甲壳动物血清中凝集素的凝集作用及影响因素.pdf

第 2 O卷第 6 期 2 0 0 2年 1 1月 泉 州师 范 学 院学 报(自然 科 学)V o 1 2 0 N o 6 J o u r n a l o f Qu a n z h o u No r ma l C o l l e g e(Na t u r a l S c i e n c e)No v 2 0 0 2 甲壳动物血清中凝集素的凝集作用及影响 因素 戴聪 杰，陈寅山(1 泉州师范学 院 生物系，福建 泉州3 6 2 0 0 0；2 福 建师范 大学 生物工 程学院，福建 福州3 5 0 0 0 7)摘 要：用 8种单 细胞藻 类对 1 2种 甲壳动 物血清进行 检测，发现每 种 甲壳 动物 血 清至少 能凝 集 3种 以上的单细胞 藻类，其 中斜 生栅 藻(S c e n e d e s mu s o b l i q u u s)细 胞 的敏 感性 最强，能 与受 检 的 1 2 种 甲壳动物 血清产生凝 集 同时进行 糖抑制，温度、p H 和 c a 影响 试验 结 果 表 明，每 种凝 集素 对 斜 生栅藻的凝集 活性都 可被 1 种或 多糖抑制。1 2 种 甲壳动物 血清凝 集素 的温 度和 p H适 应范 围表现 不 一，但 它们的凝集 活性都 被 E D T A所 抑制 关键 词：甲壳 动物；凝集素；藻类；影响 因素 中图分 类号：Q9 5 9 2 3 3 文献标识码：A 文章 编号：1 0 0 9 8 2 2 4(2 0 0 2 J O 6 0 0 7 6-0 6 凝集素是生命体内广泛分布的一种天然 的非免疫性蛋 白或糖 蛋白，具有众 多的生 物学性 质n ，其中最重要的是能识别细胞表面的糖基团，有选 择性地凝集不 同种类 的细胞，对凝集 素的筛选和活性检测，常用各种脊椎动物红细胞L 6 、肿瘤细胞、淋 巴细胞、骨髓 细胞L g 、精子 细胞 作凝集原，很少使用单细胞藻类 和微生物 细胞或孢 子等 直到 1 9 9 6年 Ho r i L 1 等才 首 次报 道 了植 物凝 集 素 对海 洋 单 细 胞 藻 类 的凝 集 作 用 本 文 以 8种 单 细 胞 藻 类 为 凝 集 原，对 1 2种 甲壳动物血清凝集 素进行检测，这将为反过来 以这些凝集 素作 为分子探针，研究藻类 细 胞表 面 的糖 脂 和糖 链 结 构开 辟 一条 新 路，并 提供 基 础 资 料 1 材料 和方法 1 1 甲壳 动物 血 清 的制 备 选取健康 的 日本对虾(P e n a e u s 血p o n i c u s)、南美 白对虾(P e n a e u s v a n a mi n a s)、罗 氏沼虾(Ma c r o b r a c h i u m r o s e n b e r g i l)、日本沼 虾(Ma c r o b r a c h i u m j a p o n i c u s)、脊条褶 虾蛄(L o p h o s q u i l l a c o s t a t a)、斑 纹婿(C h a r y b d i s f e r i a t u s)、日本 绒 螯 蟹(r i o c h e i r j a p o n i c u s)、红 星 梭 子 蟹(P o r t u n u s s a n g u i n o l e n t u s)、三 疣梭 子 蟹(P o r t u n u s t r i t u b e r c u l a t u s)、远 洋 梭 子 蟹(P o r t u n u s p e l a g i c u s)、锯 缘 青 蟹(S c y l l a s e r r a t a)、相手蟹(S e s a r ma s p)等 1 2 种 甲壳动物，带 回实验室洗净，分类鉴别 虾类用经过高压灭 菌的 1 ml、5号针头注射器从围心室内抽取血样 蟹类 剪肢放血 收集各种 甲壳 动物血 淋巴液 收 稿 日期：2 0 0 2一O 4 1 1 作者简 介：戴聪杰(1 9 6 6 一)，男，讲 师，硕士 基金项 目：泉州 市科技项 目计划资助(Z 2 0 0 2 3 9)维普资讯 http:/ 第 6期 戴聪杰等：甲壳动物血清中凝集素的凝集作用及影响因素 7 7 经受 4 5 0 0 r p m(r=1 5 c m)离心 1 0 mi n，上清液为血清型样品，在血清 中加入达 到体积 2倍浓 度 的 T B SC a 溶 液(T B S：0 1 4 mo l L N a c l，0 0 1 mo l L I 1 Tr i s HC I，p H 7 4；T B S C a 抖：T B S 0 0 1 mo l LC a C I：，p H 7 4)，然后经凝集 活力 和蛋 白质 浓度测定 后，放冰箱 备 用 1 2 藻 类细 胞 悬液 的制 备 巴夫藻(P a l 0 m v r i d i s )、盐 藻(D u n a l i e l l 8 l i n a)、塔胞 藻(P y r a m i m o n a s s p )、海 产 小 球 藻(6 l o r e l la v u l g a)、亚心 型 扁 藻(P l a t y rm o n a$c o r d i f o r m i s)用 无 菌 海 水；斜 生栅 藻(S e e n e d e s mu s o b l i q u u s)和蛋 白核 小球 藻(C h l o r e l l a p y r e o i d o s a)用 0 8 5 无 菌 生 理 盐 水，紫 球 藻(P o r p h y r i d i u m p u r p u r e u m)用 无 菌 海 水与无菌生理盐水(1：1 w w)配成的混合液稀释，经 3 0 0 0 r p m(r=1 5 c m)离心 1 5 mi n，离心 洗涤 两 次，再用 相 应 的无 菌 水稀 释 配成 藻 类 细胞 悬 液，终 浓度 约 为 8 0 x 1 0 个 ml 1 3 甲壳动 物 血清 凝 集 单 细胞 藻 类 的活 力测 定 在 孔 中加 入 2 5 l 甲壳 动物血 清 溶 液，再 加入 等 量 的藻 类 细胞 悬 液，均匀 摇 动 1 mi n，室 温 下放置 2 3 h后在显微镜下观察凝集反应结果 针对不 同的藻类，分别用等量无菌海水，无菌 生理盐水，无菌海水与生理盐水混合液代替 甲壳动物血清溶液，作 为阴性对照 呈 阳性反应的 甲壳动物血清，在 V型板上进行倍 比稀释后 与等量敏感 的藻类细胞进行凝集反应测定其凝集 效价 以有单细胞藻类凝集活力 的最大稀释度为该样品的凝集活力(计为 2“)1 4 环 境 因素 对 凝 集素 的 影 响 1 4 1 温度对甲壳动物血清凝集 活力的影响 将 甲壳动物血清置于密闭 的容器 中，然后分 别在 4冰箱及温度为 4 0、5 0、6 0、7 0、8 0、9 0水浴 中保温 1 0 mi n后取出，待其冷却至室温后 用斜 生栅 藻 细胞 悬 液 检测 其 凝 集 活 力 1 4 2 p H对甲壳动物血清凝集活力的影响 测定 p H对 甲壳动物血 清凝集 活性的影响时，使 用 下 列缓 冲 液：p H 4 6的 HA CN a AC缓 冲液；p H 7 9的 T r i s H C I 缓 冲 液；p H 1 0 儿 的 G l y N a O H缓 冲 液 将血 清 溶 液 的 p H分 别 调 至 4 0、5 0、6 0、7 0、8 0、9 0、1 0 0，在 4 下密封的容器中放置 2 4 h，然后将各溶液 的 p H调至 7 4，测定各溶液的凝集 活力 1 4 3 E D T A对甲壳动物血清凝 集活力的影响取 2 5肛 l 的甲壳 动物血清，分 别加入等体积 的 T B S溶液进行倍 比稀释后，每孔分别加入 2 5 l 1 0、2 0、5 0 mmo l LI 1 的 E D T A，用斜生栅 藻细胞悬液测定其凝集 活力 对照组不加 E D T A 受 E D T A抑制的 甲壳动物血清，重新加入含 0 0 5 mo l LI 1 C a 的 0 8 5无菌生理盐水溶液，观察是否恢复凝集活力 1 4 4糖抑制试验糖抑制试验在 9 6孔 V型微量血凝滴定板中进行 试验用 的 9种糖为乳 糖(L a c t o s e)、D一甘 露糖(DMa n n o se)、D一果 糖(DF r u c t o se)、D一半 乳 糖(DG a l a c t o se)、D一葡萄糖(DGl u c o se)、D一树胶醛糖(DA r a b i n o se)、木糖(X y l o se)、D一山梨 醇(DS o r b i t a 1)、蔗 糖(S u c r o se)，其 浓 度 均 为 2 0 0 mmo l L 先 往 V 型 板 每 孔 中加 入 2 5肛 l 的 T B S C a 溶液，第一孔加入 2 5 l 甲壳动物血清，进行倍 比稀释后，每孔加入 2 5 糖 溶液，在 3 7 下保温 1 h后，加入 2 5 l 斜生栅藻细胞悬液，再保温 1 2 h后，观察凝集情况 2 结果与讨 论 2 1 甲壳 动 物血 清 凝集 单 细胞 藻 类 的活 力 测定 甲壳动物血清凝集单细胞类 的情况见表 1，用 以检测凝集活情的 8种单细胞藻类中，除紫 维普资讯 http:/ 7 8 泉州师范学 院学报(自然科学)2 0 0 2年 I 1月 球藻属于红藻门外，余者 皆属于绿藻门 1 2种供试的 甲壳动物血 清，每一种血清至少能凝集 3 种单细胞藻类，就 8种单细胞藻类对 甲壳动物血清 的敏感性而言，斜 生栅 藻对 甲壳动 物血 清 的敏感性最强，与 1 2种供试的甲壳动物血清的凝集反应 都呈阳性，且凝集效 价也最高；亚心 型扁藻对甲壳动物血清的敏感性最弱，与 1 2种供试的甲壳动物血清的凝集反应都呈 阴性 表 i 甲壳动 物血清凝 集单细胞藻 类的活力 2“)盐藻 斜生 栅藻 2 0 2 0 2 2 0 2 2 0 2 0 2。2 2 0 2 2。日本 对 虾 南美 白对虾 罗氏沼虾 日本 沼 虾 脊 条褶虾蛄 斑 纹 蝇 日本绒螯 蟹 红 星梭子蟹 三疣 梭子蟹 远 洋梭子蟹 锯缘青 蟹 相 手蟹 细胞 凝 集 是高 度 复 杂 的反 应，凝集 作 用 能 否发 生 取决 于 凝集 素分 子 与藻 类 细 胞 表 面 能 否 发生互补或嵌合作用 紫球藻与绿藻的细胞壁都分为内外两层，内层都是纤维素层，而壁的外 层，紫球藻 由富含多种糖类的藻胶质构成，绿藻则 由糖类组成较少的果胶构成 1 ，实验结果表 明，绿藻 门除亚心型扁藻、塔胞藻外，其它绿藻对 甲壳动物血清 的敏感性 均 比紫球藻 的强，说 明受体的敏感性取决于其糖链的性质而不是数量 2 2 环境 因素对 凝 集 素 的影 响 2 2 I 温度对甲壳动物血清凝集活力的影响 1 2种 甲壳动物血清的凝集在不 同温度下处理 1 0 mi n，活 力损 失情 况 如 表 2所示 结果 表 明，脊 条褶 虾蛄、红 星梭 子蟹 在 4 0处 理 1 0 mi n后 就失 去凝 集 活力；南美 白对虾、罗 氏沼 虾、斑纹 蝠、三 疣梭 子 蟹 4种 甲壳 动 物 血 清 在 5 0 处 理 1 0 mi n后就失去凝集活力；日本沼虾、日本绒螯蟹、相手蟹 3种甲壳动物血清在 6 0处理 1 0 mi n后凝集活力丧失；远 洋梭子蟹血清在 6 0处理 1 0 mi n、锯缘青 蟹血 清在 7 0处 理 1 0 mi n、日本对虾血清在 9 0处理 1 0 mi n后仍具有凝集活性，这 3种 甲壳动物血清凝集素表现 出较高的热稳定性 关于热稳定性问题，胡新平等n 胡 在研究藻类凝集 素时指 出，藻类凝集素的 热稳定 性 主要 取 决 于凝 集 素 活性 位 点 的性 质，若 活 性 位 点 为 肽 链 或 蛋 白质，由 于 肽 链 和 蛋 白 质在受热情况下空间构象易发 生改变而丧失 活性，故此种凝集素的热稳定性就 较差；若 活性 位点为糖链，由于糖链相对于肽链和蛋 白质，其对热则不敏感得 多，故此种凝集 素的热稳定 性就较强 本实验对 1 2种 甲壳动物血清凝集素热稳定性的研究发 现，甲壳动物血 清凝集 素的 热 稳定 性 除 3种 较 耐高 温 外，普遍 较 低，这 可能 是 由 于它们 长期 生 活在 温 度 相 对 稳 定 的 水 中，其生理 活性只有在一定 的温度范围内才得以维持；至于远洋梭子蟹、锯缘青蟹、日本对虾热稳 定性较高，可能是由于它们活性位点为糖链的缘故 综上所述，甲壳动物血清凝集素的热稳定 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 维普资讯 http:/ 第 6期 戴聪杰等：甲壳动物血清中凝集素的凝集作用及影响因素 7 9 性差异可能和动物的生活环境及凝集素分子的化学结构和活性位点的化学性质有关 表 2 温 度对 甲壳动 物血清凝集 斜生栅藻细胞 的影响(2“J 4 4 O 5 O 6 O 7 O 8 O 9 O 日本对虾 南 美 白对虾 罗 氏沼虾 日本 沼虾 脊 条褶虾蛄 斑 纹 蝇 日本绒螯 蟹 红星梭 子蟹 三疣梭 子蟹 远洋梭 子蟹 锯 缘青蟹 相手蟹 2 0 2 0 2 2 2 p H对甲壳动物血清的凝集活性 的影响 甲壳动物血清在 p H=4 O 1 0 0范围 内活 力 损 失 情况 如 表 3所 示，南 美 白对 虾、三疣 子 蟹 在 p H 9 0即 失 去凝 集 活 力；罗 氏沼 虾、日本 沼虾、红星梭子蟹在 p H 5 o时也没有凝集活力；日本绒螯蟹 p H适应范围最 窄，只在 p H=6 o 7 o具有 凝集 活力；脊 条 褶虾 蛄、斑 纹 蝎、红 星梭 子 蟹在 p H l O o就 失去 凝 集 活 力；三 疣梭 子 蟹、脊 条褶 虾蛄 在 p H 4 o也 没 有凝 集 活力；日本 对 虾、远 洋 梭 子 蟹、锯 缘 青 蟹、相 手 蟹 等 4 种 甲壳 动 物血 清 的凝 集 活力对 p H 有广 泛适 应 性，在 p H=4 O l O o均具 有 凝集 活性 表 3 p H对 甲壳动物血 清凝集斜生栅 藻细胞 的影响(2 n l p H4 0 p H5 0 p H6 0 p H7 0 p H8 0 p H9 0 p Hl Oo 日本对虾 南美 白对虾 罗氏沼虾 日本沼虾 脊条褶虾蛄 斑 纹 蝇 日本 绒螯 蟹 红星 梭子蟹 三疣梭 子蟹 远洋梭 子蟹 锯缘青蟹 相手蟹 2 3 E D T A对 甲 壳动 物血 清 的 凝集 活 性的 影 响 实 验结 果(表 4)表 明，金 属 离子 螯合 剂 E D T A对 甲壳 动 物 血 清凝 集 素 凝 集 活 性 有 不 同程 度的抑制作用，所需浓度视系统 的 C a 浓度而异，加入 C a 可使 被抑制 的甲壳动物血清的凝 集活力得到恢复，说明这种抑制是可逆 的 1 2种甲壳动物血 清对斜生栅藻细胞 的凝集活力表 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 、一 一 一 一 一 一 一 一 一、一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 一 维普资讯 http:/ 8 0 泉州师范学 院学报(自然科学)2 0 0 2年 1 1 月 现对 C a 抖不 同程度 的依赖性，其 中南美 白对 虾、罗氏沼虾、日本 沼虾、脊条褶虾蛄、斑纹蜉、三 疣梭子蟹、相手蟹等的血清凝集活力强烈依赖于 C a ，经 1 0 mmo l L-1 E D T A处理后对斜生 栅藻细胞的凝集活力 即消失；日本绒螯蟹、红星梭子蟹、远洋梭子蟹 3种 甲壳动物血清凝集素 经 2 0 mmo l L-1 E D T A处理后对斜生栅藻细胞的凝集活力 即消失；而 日本对虾、锯缘青蟹分 别经 2 O、5 0 mm o l L E D T A处理后仍具有凝集 活力，表明它们对 C a 依赖性较小 表 4 C a 和 E DT A对 甲壳动 物血清凝 集斜 生栅藻 细胞 的影 响 E D T A(mmo l L )O(对 照 组)1 0 2 0 5 0 O(对 照 组)1 0 2 0 5 0 日本对虾 2 2 2。一 日本绒螯蟹 2 2 一 一 南美 白对虾 2 一 一 一 红星梭子蟹 2 2 一 一 罗 氏沼虾 2 一 一 一 三疣 梭子蟹 2 一 一 一 日本沼虾 2 一 一 一 远洋梭子蟹 2 2 一 一 脊条褶虾蛄 2 一 一 一 锯缘青蟹 2 2。2 2 斑 纹 蝎 2 一 一 一 相 手 蟹 2 一 一 一 2 4 1 2种 甲壳动 物血 清 的糖 抑 制 作 用 糖抑制试验结果见表 5，从表 5可以看出，红星梭子蟹血清对斜生栅藻细胞的凝集可被除 D一葡萄糖外的 8种糖 抑制；日本绒螯蟹可被除蔗糖外 的 8种糖抑制；相手蟹可被除乳糖、D一 甘 露糖 外 的 7种糖 抑 制；三 疣梭 子 蟹 可 被 乳 糖、D一甘 露 糖、D一果 糖、D一半 乳 糖 和 D一葡 萄 糖等 5种糖抑制；罗 氏沼虾可被 D一葡萄糖、D一树胶醛糖、木糖、蔗糖等 4种糖抑制；脊条褶 虾蛄 可 被 D一果 糖、D一树 胶 醛糖、木 糖、山梨 醇 等 4种糖 抑 制；远 洋梭 子 蟹 可被 D一半 乳 糖、D 一葡萄糖、D一树胶醛糖、山梨醇等 4种糖抑制；南美 白对 虾可被乳糖、D一半乳糖 和 D一葡萄 糖 等 3种糖 抑制；日本 沼 虾可 被 D一树胶 醛 糖、木 糖、山梨醇 等 3种 糖 抑制；斑纹 蝇 可 被 D一树 胶醛糖、木糖等 2种糖抑制；锯缘青蟹可被 D一半乳糖、D一葡萄糖等 2种糖 抑制；日本对虾只 被 D一果糖 抑 制 表 5糖对 甲壳动物 血清凝集斜 生栅藻细胞 的影响 注：“一”表示在 2 0 0 mmo 1 L 以 内不表 现抑制作 用 维普资讯 http:/ 第 6期 戴聪杰等：甲壳动物血清中凝集素 的凝集作用及影响因素 8 1 对血清中凝集素产生抑制作用的糖被认为其结构互补于凝集素结合部位结构，从 而可确 定 出凝集素结合部位对糖 的特异性 另一方面，凝集素对动物红细胞 的凝集 可看作是这些 细 胞表面的多糖或糖蛋 白的识别性结合，这在无 脊椎动物的免疫 中起重要作 用 H 糖 抑制试验 的这些结果可为这些甲壳动物凝集 素的分离和纯化时 亲和层析柱 的选择 提供 基础 资料 和科 学依据 参 考 文 献：1 徐海圣，徐 步进 甲壳动物 细胞及体液 免疫机理 的研究进 展 J 大连水产院 学报 2 0 0 1 1 6(1)：4 9 5 6 2 Ha l l J L，R o wl a n d s D THe t e r o g e n e i t y o f l o b s t e r a g g l u t i n i n s I P u r if i c a t i o n a n d p h y s i och e mi c a l c h a r a c t e r i z a t i o n J B io c h e mi s t r y，1 9 7 4，1 3(4)；8 2 1 8 2 7 3 Ha l l J L，R o wl a n d s D TH e t e r o g e n e i t y o f l o b s t e r a g g l u t i n i n s S p e c i f i c i t y o f a g g l u t i n i ne r y t h r ocy t e b i n d i n g J B i och e mis t r y 1 9 7 4，1 3(4)；8 2 8 8 3 2 4 L a c k i e A M I n v e r t e b r a t e i mmu n i t y J P a r a s i o l o g y 1 9 8 0，(8 O)；3 9 3 4 1 2 5 陈竞 春 石安静 贝类免疫生物 学研究概 况 J 水生生物 学报，1 9 9 6，2 0(1)：7 4 7 8 6 戴 聪杰，陈寅 山 福建 1 0种 甲壳动物 凝集素 的研 究 J 泉州师范学 院学报，2 0 0 2 2 0(2)：8 9 9 4 7 3 吴 兰如，徐元，黄全荣，等 海 洋生物 中选择 素的筛选 J 海洋药物 杂志，1 9 8 3 (3)：1 4 5 1 4 6 8 余萍，黄德棋 颜 志森，等 从 1 6 种 蔬菜 中筛选凝集素 的研 究 J 福建 师范大学学报，1 9 8 9，5(3)：8 O 一8 3 9 3 黄德棋，余萍，朱闽 等 花椰 菜凝集素 的细胞 凝集和糖抑 制作 用的研 究 J 福 建师范 大学学 报 t 1 9 9 2 8(2)：7 2 7 7 1 o 王 先酉，李明，张凤英 苍耳 子凝集素 的分 离纯化和某些性 质研 究 J 衡阳医学 院学报，1 9 9 8，2 6(1)：3 7 4 0 1 1 K H o r i，T Og a t a，H Ka mi y a，e t a 1 L e c t i nl i k e c o mp o u n d s a n d l e c t i n r e c e p t o r s i n ma r i n e a l g a e；h e ma g g l u t in a t i o n a n d r e a c t i v i t y wi t h p u r i f ie d l e c t i n s J J o u r n a l o f P h y c o l o g y 1 9 9 6，(3 2)；7 8 3-7 9 0 1 2 1 3 1 4 中山大学生物 系，南 京大学生物 系 植物学 统、分类部分)M 北 京：人 民教育 出版社，1 9 7 8 1 5 4 7 胡新 平 李智恩，徐 祖洪 海藻凝 集素研究进展 J 海洋 科学，2 0 0 0，2 4(8)；3 4 3 7 曹广力，朱越雄 薛 仁字，等 中华绒螫 蟹血清 中外源凝 集素的凝集作 用影响 因素 J 水产 养殖，1 9 9 9 (5)：1 6 1 8 Ag g l ut i na t i 0 n a nd Ef f e c t i v e El e m e n t s o f Le c t i ns f r o m t he Se r u m s o f Cr u s t a c e a n DAI C o n g-j i e ，CHE N Yi n s h a n。(1 Bi o l o g y De p a r t me n t，Qu a n z h o u No r ma l Co l l e g e，Fu j i a n 3 6 2 0 0 0，C hi n a；2 B i o e n g i n e e r i n g Co l l e g e，Fu j i a n No r ma l Un i v e r s i t y，Fu z h o u 3 5 0 0 0 7 Ch i n a)Ab s t r a c t：Twe l v e s p e c i e s of c r us t a c e a n a r e de t e c t e d f or h e m a g gl ut i n a t i on wi t h e i ght ki n d o f U n i c e l l u l a r a l g a e I t s h o ws t h a t s e r u ms e x t r a c t e d f r o m t we l v e s p e c i e s o f c r u s t a c e a n a r e a b l e t o a ggl u t i na t e a t l e a s t mor e t ha n t hr e e s i ngl e-c e l l a l ga ea nd t h e s e ns i t i vi t y of Sc e n e de s m u s o b l i q u us t t o t he l e c t i ns o f c r us t a c e a n i S h i ghe s t I t c a n be a ggl ut i na t e d by t w e l v e d e t e c t e d s e r ums Be s i de s，gl yc o i nhi bi t i ng a c t i on，i nf l ue nc e of t e m p e r a t ur e，PH a nd Ca +t o t he fi E t i vi t y of l e c t i ns a r e t e s t e d The r e s ul t s s how t ha t t he a c t i vi t y o f e v e r y c r u s t a c e a n l e c t i n a g g l u t i n a t i n g o n t h e c e l l o f S Oi S i n h i b i t e d b y o n e o r mo r e k i n d s o f s a c c h a r i d e s t h e a g g l u t i n a t i v e a c t i v i t y o f 1 2 c r u s t a c e a n o n t h e e e l l o f S 0i S d i f f e r e n t i n P H r a n g o f 4 O 1 O0 a nd t e mp e r a t u r e r a n g o f 4 9 O，b u t t h e i r a g g l u t i n a t i v e a c t i v i t y i s i n h i b i t e d b y EDTA Ke y wo r ds：c r us t a c e a n；l e c t i ns；a l ga e；e f f e c t i v e e l e m e n t s 一 维普资讯 http:/