第一章绪论_动物病理学 (1).pdf

动物病理学动物病理学Animal Pathology安徽农业大学动物病理学课程组安徽农业大学动物病理学课程组第一章绪论第一章绪论Chapter Oneintroduction第一节动物病理学概论第一节动物病理学概论一、概述二、病理学研究基本方法三、病理学观察方法和新技术的应用四、病理学发展简史及发展趋势五、动物病理学的内容六、学习病理学的指导思想本节内容一、概 述一、概 述（一）（一）动物动物动物病理学基本概念动物病理学基本概念（二）（二）动物动物动物病理学的任务动物病理学的任务（三）（三）动物动物动物病理学的范畴动物病理学的范畴（四）（四）动物动物动物病理学在动物医学中的地位动物病理学在动物医学中的地位?动物病理学：研究动物疾病的病因、发病机理和患病机体内所呈现的代谢、机能和形态结构的变化，来阐明疾病发生、发展和转归的一门基础学科。?目的：为疾病的诊断和防治提供理论基础和实践依据。(一一一一)动物病理学基本概念动物病理学基本概念动物病理学基本概念动物病理学基本概念Definition of pathology?Pathology is to study diseases by scientific methods.Pathology is to study diseases by scientific methods.?Disease may be defined as an abnormal alteration of Disease may be defined as an abnormal alteration of structure or function in any part of the body.structure or function in any part of the body.?基本病理过程基本病理过程（fundamental pathological process）：多种疾病过程中出现的共同的功能、代谢和形态的病理变化。）：多种疾病过程中出现的共同的功能、代谢和形态的病理变化。Pathological process:refer to a process in which some common,regular alterations of function,metabolism and structure take place in many difference diseases.e.g.Fever,shock,edema etc.（二）病理学的任务（二）病理学的任务（二）病理学的任务（二）病理学的任务病理学的主要任务是应用各种方法和手段研究和阐明：病理学的主要任务是应用各种方法和手段研究和阐明：1.病因学（1.病因学（etiology）:）:即疾病发生的原因（即疾病发生的原因（cause），包括外因、内因及其相互关系。），包括外因、内因及其相互关系。2.发病学（2.发病学（pathogenesis）:）:即在病因的作用下,机体疾病的发生、发展的具体环节和过程，以及各环节的因果关系。即在病因的作用下,机体疾病的发生、发展的具体环节和过程，以及各环节的因果关系。3.病理变化或病变:3.病理变化或病变:（pathological changes or lesions）:即在疾病发生发展过程中，机体的功能代谢和形态结构的变化。有时还阐明由于这些变化引起的临床表现，称临床病理联系（）:即在疾病发生发展过程中，机体的功能代谢和形态结构的变化。有时还阐明由于这些变化引起的临床表现，称临床病理联系（clinicopathological correlation）。）。4.疾病的转归和结局（4.疾病的转归和结局（results）：）：疾病的转化和终结疾病的转化和终结。（三）病理学的范畴（三）病理学的范畴（三）病理学的范畴（三）病理学的范畴病理解剖学病理解剖学病理解剖学（病理解剖学（pathoanatomy）?着重从形态变化角度阐明疾病发生、发展和转归的规律。着重从形态变化角度阐明疾病发生、发展和转归的规律。病理生理学病理生理学病理生理学病理生理学(Pathophysiology)?着重从功能和代谢的角度来阐明疾病发生、发展和转归的规律。着重从功能和代谢的角度来阐明疾病发生、发展和转归的规律。现在随着科学技术和近代医学科学的发展(如分子生物学和遗传学、免疫学等),在病理学方面出现了不少边缘科学和新的科学分支。现在随着科学技术和近代医学科学的发展(如分子生物学和遗传学、免疫学等),在病理学方面出现了不少边缘科学和新的科学分支。细胞病理学细胞病理学细胞病理学细胞病理学(cellular pathology).(cellular pathology).超微病理学超微病理学超微病理学超微病理学(ultrastractural pathology).(ultrastractural pathology).免疫病理学免疫病理学免疫病理学免疫病理学(immuno-pathology).(immuno-pathology).分子病理学分子病理学分子病理学分子病理学(molecular pathology）、(molecular pathology）、环境病理学环境病理学环境病理学环境病理学(envirenmental pathology）、(envirenmental pathology）、遗传病理学遗传病理学遗传病理学遗传病理学(genetic pathology）(genetic pathology）定量病理学定量病理学定量病理学定量病理学(quantitative pathology）等。(quantitative pathology）等。（四）病理学在兽医学中的地位（四）病理学在兽医学中的地位1.1.是基础是基础是基础是基础兽兽医学与临床医学与临床医学与临床医学与临床兽兽医学之间的桥梁医学之间的桥梁医学之间的桥梁医学之间的桥梁A bridge between preclinical and clinical medicine?动物病理学是兽医科学的基础学科与临床学科之间的桥梁。它以解剖学、组织与胚胎学、生理学、生物化学、微生物学和免疫学等学科的知识为基础，研究疾病的病因、发病机理和病理改变，揭示疾病发生发展的一般规律。动物病理学是兽医科学的基础学科与临床学科之间的桥梁。它以解剖学、组织与胚胎学、生理学、生物化学、微生物学和免疫学等学科的知识为基础，研究疾病的病因、发病机理和病理改变，揭示疾病发生发展的一般规律。?同时，动物病理学的基本内容又为内科学、外科学、传染病学、寄生虫病学等学科的学习提供必要的理论基础。同时，动物病理学的基本内容又为内科学、外科学、传染病学、寄生虫病学等学科的学习提供必要的理论基础。?可见,pathology是基础医学和临床医学之间的一门桥梁课程，起承上启下的作用，在医学教学中占有重要的地位。可见,pathology是基础医学和临床医学之间的一门桥梁课程，起承上启下的作用，在医学教学中占有重要的地位。?在医学界，病理学长期以来被喻为在医学界，病理学长期以来被喻为“桥梁医学桥梁医学”和和“审判医学审判医学”充分表明它在医学中，特别是在临床医学中占有不可替代的双重地位.这主要是由病理学的性质和任务所决定的。充分表明它在医学中，特别是在临床医学中占有不可替代的双重地位.这主要是由病理学的性质和任务所决定的。2.病理学（诊断）是最具有权威性的一级诊2.病理学（诊断）是最具有权威性的一级诊断。断。?动物病理学在动物疾病的诊断和研究上具有重要的作用。尽管随着科学技术和兽医科学的发展，临床诊断疾病的手段不断增多，如影像诊断技术、实验室化验、内窥镜检查等已广泛应用于临床诊断，但病理学诊断仍是很多疾病的最后诊断。?病理学通过尸体剖解、活体组织检查和动物实验等研究方法，直接应用于临床实践，在疾病的诊断、疾病发生发展规律的阐明和临床工作水平提高方面均具有重要地位。病理诊断是直接观测直接观测器官、组织和细胞病变特征而做出的疾病诊断,因而它比临床上的其他诊断如根据病史、症状和体征等做出的分析性分析性诊断诊断,比用超声波,X射线.CT.核磁共振等做出影影象诊断象诊断等,都更具有直观性直观性.客观性和准确性客观性和准确性.可见,病理学作为应用科学，其任务是鉴定疾病及其严重程度，在医学诊断中的地位有如一部“法法典典”.国外将司“法典”的病理医生称之为“doctordoctor s s doctordoctor”。在西方医学界流行这样一句话:“最后一句话要最后一句话要由病理学家来说由病理学家来说”。3.科学研究-揭示疾病规律和本质,为防治疾病提供科学理论(支撑点)3.科学研究-揭示疾病规律和本质,为防治疾病提供科学理论(支撑点)Animal experiment*Laboratory research(in vitro)*Clinical investigation“As is our pathology，so is our medicineAs is our pathology，so is our medicine”二、病理学研究基本方法二、病理学研究基本方法（一)（一)尸体剖检尸体剖检尸体剖检尸体剖检(autopsy)(autopsy)（二)（二)病理组织切片观察病理组织切片观察病理组织切片观察病理组织切片观察(histopathological slide)(histopathological slide)（三)（三)活体组织检查活体组织检查活体组织检查活体组织检查(biopsy)(biopsy)（四)（四)细胞学检查细胞学检查细胞学检查细胞学检查(cytology)(cytology)（五)（五)细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养(cell culture)(cell culture)（六)（六)动物实验动物实验动物实验动物实验(experimental with animal)(experimental with animal)（一）尸体剖检(简称尸检）（一）尸体剖检(简称尸检）?即对动物尸体或对发病动物扑杀进行病理剖检。通过剖检可观察病变，分析病变的相互关系，确定诊断，查明死因。?剖检也可对一些群发性疾病如传染病、地方病、寄生虫病等及时作出诊断，为防治工作提供依据。?实验动物的疾病复制模型可通过不同阶段的剖检研究疾病的发病机理。（二）动物实验在人为控制条件下，用实验动物复制动物疾病的模型，根据研究需要对其代谢、机能和形态结构进行系统的检测和观察研究。动物实验常用于研究疾病的病因、发病机理及其发生、发展过程等。（三）临床病理学研究?是对自然发病动物进行临床病理学研究，即根据疾病特点和研究目的对动物的血液、尿液、粪便、渗出物等做实验室化验分析，以明确发病原因及发病动物体内机能、代谢或某些形态结构的改变，了解疾病的发生发展过程。（四）活体组织检查运用切除、穿刺、钳取等手术方法从发病动物活体采取病变组织进行病理检查。（五）细胞培养将选定的某种细胞用适宜的培养基在体外培养，可观察组织病变的发生发展过程或某种病因作用下细胞病变的发生发展规律。三、病理学观察方法和新技术的应用三、病理学观察方法和新技术的应用(一)大体观察一)大体观察(gross appearance,眼观变化/大体变化)(gross appearance,眼观变化/大体变化)(二)组织和细胞学观察(二)组织和细胞学观察(microscopic appearance,镜下变化)(microscopic appearance,镜下变化)(三)组织化学和细胞化学观察(三)组织化学和细胞化学观察(hitochemistry or cytochemistry)(hitochemistry or cytochemistry)(四)免疫组织化学观察(四)免疫组织化学观察(immunohistochemistry)(immunohistochemistry)免疫荧光、免疫酶标胶体金标记技术免疫荧光、免疫酶标胶体金标记技术(五)超微结构观察(五)超微结构观察(ultrastructural observation)(ultrastructural observation)(六)流式细胞术(六)流式细胞术(flow cytometry,FCM)(flow cytometry,FCM)(七)图象分析技术(七)图象分析技术(image analysis)(image analysis)(八)分子生物学技术:(八)分子生物学技术:重组DNA技术、核酸分子杂交技术、重组DNA技术、核酸分子杂交技术、原位杂交（in situ hybridization,ISH）原位杂交（in situ hybridization,ISH）聚合酶链反应聚合酶链反应（PCR)技术(一一).).大体观察大体观察大体观察大体观察(眼观变化眼观变化眼观变化眼观变化/大体变化大体变化大体变化大体变化)通过剖检观察器官病变（猪瘟.猪丹毒.鸡瘟等）对疾病作出诊断,是最基本的方法之一。通过剖检观察器官病变（猪瘟.猪丹毒.鸡瘟等）对疾病作出诊断,是最基本的方法之一。主要是用肉眼或辅之以放大镜主要是用肉眼或辅之以放大镜主要是用肉眼或辅之以放大镜主要是用肉眼或辅之以放大镜尺尺尺尺秤等工具，有秤等工具，有秤等工具，有秤等工具，有时加用大体标本染色等观察时加用大体标本染色等观察时加用大体标本染色等观察时加用大体标本染色等观察,对大体标本和病变器官的对大体标本和病变器官的对大体标本和病变器官的对大体标本和病变器官的大小大小大小大小形状形状形状形状色泽色泽色泽色泽质地质地质地质地重量重量重量重量界限界限界限界限表面和切面表面和切面表面和切面表面和切面状态等病变特征进行细致地观察和检测状态等病变特征进行细致地观察和检测状态等病变特征进行细致地观察和检测状态等病变特征进行细致地观察和检测。大体观察可见到病变的整体形态和许多重要性大体观察可见到病变的整体形态和许多重要性大体观察可见到病变的整体形态和许多重要性大体观察可见到病变的整体形态和许多重要性状，具有微观观察不能取代的优势状，具有微观观察不能取代的优势状，具有微观观察不能取代的优势状，具有微观观察不能取代的优势，因此不能片面地只注重组织学观察及其他高技术检查，它们各有所长，应配合使用。(二二).).组织和细胞学观察组织和细胞学观察(镜下变化镜下变化)将病变组织制成切片，或将脱落细胞制成涂片，经染色后用光学显微镜观察组织和细胞的病理变化。组织切片:最常用苏木素伊红染色（染色），必要时可辅以一些特殊染色。1.1.一般组织病理学观察一般组织病理学观察通过观察器官的组织病理学变化通过观察器官的组织病理学变化,对疾病作出诊断对疾病作出诊断。如巴氏杆菌病.沙门氏菌病.结核病.肿瘤等。采取病变组织制成病理组织切片（histopathologicalslide）或将脱落细胞制成涂片脱落细胞制成涂片，经不同方法染色后，在在光学显微镜下进行观察光学显微镜下进行观察,分析分析归纳组织细胞形态结构变组织细胞形态结构变化化，诊断疾病及判定其类型及阶段等。由于分辨率比肉眼增加了数百倍，加深了对病变的认识，因而显著地提高了诊断的准确性。到目前为止，传统的组织学观察方法仍然是病理学研究和诊断的无可替代的最基本的方法。2.2.2.2.活体组织检查活体组织检查活体组织检查活体组织检查(Biopsy,(Biopsy,(Biopsy,简称活检)(Biopsy,简称活检)即即即即用局部切取、细针吸取、钳取、搔刮和手术摘取等方用局部切取、细针吸取、钳取、搔刮和手术摘取等方用局部切取、细针吸取、钳取、搔刮和手术摘取等方用局部切取、细针吸取、钳取、搔刮和手术摘取等方法，从患病动物活体获取病变组织进行病理检查等法，从患病动物活体获取病变组织进行病理检查等法，从患病动物活体获取病变组织进行病理检查等法，从患病动物活体获取病变组织进行病理检查等。优点:材料新鲜保持活组织状态，可以在疾病的各个阶段取材。优点:材料新鲜保持活组织状态，可以在疾病的各个阶段取材。缺点:不能在活动物身上任意取材,不能做全面系统的检查,取材有局限性。缺点:不能在活动物身上任意取材,不能做全面系统的检查,取材有局限性。此方法在人医临床上是非常常用的病理诊断方法此方法在人医临床上是非常常用的病理诊断方法此方法在人医临床上是非常常用的病理诊断方法此方法在人医临床上是非常常用的病理诊断方法,尤尤尤尤其是肿瘤病的诊断其是肿瘤病的诊断其是肿瘤病的诊断。在兽医临床上,国外也已应用很普遍,国内也已开始应用。如在动物医院宠物的肿瘤病、皮肤病.某些消化道疾病的诊断中；还有在畜禽的某些群发病诊断中,也可用活体组织检查法,如口蹄疫或水疱病的生前诊断取水疱液作检查。对珍惜动物的疾病诊断(如大熊猫等等）,活体组织检查可能更具优势。其是肿瘤病的诊断。在兽医临床上,国外也已应用很普遍,国内也已开始应用。如在动物医院宠物的肿瘤病、皮肤病.某些消化道疾病的诊断中；还有在畜禽的某些群发病诊断中,也可用活体组织检查法,如口蹄疫或水疱病的生前诊断取水疱液作检查。对珍惜动物的疾病诊断(如大熊猫等等）,活体组织检查可能更具优势。3.细胞学检查(Cytilogy)3.细胞学检查(Cytilogy)即对从患病动物体内收集来的细胞进行细胞学检查,又称脱落细胞学或涂抹细胞学检查,是通过采取病变处脱落的细胞,涂片染色后进行细胞学检查即对从患病动物体内收集来的细胞进行细胞学检查,又称脱落细胞学或涂抹细胞学检查,是通过采取病变处脱落的细胞,涂片染色后进行细胞学检查。细胞的来源可以是应用各种采集器在生殖道.食道.鼻咽部等病变部位直接采集的脱落细胞，也可以是自然分泌物渗出物及排泄物（如尿）中的细胞或用细针直接穿刺病变部位所吸取的细胞。如取血液制作成血细胞涂片,取口腔分泌物、消化道排泄物等等作涂/抹片,直接或经染色后在显微镜下观察。细胞的来源可以是应用各种采集器在生殖道.食道.鼻咽部等病变部位直接采集的脱落细胞，也可以是自然分泌物渗出物及排泄物（如尿）中的细胞或用细针直接穿刺病变部位所吸取的细胞。如取血液制作成血细胞涂片,取口腔分泌物、消化道排泄物等等作涂/抹片,直接或经染色后在显微镜下观察。上述三种方法（剖检、组织病理学、活检）是病理上述三种方法（剖检、组织病理学、活检）是病理上述三种方法（剖检、组织病理学、活检）是病理上述三种方法（剖检、组织病理学、活检）是病理学研究和病理诊断中最基本、最重要、最常用的方法学研究和病理诊断中最基本、最重要、最常用的方法学研究和病理诊断中最基本、最重要、最常用的方法学研究和病理诊断中最基本、最重要、最常用的方法.。国外把这三种研究国外把这三种研究国外把这三种研究国外把这三种研究方法方法方法方法喻为病理科室和病理医喻为病理科室和病理医喻为病理科室和病理医喻为病理科室和病理医学的学的学的学的“ABCABCABCABC”。(三三).).组织细胞化学观察组织细胞化学观察应用某些能与组织细胞化学成份特异性结合的显色试剂，显示病变组织细胞内的蛋白质、酶类、核酸、糖类和脂类等化学成份的改变。如过碘酸schiff反应（）可用来显示细胞内的糖原成份；冰冻切片，苏丹染色使脂肪染成桔红色.1.一般组织(细胞)化学观察应用某些能与组织细胞某些化学成分进行特异性结合应用某些能与组织细胞某些化学成分进行特异性结合的显色试剂的显色试剂,显示组织细胞内某些化学成分显示组织细胞内某些化学成分(如蛋白质如蛋白质.酶酶类类.核酸核酸.糖原糖原.脂肪等脂肪等)的变化的变化。其中,观察组织切片的称称组织化学组织化学(histochemistryhistochemistry),观察涂抹细胞或培养细胞的称细胞化学(cytochemistry)。优点:可在原位反映出组织细胞化学成分的变化,初步把纯形态观察与机能代谢联系起来,能加深对疾病本质的认识。另外也有利于病变的鉴别诊断。2.2.2.2.免疫组织化学免疫组织化学免疫组织化学免疫组织化学(免疫细胞化学免疫细胞化学免疫细胞化学免疫细胞化学)。随着免疫学技术的发展，将抗原抗体反应与组织化学或细胞化学的呈色互相结合，形成免疫组织化学技术。它在研究组织或细胞内抗原的定位定量，以及深入研究一些感染性疾病的发病机理等方面均具有重要作用。其主要原理其主要原理其主要原理其主要原理是用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应是用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应是用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应是用标记的抗体（或抗原）对细胞或组织内的相应抗原（或抗原（或抗原（或抗原（或 抗体）的分布进行细胞和组织原位的定性、抗体）的分布进行细胞和组织原位的定性、抗体）的分布进行细胞和组织原位的定性、抗体）的分布进行细胞和组织原位的定性、定位或定量检测，经过组织化学的呈色反映之后，用定位或定量检测，经过组织化学的呈色反映之后，用定位或定量检测，经过组织化学的呈色反映之后，用定位或定量检测，经过组织化学的呈色反映之后，用显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察。显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察。凡是能作抗原的物质凡是能作抗原的物质凡是能作抗原的物质凡是能作抗原的物质,如蛋白质如蛋白质如蛋白质如蛋白质.多肽多肽多肽多肽.核酸核酸核酸核酸.酶酶酶酶.激素激素激素激素.磷脂磷脂磷脂磷脂.多糖多糖多糖多糖.细胞膜表面的膜抗原和受体以及病原体细胞膜表面的膜抗原和受体以及病原体细胞膜表面的膜抗原和受体以及病原体细胞膜表面的膜抗原和受体以及病原体(包括包括包括包括细菌和病毒抗原细菌和病毒抗原细菌和病毒抗原细菌和病毒抗原)等都可用相应的特异性抗体在组织等都可用相应的特异性抗体在组织等都可用相应的特异性抗体在组织等都可用相应的特异性抗体在组织.细胞细胞细胞细胞内将其用免疫组织内将其用免疫组织内将其用免疫组织内将其用免疫组织(细胞）化学手段检出和研究。根据标细胞）化学手段检出和研究。根据标细胞）化学手段检出和研究。根据标细胞）化学手段检出和研究。根据标记物的不同，可分为记物的不同，可分为记物的不同，可分为记物的不同，可分为:免疫荧光、免疫酶标免疫荧光、免疫酶标免疫荧光、免疫酶标免疫荧光、免疫酶标胶体金标记技术。胶体金标记技术。胶体金标记技术。胶体金标记技术。鹅副粘病毒人工感染鹅脾脏.箭头示阳性染色的网状细胞鹅副粘病毒人工感染鹅脾脏.箭头示阳性染色的网状细胞3.3.3.3.核酸原位杂交核酸原位杂交核酸原位杂交核酸原位杂交与原位与原位与原位与原位PCRPCRPCRPCR技术技术技术技术(1)1)1)1)核酸原位杂交核酸原位杂交核酸原位杂交核酸原位杂交是用已知序列核酸作为探针与细胞或组织切片中核用已知序列核酸作为探针与细胞或组织切片中核用已知序列核酸作为探针与细胞或组织切片中核用已知序列核酸作为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交对其实行检测的方法，是将组织化学与分酸进行杂交对其实行检测的方法，是将组织化学与分酸进行杂交对其实行检测的方法，是将组织化学与分酸进行杂交对其实行检测的方法，是将组织化学与分子生物学技术相结合来检测和定位核酸的技术。子生物学技术相结合来检测和定位核酸的技术。子生物学技术相结合来检测和定位核酸的技术。子生物学技术相结合来检测和定位核酸的技术。适用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、细胞涂片、培养细胞爬片等。适用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、细胞涂片、培养细胞爬片等。核酸分子杂交技术原理核酸分子杂交技术原理核酸杂交是利用核酸具有核酸杂交是利用核酸具有变性变性变性变性.复性复性复性复性和和严格的碱基严格的碱基严格的碱基严格的碱基配对配对配对配对原理而实现的.如双股螺旋的DNA在碱性条件下,加热至95原理而实现的.如双股螺旋的DNA在碱性条件下,加热至9598则发生变性解链变成单链.在一定离子浓度和降温时,互补单链重新连接成双链,即退火,也称复性(renaturation).98则发生变性解链变成单链.在一定离子浓度和降温时,互补单链重新连接成双链,即退火,也称复性(renaturation).这时如果加入外源被标记的序列互补的单链DNA或RNA这时如果加入外源被标记的序列互补的单链DNA或RNA片段片段探针(probe)探针(probe),则可与解开的一条单链互补连接成带标记的异质双链分子,即核酸分子杂交。,则可与解开的一条单链互补连接成带标记的异质双链分子,即核酸分子杂交。核酸原位杂交与原位PCR技术(分子杂交技术原理)核酸原位杂交与原位PCR技术(分子杂交技术原理)染色体原位杂交示意图染色体原位杂交示意图(2).原位PCR2).原位PCR则是将组织切片或细胞涂片中的核酸将组织切片或细胞涂片中的核酸将组织切片或细胞涂片中的核酸将组织切片或细胞涂片中的核酸(DNA(DNA(DNA(DNA或或或或RNARNARNARNA均可以均可以均可以均可以)片段在原位进行扩增片段在原位进行扩增片段在原位进行扩增片段在原位进行扩增,在扩增中掺入示踪剂在扩增中掺入示踪剂在扩增中掺入示踪剂在扩增中掺入示踪剂,或扩增后或扩增后或扩增后或扩增后再行原位杂交等再行原位杂交等再行原位杂交等再行原位杂交等,以观察基因表达等以观察基因表达等以观察基因表达等。以观察基因表达等。但原位但原位但原位但原位PCRPCRPCRPCR应用应用应用应用最广的还是用来检测组织或细胞中的病原微生物如最广的还是用来检测组织或细胞中的病原微生物如最广的还是用来检测组织或细胞中的病原微生物如最广的还是用来检测组织或细胞中的病原微生物如HPV.HIV.HPV.HIV.HPV.HIV.HPV.HIV.禽流感禽流感禽流感禽流感.动物及人的冠状病毒、动物及人的冠状病毒、动物及人的冠状病毒、动物及人的冠状病毒、细菌等细菌等细菌等细菌等.其敏感性比原位杂交有明显提高其敏感性比原位杂交有明显提高其敏感性比原位杂交有明显提高其敏感性比原位杂交有明显提高。(四四四四).).).).超微结构观察或电镜观察超微结构观察或电镜观察超微结构观察或电镜观察超微结构观察或电镜观察电子显微镜较光学显微镜的分辨力高千倍多，应用透射电子显微镜观察病变组织细胞内部超微结构的变化。用扫描电子显微镜观察细胞表面超微结构的变化，能加深对疾病基本病变、病因和发病机理的认识。将免疫组织化学与电镜技术结合可形成免疫电镜技术，使超微结构观察对细胞内一些物质的定位定性，以及病毒的感染和复制部位等得到显示。运用透射和扫描电子显微镜技术,对组织细胞的内部及表面的超微结构进行观测,从亚组织(细胞器)甚至是大分子水平上了解组织细胞的形态和机能变化,运用透射和扫描电子显微镜技术,对组织细胞的内部及表面的超微结构进行观测,从亚组织(细胞器)甚至是大分子水平上了解组织细胞的形态和机能变化,使之对某些疾使之对某些疾使之对某些疾使之对某些疾病的诊断和鉴别诊断更加确切病的诊断和鉴别诊断更加确切病的诊断和鉴别诊断更加确切病的诊断和鉴别诊断更加确切,而且更能加深对疾病本质而且更能加深对疾病本质而且更能加深对疾病本质而且更能加深对疾病本质的认识的认识的认识的认识。尤其在肿瘤疾病的诊断中,细胞病理学诊断有助于肿瘤的分类.判断肿瘤的性质(良恶性)。结合负染色法在肿瘤疾病的诊断中,细胞病理学诊断有助于肿瘤的分类.判断肿瘤的性质(良恶性)。结合负染色法可观察病毒的形态和定位可观察病毒的形态和定位。超微病理学观察有其局限性超微病理学观察有其局限性超微病理学观察有其局限性超微病理学观察有其局限性：由于放大倍率太高,只见局部不见全局,加之许多超微结构变化没有特异性,常给诊断带来困难。因此，必须以肉眼因此，必须以肉眼因此，必须以肉眼因此，必须以肉眼组织学病变为基础，宏观与微组织学病变为基础，宏观与微组织学病变为基础，宏观与微组织学病变为基础，宏观与微观密切结合观密切结合观密切结合观密切结合,才能更好地发挥其优势才能更好地发挥其优势才能更好地发挥其优势才能更好地发挥其优势,起到较重要的起到较重要的起到较重要的起到较重要的辅助诊断作用。辅助诊断作用。辅助诊断作用。辅助诊断作用。(五五五五).).).).细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养细胞培养,是指从动物体内采取活组织或单细胞是指从动物体内采取活组织或单细胞是指从动物体内采取活组织或单细胞是指从动物体内采取活组织或单细胞,用适用适用适用适宜的培养基宜的培养基宜的培养基宜的培养基(液液液液)和创造相似于体内的其他条件和创造相似于体内的其他条件和创造相似于体内的其他条件和创造相似于体内的其他条件,在体外在体外在体外在体外进行培养并进行各种研究的技术方法。此类方法是生物进行培养并进行各种研究的技术方法。此类方法是生物进行培养并进行各种研究的技术方法。此类方法是生物进行培养并进行各种研究的技术方法。此类方法是生物医学各个领域常用的研究技术之一。医学各个领域常用的研究技术之一。医学各个领域常用的研究技术之一。医学各个领域常用的研究技术之一。在病理学研究中，此方法可以研究在各种病因的作用下细胞、组织病变的发生和发展的动态过程和规律。在病理学研究中，此方法可以研究在各种病因的作用下细胞、组织病变的发生和发展的动态过程和规律。根据研究的目的和条件的不同，培养的标本可以是细胞水平的，也可以是组织水平根据研究的目的和条件的不同，培养的标本可以是细胞水平的，也可以是组织水平。研究肿瘤代谢、肿瘤分类、病毒病的诊断及发病机理等研究。研究肿瘤代谢、肿瘤分类、病毒病的诊断及发病机理等研究。?细胞培养的优点:细胞培养的优点:?体外培养条件单纯体外培养条件单纯体外培养条件单纯体外培养条件单纯容易控制，可以避免体内复杂因素容易控制，可以避免体内复杂因素容易控制，可以避免体内复杂因素容易控制，可以避免体内复杂因素的干扰，故有利于分析结果和得出结论。而且比动物实的干扰，故有利于分析结果和得出结论。而且比动物实的干扰，故有利于分析结果和得出结论。而且比动物实的干扰，故有利于分析结果和得出结论。而且比动物实验和本体观察周期短验和本体观察周期短验和本体观察周期短验和本体观察周期短见效快见效快见效快见效快节省时间、节省开支。节省时间、节省开支。节省时间、节省开支。节省时间、节省开支。?细胞培养的细胞培养的缺点:缺点:?毕竟体外人工环境与体内环境有区别，而且是脱离了机体外人工环境与体内环境有区别，而且是脱离了机体外人工环境与体内环境有区别，而且是脱离了机体外人工环境与体内环境有区别，而且是脱离了机体整体的神经体整体的神经体整体的神经体整体的神经体液等因素的调控，所以其研究结果不体液等因素的调控，所以其研究结果不体液等因素的调控，所以其研究结果不体液等因素的调控，所以其研究结果不可能与体内过程完全一致可能与体内过程完全一致可能与体内过程完全一致可能与体内过程完全一致。另外，体外培养要求一定的设备严格的环境和技术条件，一般实验室不易达到。体外培养要求一定的设备严格的环境和技术条件，一般实验室不易达到。(六六六六).).).).动物实验动物实验动物实验动物实验在人为控制条件下在人为控制条件下在人为控制条件下在人为控制条件下,运用动物实验的方法运用动物实验的方法运用动物实验的方法运用动物实验的方法,在适宜动物在适宜动物在适宜动物在适宜动物身上复制动物和人类的某些疾病的模型；是生物医学的各个身上复制动物和人类的某些疾病的模型；是生物医学的各个身上复制动物和人类的某些疾病的模型；是生物医学的各个身上复制动物和人类的某些疾病的模型；是生物医学的各个领域均可利用的技术方法之一领域均可利用的技术方法之一领域均可利用的技术方法之一领域均可利用的技术方法之一。通过疾病复制过程可以研究疾病的病因学、发病学、病通过疾病复制过程可以研究疾病的病因学、发病学、病通过疾病复制过程可以研究疾病的病因学、发病学、病通过疾病复制过程可以研究疾病的病因学、发病学、病理变化及疾病的转归。并可根据研究的需要理变化及疾病的转归。并可根据研究的需要理变化及疾病的转归。并可根据研究的需要理变化及疾病的转归。并可根据研究的需要,对其进行各种对其进行各种对其进行各种对其进行各种方式的观察研究。方式的观察研究。方式的观察研究。方式的观察研究。动物实验的优点动物实验的优点动物实验的优点动物实验的优点:可以不受任何限制地按研究者的主观设计进行研究。可以任意控制实验条件任意施加有害的影响因素，可以随时和任意取材活检和处死尸检可以不受任何限制地按研究者的主观设计进行研究。可以任意控制实验条件任意施加有害的影响因素，可以随时和任意取材活检和处死尸检。其缺点其缺点其缺点其缺点:是动物与人之间及不同动物之间有许多种属差异，因而不能把动物实验的研究结果不加分析、无条件地直接套用于人或相应的动物。，仅可为人体疾病的研究提供参考。是动物与人之间及不同动物之间有许多种属差异，因而不能把动物实验的研究结果不加分析、无条件地直接套用于人或相应的动物。，仅可为人体疾病的研究提供参考。(七七七七)、流式细胞术、流式细胞术、流式细胞术、流式细胞术流式细胞术是近年发展起来的新技术流式细胞术是近年发展起来的新技术流式细胞术是近年发展起来的新技术流式细胞术是近年发展起来的新技术,其原理是将特殊其原理是将特殊其原理是将特殊其原理是将特殊处理的细胞悬液经过一细管处理的细胞悬液经过一细管处理的细胞悬液经过一细管处理的细胞悬液经过一细管,同时用特殊光线照射同时用特殊光线照射同时用特殊光线照射同时用特殊光线照射,当细当细当细当细胞通过时胞通过时胞通过时胞通过时,光线发生不同角度的散射光线发生不同角度的散射光线发生不同角度的散射光线发生不同角度的散射,经检测器变为电讯经检测器变为电讯经检测器变为电讯经检测器变为电讯号号号号,再经电子计算机贮存分析后画出直方图等再经电子计算机贮存分析后画出直方图等再经电子计算机贮存分析后画出直方图等再经电子计算机贮存分析后画出直方图等。这一方法每秒钟能分析 1,000至10,000个细胞。这一方法每秒钟能分析 1,000至10,000个细胞。流式细胞术能进行多种细胞特征分析,包括细胞大小,胞浆的颗粒状态,细胞生长状态及所分布的细胞周期,核型倍体数与DNA含量,胞膜表面标记物变化及细胞内酶的含量等等。流式细胞术能进行多种细胞特征分析,包括细胞大小,胞浆的颗粒状态,细胞生长状态及所分布的细胞周期,核型倍体数与DNA含量,胞膜表面标记物变化及细胞内酶的含量等等。(八八八八).).).).生物芯片技术生物芯片技术生物芯片技术生物芯片技术/基因芯片技术基因芯片技术基因芯片技术基因芯片技术近年来发展起来的一项生物医学高新技术，实际上近年来发展起来的一项生物医学高新技术，实际上是一种反向斑点杂交技术。基因芯片是一种反向斑点杂交技术。基因芯片(gene chip)(gene chip)又称又称DNADNA芯片芯片(DNA chip)(DNA chip)，是指固着在固相载体上的高密，是指固着在固相载体上的高密度的度的DNADNA微点阵，即将大量靶基因或寡核苷酸片段有序微点阵，即将大量靶基因或寡核苷酸片段有序地、高密度地（点与点间距小于地、高密度地（点与点间距小于500500 m m）排列在如硅片、）排列在如硅片、玻璃片、聚丙烯或尼龙膜等载体上玻璃片、聚丙烯或尼龙膜等载体上。代表不同检测基代表不同检测基因的探针被固定于固相基板上，而被检测的因的探针被固定于固相基板上，而被检测的DNADNA或或cDNAcDNA用放射性核素或荧光物标记后与固相阵列杂交用放射性核素或荧光物标记后与固相阵列杂交。然后通过放射自显影或激光共聚焦显微检测杂交信号的强弱和分布，再通过计算机软件处理分析，得到有关基因的表达谱。一套完整的基因芯片系统包括芯片阵列仪.激光扫描仪.计算机及生物信息软件处理系统等。?基因芯片基因芯片(又称又称DNADNA芯片芯片)是指固着在固相载体上的高密度的DNA微点阵，即将大量靶基因或寡核苷酸片段有序地、高密度地（点与点间距小于500m）排列在如硅片、玻璃片、聚丙烯或尼龙膜等载体上。一套完整的基因芯片系统包括芯片阵列仪芯片阵列仪、激光扫描仪激光扫描仪、计算机计算机及生生物信息软件处理系统物信息软件处理系统等。它是近年来发展起来的一项生物医学高新技术，实际上是一种反向斑点杂交技