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【实验】DNA片段的扩增和琼脂糖凝胶电泳检测.docx

上传人:仙人****88 文档编号:5634221 上传时间:2024-11-15 格式:DOCX 页数:2 大小:42.68KB 下载积分:10 金币
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《保护“东方宝石”家族——PCR技术的应用》学案 一、 资料分析 资料1:朱鹮为雄雌同形同色的鸟类,成鸟全身羽色以白色为基调,但上下体的羽干以及飞羽略沾淡淡的粉红色。 资料2:鸟类的性染色体上存在着一条假基因序列EE0.6,该基因属于基因家族在进化过程中形成的无功能的残留物,W染色体上的 EE0.6 基因序列存在着特异性。 资料3:鸟类的CHD基因(编码染色体螺旋DNA结合蛋白)在Z、W染色体上存在着序列长度的差异,Z染色体上该基因序列较长,而W染色体上该基因序列较短。 资料4:朱鹮鸟幼雏在自然环境中成活率低下,甚至出现胚胎致死的现象。研究者发现朱鹮鸟易的近亲繁殖现象是导致朱鹮繁殖成功率低下的重要原因。 资料5:微卫星DNA是一段2-6个核苷酸为单元的重复序列,如···GTGTGTGT….···,可用(GT)n代表,n代表重复出现的次数。 每个个体同源染色体上的两个重复次数越接近,则亲缘关系就更近。因此,可采用以下T17、T13、D19、D01、D16、D17、D327个微卫星位点判断鸟类的亲缘关系。 表1:同源染色体上微卫星的重复次数 个体 位点 T17 T13 D19 D01 D16 D17 D32 个体1,雄 220/240 205/234 197/221 80/84 100/110 124/132 166/174 个体2,雌 220/240 205/217 197/221 80/90 100/110 124/132 166/174 个体3,雄 148/148 190/217 193/221 75/84 90/100 124/132 148/156 个体4,雌 244/244 217/234 197/221 75/90 100/104 132/148 144/156 个体5,雌 220/244 205/217 197/221 75/90 100/110 132/148 160/166 个体6,雄 244/224 205/217 197/221 75/90 100/110 132/148 148/160 个体7,雄 244/244 217/234 197/221 75/90 104/116 132/148 144/160 注:如T17位点“220/240”,代表T17位点在一对同源染色体上重复了“220次”和“240次”。 表2:下表是7只朱鹮鸟的雌雄配对情况,请你在空格处填写出该对朱鹮鸟不同的微卫星位点个数。 个体1,雄 个体2,雌 个体3,雄 个体4,雌 个体5,雌 个体6,雄 个体7,雄 个体1,雄 —— —— —— —— —— 个体2,雌 —— —— —— 个体3,雄 —— —— —— —— 个体4,雌 —— —— —— 个体5,雌 —— —— —— 个体6,雄 —— —— —— —— 个体7,雄 —— —— —— —— 二、实验设计 (一)实验目的:鉴定仅存的7只朱鹮鸟性别 (二)选择生物样本:请你从血液、羽毛、脚垫、肌肉这4个生物样本中选择出适合做本研究的一项。 (三)实验仪器及材料: 离心管、移液枪、枪头、PCR扩增仪及反应体系、电泳仪及反应体系等。 (四)设计实验步骤: 1. 2. 3. 4. 5. (五)记录实验结果: 图1电泳条带结果 表3:实验结果记录 个体编号 1 2 3 4 5 6 7 性别 (六)分析结果,得出结论:
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