微生物学总结.docx

绪 论1、名词解释：微生物，微生物学，种，菌株、品系、克隆，菌落，菌苔。微生物: 微生物是形体微小、单细胞或个体结构简单的多细胞、甚或无细胞结构，用肉眼看不见或看不清的低等生物的总称。微生物学: 微生物学是一门在细胞、分子或群体水平上研究微生物的形态构造、生理代谢、遗传变异、生态分布和分类进化等生命活动基本规律，并将其应用于工业发酵、医药卫生、生物工程和环境保护等实践领域的科学，其根本任务是发掘、利用、改善和保护有益微生物，控制、消灭或改造有害微生物，为人类社会的进步服务。种：种是最基本的分类单位,它是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其相近，与同属内其它种有着明显差异的菌株的总称。菌株（品系）：表示任何由一个独立分离的单细胞繁殖而成的纯种群体极其一切后代；实际上是一个微生物达到遗传性纯的标志。克隆：若菌落是由一个单细胞发展而来的，则它就是一个纯种细胞群或克隆。菌落：在适宜的培养条件下，微生物在固体培养基表面（有时为内部）生长繁殖，形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。菌苔：如果将某一纯种的大量细胞密集地接种到固体培养基表面，结果长成的各“菌落”互相连成一片，这就是菌苔。2、简述微生物学发展史上5个时期的特点和代表人物。 史前期朦胧阶段（约8000年前-1676） 特点：人们虽然没有看到微生物，但已经不自觉的利用有益微生物、防止有害微生物。中国古代： 初创期-形态学时期（1676-1861） 特点：这一时期微生物学的研究工作主要是对一些微生物进行形态描述。 代表人物列文虎克：微生物学的先驱者 奠基期-生理学时期（1861-1897） 特点：这一时期的主要工作是查找各种病原微生物，把微生物学的研究从形态描述推进到生理学研究的新水平，建立了系列微生物学的分支学科。 代表人物：巴斯德和科赫。 发展期生化水平研究阶段 特点：微生物学的研究进入分子水平，微生物学家的研究工作从上一时期的查找病原微生物转移到寻找各种有益微生物的代谢产物。 代表人物E.Bchner生物化学奠基人 成熟期分子生物学水平研究阶段 特点：微生物学从一门应用学科发展为前沿基础学科，其研究工作进入分子水平，而微生物因其不同于高等动植物的生物学特性而成为分子生物学研究的主要对象。在应用研究方面，向着更自觉、更有效和可认为控制的方向发展，与遗传工程、细胞工程和酶工程紧密结合，成为新兴生物工程的主角。 代表人物J.Watson和F.Crick：分子生物学奠基人3、微生物共有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？ 五大共性：体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。 其中最基本的是体积小，面积大；原因：由于微生物是一个如此突出的小体积大面积系统，从而赋予它们具有不同于一切大生物的五大共性，因为一个小体积大面积系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此而产生其余4个共性。4、 微生物分类学有哪3项具体任务？试加以简述。 3项具体任务:分类、鉴定和命名1）、分类的任务是解决从个别到一般或从具体到抽象的问题，亦即通过收集大量描述有关个体的文献资料，经过科学的归纳和理性的思考，整理成一个科学的分类系统2）、鉴定的任务与分类恰恰相反，它是一个从一般到特殊或从抽象到具体的过程，亦即通过详细观察和描述一个未知纯种微生物的各种性状特征，然后查找现成的分类系统，以达到对其知类、辨名的目的。3）、命名的任务是为一个新发现的微生物确定一个新学名，亦即当你详细观察和描述某一具体菌种后，经过认真查找现有的权威性分类鉴定手册，发现这是一个以往从未记载过的新种，这时，就得按微生物的国际命名法规给予一个新学名。5、 种以上的分类单元分几级？ 界,门,纲,目,科,属,种七级6、 何谓三域学说？ 20世纪70年代末由美国伊利诺斯大学的C.R.Woese等人对大量微生物和其他生物进行16S和18S rRNA的寡聚核苷酸测序，并比较其同源性水平后，提出了一个与以往各种界级分类不同的新系统，称为三域学说。 三域指细菌域、古生菌域和真核生物域。7、何谓（G+C）mol% 值？它在微生物分类鉴定中有何应用？ 表示DNA分子中鸟嘌呤（G）和胞嘧啶（C）所占的摩尔百分比值。 应用: 判别种与种之间亲缘关系相近程度；是建立新分类单元时的重要指标。第一章 原核微生物的形态、构造和功能1、名词解释：原核生物：即广义的细菌，指一大类细胞核无核膜包裹，只存在称作核区的裸露DNA的原始单细胞生物，包括真细菌和古生菌两大类群。细菌：是一类细胞细短、结构简单、胞壁坚韧、多以二分裂方式繁殖和水生性较强的原核生物。缼壁细菌：指细胞壁缺乏或缺损的细菌。包括原生质体、球状体、 L型细菌和支原体。原生质体：人工条件下用溶菌酶除去细胞壁或用青霉素抑制细胞壁合成后，所留下的仅由一层细胞膜包裹的圆球状细胞。一般由G+形成。芽孢：某些细菌在生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形或椭圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢（又称内生孢子）。伴孢晶体：少数芽孢杆菌在形成芽孢的同时，会在芽孢旁形成一颗菱形、方形或不规则形的碱溶性蛋白质晶体，称为伴孢晶体（即ð内毒素）。放线菌：是一类呈丝状生长、菌落呈放射状、以孢子繁殖的陆生性较强的革兰氏阳性菌。L型细菌：在某些环境条件下（实验室或宿主体内）通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷变异型。1没有完整而坚韧的细胞壁，细胞呈多形态，有些能通过细菌滤器，故又称“滤过型细菌”。对渗透敏感，在固体培养基上形成“油煎蛋”似的小菌落（直径在0.1mm左右）古生菌：又称古细菌，是一个在进化途径上很早就与真细菌和真核生物相互独立的生物类群，主要包括一些独特生态类型的原核生物，如产甲烷菌及大多数嗜极菌。2、细菌的基本有哪些？ 细胞壁，细胞膜 ，间体 ，核区 ，核糖体 ，细胞质及其内含物3、 图示细菌细胞构造。见书11页4、试比较G+和G-细菌细胞壁的异同。成 分革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细胞肽聚糖磷壁酸类脂质蛋白质含量很高（30-95）含量较高（50）一般无（2）0含量很低（520）0含量较高（约20）含量较高 5、 简述革兰氏染色法的机制并说明此法的重要性。 革兰氏染色机制结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。乙醇脱色： G细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂 ，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色； G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和文联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。 复染: G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。 重要性: 革兰氏染色有着十分重要的理论与实践意义。通过这一染色，几乎可把所有的细菌分成革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌两个大类，因此它是分类鉴定菌种时的重要指标。又由于这两大类细菌在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异，因此任何细菌只要通过简单的革兰氏染色，就可提供不少其他重要的生物学特性方面的信息。6、 渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢的耐热机制的？ 芽孢的耐热在于芽孢衣对多价阳离子和水分的渗透很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核欣中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽孢极强的耐热性。7、 简述链霉菌形态构造特点。 1、基内菌丝：又称营养菌丝，是紧贴固体培养基表面并向培养基里面生长的菌丝。色浅、较细，其主要功能是吸收营养物和排泄代谢产物，一般没有隔膜。有的产生色素。 2、气生菌丝：营养菌丝发育到一定阶段，伸向空间形成气生菌丝，色较深、直径较粗，直形或弯曲状而分枝，有的产生色素。第二章 真核微生物的形态、构造和功能1、名词解释： 真核微生物：是指一大类有完整细胞核、结构精巧的染色体和多种细胞器的微生物。酵母菌：非分类名词，一群能发酵糖类的单细胞微生物，属真菌类。生活史 ：个体经一系列生长、发育阶段后而产生下一代个体的全部过程，就称为该生物的生活史或生命周期。霉菌：（非分类名词）丝状真菌统称，通常指菌丝体发达而又不产生大型子实体的真菌无性孢子：不经过两性细胞结合而直接由菌丝分化形成的繁殖性小体。有性孢子：指经过两性细胞结合，经质配、核配、减数分裂形成的繁殖小体。子实体：是由真菌的营养菌丝和生殖菌丝缠结而成的具有一定形状的产孢结构。菌物界：指与动物界，植物界相并列的一大群无叶绿素，依靠细胞表面吸收有机养料，细胞壁一般含几丁质的真核微生物二级菌丝：又称气生菌丝，由基内营养菌丝长出培养基外伸向空间的菌丝。它是担子菌中由相应的异性的初生菌丝进行体细胞接合而形成的菌丝。其具有分枝状者称为次生菌丝体。 2、 简述真菌的特点。 不能进行光合作用； 以产生大量孢子进行繁殖； 一般具有发达的菌丝体； 细胞壁多数含几丁质； 营养方式为异养吸收型； 陆生性较强。3、 简述酵母菌的特点。（1）生活史中，个体主要以单细胞状态存在；（2）多数营出芽繁殖，也有的裂殖；（3）能发酵糖类产能；（4）细胞壁常含甘露聚糖；（5）喜在含糖量较高、酸度较大的水生环境中生长。4、 图示酵母菌细胞构造，并指出其细胞壁的结构特点。细胞结构： 见书48页细胞壁的结构特点：（1）化学组成： 三明治状的“酵母纤维素”：分三层，外层为甘露糖，内层为葡聚糖,其间夹有一层蛋白质分子。芽痕周围有少许几丁质。 （2）原生质体的制备：用蜗牛消化酶水解细胞壁。（注：其结构特点可能不完善）5、 简述酵母菌的繁殖方式，图示酿酒酵母的生活史 并说明各阶段的特点。 繁殖方式：无性繁殖：芽殖 裂殖 产生掷孢子等无性孢子 有性繁殖产生子囊及子囊孢子 生活史：见书51页 各阶段的特点：子囊孢子发芽产生单倍体营养细胞单倍体营养细胞出芽繁殖异性营养细胞接合，质配核配，形成二倍体细胞二倍体营养细胞不进行核分裂，出芽繁殖二倍体细胞变成子囊，减数分裂，形成4子囊孢子子囊破壁后释放出单倍体子囊孢子6、 霉菌的有性和无性孢子主要有哪些？ 无性孢子有：厚垣孢子、节孢子、分生孢子、孢囊孢子、游动孢子、芽孢子、掷孢子。 有性孢子有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。7、细菌、放线菌、酵母菌、霉菌四大类微生物的菌落有何不同？为什么？ 菌落 细菌 酵母菌 放线菌 霉菌含水形态 很湿或较湿 较湿 干燥或较干燥 干燥外观形态 小而突起或大而平坦 大而突起 小而紧密 大而疏松或大而致密菌落透明度 透明或稍透明 稍透明 不透明 不透明菌落与培养基 不结合 不结合 牢固结合 较牢固结合结合程度菌落颜色 多样 单调，一般呈乳脂 十分多样 十分多样 或矿烛色，少数红色 或黑色菌落正反面 相同 相同 一般不同 一般不同颜色的差别菌落边缘 一般看不到 可见球状， 有时可见 可见粗丝 细胞 卵圆状或 细丝状细胞 状细胞 假丝状细胞气味 一般有臭味 多带酒香味 带有泥腥味 往往有霉味原因：因为细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的形态和生理类型不尽相同，所以在其菌落形态，构造等特征上也有各自的特点。8、 试比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的 异同，并讨论它们原生质体制备方法。细胞壁成分的异同细菌分为G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+类脂质一般无，而G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。放线菌为G-，其细胞壁具有G-所具有的特点。酵母菌和霉菌为真菌，酵母菌的细胞壁外层为甘露聚糖，内层为葡聚糖；而霉菌的细胞壁成分为几丁质、蛋白质、葡聚糖。原生质体制备方法：G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶 G-菌原生质体获得：EDTA鳌合剂处理，溶菌酶 放线菌 原生质体获得：青霉素、溶菌酶霉菌原生质体获得：纤维素酶酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶9、青霉素只对处于生长繁殖旺盛时期的细胞有抑制作用，而对处于休止状态的细胞没有抑制作用，请分析这种说法的正误，并说明你的理由。原因：青霉素抑制肽聚糖的合成过程，形成破裂的细胞壁，代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成，因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制：青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转肽作用。对革兰阳性菌有效，由于革兰阴性菌缺乏五肽交连桥所以青霉素对其作用不大。13、 什么叫锁状联合？其生理意义如何？锁状联合: 担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝，在进行细胞分裂时，于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构称锁状联合。生理意义：保证了双核菌丝在进行细胞分裂时，每节（每个细胞）都能含有两个异质（遗传型不同）的核，为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准，凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。14、霉菌的营养菌丝和气生菌丝各有何特点？它们分别可分化出哪些特化结构？ 1) 营养菌丝体：伸入培养基吸收营养；2) 气生菌丝体：向空中生成，形成繁殖器官。 营养菌丝的特化结构：假根吸器附着枝附着胞菌核菌索匍匐菌丝菌环和菌网 气生菌丝的特化结构：子实体第三章 病毒和亚病毒1、名词解释：病毒：是超显微的，无细胞结构，专性活细胞内寄生，在活细胞外具一般化学大分子特征，一旦进入宿主细胞又具有生命特征。真病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分的病毒亚病毒：凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的分子病原体称为亚病毒噬菌斑：当一个噬菌体感染一个敏感细胞后，隔不久即释放出一群子代噬菌体，在固体培养基中，它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞，并引起它们的裂解，如此经过多次重复，就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体噬菌斑，它是透亮不长菌的小圆斑，每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。温和性噬菌体：噬菌体侵染宿主后，并不增殖，裂解，而与宿主DNA结合，随宿主DNA复制而复制，此时细胞中找不到形态上可见的噬菌体，这种噬菌体称为温和性噬菌体或溶源噬菌体。溶原菌：含有温和性噬菌体的细菌称为溶源性细菌。溶源性噬菌体附着或整合在宿主染色体上，一道复制。2、 病毒粒有哪几种对称体制？每种对称又有几类特殊外形？螺旋对称型TMV 呈直杆状，中空二十面体对称腺病毒 外形呈典型的二十面体复合对称T偶数噬菌体 呈蝌蚪状3、 什么叫烈性噬菌体？简述其裂解性生活史。 烈性噬菌体：凡在短时间内能连续完成吸附、侵入、增殖、成熟、 裂解这五个阶段而实现其繁殖的噬菌体，称为烈性噬菌体。 吸附 噬菌体尾丝散开，固着于特异性受点上。 侵入 尾鞘收缩，尾管推出并插入到细胞壁和膜中，头部的核酸注入到宿主细胞中，而蛋白质衣壳留在细胞壁外。 增殖 增殖过程包括核酸的复制和蛋白质的生物合成。注入细胞的核酸操纵宿主细胞代谢机构，以寄主个体及细胞降解物和培养基介质为原料，大量复制噬菌体核酸，并合成蛋白质外壳。 成熟（装配）寄主细胞合成噬菌体壳体(T4噬菌体包括头部、尾部),并组装成完整的噬菌体粒子。 裂解（释放）子代噬菌体成熟后，脂肪酶和溶菌酶促进宿主细胞裂解，从而释放出大量子代噬菌体。4、 什么是一步生长曲线？它可分几期？各期有何特点？一步生长曲线 ： 定量描述烈性噬菌体增殖规律的实验曲线称作一步生长曲线或一级生长曲线。潜伏期 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。又可分为隐晦期和胞内累积期。裂解期 从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。平稳期 指被感染的宿主已全部裂解，溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。裂解量 每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数微生物的营养和培养基1、名词解释：自养微生物：以二氧化碳作为主要或唯一的碳源，以无机氮化物作为氮源，通过细菌光合作用或化能合成作用获得的能量的微生物。异养微生物：以有机物为碳源，光或有机物分解为能源的微生物。营养：指生物体从外部环境摄取其生命活动所必须的能量和物质，以满足其生长和繁殖需要的一种生理功能 。营养物：能为机体生命活动提供结构物质、能量、代谢调节物质和良好的生理环境的物质称为营养物。C/N比：所谓C/N是指在微生物培养基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与氮源中氮原子的摩尔数之比。氨基酸自养型生物：不需要氨基酸作为氮源的，它们能把非氨基酸类的简单氮源自行合成所需要的一切氨基酸。氨基酸异养型生物：需要从外界吸收现成的氨基酸作氮源。生长因子：一类对微生物正常代谢必不可少且又不能从简单的碳、氮源自行合成的所需极微量的有机物。大量元素：凡是生长所需浓度在10-310-4mol/L范围内的元素，可称为大量元素，包括P、S、K、Mg、Ca、Na和Fe等。微量元素：凡是生长所需浓度在10-610-8mol/L范围内的元素，则称为微量元素，包括Cu、Zn、Mn、Mo、和Co等。培养基：是一种人工配制的适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合养料，它具备微生物所需的六大营养元素，且其间比例合适。基团移位：指一类既需特异性载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质运送方式。其机制分两步：（1）HPr被PEP激活，（2）糖经磷酸化而进入细胞内。 选择性培养基：选择培养基是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。如酵母富集培养基中的孟加拉红抑制细菌的生长而对酵母菌无影响，偏酸性的环境有利于酵母菌的生长。 鉴别性培养基：培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。2、 指出四大类微生物的最适生长pH范围及常用的培养基名称。细菌（PH 7476）牛肉膏蛋白胨培养基真菌（自然PH）马铃薯培养基霉菌（PH 7072）察氏培养基放线菌（PH 7476）高氏一号培养基。3、 指出微生物的六大营养要素。 （一）碳源（二）氮源（三）能源（四）生长因子（五）无机盐（六）水4、试比较细胞膜运输营养物质的四种方式。比较项目 单纯扩散 促进扩散 主动运输 基因移位 特异载体蛋白无慢由浓至稀内外相等无特异性不需要不变 无无竞争性无H2O、CO2、O2甘油、乙醇、少数氨基酸、盐类、代谢抑制剂有快由浓至稀内外相等特异性不需要不变有有竞争性有SO42+、PO43+、糖（真核生物）有快由稀至浓内部浓度高得多特异性需要不变有有竞争性有有快由稀至浓内部浓度高得多特异性需要改变有有竞争性有运送速度溶质运送方向平衡时内外浓度运送分子能量消耗运送前后溶质分子载体饱和效应与溶质类似物运送抑制剂运送对象举例氨基酸、乳糖等糖类、Na+、Ca2+等无机离子葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等 5、什么是鉴别性培养基？试以EMB培养基为例，分析其鉴别作用的原理。 鉴别性培养基：培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。 EMB作用原理 其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。在低酸度时，这两种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落，因而易于辨认。尤其是大肠杆菌，因其强烈分解乳搪而产生大量的混合酸，菌体带H+故可染上酸性染料伊红，又因伊红与美蓝结合，所以菌落染上深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光：6、 什么是单功能营养物、双功能营养物、多功能营养物？ 单功能营养物：一种营养物有一种营养要素功能，该营养物称为单功能营养物。 双功能营养物：一种营养物有两种营养要素功能，该营养物称为双功能营养物。 多功能营养物：一种营养物常有两种以上营养要素功能，该营养物称为多功能营养物。7、 试述培养基的种类。 按对培养基成分的了解来分： (1)天然培养基 (2)组合培养基 按培养基外观的物理状态来分 (1)固体培养基 (2)半固体培养基 液体培养基 (4)脱水培养基 按培养基的功能来分 (1)种子培养基 (2)发酵培养基 (3)基础培养基 (4)选择性培养基第五章 微生物的新陈代谢1、名词解释：新陈代谢：是指发生在活细胞中的各种分解代谢与合成代谢的总和。其中，分解代谢是指复杂的有机物分子通过分解代谢酶系的催化，产生简单分子、腺苷三磷酸(ATP)形式的能量或还原力(或称还原当量，以H表示)的作用；合成代谢则与分解代谢相反，是指在合成代谢酶系的催化下，由简单小分子、ATP形式的能量与H形式的还原力一起合成大分子的过程。 生物氧化：生物氧化是指发生在活细胞中的一系列产能性氧化反应的总称。呼吸：呼吸是指底物按常规方式脱氢后，经完整的呼吸链递氢，最终由分子氧接受氢并产生水和释放能量(ATP)的生物氧化方式。呼吸必须在有氧条件下进行，因此又叫有氧呼吸。 无氧呼吸：无氧呼吸又称厌氧呼吸，是一类呼吸链末端的氢受体为外源无机氧化物（少数为有机氧化物）的生物氧化。 发酵：无氧条件下，底物脱氢后产生的还原力不经呼吸链而直接传递给某一中间代谢物的低效产能反应。 氧化磷酸化：又称电子传递磷酸化，是指呼吸链的递氢（或电子）和受氢过程与磷酸化反应相偶联并产生ATP的作用。 光合磷酸化：由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程成为光合磷酸化。 底物水平磷酸化：是指在生物氧化过程中产生一些含有高能磷酸键的化合物，并且这些高能磷酸化合物的高能磷酸键键能可以直接偶联ATP合成。 Stickland反应 :以一种氨基酸作氢供体和以另一种氨基酸作氢受体而实现生物氧化产能的独特发酵类型，称为stickland反应。stickland反应的产能效率很低，每分子氨基酸仅产1个ATP。2、 试述生物氧化的形式、过程、功能及类型。 形式：某物质与氧结合、脱氢或失去电子 过程:一般包括三个环节：底物脱氢（或脱电子）作用（该底物称作电子供体或供氢体）氢（或电子）的传递（需中间传递体，如NAD、FAD等）最后氢受体接受氢（或电子）（最终电子受体或最终氢受体） 功能：产能（ATP）、产还原力H和产小分子中间还原产物。 类型：呼吸、无氧呼吸、发酵3、 在化能异养微生物的生物氧化中，其基质脱氢和产能的途径主要有哪几条？试比较各途径的主要特点。 脱氢和产能的途径：EMP、HMP、ED、TCA 特点：EMP 当葡萄糖转化成1.6-二磷酸果糖后，在果糖二磷酸醛缩酶作用下，裂解为两 个3化合物，再由此转化为2分子丙酮酸。 HMP 当葡萄糖经一次磷酸化脱氢生成6-磷酸葡萄糖酸后，在6-磷酸葡萄糖酸脱酶作用下，再次脱氢降解为1分子CO2和1分子磷酸戊糖。 ED 是少数EMP途径不完整的细菌所特有的利用葡萄糖的替代途径。一分子葡萄糖经ED途径可生成两个丙酮酸并净生成一个ATP、一个NADH+H+和一个NADPH+H+。 TCA (1)氧虽不直接参与其中反应，但必须在有氧条件下运转；(2)丙酮酸在进入三羧酸循环之先要脱羧生成乙酰CoA，乙酰CoA和草酰乙酸缩合成柠檬酸再进入三羧酸循环。(3)循环的结果是乙酰CoA被彻底氧化成CO2和H2O，每氧化1分子的乙酰CoA可产生12分子的ATP，草酰乙酸参与反应而本身并不消耗。(4)产能效率极高；(5)TCA位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位。4、 试述EMP途径在微生物生命活动中的重要性。 供应ATP形式的能量和NADH2形式的还原力；是连接其它几个重要代谢途径的桥梁，包括TCA、HMP和ED途径等；为生物合成提供多种中间代谢物；通过逆向反应可进行多糖合成。5、 试述HMP途径在微生物生命活动中的重要性。 供应合成原料；产还原力；作为固定CO2的中介；扩大碳源的利用范围；连接EMP途径。6、 试述TCA循环在微生物产能和发酵生产中的重要性。 TCA位于一切分解代谢和合成代谢中的枢纽地位，产能效率极高，不仅可为微生物的生物合成提供各种碳架原料，而且还与人类的发酵生产紧密相关。7、在微生物能量代谢中ATP的产生途径有哪几条？ EMP、HMP、ED、TCA、呼吸、无氧呼吸、发酵8、 试比较呼吸、无氧呼吸、发酵的异同点。产能 呼吸 无氧呼吸 发酵 环境条件 有氧 无氧 无氧 终电子受体来源 环境，外源性 环境，外源性 胞内、内源性 性质 分子氧 化合物（通常为无机物） 代谢中间物 能进行代谢产能方式的微生物 专性好氧微生物、兼性好氧微生物、微嗜氧微生物 专性厌氧微生物、兼性好氧微生物 兼性好氧微生物、耐氧厌氧微生物、专性厌氧微生物 9、试比较同型和异型乳酸发酵。 10、细菌的酒精发酵途径如何？它与酵母菌的酒精发酵有何不同？细菌的酒精发酵有何优缺点？酒精发酵途径ED, 酵母菌的酒精发酵EMP优缺点: a.优点：代谢速率高；产物转化率高；菌体生成少；代谢副产物少；发酵温度高；不必定期供氧；细菌为原核生物，易于用基因工程改造菌种；厌氧发酵，设备简单。b.缺点：生长pH为5，较易染菌；细菌耐乙醇力较酵母菌为低（细菌7%乙醇，酵母菌耐8-10%乙醇）；底物范围窄（葡萄糖、果糖）。 11、 青霉素为何只能抑制代谢旺盛的细菌？其制菌机制如何？原因：青霉素抑制肽聚糖的合成过程，形成破裂的细胞壁，代谢旺盛的细菌才存在肽聚糖的合成，因此此时有青霉素作用时细胞易死亡。作用机制：青霉素破坏肽聚糖合成过程中肽尾与肽桥间的转肽作用。12、 如何运用代谢调控理论使微生物合成比自身需求量更多的有用代谢产物？举例说明。应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节 如赖氨酸发酵、肌苷酸的生产；应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节 如黄色短杆菌的抗氨基羟基戊酸菌株能累积苏氨酸；控制细胞膜的渗透性 如在谷氨酸发酵生产中只要把生物素浓度控制在亚适量的情况下，才能分泌出大量的谷氨酸，第六章 微生物的生长及其控制1、名词解释：生长产量常数（Y）：指菌体产量与限制性营养物消耗的比例关系。 最适生长温度：某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度。巴氏消毒法：用较低的温度处理牛乳或其他液态食品，杀死其中可能存在的无芽孢病原菌而又不损害营养与风味的消毒方法。 抗生素：抗生素是生物在其生命活动中产生的一种次生代谢产物或其人工衍生物，能对他种生物的生命活动产生抑制作用或致死作用。 抗代谢药物：又称代谢拮抗物、代谢类似物，是指在结构上与生物体所必需的代谢物相似，可以与正常代谢途径中特定的酶发生竞争性反应，从而阻碍酶的功能、干扰代谢的正常进行的物质。 选择毒力：抗生素对人体及动、植物组织的毒力，一般远小于它对致病毒的毒力，这称为抗生素的选择毒力。 生长限制因子:凡是处于较低浓度范围内，可影响生长速率和菌体产量的营养物，就称生长限制因子。 MIC：最小抑菌浓度，表示某药物对某菌的最小抑菌浓度，常以g/ml或/ml来表示。2、 什么是典型生长曲线？它可分几期？划分的依据是什么？各期特点如何？ 典型生长曲线 ：将少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中培养。在适宜条件下，其群体就会有规律地生长，定时取样测定细胞含量，以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标，就可以画出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。 划分的依据：单细胞微生物。 (1)延滞期(停滞期、调整期) 特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。 (2) 对数期 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。 稳定期 特点：a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。 衰亡期 特点：a.细胞形态多样；b.出现细胞自溶现象；c.有次生代谢产物的形成；d.芽孢在此时释放。 3、 延滞期有何特点？如何缩短延滞期？ 特点：a.生长速率常数为零；b.细胞形态变大或增大；c.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高，原生质呈嗜碱性。d.合成代谢活跃；e.对外界不良条件的反应敏感。 消除：a. 以对数期的菌体作种子菌 ；b. 适当增大接种量 ：一般采用3%8%的接种量，根据生产上的具体情况而定，最高不超过1/10。c. 培养基的成分：种子培养基尽量接近发酵培养基 。4、 指数期有何特点？处于该期的微生物有何应用？ 特点：此时菌体细胞生长的速率常数R最大，分裂快，代时短，细胞进行平衡生长，菌体内酶系活跃，代谢旺盛，菌体数目以几何级数增加，群体的形态与生理特征最一致，抗不良环境的能力强。 应用：指数期的微生物是研究生理、代谢等的良好材料；是增殖噬菌体的最适菌龄；是发酵生产中用做种子的最佳种龄，通过补加营养物质延长指数期。5、稳定期为何会到来？有何特点？ 形成原因:a.营养物尤其是生长限制因子的耗尽；b.营养物的比例失调；c.有害代谢产物的积累；d.物化条件的变化。 特点:a.生长速率常数为零；b.菌体产量达到最高；c.活菌数相对稳定；d.细胞开始贮存贮藏物；e.芽孢在这个时期形成；f.有些微生物在此时形成次生代谢产物。6、 什么叫连续培养？有何优点？为何连续时间是有限的？ 连续培养：指微生物接种到培养基里以后的整个生长期间，微生物能持续地以比较恒定的生长速率常数进行生长，从而导致微生物的生长过程能“不断”地进行下去的一种培养方法。 优点：高效、低耗、利于自控、产品质量稳定。 菌种易于退化；容易污染；营养物的利用率低于分批培养。 因此连续时间是有限的。微生物培养过程中pH变化的规律如何？如何调整？ 微生物的生命活动过程中会自动地改变外界环境的pH，其中发生pH改变有变酸和变碱两种过程，在一般微生物的培养中往往以变酸占优势，因此，随着培养时间延长，培养基的pH会逐渐下降。的变化还与培养基的组分尤其是碳氮比有很大关系，碳氮比高的培养基经培养后pH会明显下降；相反，碳氮比低的培养基经培养后，其pH常会明显上升。 措施：分为“治标”和“治本”两大类，前者指根据表面现象而进行直接、及时、快速但不持久的表面化调节，后者指根据内在机制而采用的间接、缓效但可发挥持久作用的调节。治标：1）过酸时：加NaOH等碱液中和2）过碱时：加H2SO4等酸液中和治本：1）过酸时：加适当氮源：加尿素，NaNO3或蛋白质。提高通气量 2）过碱时：加适当碳源：加糖，乳酸，醋酸，柠檬酸或油脂。 降低通气量8、 比较灭菌、消毒、防腐和化疗的异同，并举例。比较项目 灭菌 消毒 防腐 化疗 处理因素处理对象微生物类型对微生物作用实 例 强理、化因素任何物体内外一切微生物彻底杀灭加压蒸气灭菌，辐射灭菌，化学杀菌剂 理、化因素生物体表，酒、乳等有关病原菌杀死或抑制70酒精消毒，巴氏消毒法