蜂胶提取物的体外益生特性研究.pdf

实验研究报告OFJOURNALBEE(Monthly)（月刊）蜜蜂杂志2023年第8 期蜂胶提取物的体外益生特性研究李雅晶，周兵（浙江经贸职业技术学院，浙江杭州310018)摘要：目的：蜂胶是一种具有多种生物活性的天然产物，本文研究了微囊化的杨树属蜂胶醇提物的体外益生特性。方法：利用微胶囊法制备蜂胶，通过2株双歧杆菌属，2 株乳杆菌属，1株片球菌属和1株埃希氏菌属的体外静态发酵评估蜂胶提取物促进益生菌生长及抑制有害菌生长的潜力。结果：蜂胶提取物可不同程度改善乳杆菌、双歧杆菌菌株和片球菌菌株的生长，对大肠杆菌的生长起到抑制作用，并增加短链脂肪酸的生成。结论：蜂胶可促进益生菌的生长，可考虑作为益生元应用于功能食品。1关键词：蜂胶；微囊化；活性成分；体外发酵；益生作用中图分类号：S896文献标识码：A文章编号：10 0 3-9 139(2023)008-0007-07Study on Probiotic Properties ofPropolisExtractinVitroLI Ya-jing,ZHOU Bing(Zhejiang Institute of Economics and Trade,Hangzhou,310018 China)Abstract:Objective:Propolis is a kind ofnatural product with various biological activities.In vitro prebiotics of microencapsulated ethanolextract of Populus propolis(MC-EEP)were studied.Methods:Propolis was prepared by microcapsulemethod,and the potentiality of propolis extractto promote the growth of probiotics and inhibitthe growth of harmful bacteria was evaluated bystaticfermentationof2strainsofBifidobacterium,2 strains of Lactobacillus,1strain of Pediococcus and 1 strain of Escherichia.Results:Propolis extract could improve the growth收稿日期：2 0 2 3-0 5-2 0of Lactobacillus,bifidobacterium and Pediococcusstrains,inhibit the growth of Escherichia coli,and increase the production of short-chain fattyacids(SCFAs).Conclusion:Propolis can promote thegrowth of probiotics and canbeusedasaprebiotic in functional food.Keywords:Propolis;Microencapsulation;Activeingredient;Invitrofermentation;Prebiotics蜂胶(propolis)是蜜蜂从植物嫩芽、树皮与树干裂缝处采集树脂，并混人其上颚腺分泌物和蜂蜡经咀嚼加工而成的具有芳香气味的胶状物。它被蜜蜂用于修补蜂巢中的孔隙及包埋食物等，并且在蜂群的整体健康中发挥着重要的作用。蜂胶的成分复杂，由50%55%的树脂、30%40%的蜂蜡、10%的挥发油和芳香油、以及5%10%的花粉、矿物质和维生素等物质组成。从生物学活性成分分析发现，蜂胶中所含的生物活性成分有植物源的多酚类化合物如黄酮类、酚酸及其酯类等，有动物源的腺体分泌物质，如来自于蜜蜂自身的上颚腺、唾液腺分泌物等。因此，蜜蜂品种的不同及蜜蜂采集胶源植物的不同，均会对其生物学活性成分的组成及生物学活性造成大的影响2。蜂胶在长期的使用过程中，已证实具有抗菌、抗氧化、抗炎症、调节代谢等作用。因此，蜂胶作为一种天然药物，在欧洲、南美洲及我国等都在广泛应用。近年来，随着蜂胶研究的深入，研究人员逐渐将蜂胶的化学组成与生物学效应进行了更为精准的关联，逐步确定了在一些肿瘤及炎症治疗中蜂胶与疾病的谱效及量效关系3。因此确定蜂胶的来源及化学组成非常重要。Aug.8OFJOURNALBEE(Monthly)2023NO.8(月刊）蜜蜂杂志益生元是可促进肠道有益菌增殖的物质。目前发现一些植物次生代谢物与肠道微生物间存在相互作用，是益生元的潜在候选物质。对姜黄素等的研究显示，酚类及黄酮类化合物可选择性的刺激肠道中有益菌的生长，抑制有害菌的生长，而肠道中的益生菌可进一步分解这些物质来调节并提高其生物利用度4。中国杨树属蜂胶富含多酚、黄酮类化合物，在此研究中，我们通过前期摸索出的工艺，将蜂胶进行微粒化处理，并在体外与益生菌进行共发酵，分析蜂胶对肠道益生菌的影响，以此探讨蜂胶的益生作用，为蜂胶作为益生元的开发提供依据。1材料与方法1.1材料与试剂蜂胶：杨属型(populus)蜂胶，采集自中国黑龙江省伊春地区；环糊精、碳酸钠、亚硝酸钠：国药集团化学试剂有限公司；芦丁标准品（9 8%），p h y g e n e 公司、没食子酸标准溶液（10 0 0 g/mL），广检（广州）检测科技有限公司；福林酚试剂J(1mol/L),phygene公司；其余试剂均为分析纯。菌种：短双歧杆菌M-16V，长双歧杆菌CECT7894，植物乳杆菌CECT7315，鼠李糖乳酪杆菌GG，戊糖片球菌CECT8330，由迪辅乐生物科技有限公司提供；大肠埃希氏菌ATCC25922，购自北京生物保藏中心。培养基：MRS培养基，培养基成分：酪蛋白陈10.0 g，牛肉膏10.0 g，酵母粉5.0 g，葡萄糖5.0 g，乙酸钠5.0 g，柠檬酸二铵2.0 g，Tween 80 1.0 g,K,HPO42.0 g,MgS047H20 02 g,MnSO4H,0 0.05 g，Ca CO,2 0.0 g，琼脂15.0 g,蒸馏水1.0 L，p H 6.8；LB培养基：10.0 g胰蛋白陈，5.0 g酵母，10.0 g氯化钠，蒸馏水1.0 L，pH6.8混匀后保存于4下备用。标准品：乙酸、丙酸、正丁酸、异丁酸、正戊酸、异戊酸、已酸、2-乙基丁酸，上海阿拉丁生化科技股份有限公司。1.2仪器设备7890A气相色谱仪，美国Agilent公司；752Pro紫外可见光分光光度计，上海棱光技术有限公司；PHS-3C酸度计，上海雷磁仪器有限公司；SK8210LHC超声波清洗机，上海科导超声仪器有限公司；ME204E电子天平，梅特勒托利多仪器上海有限公司；旋转蒸发仪RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂；循环水式多用真空泵SHB-III，郑州长城科工贸有限公司；AG025密闭式厌氧罐，上海坤科仪器设备有限公司；HWS-150恒温恒湿培养箱，上海森信实验仪器有限公司。1.3微囊化蜂胶提取物的制备采用本课题组方法，基本过程如下：取-20预冷的蜂胶，快速粉碎，过筛，备用。加人8 0%乙醇溶液中超声混匀，预设温度28，提取时间30 min，提取3次，过滤得蜂胶醇提液友（ethanol extract of propolis，EEP,10mg/mL）。制备5%-环糊精水溶液。按体积比15：7 边搅拌边将蜂胶醇提液喷洒到环糊精（CD）水溶液中，混合液超声15min，旋转蒸发除去乙醇，冷冻干燥2 4h，制得微囊化蜂胶提取物(microencapsule EEP,MC-EEP)冻干粉。1.4蜂胶有效成分的检测制备含EEP浓度为2 mg/mL的EEP及MC-EEP样品待测。总酚含量采用福林酚法测定6 。以没食子酸为标准品，测定7 6 0 nm波长处的吸光度，制得标准曲线回归方程为y=0.037x+0.0036，R2=0.9 9 9 0；总黄酮含量测定采用GB/T20574-2006亚硝酸铝比色法测定。以芦丁为标准品，测定415nm波长处的吸光度，制得标准曲线回归方程为y=0.0404x-0.0016,R2=0.99991.5菌种活化及体外静态培养双歧杆菌属（短双歧杆菌M-16V，长双歧杆菌CECT7894），乳杆菌属（植物乳杆菌CECT7315，鼠李糖乳酪杆菌GG），片球菌属（戊糖片球菌CECT8330）以0.1%菌量接种于MRS培养基上，埃希氏菌属（大肠埃希氏菌ATCC25922）以0.1%菌量接种于LB培养基上。短双歧杆菌M-16V，长双歧杆菌CECT7894于37 恒温厌氧培养48 h进行菌种活化；戊糖片球菌CECT8330于30 恒温培养48 h进行菌种活化；植物乳杆菌9OFJOURNALBEE(Monthly)(月刊）蜜密蜂杂志2023年第8 期CECT7315，鼠李糖乳酪杆菌GG，大肠埃希氏菌ATCC25922于37 恒温培养48 h进行菌种活化。制备约10 9 个/mL菌悬液作为种子液。将CD和MC-EEP分别作为碳源（CD含量3g/L）取代MRS培养基中的葡萄糖，不含葡萄糖的MRS作为空白（Blank组）。等量添加于LB培养基中。将各种子液以10%的接种比接种于厌氧管中。上述菌均在37 厌氧培养2 4h，测定发酵液的OD600、p H、短链脂肪酸含量。1.6短链脂肪酸的测定短链脂肪酸浓度的测量采用李娟等6 的方法。取离心后的发酵液，按体积比4：1加入2 5%偏磷酸，涡旋混匀后离心，取上清液，待测。色谱条件：Agilent7890A气相色谱仪，FFAP柱E(30m0.32mm0.25m）,FID检测器。升温程序：设置初始柱温100，保持1min，然后以4/min升至18 0，之后以2 0/min升至2 0 0，维持5min。设置检测器和进样口温度分别为2 40 和2 0 0，载气、燃气分别为N2、H 2。IN2、H 2 及空气流速分别为2，30，30 0 m L/m in，不分流进样，进样量1L。通过样品峰面积与标准品对比来计算脂肪酸含量。1.7数据分析所有数据采用平均值标准差(文 SD)表示，用GraphPadPrism8软件进行作图与统计分析，两两比较采用t检验，多组间比较先经ANOVA单因素方差分析后，再用Tukey法进行多重比较，以P0.05表示差异有统计学意义。2丝结果与分析2.1蜂胶提取物的总酚、总黄酮含量EEP和MC-EEP的总酚、总黄酮含量见图1。EEP的总酚含量（2 34.52.54mg/g）低于MC-EEP的总酚含量(249.42 6.02mg/g），两者比较有显著性差异P0.05。EEP的总黄酮含量（12 6.0 6 5.41mg/g）略低于MC-EEP的总黄酮含量（142.0 2 9.38mg/g），但无显著性差异。说明蜂胶醇提物的微囊化有利于生物活性成分的溶出，增加蜂胶的利用率。因此，本实验采用MC-EEP进行体外益生实验。本实验样品由浙江养蜂人姜先生于2 0 2 0 年采集自黑龙江省伊春地区。中国幅员辽阔，植物种类南北差异较大，造成蜂胶的胶源植物差异巨大，胶源植物的差别直接影响蜂胶的生物学活性。从张翠平等人的研究来看，产自黑龙江的蜂胶属于典型的杨属型蜂胶，因此，可用总酚、总黄酮含量评价其生物学活性7 。胡福良教授团队的研究显示，杨属型蜂胶的总酚含量在150.8 32.7 5到556.35.55mg/g区间，总黄酮含量在63.75 1.92 至454.9232.67mg/g区间8 。对比可知，本实验样品中的总酚与总黄酮含量较高，因此具有较高的生物学活性。300EEP240.42MC-EEP234,50200-(6/6W)鲁号142.02128.0日100-总酚总黄酮图1EEP与ME-EEP中的总酚、总黄酮含量（n=3)注：*P0.05,*P0.012.2蜂胶提取物对肠道益生菌及条件致病菌生长的影响MC-EEP对短双歧杆菌M-16V，长双歧杆菌CECT7894，植物乳杆菌CECT7315，鼠李糖乳酪杆菌GG，戊糖片球菌CECT8330，大肠埃希氏菌ATCC25922生长的影响见图2。厌氧培养2 4h后，六株菌液均呈现不同程度的浑浊，在6 0 0 nm下测定其吸光度值对生长量进行判定。在接种短双歧杆菌M-16V、长双歧杆菌CECT7894、植物乳杆菌CECT7315、鼠李糖乳酪杆菌GG及戊糖片球菌CECT8330的培养液中，与空白对照组比较，ME-EEP组及CD组菌体生长量均得到了极显著增高(P0.01），说明在厌10Aug.OFJOURNAL2023BEE(Monthly)(月刊)NO.8蜜蜂杂志氧条件下，MRS培养基中缺乏碳源将限制双歧杆菌属、乳杆菌属及片球菌属的微生物的生长，而ME-EEP中的CD可起到碳源作用。同时，总体看来ME-EEP组的促生长作用强于CD组，并且在短双歧杆菌M-16V培养液中存在显著差异早（P0.05）；在长双歧杆菌CECT7894、戊糖片球菌CECT8330培养液中存在极显著差异（P0.05），见图2(A)-(E)。说明CD可被这些微生物作为碳源利用，而EEP由于其所含有的多酚、黄酮类生物活性物质促进培养基中营养素的吸收从而促进微生物的生长。这些微生物的生长也可能进一步促使这些生物活性物质的降解及利用9 。培养于LB培养基中的大肠埃希氏菌在厌氧条件下发酵，结果显示，与空白对照组比较，CD组生长量无显著差异，而ME-EEP组极显著降低（P0.01），同时，与CD组比较，ME-EEP组生长量亦显著降低（P0.01），说明在LB培养基中，CD的添加不会对大肠埃希氏菌的生长有影响，而MC-EEP因不仅含有CD还含有EEP,因此对一些致病菌的生长有一定的抑制作用，与玄等的报道相一致110-1。短双歧杆菌M-16V（Bif id o b a c t e r iu m b r e v e M-16 V），长双歧杆菌长亚种中(Bifidobacterium longum subsp.longum），植物乳杆菌（La c tip la n tib a c illu splantarum，鼠李糖乳酪杆菌GG（La c t i c a s-eibacillus rhamnosus GG），戊糖片球菌Pe-diococcus pentosaceus)是是国家卫生健康委公布的可用于食品的菌种名单和可用于婴幼儿食品的菌种名单中的菌种。具有较为明确的安全性与生物学活性。EEP本身在胃及小肠不易被分解，因而活性物质很难进入体液循环，但大量研究结果同时指向蜂胶具有明确的生物学活性12 ，本实验亦证实了蜂胶中的活性物质很有可能是安全通过胃及小肠后在结肠被大量的肠道菌群利用后从而发挥生物学活性，而CD对EEP的微囊化可进一步促使蜂胶中生物学活性物质抵达结肠并被微生物所利用。B.breveM-16VB.longumsubsp.longumL.plantarum1.511.571.511.23671.126701.16531.08830.88131.00.96471.0-1.0-0090000900009000.50.5-0.50.43530.34270.34400.00.00.0(A)(B)(C)空白CDMC-EEP空白BCDMC-EEP空白CDMC-EEPL.rhamnosus GGP.pentosaceusE.coli1.571.571.5-1.28671.27571.25470.96331.01.00.87471.00.71370.84000090000900009000.45400.5-0.35700.5-0.50.00.00.0(D)(E)(F)空白BCDMC-EEP空白CDMC-EEP空白CDMC-EEP图2 ME-EEP对微生物生长量的影响(n=3)注：与空白对照组比较#P0.05,排P0.01，与CD组比较，*P0.05,*P0.012.3蜂胶提取物对肠道益生菌及条件致病菌培养液pH值的影响蜂胶提取物MC-EEP对各微生物培养液pH值的影响见图3。由图3可见，在初始培养条件下，各培养液pH初始值约pH6.8，组间无显著差异。厌氧培养2 4h后，各组培养液pH值均下降，对各组均值进行单因素方差分析并进行多重比较发现，戊糖片球菌CECT8330（Pe d i o c o c c u s p e n t o s a c e u s）培养液的pH值显著低于短双歧杆菌M-16V（Bif i-dobacterium breve M-16V)(P0.05)，而大肠埃希氏菌ATCC259222(Escherichia coli)）培养液的pH值显著高于短双歧杆菌M-16V（Bif i-dobacterium breve M-16V），长双歧杆菌CECT7894（Bif id o b a c t e r iu mlongumsubsp.longum），植物乳杆菌CECT7315（La c t i p l a n-tibacillus plantarum），鼠李糖乳酪杆菌GG(Lacticaseibacillus rhamnosus GG)禾和戊糖片球菌CECT8330（P 0.0 1）。p H 值的下降程度可作为发酵过程中产酸能力的重要指标。双歧杆菌属、乳杆菌属等各类益生菌通过在结肠中发酵产酸，降低环境pH值，从而抑制有害菌的生长。本实验中利用MC-EEP替代碳源在MRS培养基中进行短双歧杆菌M-16V，长双歧杆菌CECT7894，植物乳杆菌CECT7315，鼠11OFJOURNALBEE(Monthly)(月刊）蜜蜂杂志2023年第8 期李糖乳酪杆菌GG，戊糖片球菌CECT8330等五个供试菌种的培养，培养液pH值的下降说明菌体大量生长并产酸，与生长量的测定结果相一致。大肠埃希氏菌在LB培养基中进行培养，MC-EEP添加后其pH值下降，但较其余五株菌比较下降较少。大肠埃希氏菌是肠道中常见的微生物，厌氧或兼性厌氧，能发酵乳糖产酸产气，某些菌株具有条件致病性。在生长量实验中显示大肠杆菌在培养条件下正常生长，MC-EEP对其生长有抑制作用，培养液pH值变化情况与这一现象具有一致性。B.breveM-16VB.longumsubsp.longumL.plantarum8L.rhamnosusGG6.846.856.876.836.886.88P.pentosaceus#6-E.coli5.514.454.394.374.334.0740Oh24h图3ME-EEP对微生物培养液pH值的影响（n=3)注：与E.coli组比较#p0.05,排P0.01，与P.pentosaceus组比较*P0.05，*p 0.0 12.3蜂胶提取物对肠道益生菌及条件致病菌培养液SCFAs的影响蜂胶提取物MC-EEP对各微生物培养液中主要SCFAs含量的影响见图4。通过对各菌株发酵液的分析发现，在各发酵液中，7 种被检测的SCFAs中，乙酸、丙酸和正丁酸含量占总SCFAs的9 0%以上，其中乙酸占比最高。不同的菌种对培养液中营养素的代谢能力不同，造成代谢产物不同，同时影响到产酸能力及SCFAs的组成。MC-EEP替代MRS培养基中的碳源，培养2 4h后，测得发酵液中7 种SCFAs的总量为戊糖片球菌最高(37.31 2.56mmol/L），其次是植物乳杆菌(36.88 2.11mmol/L），大肠埃希氏菌最低(24.61 2.34mmol/L），大肠埃希氏菌与其余五株益生菌总SCFAs含量有显著差异早（P0.01)。从产生的各短链脂肪酸来说，代谢产乙酸能力植物乳杆菌最高，达32.0 7 1.8 2 mmol/L；产丙酸能力短双歧杆菌M-16V最高，为4.56 0.40mmol/L；产正丁酸能力戊糖片球菌CECT8330最高，为1.2 8 7 0.15mmol/L。SC-FAs是肠道微生物代谢难溶性碳水化合物后的主要物质，可维持肠道酸性环境，抑制有害菌生长。本实验显示双歧杆菌属菌株、乳杆菌属菌株及片球菌属菌株在MC-EEP替代碳源情况下均有生长，且产生大量SCFAs，各菌所产的SCFAs组成及总量不同，说明各菌种对底物的嗜好不同，MC-EEP对各菌的影响有所差异；对于大肠埃希氏菌而言，在培养条件下加人MC-EEP对其生长有一定的抑制作用，产生的SCFAs及各主要SCFAs均少于上述五株益生菌。大肠埃希菌能够发酵乳糖产酸产气，这与本实验分析其培养物pH水平，SCFAs的含量具有相对一致性。通过对蜂胶及其提取物前期的研究发现，蜂胶在胃肠道很难消化降解，但依然可以发挥其生物学活性，本研究的结果进一步证实，其活性的发挥可能是由于其肠道益生作用而产生的，活性成分的代谢吸收与肠道菌群的生长利用相辅相成。50740740-34.5936.8837.3130.1832.0730.9832.0830-26.8230.96工(/LowW)渊224.05(LOww)理30-24.6120.1420工2010-101(A)(B)0TsnaoesouaddL00r3wnuolwnueaueld7snaoesouedd&snsouweuu7Idsqns usnsouueuur7612.04.563.85 4,111.5-(/LOWW)上T1.2943.633.413.231.101.000.95士1.00.8920.5-(C)(D)0.0snaoesouadd9T-Wsnaoesouadd&ordsqns unbuotgsnsouweusnsouueur7Ldsqns uSunuolg图4ME-EEP对微生物培养液SUFA含量的影响(n=3)注：与E.coli组比较#P0.05，排P0.01Aug.12OFJOURNALBEE(Monthly)(月刊）NO.82023蜜蜂杂志3讨论肠道菌群定值在人体胃、肠道中，菌群种类及数量庞大，估计其数量值在人体体细胞总量的10 倍以上。肠道细菌作为机体的共生生物，它们与宿主相互依存，共同进化，在维持机体免疫和代谢稳态以及抵御病原体方面发挥着至关重要的作用113。肠道中一些厌氧微生物发酵难消化的碳水化合物后产生短链脂肪酸（SCFAs），SCFA s 可以降低结肠内pH值，从而提高其酸性环境以抑制有害菌的生长。同时，SCFAs在外周免疫系统中发挥了关键作用，并通过炎症途径影响宿主的代谢。其作用机理可能是SCFAs通过激活核转录因子-kB（NF-k B)来抑制IL-6、I L-8、IL-1、T NF-等细胞因子的产生，从而减少炎症反应的发生15。从分布上来看，SCFAs包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸、异已酸和已酸等，其中乙酸、丙酸、丁酸占比最高，达到总SCFAs的9 0%以上。大量动物实验和临床研究显示，蜂胶能够有效地缓解及控制高脂血症、糖尿病等代谢性疾病的发生及发展，并且与缓解氧化应激状态及炎症反应有关，但蜂胶对代谢性疾病的确切作用机制至今尚不清楚。而肠道菌群的组成、丰度等是代谢性疾病发病的基础因素15。相较于体细胞，肠道菌群更易受外界因素的影响，尤其是膳食因素。因此，肠道菌群可能是蜂胶防治代谢性疾病的作用新靶点。4结论本研究通过体外静态培养五株益生菌及一株条件致病菌分析蜂胶提取物的益生作用。将蜂胶醇提物（EEP）用CD微囊化后制备MC-EEP，使其具有更好的溶解性。通过对EEP和MC-EEP中总酚酸和总黄酮的含量分析表明在培养液中，MC-EEP中的有效成分溶出率高于EEP，可用于评估蜂胶的体外培养益生作用。研究了剥夺碳源的空白组、作为MC-EEP壁材的CD组及MC-EEP组对卫健委颁布的可用于食品的菌种名单及可用于婴幼儿食品的菌种名单的五株益生菌及大肠埃希氏菌的增殖效果，结果表明，蜂胶提取物表现出益生元效果，即能够协同促进益生菌的生长，且对大肠埃希氏菌显示出一定的抑制作用。MC-EEP的作用能使菌体产酸，降低培养液的pH值，并能够促进益生菌代谢产生一定量的SUFA。综上，MC-EEP促进有益菌群的增殖，抑制有害菌的生长，具有双重的益生功能，接下来应进一步从体内实验入手，为蜂胶作为益生元的应用提供更充分的理论及实验依据。参考文献：1ANJUM S I,ULLAH A,KHAN K A,et al.Compo-sition and functional properties of propolis(bee glue):A review J.Saudi Journal of Bi-ological Sciences,2019,26(7):1 695-703.2KASOTE D,BANKOVA V,VILJOEN A M.Propolis:chemical diversity and challenges in qualitycontro1 J.Phytochemistry Reviews,2022,21(6):1887-911.3蒋侠森.蜂胶的化学成分、抗氧化谱效分析及长白山蜂胶的特性研究DI.杭州：浙江大学，2 0 2 0.4吴传超，梁瑞雨，张洪涛，等.环-1，2-葡聚糖一姜黄素包合物的体外益生特性研究J.食品与发酵工业：1-11.5胡福良，李英华，朱威。亚微米蜂胶微胶囊的制备方法，CN1311815CP/0L.6张硕，王芳，杜琳，潘无双.西藏蜂胶及其模拟消化液的活性成分和抗氧化活性J食品工业科技，2 0 2 3，44(17)：1-7.7张翠平，平舜，黄帅，等蜂胶的地理来源、植物来源及化学成分的研究J.中国药学杂志，2013,48(22):1889-1892.8JIANG X S,TAO L C,LI C G,et al.Grouping,Spectrum-Effect Relationship and Antioxi-dant Compounds of Chinese Propolis fromDifferent Regions Using Multivariate Analysesand Off-Line Anti-DPPH Assay J.Molecules,2020,25(14):3243.9CAI W,XU J X,LI G,et al.Ethanol extract ofpropolis prevents high-fat diet-induced in-sulin resistance and obesity in associationwith modulation of gut microbiota in mice J.Food Research International,2020,130:108939.D0I:10.1016/j.foodres.2019.108939.1O YUAN J,YUAN W,GUO Y,et al.Anti-Biofilm1.3OFJOURNALBEE(Monthly)（月刊）蜜蜂杂志2023年第8 期饲养管理诱蜂兰诱到蜜蜂4群郑国庆(湖南省桃源县漳江镇六合里，湖南桃源415700)2023年4月16日，收到桃源县观音寺镇舒溪村敬泽辉微信，诱蜂兰（见图1)诱到4群蜂。他家是山区，蜜源植物丰富，生产的土蜂蜜价格高，卖到2 0 0 元/kg，且不愁销。他在原有养蜂爱好的基础上再发展，习惯圆桶养蜂，分蜂时往往飞到大树上、房子上，很难收捕，架梯上树收蜂，还有摔伤危险，只能望蜂兴叹。经朋友介绍，诱蜂兰盆景诱蜂好，所以在淘宝上买了2 株放在院内。诱蜂兰的开花日期在4月上中旬，刚好与蜜蜂分蜂季节吻合，因为蜜蜂喜欢诱蜂兰花朵分泌的花蜜气味，侦察蜂采诱蜂兰花蜜，引来分蜂群来安营扎寨。主Activities of Chinese Poplar Propolis Essen-tial Oil against Streptococcus mutans J.Nutrients,2022,14(16):3290.11 WANG F,YUAN J,LI J,et al.Antibacterial ac-tivity of Chinese propolis and its synergywith beta-lactams against methicillin-resis-tant Staphylococcus aureus J.BrazilianJournal of Microbiology,2022 53(4):1789-1797.12 ORSOLIC N,JEMBREK M J.Molecular and Cel-lular Mechanisms of Propolis and Its Polyphe-nolic Compounds against Cancer J.Interna-tional Journal of Molecular Sciences,2022,人在诱蜂兰上方吊个收蜂罩(安全帽、蜂箱等也可代替），蜜蜂就会自动爬进去，诱蜂成功（图2)。如果家里有箱养的蜂，可临时提出1张蜜脾，抖掉脾上蜜蜂，悬吊在诱蜂兰盆景上方，很快就有蜜图1诱蜂兰图2 在诱蜂兰上方吊个收蜂罩，收捕蜜蜂蜂爬上脾，再将脾提人蜂箱，收蜂便成功。诱蜂兰或挂蜜脾诱蜂，不要人看守，安全可靠、省心省事。感兴趣的读者不一试，效果怎样，望反馈。微信号码：17 39 8 7 6 5346。收稿日期：2 0 2 3-0 5-0 423(18):10479.13 ZHENG Y F,WUY Q,TAO L C,et al.ChinesePropolis Prevents Obesity and MetabolismSyndromes Induced by a High Fat Diet andAccompanied by an Alitered Gut MicrobiotaStructurein Mice JJ.Nutrients,2020,12(4):959.14钟晨瑜，蔡珂丹.短链脂肪酸在慢性肾脏病中作用及机制的研究进展J.中国病理生理杂志，2021,37(10):1900-1904.15蔡伟.蜂胶醇提物对高脂饮食诱导肥胖小鼠糖脂代谢及肠道菌群的作用D南昌：南昌大学，2 0 2 0.