尿液标本的细菌学检验操作规程SOP微-003.doc

单位及实验室名称 项 目
汉源县人民医院检验科 尿液标本的细菌学检验操作
编号：LAB/SOP/HY/微-003
日期：2010年5月3日
版本：第一版，第0次修订
第1页，共3页
一、【标本采集】
1.采用无菌导尿法，取尿液5-10ml，盛于无菌试管中送检。
2.尿路感染一般采集中断尿：其方法为：（1）女患者先用肥皂水及1：1000高锰酸钾水溶液冲洗外阴部及尿道口，留取中段尿；（2）男患者应先翻转包皮冲洗，用2%红汞或1：1000苯扎溴铵消毒尿道口，留取中段尿；（3）儿童、婴儿先消毒其阴部，将无菌小瓶直接对准尿道，待排尿后立即送检。
3.若取左右两侧肾盂尿，应由泌尿科医师采取，左右侧的标签应标记明确，以免出现错误。
4.做结核杆菌检查时，可收集24h尿液，将沉淀部分盛于洁净瓶内送检。伤寒杆菌等其它细菌的培养检查，可取清晨第一次尿液送检。
5.膀胱穿刺：此法主要用于厌氧菌培养。
二、【检验方法】
1.直接涂片检查
（1）一般细菌涂片：以无菌方法吸取尿液10—15ml置于无菌试管内，经3000r/min，离心沉淀15-20分钟，倒去上清液，取沉渣涂成薄膜镜检，自然晾干，革兰染色镜检，可以得出初步报告“找到革兰ⅹ菌，形似ⅹⅹ细菌”。
（2）结核分枝杆菌：尿液经高压消毒后，将尿液离心取沉淀物涂片，抗酸染色镜检，根据镜检可报告：“找到或未找到抗酸杆菌”。
（3）假丝酵母菌涂片：取尿液离心沉淀物置于洁净玻片上，加以盖玻片，轻轻加压，用高倍镜检查。如沉渣太多可滴加100g/L的KOH溶液使其溶解后再镜检。若发现有发亮的芽丝胞子和假菌丝，经革兰染色镜检时有酵母样细胞时，可报告“找到酵母样细胞，形似假丝酵母菌”。否则可报告“未找到假丝酵母菌”。
2.细菌培养
（1）一般细菌培养：将接种环灭菌后挑取离心沉淀物，分别接种在血平板及中国兰平板上，35℃培养18-24h，观察有无细菌生长，根据菌落特征和涂片、染色结果，选择相应的方法做进一步鉴定，如培养2天无细菌生长，则报告“经48h培养无细菌生长”。
（2）厌氧菌培养：必须用膀胱穿刺尿进行培养，接种厌氧琼脂平板，置厌氧环境。
三、【检验程序】
尿液
—————————————————————————————
↓ ↓ ↓ ↓
离心沉淀涂片染色镜检 定量培养 分离培养 结核杆菌检查
↓ ↓ ↓ ↓
细菌计数 厌氧环境培养 普通及CO2环境培养 罗氏培养基 涂片镜检
↓ ↓
——————
↓
菌落观察
↓
———————————————————————
↓ ↓ ↓
生化反应试验→ 血清学检查 ←自动化鉴定
↓
药敏试验
↓
报告结果
四、【结果判定】
清洁中段尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数>105cfu/ml，革兰阳性球菌菌落计数>104cfu/ml有诊断意义，如培养48h无细菌生长，则报告“培养48h无细菌生长”。
作者：肖德慧
时间：2010-5-3
3