宁夏地区472例胆石病胆石红外光谱法定性实验分析_曹建华.pdf

检验与临床 宁夏地区 472例胆石病胆石红外光谱法定性实验分析曹建华1,吴可夫1,吴自强1,纳鹏军2,戴小军2(1.宁夏医学院二附院肝胆外科,宁夏 银川750001;2.宁夏大学分析测试中心)【摘要】目的探讨宁夏地区胆石类型及分布特点。方法 调查 472例胆结石患者临床资料,红外光谱法测定胆石主成分红外光谱与标准样品的红外光谱比较,确定结石类型。结果 胆固醇类结石占 86.44%,胆色素类结石占 5.72%,混合性结石占6.36%,其他类结石占 2.4%;胆囊结石占 90.68%,胆管结石占 9.32%。喜食高热量饮食、肥胖、高血脂城镇患者易患胆囊胆固醇类结石,反复胆道感染患者易患胆管结石。回族胆石类型及分布与汉族比例接近。结论 宁夏地区以胆囊胆固醇类结石为主,性别、年龄、职业、饮食结构、居住环境等因素影响胆石类型或分布,回族与汉族胆石类型及分布差异无统计学意义。关键词 胆石;光谱分析;红外线胆石病是世界范围内的常见病及多发病,其危险因素的多样性决定了胆石类型及分布的地区差异性 1,2。宁夏隶属西北地域,回汉杂居,近年胆石病患者明显增多且有年轻化趋势,严重威胁该地区人民群众的健康。本文通过对本院 2005年 1月 2005年 8月连续手术取得的胆石病患者胆石进行红外光谱法定性实验分析及相关因素调查,以探讨宁夏地区胆石病结石类型及分布特点,为临床决策及人群预防提供参考依据。1资料与方法1 1一般资料472例患者中,男性 133例,女性 339例;年龄 17 86(中位年龄 50.3)岁;汉族 393例,回族 79例;农民 95例,自由职业者 108例,工人 140例,职员(干部及知识分子)152例;城镇患者 419例,农村患者 143例;胆囊结石 428例,胆管结石 44例,其中胆囊切除后继发胆管结石 9例;喜进畜类肉食者 283例;体形肥胖者(B M I 25)143例,营养低下者 5例;合并高脂血症者 154例;既往有明确胆管感染者 23例。相关因素调查后列表统计分析。1 2方法手术取得患者胆石中用流动的自来水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗 1次,放置于 40烘箱内烘干。红外光谱法 3,4定性实验:取胆结石标本置研钵中研成粉末,再放入干燥器中干燥 3 d,恒重后精取样品 2 m g,加纯品 B r K粉剂 100mg 充分研磨混匀,在 150 k g/c m2压力下压片,以日本导津 I R-440型红外分光光度计,美国 N i c o l e t F T-I R170S X型傅立叶变换红外光谱仪测定胆石主成分红外光谱。结石类型的确定:所得胆石的红外光谱与标准样品的红外光谱进行比较,根据光谱特征峰分析确定结石类型。1 3统计学处理以 S P S S12.0统计软件处理数据,组间比较采用 2检验,P0.05)。408例胆固醇类结石中,男性 112例,女性 296例;29例胆色素结石中,男性 12例,女性 17例。性别与胆固醇类结石及胆色素结石分布无统计学意义(P0.05)。4例脂肪酸钙类结石均分布于胆囊且为女性患者。年龄最小 17岁,最大 86岁,其中40 59岁占 55.4%。胆囊胆固醇结石虽然散布于各年龄段,但胆色素类结石及其他类结石以 40 59岁年龄段多见。脂肪酸钙类结石全部分布于 40 60岁 2组。2 3职业、居住地与胆石类型及分布的关系 433例胆囊结石中农民 63例,自由职业者 83例,工人 126例,职员 147例。不同职业者胆石分布差异有统计学意义(2=59.29,P 0.01)。408例胆固醇类结石中农民 76例、自由职业者 92例、工人 127例、职员 143例;29例胆色素类结石中农民 9例、自由职业者 8例、工人 7例、职员 5例;28例混合性结石中农民 10例、自由职业者 8例、工人 6例、职员 4例。不同职业者胆石类型差异有统计学意义(2=13.01,P 0.01)。城镇胆囊结石患者 304例,胆管结石患者 15例,农村胆囊结石患者 124例,胆管结石患者 19例。不同居住环境的胆石分布差异有统计学意义(2=10.67,P0.01)。2 4饮食习惯、体重、血脂、胆道感染史与胆石类型及分部的关系喜进肉食的 264例胆囊结石患者中,胆固醇结石 252例,胆红素类结石 5例,混合性结石 6例;19例胆管结石中,胆固醇结石 11例,胆红素类结石 4例,混合性结石 5例。喜进高脂畜类肉食者胆石类型与分布有统计学意义(2=32.71,P 0.01)。肥胖合并胆囊结石的 134例患者中,胆固醇结石 127例,胆红素类结石 2例,混合性结石 5例;9例合并胆管结石患者中,胆固醇结石 5例,胆红素类结石 1例,混合性结石 3例。肥胖者胆石类型与分布有统计学意义(2=18.33,P0.01)。154例患高脂血症者中患胆囊结石者 123例,占 78.8%,患胆固醇类结石者 109例,占 69.9%。23例胆管感染者中,患胆管结1111中国医师杂志2006年 8月第 8卷第 8期基金项目:宁夏银川市 2004科技攻关计划项目(2004-30)表 1胆石类型与胆石分布关系胆石类型胆石成分胆石分布胆囊例(%)肝外胆管例(%)肝内胆管例(%)合计例(%)胆固醇类结石“纯”胆固醇结石47(11.52)-兼有其他成分344(84.31)16(3.92)1(0.25)408(86.44)(小计)391(95.83)16(3.92)1(0.25)胆色素类结石胆红素类结石6(22.22)11(40.74)1(3.70)黑色类结石6(22.22)3(11.11)-27(5.72)(小计)12(44.44)14(51.85)-混合性结石胆固醇-胆红素钙类19(63.33)10(33.33)1(3.33)30(6.36)其他类结石碳酸钙类结石2(66.66)1(33.33)-3(0.64)脂肪酸钙类结石4(100.00)-4(0.85)磷酸钙类结石-蛋白类结石-多糖类结石-注:“”表示在红外光谱上只见一种成分的吸收峰,“”表示特征吸收峰以主成分为主,并存有其他成分吸收峰。不同部位胆石类型分布比较2=108.32,P0.01。具体为:胆囊结石与肝外胆管结石组间胆石类型分布比较 2=102.46,P0.01,其中胆固醇类结石与胆色素类结石间比较 2=94.43,P 0.01,胆固醇类结石与混合性结石间比较 2=45.06,28.66,P 0.01;胆囊结石与肝内胆管结石组间胆石类型分布比较 2=14.16,P 0.01,其中胆固醇类结石与胆色素类结石间比较 2=98.17,P0.01,胆固醇类结石与混合性结石间比较 2=49.71,P0.05)。胆固醇结石中,汉族372例,回族 58例;胆色素结石中,汉族 28例,回族 6例,回汉民族胆石类型无统计学意义(P0.05)。3讨论本组资料来源于就诊高峰时间段内连续手术治疗的宁夏各地胆石病患者,测试胆石标本数量多,留取连续,方法严格,具有一定的代表性。472例胆石中,胆固醇类结石占 86.44%,胆色素类结石占 5.72%,混合性结石占 6.36%,其他类结 石占1.49%;单纯胆囊结石占 90.68%,肝外胆管结石占 8.69%,肝内胆管结石占 0.66%;胆囊结石中胆固醇结石占 95.68%,胆管结石中胆红素类结石占 66.67%;胆囊结石与胆管结石手术比例为 9.72:1,与广西、福建、北京等地区差别显著,但与新疆、甘肃、内蒙古相近 5,6。可能与同处西北地区具有相近的地域特点、气候条件及饮食习惯有关。宁夏地区居民多以面粉、杂粮为主食。研究中发现喜进食高热量羊肉、高脂畜类肉食、体形肥胖、高血脂者多为胆囊胆固醇性结石患者,长期高热量饮食致使体内脂质代谢紊乱可能是影响宁夏地区胆石病的主要因素。既往认为宁夏地区胆管结石发病率低主要与低蛔虫感染率有关,继发肝外胆管结石多与早期服用排石药物治疗有关 7。本次研究中发现有胆囊切除史或反复胆道感染者易患胆管结石,类型以混合型结石及胆色素类为主,原因可能主要与胆囊切除手术率明显上升,导致继发胆管结石概率增多有关。另外胆囊切除术后胆管代偿功能不良,E S T 术(内镜下十二肠乳头切开术)后肠液返流继发胆道感染,增加了胆管结石形成的的危险性。红外光谱法测试分析胆石成分同时发现了一些少见结石,如脂肪酸钙类结石及碳酸钙类结石。尤其是脂肪酸钙类结石,全部来源于中年绝经前后患有高脂血症女性患者,原因可能与该期女性患者激素分泌失调,胆汁酸代谢紊乱有关。本组 472例胆石病患者中 40 59岁居多,占 54.2%,显示中年人构成比高;30岁以下患者占 7.8%,显示患病有年轻化趋势;60岁占25%,显示随着社会老龄化进的程,胆石病仍是本地区老年人常见多发病;男女比为 1:2.55,这一结果低于王炜 6年前 1:3.6的报道 7。这可能与近几年宁夏地区男性在蛋白和脂肪消耗量上增加,胆固醇结石发病率上升速度加快,女性因计划生育产次明显减少和积极参与全民健身运动,主动瘦身,胆固醇结石发病率上升速度减慢有关。回族是宁夏地区主要少数民族,信仰伊斯兰教,与汉族杂居,分部具有大分散小聚居的特点。既往研究发现宁夏地区回族居民胆石病患病率明显低于汉族居民 7。本次研究发现回族患病率仍低于汉族,但比例在缩小,胆石类型及分布差异性无统计学意义。回族居民胆石病患病率低可能与民族宗教信仰、饮食风俗习惯有关。今后随着社会经济发展、人口流动加速和城市化建设的进程,民族间交汇融合,回族与汉族胆石病差别将可能会逐步缩小。职业在一定程度上能反映居住环境、膳食结构和生活水平,也就决定了胆石类型分布的变化。本组资料显示宁夏地区不同职业及居住环境在胆石类型及分布差别有统计学意义(P0.05)。说明在宁夏地区生活环境、卫生条件及职业因素仍在影响胆结石的类型及分布。形成胆结石的内部遗传因素较难改变,如何通过改变包括饮食因素在内的外部环境因素有效减少和预防人群胆石病的发生,值得在今后工作中进一步研究。1112J o u r n a l o f C h i n e s eP h y s i c i a n,A u g u s t,2006,V o l 8,N o 8肾综合征出血热患者肾组织中 C D4+和 C D8+细胞浸润的临床意义贺发贵1,徐应军2,周柱亮1,汪建国1,杨琪1,马路1(1.解放军第二八一医院全军肾病中西结合治疗中心,河北 北戴河 0661052.华北煤炭医学院流行病与卫生统计学教研室)【摘要】目的探讨肾综合征出血热(H F R S)患者肾组织中 C D4+、C D8+细胞浸润及其临床意义。方法用间接免疫荧光法对病例组 118例及正常对照组 20例肾组织进行 C D4+、C D8+细胞测定。结果病例组与对照组相比肾组织中 C D4+、C D8+细胞浸润明显(P0.01),轻、中、重、危重型 H F R S 各组间肾组织中 C D4+、C D8+细胞浸润数差异有统计学意义(P0.01)。各型 H F R S患者肾组织中 C D4+、C D8+细胞数与时间的关系均呈抛物线曲线;幅度由轻型至危重型逐渐增大。结论H F R S 患者 C D4+、C D8+细胞浸润增强。C D4+、C D8+细胞浸润程度越重,病情越重,所需治愈时间越长。关键词 肾综合征出血热;T 淋巴细胞亚群肾综合征出血热(H F R S)在我国分布广、发病多、病死率高。HF R S 患者血中 C D4+细胞百分比较正常降低,C D8+细胞百分比较增高,C D4+/C D8+比值下降或倒置,T 淋巴细胞亚群的比例变化与疾病的严重程度密切相关 1。笔者对 118例HF R S 患者肾活检的临床资料进行分析,探讨炎性细胞浸润及其临床意义。1资料与方法1 1一般资料选取 1998年 1月 2003年 7月经临床及实验室诊断为 H F R S 的患者 118例为病例组。患病前均无肾脏病病史,病情相对平稳时行肾活检病理检查,肾病理改变符合HF R S 肾病理损害特点。其中男 86例,女 32例,发病到肾穿的时间为 4 64(16.7212.51)d,年龄为 6 72(平均 36.07)岁,依据孙传兴主编临床疾病诊断依据治愈好转标准第 2版,轻型 32例、中型 39例、重型 34例、危重型 13例,118例 HF R S 中3例 2月内未愈,余 115例均治愈。对照组 20例,其中男 13例,女 7例,其肾活检病理均为正常肾组织。1 2试剂鼠抗人 C D8+单克隆抗体,鼠抗人 C D4+单克隆抗体,异硫氰酸荧光素标记山羊抗小鼠 I g G(由北京中山生物技术有限公司提供)。柠檬酸盐缓冲液、P B S 缓冲液、丙酮、缓冲甘油等均自行配制。1 3实验方法采用间接免疫荧光法。1 4统计学处理结果以 xs 表示,用 t 检验及方差分析进行显著性检验;计数资料比较用 2检验,统计软件为 S P S S10.0。2结果2 1C D4+、C D8+细胞在 HF R S患者肾组织中的浸润病例组与对照组相比较无论性别、年龄、体重指数、年龄均无统计学意义。对照组 20例中均未见 C D4+、C D8+细胞浸润,118例HF R S热 患 者 中 有102 例 同 时 C D4+、C D8+细 胞 浸 润(86.44%),二者相比差异有统计学意义(2=66.27,P 0.01),其阳性细胞平 均数 C D4+(5.04 2.67)个/每 视野,C D8+(4.582.36)个/每视野,显示 C D4+、C D8+细胞浸润与HF R S 有关。2 2C D4+、C D8+细胞浸润与 H F R S 临床特征的关系随病情的加重,两种细胞的浸润程度加重。其中一例未愈患者 33 d后行第二次肾活检术,第一次肾组织中 C D4+、C D8+细数为 18个和 17个,第二次分别为 4个和 6个。见表 1。表 1各组 C D4+、C D8+细胞数的比较(xs,个/每视野)H F R S 类型例数C D4+C D8+对照组2000轻型322.19 1.832.001.66中型394.32 3.153.552.36重型3410.50 1.737.092.86危重型1312.28 4.9411.422.86注:多组间比较 F=6.12,5.42,P 0.01118例 H F R S 患者中除 3例 2月内未愈,余 115例均治愈。C D4+、C D8+未浸润 16例,其治愈时间为(12.38 2.35)d,C D4+、C D8+浸润 102例,其治愈时间为(26.45 4.75)d,二者比较,差异有统计学意义(t=18.55,P0.01),见表 2。参考文献1韩天权.关于胆固醇结石成因及其预防的研究动态.中国医学理论与实践,2001,6:188-190.2黄志强.胆道外科的现状与未来.中国实用外科杂志,1999,19:17-18.3曾繁清,海汇,金利凡.人体胆结石的红外光谱的比较分析.光谱学与光谱分析,2001,21(3):314-316.4吴瑾光,申国荣,周孝思,等.胆结石的付立叶变换红外光谱研究.北京大学学报(自然科学版),1984,5(5):28-41.5中华外科学会胆道外科学组.我国胆石病十年来的变迁.中华外科杂志,1995,33(11):652-657.6陈希纲,刘家奇,彭民浩,等.广西胆结石成分的 19年变化.中华肝胆外科杂志,2001,7(5):266-268.7王炜,徐强,马德强,等.宁夏银川地区胆石症 2743例临床分析.中华肝胆外科杂志,2001,7(5):269-271.收稿日期:2006-02-211113中国医师杂志2006年 8月第 8卷第 8期