微生物标本的采集和运送基本原则.doc

一、盂县中医医院院微生物标本的采集和运 送基本原则1发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于70。2尽量在抗菌药物使用前采集标本。3标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。4标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。5以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子等，应标明标本种类，并立即送检。6盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。中段尿培养的标本应用专用的无菌尿标留取（在仓库领取）。静脉导管、胸腹水，脑脊液等到细菌室取无菌试管留取。7送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。二、常见医院微生物标本采集送检方法1血液与骨髓 通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采取血标本。 采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养基前，应更换针头或过火消毒针头。血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保存。 每次采血量成人5一10ml，婴幼儿l一5ml，培养基与血液之比以 10：1-5：1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。 怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次用药前采血。 每例病人至少采血两次，间隔0.5-lh，以利于提高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。多次多部位采血可提高阳性率。 对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lml作增菌培养。2尿液 中段尿：女性采样前应先用肥皂水或01高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻转包皮冲洗，用0.1新洁尔灭消毒尿道口灭菌纱布擦干后收集标本10ml，0.5小时内送检。 导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解开接口，弃去导尿管前段尿液、留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。 尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难，或培养结果与病情不符时，可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。 送检标本以早晨第一次尿液为佳。 室温下尿标本耽搁稍久，可致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不能立即送检者，可暂存4冰箱。3痰液 咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用45的l0氯化钠溶液雾化吸入导痰。 对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道插至肺支气管水平吸引痰液。 对重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染，可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采集无口咽部菌群污染的痰液，进行感染病原学诊断。 痰标本不能及时送检者，可暂存4冰箱。如果室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌可呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感杆菌检出率则明显下降。4伤口、烧伤创面与脓液 用无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用无菌棉拭取病灶深部的脓液和分泌物，立即置无菌试管内送检。 对未破损的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检：也可于切开排脓时用无菌棉拭子采样。5粪便 排便后，挑取有脓血、粘液部分的粪便约23g(液状粪便则取絮状物)，盛于灭菌广口瓶或蜡纸盒送检。用棉拭子挑取粪便插入CnryBLair运送培养基或PH7.0的磷酸盐甘油中送检，可提高病原菌检出率 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用直肠拭于(又称肛拭)采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润，然后插入肛门约45cm(幼儿约23cm)处，轻轻旋转擦取直肠表面粘液后退出置运送培养基内送检。6咽拭、口腔拭子 病人清水嗽口后由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧，反复擦拭数次，插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液。 对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭子在病灶部位擦拭数次即可。7浆膜腔积液、脑脊液 浆膜腔积液包括胸水、腹水、心包液、关节液和鞘膜液等以严格无菌操作抽取数毫升液体置无菌试管或小瓶送检。对易自凝的标本可添加抗凝剂（抗凝剂需无菌）。 严格无菌操作下采取脑脊液数毫升置于无菌试管。标本采集后应立即送检，以防细菌死亡。疑似有脑膜炎奈瑟菌时，应注意保暖，不可置冰箱保存。8生殖道标本 根据不同感染种类和病变特征采集不同的标本。采集尿道标本时，应先用生理盐水局部清洗，以无菌棉拭子插入尿道口 l一2cm停留十余秒钟。轻轻旋转拭子后退出 对外阴部糜烂、溃疡者，经生理盐水清洗后用棉拭子擦取病灶边缘的分泌物。 阴道和官颈口分泌物须在窥阴器下用长棉拭子采集。 子宫内分泌物需用无菌导管抽取导管外套一层保护膜，插入子宫后再刺穿该膜予负压吸引，可减少阴道菌群污染。 女性盆腔脓肿，应在阴道局部消毒后，由直肠子宫凹陷处进针抽取。 前列腺液需进行前列腺按摩获取。9组织标本 表浅的感染组织和各种窦道标本可用棉签擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手术切除。对窦道和痰管应深部刮取管壁组织。 深部组织标本可经皮肤穿刺采集或手术切取。标本置无菌容器并加少量无菌生理盐水以保湿度，或置肉汤增菌液，或置血平皿送检。 尸检标本应于死后20h内采取，以防肠道等菌群侵入引起污染。 作病原体分离的组织标本，不可用福尔马林固定。疑有污染的较大组织块，可用烧红的烙铁烧灼其表面或置沸水中510秒钟使表面变白消除污染后，再用无菌器械切开组织，取中央部位组织送检。10.静脉导管从病人体内拔出静脉插管，用无菌技术剪取5cm长导管尖端。不能作床旁接种者，导管置含有少量生理盐水的无菌试管内立即送检。实验室接到标本后马上把导管置于血平皿上作滚动涂布接种，也可将剪下的导管置肉汤增菌液或置于血培养液内，但不能区分导管感染菌与少量的定植菌。三内毒素检查1、标本采集【标本采集前注意事项】不需特殊准备，最好空腹采血。周一至周五上午10点半之前送检。节假日不检测。【标本类型】 血浆（肝素抗凝）、脑脊液、胸水、腹水【标本容器】无热源试管（血液和胸、腹水需肝素抗凝），用时到检验科四楼细菌室领取，原则上不备管。【样本条码粘贴要求】打印清晰的条码纵向粘贴在试管上，上下均应留有空间，具体以覆盖住原标签为准。病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码帖上涂写，保持条码的完整和清晰。【标本采集方法】血液标本：以无菌方法采取患者空腹静脉血液约2ml，注入肝素抗凝无热源试管，充分混匀，避免凝集。脑脊液、胸水、腹水：以无菌方法留取相应标本，于无热源试管中。胸、腹水置于肝素抗凝管。尿液：因尿液标本在留取时易污染，暂不做尿液标本，除非为穿刺尿标本。【标本的送检地点】检验科微生物室（裙楼4楼）。三、临床意义健康人群生物参考区间: 10 pg/ml以下。1 革兰氏阴性菌败血症的诊断。2 能引起细菌和毒素入血的局部感染，如呼吸道感染，脑膜炎、髓膜炎、消化道、肾脏及腹腔感染等疾病时，血中内毒素水平也与临床具有较好的一致性。3 尿道感染：尿道感染大部分由革兰氏阴性菌引起，因此检测尿液中的内毒素水平可快速准确的对病人作出诊断，及时治疗。4 肠源性内毒素血症:肝脏疾病和急性坏死性胰腺炎时可引起肠源性内毒素血症。四、1-3-D-葡聚糖检查【标本采集前注意事项】不需特殊准备，最好空腹采血。周一至周五上午10点半之前送检。节假日不检测。【标本类型】 血浆（肝素抗凝）、脑脊液、胸水、腹水【标本容器】真空采血管（血液和胸、腹水需肝素抗凝）【样本条码粘贴要求】打印清晰的条码纵向粘贴在试管上，上下均应留有空间，具体以覆盖住原标签为准。病人的姓名端向上，条码区的任何区域不得被覆盖，注意不要在条码帖上涂写，保持条码的完整和清晰。【标本采集】血液标本：以无菌方法采取患者空腹静脉血液约2ml，注入肝素抗凝试管（黑盖或绿盖），充分混匀，避免凝集。脑脊液、胸水、腹水：以无菌方法留取相应标本于无菌试管中。胸、腹水应用肝素抗凝。尿液：无菌方法留取中段尿标本，避免阴道分泌物的污染。【血液标本的送检地点】检验科微生物室（裙楼4楼）。三、临床意义健康人群生物参考区间: 10 pg/ml以下。