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土壤农化分析实验

目录
实验一 土壤有机质测定(外加热法) 　　　
实验二 土壤全氮量测定
实验三 水解氮的测定(碱解扩散法)
实验四 土壤铵态氮的测定
(一)蒸馏滴定法
(二)奈氏比色法
实验五 土壤硝态氮的测定
(一)硝酸银电极法
(二)酚二磺酸比色法
实验六 土壤有效硫的测定
实验七 土壤全磷的测定
(一)NaOH碱熔—钼锑抗比色法
(二)HCl十H2S04酸溶—钼锑抗比色法
实验八 土壤速效磷的测定
(一)中性和石灰性土壤速效磷测定
(二)酸性土壤速效磷的测定
实验九 土壤全钾测定
实验十 土壤速效钾的测定
(一)火焰光度法
(二)1molNaN03提取——四苯硼钠比浊法
实验十一 土壤阳离子交换量测定
(一)1mol中性NH40Ac法
(二)BaCl2—H2S04快速法
实验十二 土壤交换性盐基测定
(一)交换性盐基总量测定
(二)交换性钙、镁的测定(EDTA容量法)
(三)交换性钾钠的测定(火焰光度法)
实验十三 活性酸和交换性酸的测定
(一)活性酸(pH)测定
(二)交换性酸的测定(总量测定)
实验十四 土壤水溶性盐总量测定(电导率测定)
实验十五 植物样品消化
(一) H2S04—H202法
(二)混合加速剂消煮法
实验十六 植物样品中氮的测定
(一)奈氏比色法
(二)半微量蒸馏法
实验十七 植物样品中全磷测定(钡钼黄比色法)
实验十八 植物样品中全钾测定(火焰光度法)
实验十九 植物钙镁的测定(EDTA络合滴定法)
实验二十 土壤和植物中硼的测定
(一)姜黄素比色法
(二)甲亚胺—H比色法
(三)植物样品干灰化及硼测定
实验二十一 土壤和植物锰的测定(KMn04比色法)
(一)土壤有效锰测定
(二)植物中锰的测定
实验二十二 土壤和植物中铜、锌的测定(原子吸收分光光度法)
(一)土壤中有效铜、锌测定
(二)植物中铜、锌测定
实验二十三 土壤和植物中钼的测定
硫氰酸盐比色法
实验二十四 土壤和植物中铁的测定(邻菲罗啉比色法)
(一)土壤有效铁测定
(二)植物中铁的测定
实验二十五 纯蛋白质的测定
(一)沉淀分离后消化测定
(二) 染料结合法
实验二十六 氨基酸总量的测定(茚三酮比色法)
实验二十七 水溶性糖的测定(葸酮法)
实验二十八 淀粉的测定(HCl水解一菲啉碘量法)
实验二十九 粗脂肪的测定(残余法)
实验三十 果蔬总酸度的测定
实验三十一 维生素C的测定
(一)2，6—二氯靛酚滴定法
(三) 荧光测定法
实验三十二 氮肥的测定
(一)甲醛法(铵态氮肥中氮的测定)
(二)蒸馏法(尿素含氮量测定)
实验三十三 磷肥的测定
(一)喹啉钼酸重量法(过磷酸钙有效磷测定)
(二)喹啉钼酸容量法
(三)过磷酸钙中游离—酸测定
(四)钒钼黄法(磷矿粉中有效磷测定)
实验三十四 钾肥测定
(一)火焰光度法
(二)四苯硼钠重量法

实验一 土壤有机质测定(外加热法)
一、方法原理:在恒加热条件下(175—180℃，5分钟)，用定量K2Cr2O7—H2S04溶液氧化有机质，剩余的K2Cr207用标准FeS04滴定，由氧化有机质消耗的K2Cr2O7的量计算有机质含量。反应式为：
2K2Cr2O7+3C+8H2S0 ——2K2S04 + 2Cr2(S04)3+3C02+8H2O
K2Cr207+6FeS04+7H2S04 —— K2S04 + Cr2(S04)3+ 3Fe2(S04)3 + 7H20
此法氧化率只有90％，所以测得结果乘上校正系数1.1，计算有机碳含量。
二、试剂
1．0.4000MOL.L-1（1/6K2Cr207—H2S04）：40gK2Cr2O7溶于1000mL水中，冷却后，将1000mL浓硫酸慢慢加人，搅匀。　
2．0.2 MOL.L-1 FeS04：224gFeS04·7H20，溶于3000mL水，慢慢加入浓H2S04 20mL(或6
mol.l-1(1/2H2S04)120mL)，加水至4000ml。
3．邻菲锣啉指示剂：2.970g邻菲锣啉和1.390gFeS04·7H20溶解于200mL水中。
4．0.1000 MOL.L-1（1/6K2Cr2O7）：分析纯K2Cr2O7在130℃烘3小时后，冷却。准确称取2.4517g，
少量水溶解，加浓H2S04 35ml，冷却后移人500ml容量瓶，用水定容。
5．FeS04溶液的标定：取0.1000 MOL.L-1。K2Cr207溶液10ml(分别取三份)放人三角瓶中，加邻菲锣啉3滴，用配制的FeS04溶液滴定至砖红色，计算FeS04溶液的浓度，该溶液每天使用前应重新标定。
C(FeSO4)=(O.1000 * lOml)/V = 1/V
式中：V为滴定所用FeS04溶液的体积
FeS04浓度取三份测定结果的平均值。
三、仪器
油浴锅、温度计、硬质试管、滴定管、天平。
四、操作步骤
1．称取100目土样0.5g左右(用1／万天平)放人干的硬质试管内。
2．准确加人0.4MOL.L-1(1/6 K2Cr2O7———H2S04)溶液10ml，摇匀。
3．盖上小漏斗，放人铁丝笼中。
4。油浴加热至185—190℃，将铁丝笼放人，控制温度在170—180℃，从冒气泡开始计时，加热5分钟。
5．取出铁丝笼，待试管冷却后，将内容物倒入250ml三角瓶中，用水洗试管和小漏斗，洗液也倒入三角瓶(共用水50~60ml，分3~4次洗试管，最后三角瓶中溶液体积约60~70m1)。
6。在三角瓶中加指示剂(邻菲锣啉)3滴，用标准FeS04溶液滴定，颜色由橙一灰绿一浅
绿——砖红为终点。
向时作空白：即取10ml 0.4MOL.L-1(1/6 K2Cr207—H2SO4) 溶液，不加土样(或加灼烧过的石英砂)，同操作2—6进行。

五、计算结果
有机c％={(Vo-V) *C *0.003 * 1.1}/W
式中：Vo：空白滴定用FeS04体积(ml)
V：样品滴定用FeS04体积(ml)
C：标准FeS04浓度(MOL.L-1)
W：土重(g)
0.003：碳的毫克当量数
有机质％=有机C％*1.724
六、注意事项
1．为了使油浴煮沸温度在170~180℃，放入铁丝笼前油浴应加热至185~190℃(夏天)
瓤95~2000C(冬天)，从试管内开始冒大气泡开始计时，煮沸5分钟，计时应准确。反应时由
于有CO2放出，溶液可能剧烈上冲，要防止冲出，可以将铁丝笼稍提起，再放下，控制反应程
度。
2。加热方法可用油浴(植物油)，升温均匀，但有污染的可能；或用石腊油，无污染，但易挥发；或用磷酸，无污染，比较清晰易看，但需用玻璃容器加热；也有用砂浴的，无污染，但受热不均匀。
3．消煮好以后，溶液应为桔黄色或黄中稍带绿色，如为绿色，则K2Cr2O7用量不足，须重
做。
4．邻菲锣啉作指示剂，滴定开始时为橙色，中间应有灰绿色变化过程，最后为棕红色(砖
红色)(E = 1.06V)。滴定时溶液酸度有影响，应维持在1MOL.L-1(1/2H2S04)左右，所以消煮溶液稀释
体积应为60~70ml，不要太浓或过稀。
5．FeS04溶液在空气中易氧化，所以配好后不要放太长时间，在每次使用前(一、二天内)
应重新标定浓度。
七、思考题：
1．重铬酸钾外加热法测土壤有机质的基本原理和主要条件是什么，该法有何优缺点?
2，测定土壤有机质，对土样有何要求?用1mm土样可否?用新鲜土测定好不好?测水稻土有机质应如何处理样品，为什么?
3．测有机质时，土样的量和K2Cr2O7—H2S04溶液的加入量有何要求?
4．如果消煮时少量溶液冲出，结果会如何?消煮后试管未洗净，结果如何?加入土样前
试管不干，少量土沾在试管上边，会有什么影响?加热温度只有165℃，结果如何?加热时间
超过5分钟，会有什么影响?
5．加入指示剂用FeS04滴定，滴了不到1ml，颜色就变为砖红色(一般应用l0ml以上)，
这可能是什么原因造成?如何改进?

实验二 土壤全氮含量测定
一、 方法原理
土壤样品用浓H2S04—催化剂加热消煮，使各种形态的氮都转化为NH4+—N，然后加碱蒸馏 ,用硼酸吸收NH3，用标准酸滴定，计算样品含N量。
主要反应：
含N化合物+H2S04——— (NH4)2S04+CO2+SO2 + H20
(NH4)2S04+2NaOH—— 2NH3+ Na2S04+2H20
NH3+H3B03———————NH4·H2B03
2NH4·H2B03 + H2S04一(NH4)2S04+2H3B03
二、试剂
1，混合催化剂：1g硒(Se)粉，10gCuS04.5H20，100gK2S04磨细混匀。
2．浓H2S04。
3．40％NaOH：400gNaOH，加水至1000ml。
4．硼酸吸收液(2％)：60g硼酸(H3B03)溶于2500ml水，加60ml混合指示剂，用0.1mol
NaOH调节pH为4.5~5.0(紫红色)，然后加水至3000ml。
5．混合指示剂：0.099g溴甲酚绿和0.066g甲基红，溶于100ml乙醇。
6．0.01～0.02MOL.L-1标准酸(1/2H2SO4)：3ml浓H2S04加入10000ml水中，混匀。
标定：准确称取硼砂(Na2B204)1.9068g，溶解定容为100ml，此为硼砂溶液。取此液10ml，放人三角瓶中，加甲基红指示剂2滴，用所配标准酸滴定由黄色至红色止，计算酸浓度。
三、仪器。
开氏瓶、电炉、定N蒸馏器、滴定管(半微量)。
四、操作步骤
1．称土样(100目)0.5~1g，放入开氏瓶底。加入混合催化剂2g，加几滴水湿润，再加入
浓H2S04 5ml，摇匀。
2，在通风柜内加热消煮，至淡兰色(无黑色)后再消煮0.5~1小时。取下冷却后，加水约
50ml。
3．取20ml硼酸吸收液(2％H3B03)放人250ml三角瓶中，三角瓶置于定N蒸馏器冷凝管
下，管口浸入吸收液中。
4．开氏瓶(内有消煮液)接在定N蒸馏器上，由小漏斗加人20~25ml 40％浓度的NaOH
溶液，夹紧不使漏气。
5．通水冷凝，通蒸气蒸馏15分钟左右。在临近结束前，使冷凝管口离开吸收液，再蒸馏2分钟，并用纳氏试剂或pH试纸检查是否蒸馏完全。如已蒸馏完毕，用少量水冲洗冷凝管下
口，然后取出三角瓶。
6．用0.01 MOL.L-1标准酸溶液滴定，由兰绿色滴暮紫红色为终点。

五、计算
土壤全N(g.Kg-1)= [(V-V0)*C*14*10-3*103]/W
式中：C：标准酸浓度(MOL.L-1)。
V、Vo：分别为滴定样品和空白所用标准酸体积（ml）
14：N的摩尔质量（g/mol）
W：土样重(g)
六，注意事项：
1．土样应避免沾在开氏瓶颈部，如因颈部不干而沾丁土样，应用H2S04或少量水冲入瓶
底，否则会因消煮不到而使结果偏低或失误。
2．加入少量水湿润的目的是为了防止土与H2S04不能混匀而成团粒，不利于充分消化。
但水份多了会降低消煮温度，延长消化时间。所以不可加入太多水。可将土样在瓶底摇动散
开，然后加H2S04，这样土样不至成团粒，能与H2S04混匀。
3。消煮过程中，应摇动开氏瓶数次，让土样集中在瓶底与H2S04充分反应。消化开始时，
由于有机物炭化，溶液为棕黑色等深颜色，随有机物氧化，颜色变浅，至出现兰绿色时(此为CuS04的颜色)，大部分有机物都已分解，再消化半小时以上，使一些难转化的含氮化合物也转化为NH4+—N。如果开氏瓶内还有黑色或棕色，必须继续消化至该色消失。
4．有时某些土样消化时会有溶液溅动现象，应控制温度不使反应局部过剧烈。消化土样
也可以用硬质试管—铝锭消化器或其它定氮消煮仪器。催化剂中Se有毒，且在高温下易挥
发，消化过程中还有S02等毒气产生，所以消煮必须在通风柜内进行。
5。消化后开氏瓶内为浓H2S04，应冷却后小心加入水稀释，否则会因水与浓H2S04激烈
作用，而使消化溶液冲出，造成损失或失败。
6，如用常量蒸馏器，可将开氏瓶直接接在蒸馏器上蒸馏。如用半微量定氮蒸馏器，可将
消化溶液全部转移人lOOml容量瓶中，用水洗几次开氏瓶，洗液也转入容量瓶。用水定容后，
取10~20ml溶液加入半微量定氮蒸馏器进行蒸馏测定，最后计算时需乘上分取倍数(10~5倍)。
7．常量定氮蒸馏时，由于蒸出NH3，H20量较大，冷凝管下口(可接皮管或塑料管加长些)
应插入硼酸吸收液，避免可能有的挥发损失。最后为避免管口沽有硼酸吸收液，．所以结束前2分钟将冷凝管口离开硼酸吸收液，让蒸馏溶液<这时含NH3·H20已经很少)冲洗管内口。在取出三角瓶时，还应用水冲洗一下冷凝管下口。、如果是用半微量定氮蒸馏，由于蒸出NH3·H20量较少，一般不会有挥发损失问题，所以冷凝管口可不插入吸收液中。
8．蒸馏加入的40％NaOH的量要适宜。少了，不能完全中和浓H2S04，因此不能使NH3蒸出；过多了，反应过剧烈，容易造成氮的损失。加入的量要根据溶液中含H2S04的量来决定，如消化时用5ml浓H2S04，则蒸馏时用20~25ml 40％NaOH(10N)。如用半微量蒸馏，取20ml稀释液(20ml／100ml)，则只需加5ml 40％NaOH口添加NaOH的过程要快速，防止反应生成的NH3损失。
9．该测定中不包括土壤中的N03—N。如土样有较多NO3-和NO2-—N，则需加入水杨酸和Na2S203固定和还原NO3-—N、NO2-—N成为NH4+—N，然后同样进行消煮。

七、思考题
1．土样消煮时，加入的各种试剂各起什么作用?
2. 如何保证消煮完全，使全部氮都转化为NH4+—N?
3．在蒸馏过程中，哪些因素可能造成测定结果偏低?

实验三 水解氮的测定(碱解扩散法)
一、方法原理
在扩散皿中，用1MOL.L-1 NaOH水解土壤，使易水解态氮转化为NH3，扩散后由H3B03吸收，用标准酸滴定，计算土壤水解N含量。
二、试剂
1．1MOL.L-1NaOH：40g：NaOH，溶于1000ml水。
2．2％H3B03：同实验二，试剂4。
3．0.01 MOL.L-1 (1/2H2S04)：同实验二，试剂6。．
4．碱性甘油：20g阿拉伯胶粉，加热溶解于100ml水中(80℃)。冷却后，加入20ml甘油，
再加入20ml 40％NaOH溶液，混匀，贮于滴瓶中。
三、仪器
扩散皿、橡皮筋、恒温箱、天平、微量滴定管
四、操作方法：
1。称取土样2.00g，均匀铺于扩散皿外室。
2．内室中加2％H3B03 2ml。
3．在扩散皿边上涂碱性甘油，盖上玻璃片，转动使碱性甘油在四周沾匀。
4．将玻片推开一小缝，往外室加人1 MOL.L-1 NaOH 5ml。
5．立即盖严玻片，轻轻转动扩散皿，使外室土样与碱液混匀。用皮筋将玻片固定住。
6，扩散皿小心放人恒温箱，40℃，放24小时。
7．取出扩散皿，去玻片，用0.01 MOL.L-1标准酸滴定内室溶液至紫红色止。
五、结果计算：
水解N (mg／kg) = C*V*14*1000/W
式中：C：标准酸的浓度(MOL.L-1)
V：滴定所用标准酸体积(ml)
14： N的摩尔质量.
W：土样重(g)
六、注意事项：
1。土样用40目，均匀散开，必须全部与NaOH溶液混匀o
2．扩散皿要无缺口，无裂缝，保证扩散过程中不漏气。
3．碱性甘油及NaOH都不得沾及内室。如有少量沾人，需重做o
4．操作中要小心，不使扩散皿倾斜，或剧烈晃动，避免内室H3B03溢出，或外室样品和
NaOH浸入内室。
5．为使水解完全，应使时间在24小时左右，温度400C，夏天温度在350C以上时，也可不
放在恒温箱中，就在室内桌上水解，时间可稍长点。
6．滴定时可用小玻棒轻轻搅动内室溶液，但不要摇动扩散皿。
七、思考题：
1．成功进行水解氮测定的关键技术有哪几点?
2．如果①玻片未盖严，②扩散皿未放平，使一边土样完全浸于NaOH中而另一边很少有
NaOH，③加入NaOH溶液不到lml，④将40％NaOH当作1 MOL.L-1 NaOH加入，⑤恒温温度为45℃，⑥水解时间为4小时，将对测定有何影响?
3．在内室中加入紫红色H3B03吸收液，未进行扩散就变为绿色，是什么造成?如何办?如果水解24小时后，内室吸收液仍为紫红色，可能的原因有哪些?
4．一同学在碱解扩散后，用标准酸滴定，内室已经滴满溶液而颜色仍为绿色，而其它同学
用同一土样和试剂做实验，都不到滴满内室即已变为紫红色终点，该同学实验中可能出了什么错误?
5．在碱解扩散后，取出扩散皿，发现玻片内挂了不少水珠，这是什么原因引起的?对测定
结果有无什么影响?

实验四 土壤铵态氮的测定
(一)蒸馏滴定法
一、方法原理
用2 MOL.L-1 KCl提取土壤中的NH4+—N，用MgO进行蒸馏，用H3B03吸收NH3，标准酸滴定，计算NH4+—N含量。
二、试剂
1．2 MOL.L-1 KCl：取149.1g KCI，溶于1000ml水中。
2．2％H3B03：同实验2，试剂4。
3．0.005 MOL.L-1标准酸(1/2H2SO4)：实验二试剂6，准确稀释1倍用。
4．12％MgO悬浊液：60gMgO(灼烧过)放人500ml水中，摇匀。
三、仪器：
振荡机，半微量定氮蒸馏器，微量滴定管
四、操作步骤
1．称取土样(1mm)5.0g，放入三角瓶中，加入2 MOL.L-1 KCI溶液25ml，用塞子塞紧，振荡半小时。取出过滤。
2．吸取滤液10.0ml，放人半微量定N蒸馏器，加入10m1 12％MgO悬浊液，少量水洗进样杯，然后塞住进样杯。
3．取5 ml 2％H3B03溶液放人三角瓶，置于冷凝管下，通蒸气蒸馏约10分钟(蒸出液约
30~40ml)。
4．取出三角瓶，用标准酸滴定至紫红色为终点。
五、计算
NH4+—N(ppm) = (c*V*14.0*分取倍数*103)/W
式中：c、V：分别为滴定用标准酸的浓度和体积
14.0:N的摩尔质量
W：土样重(g)
分取倍数：加入浸提液体积(ml)／吸取滤液体积(m1)
六、注意事项
1．本法只适用于含NH4+—N较多的土样。含量低的土样测定误差大。含量低的土样可用比色法测定。
2．最好用新鲜土测定N乩／—N，同时测水分，换算为烘干土计算。土样风干过程中，NH4+—N含量会变化。
3．用MgO作蒸馏剂是为了防止浸出液中有机N水解使结果偏高，不可用NaOH作蒸馏试剂。
4．半微量蒸馏器内腔不能容纳过多溶液，否则蒸馏时溶液可能冲出到馏出液中而使蒸馏
失败，所以加入滤液和MgO悬浊液体积不能过多。
七、思考题：
1．为什么不用NaOH而用MgO进行蒸馏?
2．蒸馏法测土壤NH4+—N对仪器有何要求?

(二)奈氏比色法
一、方法原理
用中性NaCl溶液提取土壤NH4+—N，在碱性条件下N埘与奈氏试剂络合为黄色络合
物，比色测定，计算NH4+含量。
反应为：
NH4+ + 2HgI42- + 40H— → Hg20(NH2)I + 7I- + 3H20
该法测定范围为0.1 ~ 3ppm NH4+ 。
二、试剂
1．奈氏试剂：①35gKI和45gHgl2溶于400ml水中，②112gKOH溶于500ml水中，冷却。然后将①慢慢加入②中，边加边搅拌，最后加水至1000ml，放置过夜，取上清液贮于棕色瓶中，用橡皮塞子塞紧。
2．25％酒石酸钠：50g酒石酸钠，溶于200ml水。
3．20％NaCl：500gNaCl溶于2500ml水。
4。1％阿拉伯胶：2g阿拉伯胶，溶于200ml沸水。
5．标准溶液：NH4Cl在1OOoC烘干，取0.1910gNH4Cl放入500ml容量瓶，用水定容，此为
100ppm NH4+—N溶液。取此液lOml放入lOOml容量瓶，用水定容，此为lOppm NH4+—N标准溶液。
三、仪器
天平，振荡机，分光光度计
四、操作步骤
1．称取土样10.0g，放入三角瓶中，加入20％NaCI溶液50ml．用塞子塞紧，振荡30分钟，
2．过滤于烧杯或三角瓶中，取滤液5一lOml，放人25ml容量瓶中，加25％酒石酸钠lml，
摇匀，放5分钟，加水lOml。
3．加入1％阿拉伯胶5滴，摇匀。再加入奈氏试剂1 ml，摇匀，用水定容。放5分钟后，比色测定。波长为420nm。
标准曲线制作：
分别取10ppm NH4+—N标准溶液0、1、2、3、4、5ml，放人25ml容量瓶中，同上2~3步骤
进行，在440nm波长测定A值，以浓度为横轴，A值为纵轴作标准曲线。浓度为：0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.Oppm。
五、计算：
NH4+—N (mg／kg) = (ppm * 50 * 25 * 1000)/ (10 * 5 * 1000)
六、注意事项
1．提取土壤NH4+—N也可以用2 MOL.L-1 KCl溶液，用1:5土液比同样进行浸提操作，如样品含NH4+—N少，也可以用1 ：2.5土液比提取。
2．添加试剂次序不可变动，添加掩蔽剂酒石酸钠后，应放置5分钟，使出Ca、Mg等离子
被络合：
3．生成的络合物在温度高时稳定半小时左右，温度低时稳定1小时左右，应在稳定时间
之内比色测定完。
七、思考题：
1．奈氏比色法测NH4+—N的基本原理和主要试剂的作用是什么?
2．奈氏比色法要求显色溶液为碱性(pH>11)，实验中通过什么来达到这一要求的?如果样品提取液不是中性，应如何办?

实验五土壤硝态氮的测定
(一)硝酸根电极法
一、原理
用2％K2S04溶液提取土壤N03——N，用硝酸根电极法测定．N03——N。
E = EO – (2.303RT/nF)*log(NO3-)
二、试剂
1．2％ K2SO4 ：lOOgK2S04溶于5000ml水。
2．N03- —N标准溶液：
取0.6071gNaN03，放人100ml容量瓶，用2％K2S04定容，此溶液含N03—N1000ppm。
依次将此标准原液用2％ K2S04稀释为NO3——N标准系列溶液，浓度分别为：100、50、
10、5、1ppm。
三、仪器
硝酸根电极、离子计或pHS—2型酸度计，甘汞电极，振荡机
四、操作步骤
1。称土样10.0g放人150ml三角瓶中，加入50ml 2％ K2SO4溶液，塞紧塞子，振荡15分
钟。
2．干过滤，取滤液约25ml，放人小烧杯中。
3．放硝酸根电极和甘汞电极在溶液中，测读电位(mv)，查标准曲线，得溶液NO3-—N浓度。
标准曲线：
分别取1、5、10、50、100ppmN03-—N标准溶液20 ~ 25ml放人小烧杯中，同操作3测电位(mv)，在二联半对数纸上以电位正(mv)为纵轴，浓度M为横轴作曲线。也可将mv与N03-—N浓度的负对数(PNO3-)在方格纸上作图。
五、计算
N03-­­N( mg／kg) = (查曲线得ppm * 50 * 1000)/(10 * 1000)
六、注意事项
1．测N03-—N用1mm风干土或新鲜土。旱地土壤测NO3-—N，水田土壤一般不测NO3—N。
2．测定时所取滤液体积不必准确，以电极响应部位能浸入液中即可。硝酸根电极响应很快，一般几秒钟后即可达到平衡，读数。
3．该法测定范围为10-1~ 10-5mol.l-1(N03—)。测定时电极pH范围为4 ~ 9.5。每次测定后，电极应清洗至“空白”电位附近。
4．CI—、ClO3-、H2PO4-等离子有一定干扰，C1—超过NO3-浓度100倍时干扰。
七，思考题
1．可否用标准添加法测定NO3-—N浓度?如何进行?
2．为什么水田土壤一般不测NO3-—N含量?
(二)酚二磺酸比色法

一、方法原理
N03——N提取液在微碱性条件下蒸干，加酚二磺酸反应，生成硝基酚二磺酸，反应为：
HN03 + C6H30H(HS03)2—>C6H20H(HS03)2N02+ H20
经碱化后生成黄色溶液，颜色深浅与N03——N含量在一定范围内正相关，在波长400 ~ 425nm处比色测定。
二，试剂
1．酚二磺酸：25.0g苯酚在500ml三角瓶中，加入225ml浓H2SO4，在沸水浴上加热6小
时。冷却后如有结晶析出，用时须重新加热溶解，不要加水。试剂贮于棕色瓶中，密封防吸湿。
2．粉状固体：CaS04·2H20，CaCO3，Ca(OH)2，MgCO3，Ag2S04，活性炭。
3．1 : 1 NH4OH
4：NO3-—N标准溶液(10ppm)：0.722gKN03溶解定容为1000ml，为100ppmN03-—N溶液。再稀释10倍，得10ppm NO3-—N标准溶液。
三、仪器
分光光度计，水浴锅，蒸发皿
四、操作步骤。
1。称取新鲜土样50.0g，放人500ml三角瓶中，加0.5gCaS04·2H20和250ml水，塞紧塞
子夕振荡均分钟，放置几分钟后将上部溶液过滤。’
2．取滤液25—50ml，放入蒸发皿中，加0.05gCaC03，在水浴上蒸干，冷却。
3．加入酚二磺酚2ml，轻轻摇动使蒸干物充分接触反应，放置10分钟。
4．加水20ml，用玻棒搅拌使蒸干物溶解，冷却。边加边搅慢慢加入1 ：1NH4OH，至溶液
显黄色(微碱性)再多加2ml 。
5．将溶液移入100ml容量瓶，加水定容。用波长420nm比色测定。
标准曲线：
分别取10ppmN03-—N标准溶液0、1、5、10、15、20ml，于蒸发皿中，同操作2 ~ 5同样进行，作标准曲线。NO3-—N浓度分别为：0，0.1，0.5，1.0，1.5，2.0ppm 。
五、计算
NO3—N ppm(ug.ml-1 )= 查标准曲线ppm * 土水比 * 稀释倍数
=ppm * (250/50) * (100/25)(取25ml溶液)
六、注意事项
1．土样风干时N03-—N会发生变化，所以要用鲜土测定，如需用干土重计算，同时另取样测水分。
2．滤液必须澄清，因此提取N03-—N时加入凝絮剂CaS04，CaC03等。如滤液有色，可加少许活性炭摇动后过滤去色。
3．如土样C1—多(超过15ppm)，提取液需用Ag2S04处理去C1—。方法是：100ml滤液中加0.1gAg2S04，振荡15分钟。再加0.2g Ca(OH)2和0.5gMgC03，沉淀多余的Ag+，振荡5分钟后过滤，取滤液测N03-—N。
4。蒸干过程中为防止N03-—N损失，加入少量CaC03，保持溶液弱碱性。
5．N03-—N与酚二磺酸反应必须在无水条件下进行，反应前必须蒸干。已经蒸干时不要
再继续加热。
6．碱化时用NH40H，不要用NaOH或KOH。
七、思考题
1．酚二碘酸比色法测NO3-—N的反应条件要求有哪些?
2．该法可能有些什么干扰测定?如何克服?
3．操作过程中加CaS04和CaC03各起什么作用?

实验六土壤有效硫的测定

Ca(H2P04)2—2NHOAc提取---BaS04比浊法
一、方法原理
用Ca(H2P04)2—2NHOAc溶液提取土壤有效硫，(包括可溶性硫酸盐和翠附性硫酸盐)，用H202氧化除去溶液中少量有机质，然后用BaS04比浊法测定。
二、试剂
1．Ca(H2P04)2—2NHOAc浸提液：取5.1gCa(H2PO4)2·H20溶于2500m1 2N HOAc溶液中(145mlHOAc加水至2500ml)。
2．H202(30％)，HCI(1 : 4)
3．0.25％阿拉伯胶水：0.25g阿拉伯胶，溶于lOOml热水。
4，BaCl2·2H20晶粒(0.25 ~ 0.5mm)。
5．S 标准溶液(100ppmS)：0.5436gK2S04溶解定容为1000ml，此为100ppmS溶液。再用水稀释为25ppmS(吸25m1 100ppmS溶液稀释为lOOml)。
三、仪器
振荡机，分光光度计，电热板
四、操作步骤
1．取lmm土样10.00g，放入150ml三角瓶中，加50ml浸提剂,塞紧塞子，振荡1小时，过虑。
2．取20ml滤液，放人lOOml三角瓶中，电热板上加热，滴加5滴30％H202氧化有机质，反应后再煮沸一会，去尽H202，加入1:4HCl 1ml。
3．溶液全部移入25ml容量瓶，少量水洗三角瓶数次，洗液也移入容量瓶。加入0.25％阿拉伯胶2ml，用水定容。
4．加入BaCl2·2H20晶粒1.0g，塞紧摇动1分钟。
5．在5—30分钟内，比色测定，波长为440nm，用3cm比色皿。从标准曲线上查出溶液浓度。
标准曲线绘制：
吸取25ppmS溶液0，1，2，3，4，5ml，分别放人25ml容量瓶，加入1 ：4HCl lml，0.25％阿拉伯胶2mL，用水定容，同操作4，5进行，绘制标准曲线，标准系列S浓度为0，1.0,2.0, 3.0，4.0，5.0ppm。
五、计算
土壤有效sppm = (ppmS * 50 * 25)/(10 * 20) = ppmS * 6.25
六、注意事项
l.Ca(H2P04)2—2NHOAc提取法适用于酸性土壤，对多数作物的临界值范围大致为8—12ppm。如测定中性、石灰性土壤，可用0.5 MOL.L-1 NaHC03(pH8.5)为浸提剂 。
2．浸提温度最好在20 ~ 25OC。
3．Ba2C12·2H20晶粒需先研细，取0.25 ~ 0.5mm粒径的用。可加入容量瓶用力振摇反应，也可将溶液倒入烧杯，加晶粒，用磁力搅拌反应。
4. 悬浊液稳定时间30分钟，所以应在30分钟内比浊完，如悬浊度较高也可用2cm或1cm比色皿。
5．在S浓度低时(<lppm)，曲线部分不成直线关系，所以尽量不用低浓度部分。如溶液含S量低，可以多取滤液浓缩后测定，或是在溶液中添加标准溶液(例如加入25ppmS标准溶液lml，浓度提高lppm)，使溶液含S浓度增加，比浊读数在标准曲线上的线性部分，在计算时，再将添加的量减去。
七、思考题
1．为什么要用H202除去滤液中的有机物?
2.比浊法测S在反应条件方面应注意些什么?

实验七 土壤全磷的测定
(一)NaOH碱熔一钼锑抗比色法
一、方法原理
用NaOH熔融分解土样，使磷转化为可溶性磷酸盐，制备待测溶液。
取待测液在一定酸度条件下与钼锑抗反应生成磷钼杂多酸，其中Mo5+被抗坏血酸还原为Mo6+，生成钼兰，比色测定可得溶液磷浓度。
该法测定范围为0.1 ~ 1.4pm(P)。
二、试剂
1．NaOH(固体)
2. 4MOL.L-1(1/2H2SO4):120ML浓H2SO4慢慢加入960ml水中,搅拌,冷却后装瓶.
3．2，4—二硝基酚：0.4g 2，4—二硝基酚溶于200ml水中。
4，10％ Na2C03：40gNa2C03加水至400ml。
5．5％ H2S04：，20ml浓H2S04，慢慢加入380ml水中。
6．6.5mol.l-1钼锑贮备液：
①180ml浓H2SO4慢慢加入400ml水中，冷却。
②20g(NH4)2Mo04加入300ml水中(60OC)溶解，冷却。
③0.5g酒石酸锑钾溶于100ml水。
将①慢慢加入②中，搅匀；再将③加入，冷却后加水至1000ml，贮于棕色瓶中。
7．钼锑抗溶液(使用当天配)
1.5g抗坏血酸加入100ml钼锑贮备液中，溶解。
8．P标准溶液：
KH2P04在105OC烘2小时。取0.4390g，溶于水，加入3mlH2S04，移入1000ml容量瓶，用水定容，此为100ppmP标准液。
取此液5ml放人100ml容量瓶，水定容，得5ppmP标液。

三、仪器
马福炉，银坩埚，分光光度计，电炉。
四、操作步骤
(1)样品处理，待测液制备：
1．称取100目土样0.3g左右，称准至1／万。
2．用台秤取2g NaOH固体，将其中一半小心放入银坩埚底，铺散开。将土样倒在NaOH上，再将剩下的NaOH倒在上面。
3．先在电炉上加热，去除水分，然后将银坩埚放人马福炉，盖上盖子。逐步升温至720OC
保持20分钟。
4．取出坩埚，用少量水溶解熔块(可稍加热)，溶液转入100ml容量瓶。多次进行上述操作直至熔块完全溶解。最后用4 MOL.L-1 H2S04洗坩埚，洗液也转入容量瓶。
5．加入10ml4 MOL.L-1(1/2 H2S04)，冷却后用水定容。澄清或过滤后，供测全P、全K用(可过滤于干净三角瓶中)。
(2)测定：
①取待测溶液5ml，放入25ml容量瓶中，加水约10ml。
②加入2，4—二硝基酚2滴，用10％Na2C03或5％ H2S04调节pH至刚显微黄色。
③加入钼锑抗溶液2．50ml，摇动去气泡，用水定容，放置15分钟后比色测定。波长660nm。由标准典线上查出溶液P浓度(ppm)。
④标准曲线绘制：
分别取5ppm磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml，放人25ml容量瓶中，同测定②③进行，该标准系列浓度依次为0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.Oppm(P)。作标准曲线。
五、计算：
P(g/kg) = (ppm * l00 * 25 * 1000)/(W * 5 * 106) =( ppm * O.5 )/W
六、注意事项
1．土样和NaOH比例约为1:8，土样量多时，NaOH量应相应增加。称取的土样放人银坩埚中要散开不要堆成团粒，以便土样与NaOH充分接触反应。也可以将土样放在坩埚底，滴几滴乙醇使土散开，然后盖上NaOH。
2．NaOH易吸水，称量后要尽快放入坩埚并在电炉上烘干。也可以放人马福炉中先升温至200—3000C，停10分钟，使水分去尽，然后再升温至7200C，否则会因NaOH会水分多而在熔融过程中样品和NaOH从坩埚边溢出。
3．银坩埚只能在9500C以下使用，否则会熔化。所以必须校正和控制马福炉温度，在7200C熔融。
4．熔融好的样品冷却后表面平滑无气泡，颜色多呈兰绿色(Mn2+的颜色)，如仍为土黄色
或黑色，说明还未熔融好，可以再放人马福炉在720℃熔融10 ~ 20分钟。
5．银坩埚的盖子在熔融过程中应盖上，但边上露出一小缝以便出气和空气流通。冷却后
溶解样品熔融物时，盖子也应用少量水洗净。
6．熔融物不易很快溶解，可以稍加热，但不可煮沸，否则会溅出损失。每次用5—10ml水
溶洗，用玻棒搅动加速溶解，多进行几次可全部溶出。也可以在坩埚中加较多水，放置过夜则
熔融物很容易溶解。
7．加入1/2H2SO4(4 MOL.L-1)是为了中和多余的NaOH，使溶液呈酸性(约0.3mol.l-1)，让硅沉淀下来。加入H2S04量应根据所用NaOH量多少而加减。
8．所取待测液体积根据磷含量