1、第一节 基因工程的原理【学习目标】1. 识别基因工程的概念2.简述基因工程的原理及技术【学习过程】1.认真研读课本,总结基因工程所需工具限制性内切酶和DNA连接酶。2.小组协作总结基因工程的一般操作顺序,并由代表简述。【知识梳理】 来源:大肠杆菌等微生物 限制性内切酶 特点:识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特异的位点上切割磷酸二酯键 所需工具 基 DNA连接酶:连接被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 因 概念:定向改造 直接分离法鸟枪法 工 目的基因的获得 程 人工合成法人工合成法、反转录法 的 重组载体的构建载体(条件、类型) 原 操作程序 基因枪法 理 重组载体的转化和筛选转化方法
2、显微注射法 花粉管通道法 目的基因的表达和鉴定【典题解悟】1基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是( )A.常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达解析:构建重组质粒时首先用同一种限制性内切酶切割目的基因与质粒,以获得相同的粘性末端,然后用DNA连接酶连接从而形成重组质粒;重组质粒导入受体细胞后需要进行检测,看是否导入,检测依据是质粒上的标记基因,较为常见的是一些抗生素基因;目的基因成功导入受体细胞,最终是否表达还需要鉴定
3、,只有出现了目的基因对应的性状才表明目的基因已表达。故答案为B9下列关于基因工程的叙述,正确的是( )A基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B通常用一种限制性内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNAC细菌质粒是基因工程常用的运载体D为育成抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体解析:基因工程中的目的基因指基因操作中的外源基因,并常以抗菌素抗性基因做目的基因;构建重组质粒时用同一种限制性内切酶切割目的基因与质粒,以获得相同的粘性末端;对于植物细胞的基因工程操作,受体细胞常以正常体细胞为主,并不是只有受精卵。故答案为:C【当堂检测】1、有关基因工程叙述正确的是(
4、) A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成是在细胞内完成的 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料2、下列关于限制酶的说法不正确的是( )A、限制酶广泛存在于各种生物中,微生物中很少分布B、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C、不同的限制酶切割DNA的切点不同D、限制酶的作用主要是用来提取目的基因3、下列哪项不是基因工程中常用来做载体( ) A、细菌质粒 B、噬菌体 C、动植物病毒 D、细菌核区的DNA4、下列说法正确的是( ) A、DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的 B、限制酶的切口一定是GAATTC碱基序列 C、质粒是基因工程中唯一用作运载目的
5、基因的运载体 D、利用运载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”5、20世纪70年代,创立了一种新兴的生物技术基因工程,实施该工程的最终目的是( ) A、定向提取生物体的DNA分子 B、定向地对DNA分子进行人工剪切 C、在生物体外对DNA分子进行改造 D、定向地改造生物的遗传性状6、下列关于基因工程的叙述中错误的是( ) A、基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物,培育新品种 B、基因工程技术是唯一能突破远缘杂交不亲和障碍,培育生物新类型的方法 C、基因工程的基本工具是:限制性核酸内切酶、DNA连接酶和基因的运载体 D、基因工程的研究成果,目前大多需要通过发酵
6、工程和酶工程来实现产业化7、在基因工程中,作为基因运输工具的运载体,下列特征除哪项外,都是运载体必须具备的条件( ) A、能够在宿主细胞中复制,并稳定地保存 B、具有多个限制酶切点 C、必须是细菌的质粒或噬菌体 D、具有某些标记基因8、基因工程常用的受体细胞有( ) 大肠杆菌 枯草杆菌 支原体 动植物细胞A、 B、 C、 D、9、基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的是( ) A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达10、不属于目的基因与运载体结合过程的是( ) A、用一定的限制酶切割
7、质粒露出黏性末端 B、用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端C、将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处 D、将重组DNA导入到受体细胞进行扩增11、科学家通过基因工程的方法培育抗虫棉时,需从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,“放入”棉花的细胞中与棉花结合起来并发挥作用,请回答下列有关问题:(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ,此工具主要存在于 中,其特点是 。(2)苏云金芽孢杆菌中一个DNA分子上有许多基因,获得抗虫基因常用的方法是”鸟枪法”。具体做法是:用 酶将苏云金芽孢杆菌的 切成许多片段,然后将这些片段分别 ,再通过 导入不同的受体细胞中,让它们在各个不同的受体细胞中大量 ,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把 分离出来。(3)进行基因工程操作一般要经过的四个步骤是: ; ; ; 。【当堂检测】答案1-5 DADDD 6-10 BCDCD11.(1)限制酶;微生物;一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点切割(2)限制酶; DNA; 与运载体结合; 运载体; 复制; 带有目的基因的DNA片段(3)目的基因的获取;重组载体的构建;重组载体的转化和筛选;目的基因的表达和鉴定用心 爱心 专心