资源描述
体液检验
尿常规分析:
一、直接显微镜检查法
【操作】
(1) 取待检混匀尿液10ml 于刻度离心管中,1300r/min 离心5min ,弃上清液,保留0.2ml 残留液备用。
(2) 将沉淀物混匀后,取50μl 滴人载玻片上,用18mm ×18mm 盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜 (10 ×10) 观察20 个低倍视野 (LP) 的管型数。再用高倍镜 (10 ×40) 计数10 个高倍视野 (HP) 的细胞数。
二、【报告形式】
细胞:以10 个视野中的最少数到最多数 (××~××个细胞/HP) 报告。
管型:以20 个视野的平均数 (××个/LP) 报告。
结晶:以每一高倍视野+、++、+++、++++等的半定量方式报告。
三、尿液沉渣有形成分形态学特点及其临床意义
(1) 红细胞:正常值:尿液经离心后约0 ~3/HP。
高倍镜下红细胞为淡黄色,呈中央凹陷的盘片状。低渗尿液时细胞形态不一;高渗浓度时细胞皱缩成锯齿形。非肾性血尿中红细胞呈均一性且大多形态正常;而肾性血尿中则现非均一性的变形细胞;两者兼有者称为混合性血尿。
尿中红细胞增多称为血尿,可分为镜下血尿和肉眼血尿。泌尿系统各部位的炎症,急、慢性肾小球肾炎,肿瘤,结石,结核,创伤,先天畸形及肾移植后排异反应均可导致不同程度的血尿。某些全身性疾病如血小板减少性紫癜、血友病、弥散性血管内凝血、红斑狼疮等均可发生血尿。前列腺炎、精囊炎、盆腔炎也可引起血尿。
(2) 白细胞:正常值:尿液经离心后白细胞男性0 ~3/HP ,女性0 ~5/HP ,除肾
移植后排异反应及淋巴细胞白血病可见淋巴细胞外,一般均为中性粒细胞。尿液中白细胞比红细胞体积大,有核,但不一定能看清楚,炎症时白细胞发生变性或死亡,或为不规则、结构不清、成堆、含颗粒较多的脓细胞,其意义与白细胞相同。白细胞增多是泌尿系统炎症的重要指标,细胞数量与炎症程度相关,尤其是细菌性感染。如急、慢性尿路感染,前列腺炎,结核,结石,肿瘤并发感染。女性阴道炎、宫颈炎、附件炎时分泌物进入尿中,也可导致尿白细胞增多。
(3) 上皮细胞:由泌尿道各段上皮脱落混入尿中,这些部位病变时,尿液中上皮细胞
多。①鳞状上皮细胞:大而扁平,呈多角形,有小而明显的核。女性尿中可成片出现,无临床意义;如同时伴有大量的白细胞,则可能为泌尿生殖道炎症。②移行上皮细胞:随脱落部位不同,有多种形态,如尾状上皮,含一个圆形或椭圆形的核,肾盂、输尿管炎症时可脱落。③肾小管上皮细胞:来自肾小管,比中性粒细胞大1.5 ~2.0 倍,含一个较大的圆形核,胞质中有小空泡、颗粒或脂肪小滴,正常人尿液中少见,肾炎或先天性肾炎时可出现。(4) 肿瘤细胞:泌尿系统肿瘤 (主要是膀胱肿瘤) 患者出现血尿的同时尿中会检查到脱落的肿瘤细胞。其形态不同于上皮细胞和白细胞。为了提高肿瘤细胞检出率,可用甲醛作防腐剂,留取24h 尿沉渣浓集后检查。
(4).管型:由尿液蛋白在肾小管、集合管沉淀凝固而致,呈圆柱状结构。根据其形状
内含物不同又可分成透明管型、颗粒管型、细胞管型和蜡样管型。
[1 ]透明管型:呈柱状体,无色、半透明、两端钝圆,也可以内含或外附少量颗粒或细胞。正常人尿液中偶见,全身或肾脏受刺激后可以增加。大量出现见于急、慢性肾小球肾炎和其他肾病。可以和其他管型同时出现在尿液中。
[2]红细胞管型:多见于肾单位内出血,如急性肾小球肾炎、慢性肾炎急性发作。也可见于血型不合引起的输血反应及急性肾小管坏死、肾出血、肾移植排异反应。在红斑狼疮和其他胶原性疾病、肾梗死、肾静脉栓塞形成等情况下,红细胞管型是其特征性表现。
[3]白细胞管型:由变性坏死的白细胞聚集而成,过氧化物酶染色呈阳性。白细胞管型的出现表示肾实质有细菌性感染存在,常见于肾盂肾炎、间质性肾炎等。狼疮性肾炎时也可见到
[4]肾上皮细胞管型:管型内含有肾小管上皮细胞,过氧化物酶染色呈阴性,可与白细胞管型鉴别。常见于急性肾小管坏死、子痫、中毒、肾移植后排异反应等。
[5]颗粒管型:管型内含大小不同颗粒占1/3 以上,是尿沉渣中最常见又最有意义的病理
学改变。颗粒可以来自变性细胞残渣,也可以由蛋白变性形成。根据其颗粒大小又可分为粗颗粒管型和细颗粒管型。可见于肾实质性病变如急、慢性肾小球肾炎,肾病,肾动脉硬化等。
[6]蜡样管型:不含颗粒,其质地和颜色像蜡一样呈淡黄色或灰色,质地厚,有切痕,由颗
粒管型或细胞管型等长期滞留于肾小管中演变而来。蜡样管型的出现提示肾小管有严重病变,预后差。
(5).结晶
尿液中有无结晶析出取决于该物质在尿液中的溶解度、浓度,尿液的pH 值、温度及胶体状况等因素。尿液中大多结晶属代谢性,来自饮食,一般无重要临床意义。常见有磷酸盐结晶、草酸钙结晶、 尿酸盐结晶、 氨基酸结晶、胆固醇结晶、磺胺类药物结晶等。
(6).尿液中的其他有形成分
[1] 寄生虫:尿液中的寄生虫主要是阴道毛滴虫,形态略大于白细胞,呈倒置梨状、有鞭毛,在新鲜尿液中会运动,一般伴有红细胞渗出。滴虫可引起外阴部瘙痒、刺后或遗精者尿中可见,除鉴别作用外,一般无意义。
[2] 细菌:大量细菌和白细胞同时出现提示泌尿系统感染,但尿液中的细菌应通过培养确认是否为致病菌。普通尿沉渣检查不适合细菌鉴别。泌尿系统器官患结核时,结核杆菌可随尿液排出。需做此项检查时可留取24h 尿液,以甲醛防腐,用沉淀浓集或有机溶剂 (汽油) 漂浮的方法,浓集漂浮后作抗酸染色。要注意与尿液中常见的耻垢杆菌相区别。
[3] 霉菌:某些长期应用抗生素治疗或器官移植后应用免疫抑制剂患者,新鲜尿中可检到霉菌的芽孢或菌丝,提示有霉菌生长。
本-周氏蛋白
【原理】本-周氏蛋白又称凝溶蛋白,是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。此种蛋白在一定的pH条件下加热至40~60℃时有沉淀发生,温度升高至100℃时,沉淀消失,再冷却时又可重现沉淀。
【试剂】
1. 200g/L磺基水杨酸溶液。
2. 2mol/L醋酸盐缓冲液(pH4.9):醋酸钠17.5g+冰醋酸4ml+蒸馏水至100ml。
【操作】
1. 先将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性检查,如呈阴性反应,则可认为尿液标本中本-周氏蛋白阴性。
2. 取透明尿液4ml于试管中,再加入醋酸盐缓冲液1ml,混匀后,放置56℃水浴中15min。如有浑浊或出现沉淀,再将试管放入沸水中,煮沸3min,观察试管中浑浊或沉淀的变化,如浑浊变清、浑浊减弱或沉淀减少,则提示尿液本-周氏蛋白阳性。
3. 若煮沸后,浑浊增加或沉淀增多,则表明尿液中还可能有其他蛋白质,此时应将试管从沸水中取出,立即过滤。观察滤液,如滤液开始透明,温度下降后浑浊,再煮沸时又透明,则提示本-周氏蛋白阳性。
【正常参考值】
阴性。
【附注】
1. 尿液应新鲜,否则因白蛋白、球蛋白分解变性而干扰试验。
2. 浑浊尿液应离心沉淀后,取上清液作试验。
3. 过多的本周氏蛋白,在90℃以上不易完全溶解,故需与对照管比较,也可将尿液稀释后再检测。
4. 煮沸过滤去除尿液白、球蛋白时,动作要迅速,并需保持高温,否则本周氏蛋白也会滤去。
5. 甲基苯磺酸法比热沉淀反应法灵敏度高,但有假阳性。
【临床意义】
。
阳性者多见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症肾淀粉样变、恶性淋巴瘤患者也可呈阳性
浆膜腔积液常规检查
一、一般理学及性状检查
1. 颜色:肉眼观察。
【分类】
(1)红色或咖啡色:常见于浆膜腔出血、恶性肿瘤或穿刺性损伤。
(2)绿色:提示有铜绿假单胞菌感染。
(3)奶酪色:常见于化脓性感染。
(4)乳白色:常见于胸导管或淋巴管阻塞所致的乳糜性积液。
漏出液多为黄色或黄绿色;渗出液多为草绿色、棕红色、咖啡色、奶酪色和绿色。
2. 透明度:肉眼观察。
【临床判断】漏出液多为澄清透明;渗出液多为不透明或浑浊。
3. 凝固物:肉眼观察。
【临床判断】漏出液不易凝固;渗出液易凝固。
4. 比重:比重计法。
【临床判断】漏出液<1.018;渗出液>1.018。
5. pH:试纸法。
【临床判断】漏出液7.41~7.51;渗出液pH低于漏出液pH。
(1)渗出液较低,常见于脓性渗出液。
(2)pH小于7.39,常见于结核性胸腹水。
(3)pH大于7.41,常见于癌性胸腹水,配合细胞学检查。
二. 蛋白定性检查'-\\李凡他试验(Ribalta Test)。
【原理】渗出液中可含多量的浆液粘蛋白,在酸性条件下可产生白色雾状沉淀。
【试剂】冰醋酸。
【操作】
1. 取100ml量筒,加蒸馏水100ml,滴入冰醋酸0.1ml,充分混匀,静置数分钟。
2. 将标本靠近量筒液面逐滴轻轻滴下,在黑色背景下,观察白色雾状沉淀的发生及其下降速度等。
3. 结果判断:
A. 阴性:清晰不显白色雾状。
B. ±:渐呈白雾状。
C. 1+:滴加后呈白雾状。
2+:滴加后呈白薄云状。
D. 3+:滴加后呈白浓云状。
E. 4+:滴加后呈白色胶状或凝块。
【附注】
1.试验时,如产生白色浑浊不明显,,下沉缓慢,并很快消失者为阴性。
2.如标本为血性,应在离心后按上述方法进行蛋白定性试验。
三. 细胞计数与分类
【试剂与器材】细胞计数板。 红细胞稀释液
【操作】
1. 细胞总数及有核细胞计数:计数方基本与脑脊液检查相同,澄清胸腹水可混匀后直接滴入计数池,计数10个大方格内红细胞、白细胞数,其总和即为每ul的细胞数。再换算成每L的细胞数。
2. 浑浊或血性胸腹水则应按红细胞和白细胞计数方法进行。
3. 细胞分类
① 直接分类法:在白细胞计数后,转换为高倍镜,根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞、及单核细胞)和多核细胞,应计数100个细胞,并以百分数表示。若细胞总数少于100个,则直接写出细胞的具体数字。
② 染色分类法:胸腹水离心沉淀后,取沉渣物2滴,加正常血清1滴,制成薄膜片,待干后进行瑞氏染色,油镜分类。
③ 如见有不能分类的细胞,应另行描述报告。必要时苏木精-伊红(HE)或巴氏法染色查找肿瘤细胞。
【正常参考值】正常人无胸腹水。
【临床意义】滤出液中有核细胞数在100 ×10 6/L 以下;渗出液中有核细胞数较多,在
500 6×10 /L 以上,但两者并无绝对界限。
1.滤出液: 滤出液中细胞数较少,以淋巴细胞为主,并有少量间皮细胞。
2.渗出液: 渗出液中细胞数较多,各种细胞增多意义如下:
(1) 红细胞增多:见于恶性肿瘤、结核或穿刺出血。
(2) 中性粒细胞增多:常见于化脓性感染和早期浆膜结核。
(3) 淋巴细胞增多:提示慢性感染、病毒和结核杆菌感染或结缔组织病所致的渗出液。
(4) 嗜酸性粒细胞增多:见于变态反应、寄生虫感染、多次穿刺刺激等所致的渗出液。
(5) 间皮细胞增多:提示浆膜受损或受刺激。间皮细胞直径约15 ~30μm ,圆形或椭圆形,胞浆丰富,呈淡蓝色,含有少数空泡,核大,位于中心或偏位,核仁有1 ~3个,为紫色。在渗出液中可因各种原因呈现异形变或退行性变,形态很不规则。
(6) 组织细胞:在大量中性粒细胞出现的同时,常伴有组织细胞的出现,它较白细胞大,直径一般不超过16μm ,细胞染色较淡,核呈肾形或不规则形,偏位,核致密,胞浆多呈泡沫状。
(7) 浆细胞:少量出现没有重要临床意义;若在胸水中见到较多的浆细胞,可能是增生性骨髓瘤。
(8) 狼疮细胞:偶见于系统性红斑狼疮患者的浆膜液中。
(9) 如有多量形态不规则、体积大、核大并可见核仁、胞浆染色深、单个或多个成
堆细胞出现,应注意观察是否为肿瘤细胞,需作进一步的细胞学检查。
四、病原体涂片检验
1.细菌学检验
如怀疑细菌感染,有必要将标本离心,沉渣涂片,作革兰染色或抗酸染色,以 “找到革兰阳性或阴性菌 (或抗酸杆菌)” 报告;真菌引起的可查到菌丝或芽孢。并需进一步作细菌培养、药敏试验等,以明确诊断。
脑脊液常规检查
一般性状检查
1.颜色:肉眼观察。
【正常参考值】:无色
分类
(1)红色:常见于蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤,注意蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤的区别。脑脊液离心后,若上层液体仍呈黄色,隐血试验阳性,多为蛛网膜下腔出血,反而若上层液体澄清无色,多为穿刺损伤或或因病变所致的新鲜出血。
(2)黄色:常见于脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留,黄疸患者。
(3)米汤样:常见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。
(4)绿色:常见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的的脑膜炎。
(5)褐色或黑色:常见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。
2.透明度:肉眼观察。
【正常参考值】:透明
【临床意义】
浑浊主要为细胞增加所致。
3.凝固物:肉眼观察。
【正常参考值】 无凝固物
二、蛋白定性试验:潘氏试验(Pandy Test)
【原理】 脑脊液中球蛋白与苯酚结合,形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀。
【试剂】:5%苯酚溶液:苯酚25ml+蒸馏水至500ml,振摇完全溶解,棕色瓶保存。
【操作】
1. 取试剂2-3ml与小试管内,用毛细管滴入脑脊液(血性标本需离心)1-2滴,衬以黑色背景,立即观测结果。
2. 结果判断
(1) 阴性:清晰透明,不显雾状。
(2) 阳性(+):灰白色云雾状+
(3) 阳性(2+):白色浑浊++
(4) 阳性(3+):白色浓絮状沉淀+++
(5) 阳性(4+):白色凝块++++
正常参考值:阴性
三、有形成分检查
(一)细胞总数
试剂与器材
1. 细胞计数板
2. 红细胞稀释液(生理盐水)
操作
1. 澄清脑脊液可混匀后直接滴入计数池,计数10个大方格内红细胞、白细胞数,其总和即为每ul的细胞数。再换算成每L的细胞数。
浑浊或血性脑脊液则应按红细胞计数方法(20ul脑脊液+0.38ml盐水)进行。即混匀后充池计数4个大方格内细胞总数×50即每ul脑脊液细胞总数。
(二)白细胞计数
1.非血性标本:小试管内加入1-2滴冰乙酸,转动试管,使内壁沾有冰乙酸后将多余部分倾去,然后滴加混匀的脑脊液3-4滴,数分钟后,混匀充入计数池,按细胞总数操作进行,换算成每L白细胞总数。
2.血性标本:按白细胞计数方法进行(20ul脑脊液+0.38ml1%冰乙酸)
正常参考值:
正常人脑脊液无红细胞,仅有少量白细胞。
白细胞:成年0-8×106/L;儿童0-15×106/L;新生儿0-30×106/L
(三)细胞分类
1.直接分类法:在白细胞计数后,转换为高倍镜,根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞,单核细胞)和多核细胞,应计数100个细胞,并以百分数表示。若细胞总数少于100个,则直接写出细胞的具体数字。
2.染色分类法:脑脊液离心沉淀后,取沉渣物2滴,加正常血清1滴,制成薄片,待干后进行瑞氏染色,油镜分类。
3.如见有不能分类的细胞,应另行描述报告,如肿瘤细胞或脑膜白血病等。
正常参考值:
细胞分类:淋巴细胞 40%-80%(新生儿:5%-35%)
单核细胞 15%-45%(新生儿:50%-90%)
中性粒细胞 0-6%(新生儿:0-8%)
临床意义
1. 中性粒细胞增多:主要见于感染性疾病,如细菌性感染明显增多,也可见于非感染性疾病,如出血、脑外伤、多次穿刺、转移性肿瘤、脑膜白血病以及脑血管栓塞等。
2. 淋巴细胞增多:见于病毒感染、细菌感染的恢复期、梅毒性脑膜炎、钩端螺旋体脑膜炎、寄生虫感染等;也见于非感染性的多发性硬化,多发性神经炎等。
3. 单核细胞增多:见于病毒或细菌感染、中枢神经系统变性疾病以及异物刺激等。外伤等疾病中、后期。
4. 红细胞增多:见于脑出血、脑外伤、穿刺损伤等。
粪便常规检查
一、粪便标本的采集与处理
1. 标本采集因检查目的的不同而异:一般检查留取新鲜的即可;血吸虫毛蚴孵化留全量新鲜粪便;细菌检查则应收集于灭菌封口的容器内,勿混入消毒剂及其它化学药品;蛲虫检查需要软玻璃纸拭子;阿米巴滋养体应保温,及时检查;脂肪检查,应先食定量的脂肪餐,每天进食脂肪50-150g,连续6天
2. 严禁污染:不可有尿液、植物、泥土、污水等混入
3. 容器:必须有盖,并有明显的标记
4. 标本涂片:选择其中脓血粘液等病理成分
5. 检查后标本处理:焚烧、5%甲酚皂溶液浸泡24h或0.1%过氧乙酸浸泡12h后倒入厕所。
二、一般形状检查
1. 颜色:肉眼观察。
【正常参考值】
棕黄色,但可因饮食、药物而改变颜色。
【颜色种类】
(1)灰白色:常见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏。
(2)绿色:常见于食用含叶绿素的蔬菜或含胆绿素时。
(3)红色:常见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。
(4)柏油样:常见于上消化道出血等。
(5)酱色:常见于阿米巴痢疾、试验大量咖啡、巧克力等。
(6)米泔水样:见于霍乱。
2.性状:肉眼观察。
【正常参考值】
有形软便。
【性状种类】
(1)硬便:常见于便秘等。
(2)粘液稀便:常见于肠壁受刺激或炎症时,如肠炎、痢疾和急性血吸虫病。
(3)粘液脓性血便:常见于细菌痢疾等。
(4)酱色粘液便:常见于阿米巴痢疾。
(5)稀汁样便:常见于急性胃肠炎等。
(6)米泔水样便并有大量肠粘膜脱落:常见于霍乱、副霍乱等。
(7)扁平带状便:常见于直肠或肛门狭窄等。
三、显微镜检查:
1. 洁净玻片上加等渗盐水1-2滴,选择粪便的不正常部分,或挑取不同部位的粪便直接涂片。
2. 如发现疑似包囊,则应加1滴碘液染色,高倍下鉴别。应注意植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别,并注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等,如大量出现,则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
3. 注意夏科-雷登结晶的辨认:无色或浅黄色,两端细尖而透明具有折光性的菱形结晶,大小不一。常见于肠道溃疡,尤以阿米巴感染的患者粪便中易见,过敏性腹泻及钩虫病患者粪便中亦常见到。
4. 正常菌群:便中细菌约占粪便净重的1/3(4000亿/1g干便),以大肠杆菌和肠球菌为主,占80%,而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10%,芽孢菌(如梭状菌)和酵母菌为常住菌,但总量不超过10%。
5. 红细胞、白细胞、上皮细胞、巨噬细胞报告方式:××/HP 或 ×+/HP。
6. 虫卵、结晶或其它特殊成分报告方式:未找到或找到××,并在其后面注明数量,以低倍视野计算。
一. 寄生虫检查
【方法】光学显微镜涂片检查,根据粪便中寄生虫卵或其虫体的形态特征判断。如蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体,肉眼即可分辩;钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可见到。服用驱虫剂后排便时应检查有否虫体或虫头。必要时可作染色检查。
【正常参考值】
未见虫卵或虫体。
三.、粪便隐血试验(胶体金法)
【原理】单抗试纸法。采用胶体金为标记物,应用双抗体夹心法,检测粪便中人的血红蛋白,特异性强,不受食物或药物的干扰。
【操作】
(1) 将样品杯标记后放在样品架上 ,取0.5ml蒸馏水加入样品杯中,用取样棒挑取粪便标本10-50mg(相当于火柴头大小),放入杯内,调成混悬液。
(2) 从原包装袋内取出试剂,应在1小时内尽快使用。
(3) 已收集到样品杯中的粪便标本应在1小时内尽快检测,效果最佳。
(4) 将试纸条箭头所指的一端浸入标本溶液中,标本液面不要超过标记线。
(5) 等待紫红色条带的出现,测试结果应在5分钟时读取,10分钟后判断结果无效。
【结果判断】
阳性:检测线与对照线同时显红色。
阴性:仅对照线呈红色。
无效:检测线与对照线均不显色。
[临床意义]:
1. 白细胞: 见于各型肠炎。急性细菌性痢疾时,白细胞大量出现,细胞肿大,边缘不完整或已破碎,核不清楚,呈分叶状,细胞质中充满细小颗粒,此为脓细胞。
2. 红细胞: 上消化道出血时,红细胞多已破坏,可通过隐血试验证实。多见于下消化道炎症(细菌性痢疾、阿米巴痢疾、溃疡性结肠炎)、外伤、肿瘤等。
3. 巨噬细胞: 多见于急性细菌性痢疾,也可见于急性出血性肠炎或偶见于溃疡性结肠炎。
4. 肠黏膜上皮细胞: 多为柱状上皮细胞。多见于霍乱、副霍乱、坏死性肠炎。假膜性肠炎时可见多量肠黏膜上皮细胞,多与白细胞共同存在。
5. 肿瘤细胞: 形态多不典型,不足以为证。
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