上皮型钙粘附蛋白和层粘连蛋白在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义.pdf

第2 7 卷第1 期20 06 年 2月 西 安 交 通 大 学 学 报(医 学 版)J o u r n a l o f X i a n J i a o t o n g U n i v e r s i t y(Me d i c a l S c i e n c e s)Vo l.2 7 No.1 F e b.2 0 0 6上皮型钙粘附蛋白和层粘连蛋白在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义 刘景瑜，安瑞芳2，张晨2，王妹2 (1.南京大学医学院附属鼓楼医院妇产科，江苏南京2.西安交通大学医学院第一附属医院妇产科，陕西西安2 1 0 0 0 8;7 1 0 0 6 1)摘要:方 法Q0探讨上皮型钙粘附蛋白(E-c a d)和层粘连蛋白(L N)在妊娠滋养细胞疾病(G T D)中的表达及意义。应用免疫组织化学(S P法)检测7 4 例 G T D中E-c a d 和 L N的表达情况。结果率和 L N强表达率分别为3 7.8 0 0(2 8/7 4)和64.86%(4 8/7 4)6 4.8 6%(4 8/7 4)，显著低于正常绒毛组织。在 G T D中，E-c a d的正常表达在葡萄胎(H M),侵蚀性葡萄胎(I M)及绒毛膜癌(C C)中 E-c a d的正常表达率分别为 5 3.3%、3 1.2 5%和 1 6.6 7%;L N的强表达率分别为 8 0 线、5 6.2 5%和5 0%。随着G T D 恶性程度的增加，E-c a d 的正常表达率及L N的强表达率逐渐降低，且与正常绒毛组织有显著差异。it论E-c a d 及 L N的表达与G T D的发生、恶变及侵袭有关系;对 E-c a d与 L N表达的监测有助于预测G T D的发展趋势及提示治疗效果。关键词:妊娠滋养细胞疾病;葡萄胎;侵蚀性葡萄胎;绒毛膜癌;层粘连蛋白中图分类号:R 7 3 7.3 3文献标识码:A文章编号:1 6 7 1-8 2 5 9(2 0 0 6)0 1-0 0 6 9-0 4Th ee x p r e s s i o no f E-c a d h e r i n a n d L a mi n i n i n g e s t a t i o n a lt r o p h o b l a s t i c d i s e a s e s a n d t h e i r s i g n i f i c a n c eL i u J i n g y u ，A n R u i f a n g 2，Z h a n g C h e n ，Wa n g S h u t(1.D e p a r t m e n t o f O b s t e t r i c s a n d G y n e c o l o g y,N a n J i n g D r u m T o w e r Ho s p i t a l，Me d i c a l S c h o o l o f N a n J i n g Un i v e r s i t y,Na n j i n g 2 1 0 0 0 8;2.D e p a r t me n t o f O b s t e t r i c s a n d G y n e c o l o g y，F i r s t Af f i l i a t e d Ho s p i t a l，Me d i c a l S c h o o l o f V a n J i a o t o n g Un i v e r s i t y,V a n 7 1 0 0 6 1，C h i n a)A B S T R A C T;O b j e c t i v e T o e x p l o r e t h e e x p r e s s i o n s o f E-c a d h e r i n(E-c a d)a n d L a m i n i n(L N)t r o p h o b l a s t i c d i s e a s e s(G T D)a n d t h e i r s i g n i f i c a n c e.M e t h o d s T h e e x p r e s s i o n o f E-c a d h e r i n a n d i n g e s t a t i o n a lLN i n 7 4 c a s e sg e s t a t i o n a l d i s e a s e s w a s d e t e c t e d b y i m m u n o h i s t o c h e m i c a l(S P)m e t h o d.R e s u l t s T h e n o r m a l e x p r e s s i o n r a t e s o fE-c a d a n d t h e s t r o n g e x p r e s s i o n r a t e s o f L N i n G T D w e r e 3 7.8%(2 8/7 4)a n d 6 4.8 6%a(4 8/7 4)，r e s p e c t i v e l y,a n dw e r e s i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a n t h o s e i n n o r m a l v i l l u s t i s s u e.I n H M(h y d a t i d i f o r m m o l e)，I M(i n v a s i v e m o d e)a n d C C(c h o r i o c a r c i n o m a)，t h e n o r m a l e x p r e s s i o n r a t e s o f E-c a d w e r e 5 3.3%，3 1.2 5%a n d 1 6.6 7%，r e s p e c t i v e l y;t h es t r o n g e x p r e s s i o n r a t e s o f L N w e r e 8 0%，5 6.2 5%a n d 5 0%，r e s p e c t i v e l y.Wi t h t h e d e v e l o p m e n t o f G T Dm a l i g n a n c y,t h e n o r m a l e x p r e s s i o n r a t e s o f E-c a d a n d t h e s t r o n g e x p r e s s i o n r a t e s o f L N d e c l i n e d g r a d u a l l y a n d w e r es i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f r o m t h o s e o f n o r m a l v i l l u s.T h e d e c r e a s i n g e x p r e s s i o n o f t h e b o t h w e r e a s s o c i a t e d w i t h t h ed e v e l o p m e n t,m a l i g n a n c e a n d i n v a s i v e n e s s o f G T D.I n G T D,t h e r e w e r e n o s i g n i f i c a n t r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h en o r m a l e x p r e s s i o n o f E-c a d a n d t h e s t r o n g e x p r e s s i o n o f L N.C o n c lu s io n T h e e x p r e s s io n o f t h e E-c a d a n d L N a r ea s s o c i a t e d w i t h t h e d e v e l o p m e n t,m a l i g n a n c e a n d i n v a s i v e n e s s o f G T D.T h e c o m b i n a t i o n o f t h e m i s h e l p f u l f o r t h ed i a g n o s i s o f G T D,a n d i t s v a l u a b l e t o p r e d i c t t h e p r o g r e s s t r e n d a n d p r o g n o s i s o f G T D.K E Y WO R D S:g e s t a t i o n a l t r o p h o b l a s t i c d i s e a s e;h y d a t i d i f o r m m o l e;i n v a s i v e t o o le;c h o r io c a r c i n o m a;E-c a d h e r-i n;l a mi n i n 妊娠滋养细胞疾病(g e s t a t i o n a l t r o p h o b l a s t i cd i s e a s e,G T D)是一组来源于胎盘绒毛滋养细胞的疾收稿日期:2 0 0 5-0 5-1 7修回日期:2 0 0 5-0 8-3 1作者简介:刘景瑜(1 9 7 9-)，女(汉族)，临床医学硕士，主要从事妇科肿 瘤的研究.E-m a i l;l i a n j i n g l 2 1 6)h o t m a i l.c o m病，其中包括葡萄胎(h y d a t i d i f o r m m o l e,H M)，侵蚀性葡萄胎(i n v a s i v e mo l e,I M)和绒毛膜癌(c h o r i o-c a r c i n o m a,C C)。滋养细胞生物行为具有某些肿瘤细胞的特性，其异常增生导致 G T D的机理仍不清楚，但可以肯定的是 G T D的发生是多因素作用的复西 安 交 通 大 学 学 报(医 学 版)第 2 7卷杂过程。我们采用免疫组织化学的方法，观察 HM,I M及 C C组织中上皮型钙粘附蛋白(E-c a d)及层粘连蛋白(L N)的表达情况，结合临床资料分析，旨在探讨E-c a d 及L N与G T D的发生、发展及侵袭转移的关系，进而揭示其临床意义及应用价值。1 材料与方法1.1 临床资料收集西安交通大学医学院第一附属医院妇科 1 9 9 0 年 1 月至2 0 0 0 年 1 2 月妊娠滋养细胞疾病组织标本 7 4 例，其中H M 3 0 例，均为首次清宫标本，I M 3 2 例，C C 1 2 例，上述标本均用 1 0 0 o(体积分数)中性福尔马林固 定，石蜡包埋，切片厚5 K m，分别作 HE和 S P免疫组化染色。主要试剂有鼠抗人E-c a d 单克隆抗体(O n c o g e n e 公司)，鼠抗人L N单克隆抗体(S a n t a C r u z 生化公司),S P试剂盒(Z Y ME D公司)。同时取正常早期妊娠绒毛组织标本 2 0 例作为对照组。1.2 结果判定E-c a d为细胞膜表达蛋白，正常组织中E-c a d 均匀一致的呈线性表达于细胞膜上。如肿瘤组织染色方式和强度与正常组织相同，则认为E-c a d 正常表达，否则为E-c a d 异常表达。L N定位于细胞基底膜，阳性是指在光镜下正常绒毛组织中L N均匀一致的表达于上皮细胞基底膜，呈连续线性表达，细胞浆内呈颗粒状。L N半定量分级:高倍镜下计算 1 0 个随机视野，根据着色深浅或阳性细胞所占比例分为4 个等级:阴性(一)上皮细胞基底膜消失或基底膜未着色，细胞膜、细胞浆未着色或染色弱，染色范围2 0 0 o。弱阳性(十)上皮细胞基底膜、细胞膜染色弱，胞浆内少量浅棕色颗粒，染色范围)2 0 0 o，但4 0%。阳性(+)上皮细胞基底膜、细胞膜染色强，细胞轮廓隐约可见，胞浆内较多棕色颗粒，染色范围)4 0%，但7 5%.强阳性(料 十)上皮细胞基底膜、细胞膜染色强，细胞轮廓明显可见，胞浆内大量棕色细颗粒，染色范围)7 5 0 o。以一、+为弱表达，+十、拼为强表达。1.3 统计学处理所有资料采用 S P S S软件处理，采用2 X2 列联丫检验，以P GO.0 5 为有统计学意义。E-c a d 在 HM 组织中表现为染色强度减低，强弱不等，或胞浆表达，或不着色，与正常绒毛中E-c a d 表达率差异显著。E-c a d 在 I M 中的异常表达表现为无明显的胞膜表达，以胞浆表达为主，胞浆中呈棕黄色颗粒，与正常绒毛组织有显著性差异(P 0.0 5).E-c a d在 C C中很少正常表达，多呈胞浆表达，杂乱的胞膜表达，与正常绒毛及 H M组织中有显著性差异(P 0.0 5)。本研究中 E-c a d在正常绒毛和G T D组织的表达有显著性差异(P 0.0 5),且随着 G T D恶性程度的升高，E-c a d正常表达率逐渐下降。G T D不同临床参数中E-c a d的表达情况见表 2。表 1 E-c a d 在正常绒毛及 G T D组织中的表达T a b l e 1 E x p r e s s i o n o f E-c a d i n t h e s p e c i m e n o f n o r m a l v i l-l o u s a n d G T DTi s s u e s No r ma le x p r e s s i o nN o r m a l e x p r e s s i o np e r c e n t a g e(肠)N o r m a l v i l l o u sH y d a t i d if o r m m o l eI n v a s i v e mo l eC h o r i o c a r c i n o m aGTD3 7.8 0 .P 0.0 5 v s.n o r m a l v i l l o u s;I P 0.0 50.0 50.0 50.0 50.0 5 0.0 560.5066.33.44.14.303375址16.0.410651012184121056861012452528210010加18121814肠62012668朴朴锐即郑姗工刻NotyesNotyes工2 结果 C l i n i c a l s t a g e C h e m o t h e r a p yCC C h e m o t h e r a p y2.1 E-c a d在正常绒毛及 G T D组织中的表达E-c a d 在正常绒毛及 G T D组织 中的表达见表 t oE-c a d 在正常绒毛组织中均匀一致的表达于细胞膜表面，近母体侧及细胞间的染色较胎儿面更为明显，细胞滋养细胞 E-c a d的表达较合体滋养细胞 明显。C l i n i c a l s t a g e 0.0 5 )Q 4 2 2 5 0.02.2 L N在正常绒毛及 G T D组织中的表达L N在正常绒毛及 G T D组织中的表达见表 3.L N在 HM1 期刘景瑜，安瑞芳，张晨，等.上皮型钙粘附蛋白和层粘连蛋白在妊娠滋养细胞疾病中的表达及意义组织中的表达仍主要在基底膜呈连续线状，有些部位的表达强弱不一，与正常绒毛中L N强表达率差异显著(P O.0 5)。在I M中，L N主要为胞浆表达，着色均匀或呈颗粒状，上皮基底膜多数为弱表达，细胞间质呈弱阳性或阳性表达，与正常绒毛及 HM组织中的强表达率间有明显差异(P0.0 5).L N在 C C中，胞浆呈强阳性着色，棕黄色颗粒布满胞质，间质呈弱阳性着色，C C中无基底膜存在，仅可见少许血管基底膜呈弱阳性表达，与正常绒毛及 H M组织有显著差异(P O.0 5);与 I M无显著差异(P O.0 5)o本研究的7 4 例 G T D中，L N总的强表达率与正常绒毛组织有显著差异，且随着 G T D恶性程度的升高，L N强表达率逐渐下降。G T D不同临床参数中 L N的表达情况见表 4 0E-c a d 正常表达且 L N呈强表达者 2 2 例，占2 9.7 0 0;E-c a d 异常表达且 L N呈弱表达者2 0 例，占2 7.0 3 写。随 G T D恶性程度的升高，E-c a d 正常表达且 L N呈强表达者所占比例逐渐降低，提示结合 E-c a d的异常表达和 L N弱表达有助于预测 G T D的发展趋势。3 讨论表 3Ta b l eL N在正常绒毛及 G T D3 E x p r e s s i o n o f L N i n组织中的表达t h e s p e c i me n o f n o r ma l v i l l o u sa n d GTDTi s s u e sNo r ma lN o r m a l e x p r e s s i o ne x p r e s s i o np e r c e n t a g e(%)No r ma l v i l l o u sH y d a t i d i f o r m m o l eI n v a s i v e mo l eC h o r i o c a r c i n o maGTD2 03 03 21 27 42 02 4。1 8 64 81 0 0.0 08 0.0 0 5 6.2 5 05 0.0 0 6 4.8 0 .P 0.0 5 v s.n o r m a l v i l l o u s;1 1 P 0.0 5八U八U1.Jg曰P a t h o l o g i c at y p eGe s t a t i o n a lt i m e(w e e k s)1 81 21 61 81 0 0.5 0.0.0 5C l i n i c a l s t a g e5 3.6 6.0.0 5C h e m o t h e r a p y0.0 56 26 6.73 3.3C l i n i c a l s t a g e I 8 2 6 2 5.00.0 5)，两者的联合表达率随着 G T D恶性程度的升高，呈下降趋势，但在某些方面，L N较E-c a d 更敏感，如 L N与 H M孕周、与I M化疗与否及与C C分期有关，而 E-c a d则与这些因素无关。无论 E-c a d还是L N在细胞滋养细胞的染色较合体滋养细胞明显，而在G T D中由于滋养细胞增生的多少，不仅不同标本表现不一，即使在同一标本也不完全一致，且两种滋养细胞的增生比例也存在上述情况。因此，在细胞滋养细胞和合体滋养细胞中 E-c a d及 L N表达的差别仍有待进一步研究。参考文献:1 G e t s i o s S,Ma c C a l ma n C D.C a d h e r i n-1 1 m o d u l a t e s t h e t e r m i n a l d i f f e r e n t i a t i o n a n d f u s i o n o f h u m a n t r o p h o b l a s t i c c e l l s i n v i t r o J .D e v B i o l,2 0 0 3，2 5 7(1);4 1-5 4.2 S h i h I M,H s u M Y.T h e r o l e o f E-c a d h e r i n i n m o t i l i t y a n d i n v a-s i o n o f i m p l a n t a t i o n s i t e i n t e r m e d i a t e t r o p h o b l a s t J .P a c e n t a,2 0 0 2,2 3(1 0);7 0 6-7 1 5.3 F l o r i d o n C,N i e l s e n O,H o l u n d B,e t a l.L o c a l i z a t i o n o f E-c a d-h e r i n i n v i l l o u s,e x t r a v i l l o u s a n d v a s c u l a r t r o p h o b l a s t s d u r i n g i n-t r a u t e r i n e,e c t o p i c a n d m o l a r p r e g n a n c y J .Mo l H u m R e p r o d,2 0 0 0,6(1 0);9 4 3-9 5 0.4 G e t s i o s S,Ma c C a l m a n C D.C a d h e r i n-1 1 m o d u l a t e s t h e t e r m i n a l d i f f e r e n t i a t i o n a n d f u s i o n o f h u m a n t r o p h o b l a s t i c c e l l s i n v i t r o J .D e v B i o l,2 0 0 3,2 5 7(1):4 1-5 4.5 王强，高英茂，张金萍，等，层粘连蛋白和纤维粘连蛋白在正常绒 毛膜、葡萄胎、绒癌组织中的表达 J .解剖学杂志，2 0 0 2,2(4):3 3 8-3 4 1.6 安瑞芳，王妹，张永爱，等.层粘连蛋白及其受体在妊娠滋养细胞 肿瘤中的表达及意义 J .四川大学学报(医学版),2 0 0 5,3 6(3):3 4 4-3 4 6 7 崔彩莲，李英.人胎盘绒毛层粘连蛋白及其受体的定位与 定量研 究 J .北京医科大学学报，1 9 9 8,3 0(4):3 0 2-3 0 4.8 G o l d b e r g 1,D a v i d s o n B,L e r n e r G,e t a l.E x p r e s s i o n o f e x t r a-c e l l u l a r m a t r i x p r o t e i n i n c e r v i c a l s q u a m o u s c e l l c a r c i n o m a a c l i n i n e o p a t h o l o g i c a l s t u d y J .C l i n P a t h o l,1 9 9 8,5 1(1 0):7 8 1-7 8 5.9 C a p o-C h i c h i C D,S m i t h E R,Y a n g D H,e t a l.D y n a m i c a l t e r a-t i o n s o f t h e e x t r a c e l l u l a r e n v i r o n m e n t o f o v a r i a n s u r f a c e e p i t h e l i a l c e l l s i n p r e m a l i g n a n t t r a n s f o r m a t i o n,t u m o r i g e n i c i t y,a n d m e t a s-t a s i s J .C a n c e r,2 0 0 2,9 5(8):1 8 0 2-1 8 1 5.(编辑韩维栋)