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Breeze 2 系统现场培训教材系统现场培训教材 目录目录BREEZE 软件软件.1 1登录.1 2项目管理.2 2.1.新建项目.2 2.2.项目切换.4 2.3.项目的备份与还原.4 3数据的采集.10 3.1.建立方法组.10 3.2.数据的采集.17 4数据的处理.21 4.1.利用向导建立处理方法.21 4.2.修改样品信息.26 4.3.定量计算.28 5数据的打印.29 附录附录I GPC 数据处理数据处理.33 1.使用窄分布标样校正系统.33 1.1.输入窄分布标样的分子量.33 1.2.建立处理参数.34 1.3.处理窄分布标样.40 2.处理宽分布未知样.43 2.1准备处理未知样.43 2.2设置宽分布标样的积分参数.45 2.3处理其余的宽分布未知物.49 2.4保存未知样的结果.50 3.打印数据.50 附录附录II BREEZE 系统故障排除系统故障排除.52 1常规故障排除提示.52 2何时联系 WATERS 技术服务部门.52 3排除色谱系统故障.53 4硬件问题故障排除.56 4.1.一般硬件问题故障排除.56 4.2.紫外检测器的一般故障排除.56 4.32707 自动进样器故障排除.57 Breeze 2 软件现场培训教材 Breeze 软件软件 1 登录登录Breeze鼠标左键双击快捷图标，出现如下画面，输入用户名。默认的用户名为Breeze。Breeze在随后出现的画面中，选择需要使用的项目与系统，点击确定。进入软件。需要时，可以通过查看帮助得到详细信息。第 1 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2项目管理项目管理 2.1.新建项目新建项目Breeze 2 软件中的项目是方法、结果、和原始数据的集合，由用户定义。该集合驻留在软件数据库中并可以通过切换不同的项目而显示其内容。建立项目是为了方便用户归类、管理和检索相应的数据，所以需根据实际情况来决定是否建立，而并不是每次开机都要创建。如果需要创建项目，请在登录Breeze 软件后，在-”。菜单中选择“管理 项目“Defaults”出现如下对话框，在下拉菜单中选择。点击下一步。第 2 页 Breeze 2 软件现场培训教材 输入项目名称，点击下一步。必要时输入项目注释。新项目创建完毕，出现在项目列表中。第 3 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2.2.项目切换项目切换Breeze-/”，在窗口菜单中，选择“管理 改变系统 项目 出现“改变项目/系统”窗口：在项目列表中选择需要进入的项目，然后单击确定，即可进入所选的项目中进行数据的采集与浏览处理等操作。如果 Breeze 2 软件中存在有已经设置好的多个系统，也可以通过“改变项目/系统”窗口，选择其他的系统名称而进切换。2.3.项目的备份与还原项目的备份与还原2.3.1项目的备份项目的备份Breeze-在菜单中，选择“管理 项目”，出现项目列表。在项目列表中选中需要备份的项目，然后在窗口下方选择“备份项目”，第 4 页 Breeze 2 软件现场培训教材 出现备份项目向导：Backup Comments在备份注释（）中填入注释（这是必须的），然后单击下一步。出现如下画面：第 5 页 Breeze 2 软件现场培训教材 Browse通过浏览（）按钮，选择保存备份项目的路径（如果备份到特定的文件夹，需要事先建好文件夹），然后单击“下一步”。随即开始进行项目的备份，第 6 页 Breeze 2 软件现场培训教材 直至“下一步”按键从灰色变为可选后，单击“下一步”，在下一画面中单击“完成”结束项目的备份。Breeze 2 注意：在卸载或重装注意：在卸载或重装软件之前，请确认已经将相关的项目数据进行了正确的备份操作，以确保数据的安全与完整。软件之前，请确认已经将相关的项目数据进行了正确的备份操作，以确保数据的安全与完整。为了为了保障数据的安全性保障数据的安全性，建议建议使用者使用者周期性周期性地进行地进行。项目备份项目备份 第 7 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2.3.2 项目的还原项目的还原 Breeze-在菜单中，选择“管理 项目”，出现项目列表。在窗口下方选择“还原项目”，出现还原项目向导。需通过“浏览”选择备份项目保存的路径，然后单击“下一步”。出现如下对话框：第 8 页 Breeze 2 软件现场培训教材 在“项目名”中输入对应的项目名称，然后单击“下一步”，进行项目的还原，直至“完成”按键变亮。第 9 页 Breeze 2 软件现场培训教材 “完成”（Finish）单击。还原的项目会出现在项目列表中。3数据的采集数据的采集3.1.建立方法组建立方法组 Breeze 2在软件中，必须在建立了适当的方法组后，才能采集数据。方法组是用户定义的方法和数据通道的集合。方法组可以包括：“”用于采集数据以收集数据的仪器方法（只运行 模式）?“”用于收集并处理数据的仪器和处理方法（运行并处理 模式）?“”用于收集、处理并报告数据的仪器、处理和报告方法（运行并报告 模式）?ASCII AIA 用于导出数据的或数据文件的导出方法?如果仅需要采集数据，而不需要在采集的同时进行数据处理与打印，可只设定方法组中的仪器方法，而不需要指定处理方法、报告方法与导出方法。“Breeze 在软件的采集栏中，选择调用方法组编辑器向导”，出现如下画面：第 10 页 Breeze 2 软件现场培训教材 如果已经建有合适的仪器方法，可以从下拉菜单中直接进行选择。如果尚未有合适的仪器方法，请单击“新建”按钮进行创建。本教材将演示怎样创建一个全新的仪器方法。仪器方法的具体参数由不同的仪器组成以及特定的实验需要所决定。大多数情况下，如果您不能确定正确的参数，请接受默认的设置。需要分别针对泵，检测器、或柱温箱（选件）和自动进样器（选件）设置对应的参数。下图中为泵的参数的设置页面。在泵参数设置页面：第 11 页 Breeze 2 软件现场培训教材 高压限制：请根据所使用的色谱柱的说明书来确定泵的高压限制。如果运行时系统压力超过了高压限制，泵会自动停止运行，从而起到保护色谱柱的作用。低压限度：一般设置为 0。泵模式：如果是梯度方法，请从泵模式的下拉菜中选择“梯度”并按需要填写梯度表。流速：请根据实际操作的流动相的比例以及流速。注意，等度流速 C 栏内不要填写流速，请保持为 0.00。梯度表：请根据实际操作的流动相的比例以及流速。梯度曲线设置请参考下图，如果采用的是线性梯度或无法确定梯度曲线的类型，请选择“6”号梯度曲线。梯度组成 时间 请注意：如果您不能确定具体的选项，请保持默认的参数不变。请注意：如果您不能确定具体的选项，请保持默认的参数不变。2489下图中为典型的紫外检测器（）的设置画面：第 12 页 Breeze 2 软件现场培训教材 ，主要参数的含义：在紫外检测器的设置页面中灯开启：请务必保证“灯开启”的选项是被选中的，波长模式：请根据试验需要选择波长模式是“双”还是“单”。如果选择了“双”模式，需要在随之出现的“通道B”中输入特定的参数。请注意，2489 紫外检测器如果开启了双波长模式，需要设置二个不同的检测波长。波长：请根据试验要求输入特定的检测波长采样速率：一般可以设置为 1 点/秒。如果色谱峰形极其尖锐，必要时可以将采样速率设置为25或者。请注意：其他的选项，如果您不能确定具体含义，请保持默认的参数不变。请注意：其他的选项，如果您不能确定具体含义，请保持默认的参数不变。此外，无需设置模拟输出 1 或者模拟输出 2 里的参数。当使用 Breeze 2 软件进行数据采集时，模拟输出的任何设置都是无效的。如果需要了解关于 2489 紫外检测器更详细的参数含义，请点击获取帮助。下图中为典型的 2414 示差检测器（在 Breeze 2 软件中识别为 W410）参数设置页面：第 13 页 Breeze 2 软件现场培训教材 请根据样品响应的强弱，决定灵敏性（sensitivity）的数值。如果样品均为负峰，可以将“极性”选项设置为“-”，以便将色谱峰翻转为易于积分的正峰。如不能确定，请保持其它参数的设置为默认值。2414 示差检测器的温度设置页面：第 14 页 Breeze 2 软件现场培训教材 在温度设置页面中，请设置示差检测器的内温（检测池温度）与外部加热器的温度（柱温箱，如果有）。示差检测器是温度敏感型的检测器，因此，请在实验过程中保证内温与外温的恒定。具体的温度值请参照特定的方法要求或者特定色谱柱的使用说明而选择，如无特定要求，请设置为 30-40，或者至少高于室温 5。等到所有的参数设置都已经完成，可以从菜单中选择“文件-保存”或者“文件-另存为”，输入仪器方法名称，进行保存。然后返回方法组编辑画面，在方法的下拉菜单中选择刚才建立好的仪器方法，并点击“下一步”按钮。第 15 页 Breeze 2 软件现场培训教材 在以下的画面中接受默认的选项，然后点击下一步。输入方法组名称，并单击“完成”，保存方法组。第 16 页 Breeze 2 软件现场培训教材 3.2.数据的采集数据的采集 3.2.1 平衡系统平衡系统（Equilibrate）单击左下角的平衡图标，设定平衡/系统监视器（Equilibrate System）出现对话框：/在下拉菜单中选择适当的仪器方法，然后单击“平衡 监视器”键，平衡系统。在右下角的监视框中，可以查看基线的变化。也可以在菜单栏中选择“控制面板”按钮，查看基线的大图。第 17 页 Breeze 2 软件现场培训教材 退出平衡系统状态。一旦基线平衡后，即可单击3.2.2 单针进样单针进样“”可以单击左下角的图标，出现以下 单针进样参数 对话框：在方法组下拉菜单中，可以选择指定的方法组（包含指定的仪器方法），在样品名、运行第 18 页 Breeze 2 软件现场培训教材 图标终止参数设定完毕后，即可单击“进样”键开始进样。也可以通过时间等数据的采集。60min提示：如果不知道确切的运行时间，第一次运行时间应设长一些，如填，进样确认后，进第二针时再改回适合的时间Breeze 2，以确保数据采集的有效性。软件支持提前中止数据的采集，中止采集不会造成数据的丢失。Breeze 2 提示：因不同的功能决定数据的类型，进而对应不同的数据处理方式，故请使用GPC软件进行数据采集与分析的用户选择“窄分布”或“宽分布”的标准样或未知样的功能。而使用Breeze 2 HPLC 软件进行数据采集与分析的用户则请选用“进标准样”或“进样”的功能。提示：如果是手动进样器，要注意采样界面下方的系统状态条显示为等待进样等待进样时，才可以扳动手动进样阀开始进样。2707注意：使用注意：使用自动进样器运行样品之前，需要定义样品板。自动进样器运行样品之前，需要定义样品板。3.2.3 样品组进样样品组进样 1选择样品队列图标，进入样品组进样工作区。2.号（Plate/Well）”“进样体积”、“在样品表单中，逐行填写“样品瓶进样数”、“样品名称”、“功能”以及“方法组”与“运行时间”后（其它可以暂时忽略不填或者接受默认值），即可点击图标，开始样品序列的数据采集。Breeze 2 提示：因不同的功能决定数据的类型，进而对应不同的数据处理方式，故请使用GPC软件进行数据采集与分析的用户选择“窄分布”或“宽分布”的标准样或未知样的功能。而使用Breeze 2 HPLC 软件进行数据采集与分析的用户则请选用“进标准样”或“进样”的功能。2707 注意：使用注意：使用自动进样器运行样品组之前，需要定义样品板。自动进样器运行样品组之前，需要定义样品板。第 19 页 Breeze 2 软件现场培训教材 3.“”一旦点击图标后，会出现如下 样品组 对话框：第 20 页 Breeze 2 软件现场培训教材 “”在对话框中写入样品组的名称，然后点击 运行，即可运行样品组。4.如果运行中需要终止样品组的运行，可点击图标，终止运行。4 数据的处理数据的处理4.1.利用向导建立处理方法利用向导建立处理方法查询数据工作区里1在中选中要处理的样品通道（Channels），单击Review（，查看）图标，打开数据。2.Processing Method Wizard单击（处理方法向导，）图标，出现对话框：第 21 页 Breeze 2 软件现场培训教材 3.Start New Processing Method“”选择新建处理方法（）。然后单击 确定。4.-IntegrationIntegration Region在积分 积分区域（）页面中，“在空格中输入，或者在示意图上用鼠标左键拖拽来选择积分的起止时间，然后单击”下一步。5.Peak Width and Threshold出现峰宽及阈值（）页面，第 22 页 Breeze 2 软件现场培训教材 接受默认的数值，不作改动，单击“下一步”。6.Peak Rejection/在剔除峰（）页中，根据需要设定最小面积和 或者最小峰高（也可不设），然后单击“下一步”。-CalibrationGeneralArea7.在校正 普通（）页中，选择定量的方式：面积（），校正曲线的拟合方式：线性（Linear）。然后单击下一步。第 23 页 Breeze 2 软件现场培训教材 8.“”“在名称和保留时间页面的 名称栏中编辑组分名称（注意，此处的名称必须与在改变样品”中所输入的名称一致）。然后单击“下一步”。9.在缺省量页面中，不作任何改动，单击下一步。第 24 页 Breeze 2 软件现场培训教材 10.在“内标样”页面中，type of Calibration），如为外标法外标法，选外标校正（选择校正的类型（External Standard CalibrationSingle Internal Standard），内标法内标法选择单一内标法（）并在随之出现的下拉菜单中选择内标峰，然后单击“下一步”。11.Method Name出现处理方法名（）页面，第 25 页 Breeze 2 软件现场培训教材 输入方法名称，单击“完成”，结束建立处理方法的过程。(Save all)12.如果此过程后，又对处理方法进行了修改，可单击保存全部进行保存。4.2.修改样品信息修改样品信息1.Find Data。在查询数据（）中，选中标样“Alter Sample（单击右键，出现快捷菜单，选择修改样品）”，或者单击工具栏中的（修改样品）出现修改样品窗口。第 26 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2.单击窗口中量，AmountComponents Editor（）图标，出现组分编辑器（）。ComponentsAmount在该窗口中编辑样品的各个组分的名称（），量（），必要时，输入单位（Units），然后关闭窗口。3.单击Save）保存改变后，关闭修改样品对话框。完成对样品信息的修改。（保存，第 27 页 Breeze 2 软件现场培训教材 4.3.定量计算定量计算查询数据（1 Find DataChannel 回到）的通道（）选项卡。用鼠标选择标样以及未知样品（注意一定要先选择标样，再选择未知样），然后单击右键出现快捷菜单，选择：“Process（处理）”。出现如下窗口：Use specified method在“处理”中，选“使用指定的处理方法”（），并在下拉菜单中选择刚才利用向导建立的方法。单击“确定”。“2 Results到“结果”（）选项卡中，单击更新”键刷新结果。3.Review 选中欲浏览的结果，单击（查看，），出现查看主窗口。第 28 页 Breeze 2 软件现场培训教材 Amount在色谱图下方的峰表中，含量（）栏中，即可看到定量的结果。4.Calibration Curve单击工作栏中的（校正曲线，），打开校正曲线窗口。窗口的上部为曲线的方程等内容。可通过下拉菜单查看不同组分的相关信息。5 数据的打印数据的打印1.在结果选项卡中选择欲打印的结果，单击（预览报告）。出现“打开报告方法”第 29 页 Breeze 2 软件现场培训教材 “可以选择选择 使用对选中的数据适用的报告方法（Use a Report Method that was generated to appropriate for the selected data”“”），或者在 使用以下的报告方法Use the following Report Method（）下拉菜单中选择适当的报告方法（例如详细单个报告），然后单击“”确定。2.预览无误后，可单击，进行打印。第 30 页 Breeze 2 软件现场培训教材 第 31 页 Breeze 2 软件现场培训教材 附录附录附录I GPC 数据处理数据处理.33 1.使用窄分布标样校正系统.33 1.1.输入窄分布标样的分子量.33 1.2.建立处理参数.34 1.3.处理窄分布标样.40 2.处理宽分布未知样.43 2.1.准备处理未知样.43 2.2设置宽分布标样的积分参数.45 2.3处理其余的宽分布未知物.49 2.4保存未知样的结果.50 3.打印数据.50 附录附录II BREEZE 系统故障排除系统故障排除.52 1常规故障排除提示.52 2何时联系 WATERS 技术服务部门.52 3排除色谱系统故障.53 4硬件问题故障排除.56 4.1一般硬件问题故障排除.56 4.2.紫外检测器的一般故障排除.56 4.32707 自动进样器故障排除.57 第 32 页 Breeze 2 软件现场培训教材 附录附录I GPC 数据处理数据处理 1.使用窄分布标样校正系统使用窄分布标样校正系统 1.1.输入窄分布标样的分子量输入窄分布标样的分子量 MWs输入窄分布标样的分子量（）Find Data1 击命令栏中的（查询数据）。查询数据页面会显示当前项目的数据。Sample Set2 如果是以样品组的方式进样，请点击（样品组）表，然后右键点击对应的样品组以选中之。选择View AsChannel（查看相关），打开样品组的（通道）表。3 Channel 如果是以单针进样的方式采集数据，请直接选择（通道）表。4 选择窄分布标样。Alter Sample(5)点击修改样品，修改样品对话框中出现选中的通道。Components6 选择第一行，然后点击（组分），出现组分编辑器。如未选中，点击Current （当前）表。第 33 页 Breeze 2 软件现场培训教材 注意：如果已经输入，窄分布标样的分子量将出现在组分编辑器中。7 检查当前的样品瓶号并核实，输入分子量。如果分子量已输入，需要时可以进行改动。当前样品输入结束后，点击Next（下一个）。8 7 重复步骤 直至所有窄分布标样的分子量输入完毕。9 OK 点击，保存改动并关闭组分编辑器。10SaveExit（保存），然后（退出），退出修改样品对话框。1.2.建立处理参数建立处理参数 Processing Parameters Wizard可以通过使用（处理方法向导）建立处理参数。1.2.1.确定确定V0和和VtBreeze 2 V0 GPC Vt软件使用表示系统中色谱柱组的排除体积，表示总保留体积。V0 Vt 和可用于扩展校正曲线的有效范围。使用处理方法向导建立处理参数时，需指定V0 Vt和的值。300mm7.8mm1ml/minV0 对于一根典型的的柱，在流速为时，每根柱的值为5.56.0ml 至。VtV0的值大约是的二倍。可以在色谱图中检测到的最后一个杂质峰的保留时间基础上决定Vt 值。第 34 页 Breeze 2 软件现场培训教材 V0Vt注：根据不同的系统，可能需要使用其它的方法来确定和，更多的信息请参见Breeze 2 HelpDeterming V0 and Vt for your Column Set中的。1.2.2.设置处理参数设置处理参数 使用处理方法向导设置处理参数：Find Data1 Find Data点击命令栏中的（查询数据），打开工作区。2 Channels 单击（通道），然后选择窄分布标样通道。3 View DataChannles 单击命令栏中的，必要时单击（通道）表。选中的通道出现在通道表中。（处理方法向导），打开处理方法向导对话框。4 点击第 35 页 Breeze 2 软件现场培训教材 5 创建新的积分参数a.Start New Processing Parameters选中新建处理方法（），然后单击确定（OK）。IntegrationIntegration Region积分区域页面出现。IntegrationIntegration Region 6d如果积分区域页面（上图）出现，进入步骤。b.Start End在（开始）及（结束）框中输入数值。也可以在需要积分的区域附近通过拖拽鼠标进行选定。选定的区域将被放大。第 36 页 Breeze 2 软件现场培训教材 c.NextIntegrationPeak Width and Threshold 单击（下一步），出现（峰宽和阈值）页面。Clear Peak Width and Threshold d.确保（清除峰宽和阈值）复选框没有选中，然后单击NextIntegrationPeak Rejection-（下一步）。出现（积分 剔出峰）页面。Minimum Area e.选择复选框，然后单击色谱图中面积最小的峰。Minimum Area95（最小峰面积）框中显示选中峰的面积值的。第 37 页 Breeze 2 软件现场培训教材 f.10为了排除峰面积小于或等于选中的标样峰的的峰，可以删除最小峰面积数值的最右面的一位，然后点击NextGPCCalibrationGPC-（下一步）。（校正）页面出现。6 GPC 确保选择了以下的校正参数：a.Type of calibration Relative（相对校正）b.Calibration fit type-基于采集数据的色谱柱组的情况而选择c.Flow Rate 基于采集数据的系统的流速 NextGPCColumn Set设置结束后，单击。（色谱柱组）页面出现。7 定义色谱柱组体积和方法名。a.V0Vt 根据采集数据的系统，输入和的值第 38 页 Breeze 2 软件现场培训教材 b.NextMethod Name 单击。出现（方法名称）页面。c.Method Name在（方法名称）文本框中命名方法，如果需要提供有关处理方法的额外的信息，可以在注释框中输入注释（选项）。Finishd.单击完成向导，保存新的处理参数，并使用新的处理参数处理当前的窄分布标样。积分和校正窄分布标样出现在Review 主窗口的色谱图中。第 39 页 Breeze 2 软件现场培训教材 10 Save All 单击（），保存全部。1.3.处理窄分布标样处理窄分布标样 1.3.1.查看窄分布标样查看窄分布标样 Find Data1 Find Data点击命令栏中的（查询数据），打开工作区。Sample Sets2 如果是以样品组的方式进样，请单击（样品组），然后选择要查看的样品组。右键单击快捷菜单中的View AsChannles（查看相关），然后选择。选中的通道出现在通道表中。3 Channels 如果是以单针进样的方式采集数据，请直接选择（通道）表。4 选择要查看的窄分布标样。View DataView Date5 点击（查看数据），在（查看数据）工作区内查看所选标样。6 FileOpen Method 在（文件）菜单中选择，打开已保存方法的对话框出现。7 Open 选择相应的方法，然后单击（打开）。窄分布标样出现。第 40 页 Breeze 2 软件现场培训教材 1.3.2.对窄分布标样积分并校正对窄分布标样积分并校正 Review 1 选择主工作区的通道表中的第一个通道。integrate2 单击（积分）。所选中的处理方法将被应用到第一个通道上，已积分的峰也在色谱图中出现。3 检查是否只有标样峰被积分，以及峰的积分是否适当。如峰的积分不当，单击积分参数，然后调整积分页面上的窄分布标样的积分参数。Narrow注：当调整窄分布标样参数时，确保选中了积分页面中的（窄）选项。Peak4 ReviewPeak单击（峰）页面（在主工作区的底部）以显示（峰）表格。Results 5 点击校正。色谱图被校正，峰和结果在（结果）表中出现。第 41 页 Breeze 2 软件现场培训教材 第一个分子量被归属于第一个峰，第二个分子量被归属到第二个峰，依此类推。6 单击（下一个通道）。下一个色谱图将出现。27 7 重复步骤 至 直到所有的窄分布标样被处理完毕。8 单击（保存全部）。10如果改变了处理参数，必须保存方法，并对改变方法前处理的所有标样进行重新积分和校正1.3.3.检查校正曲线检查校正曲线 1 单击（校正曲线）。出现校正曲线窗口。第 42 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2 检查校正曲线的形状以及曲线的点以确认每一点都落在校正曲线上。3 R 在校正状态区域，检查相关系数R以及校正曲线的标准差。4 在校正状态区域，检查是否有任何无效曲线的信息。5 对于在校正曲线的计算期间是否有处理的问题，可检查代码框。1.3.4.保存校正曲线保存校正曲线 FileSaveCalibration选择菜单中的（保存），然后选择（校正）。2.处理宽分布未知样处理宽分布未知样 2.1.准备处理未知样准备处理未知样 Find Data1 Find Data单击命令栏中的（查询数据）。（查询数据）工作区出现。2 Sample Set如果是以样品组的方式进样，请点击（样品组）表，然后右键点击对应的样品组以选中之。选择View AsChannels（查看相关），打开样品组的（通道）表。第 43 页 Breeze 2 软件现场培训教材 3 Channels 如果是以单针进样的方式采集数据，请直接选择（通道）表。4 选择宽分布未知样。5 单击（查看数据），查看工作区出现。6 FileOpen Processing Method 在（文件）菜单中选择（打开处理方法）。7 打开已存在的方法的对话框出现。第 44 页 Breeze 2 软件现场培训教材 8 Open 选择一直在使用的处理方法的名称，然后单击打开（）。2.2设置宽分布标样的积分参数设置宽分布标样的积分参数 处理方法向导。处理方法向导对话框出现。1.单击 2.Edit Exisiting Processing Parameters and Keep the Calibration点击（编辑现有的GPC OK 处理方法并保留校正），然后单击（确定）。第 45 页 Breeze 2 软件现场培训教材 3.StartEndNext在开始和结束框中输入恰当的时间，然后单击下一步。IntegrationPeak Width and Threshold （峰宽及阈值）页面出现。4.NextIntegrationPeak Rejection-不改变其它的参数并点击。（积分 剔除峰）页面出现。第 46 页 Breeze 2 软件现场培训教材 Minimum Area 5.选择（最小面积）复选框，然后单击色谱图中最小的峰。6.NextGPCCalibrationGPC 点击。（校正）页面出现。7.NextGPCColumn SetGPC 不改变校正参数当前的值并单击。（色谱柱组）页面出现。第 47 页 Breeze 2 软件现场培训教材 8.GPCV0VtNextMethod Name不改变色谱柱组参数和并单击。（方法名称）页面出现。FinishProcessing Parameters Wizard9.不改变方法名并单击（完成）以完成（处理方法向导），保存已更改的参数，应用到当前的宽分布未知样，并回到Review Main Window（查看主窗口）。第一个积分并定量的宽分布未知样出现在Review Main Window（查看主窗口）的色谱图中。第 48 页 Breeze 2 软件现场培训教材 10.单击保存全部。2.3处理其余的宽分布未知物处理其余的宽分布未知物 1 Peaks单击积分，然后单击定量。表会显示被积分峰的分子量均值。2注：如果需要，在浏览和保存结果前，可以对每一个宽分布未知样重复步骤。2 单击（结果）来查看更多的内容。Peak 3 单击表查看分子量平均值和其它的信息。第 49 页 Breeze 2 软件现场培训教材 2.4保存未知样的结果保存未知样的结果 GPC单击保存宽分布未知样的结果。注：如保存未知样的结果，应该首先保存处理参数和校正。如果保存结果的选项不可用，选择FileSaveCalibration菜单中的，然后来保存处理参数和校正的改变。3.打印数据打印数据 Find Data1 Find Data单击命令栏中的（查询数据）。（查看数据）工作区出现。Results2 在（结果）中找到处理好的数据，如果未看到对应的数据，请单击Update（更新）。3 在结果选项卡中选择欲打印的结果，单击（预览报告）。出现“打开报告方法”对话框。第 50 页 Breeze 2 软件现场培训教材 4“可以选择选择 使用对选中的数据适用的报告方法（Use a Report Method that was generated to appropriate for the selected data”“），或者在 使用以下的报告方法”Use the following Report Method（）下拉菜单中选择适当的报告方法（例如详细宽分布未知样相对），然后单击“”确定。5 可通过下拉菜单调整预览画面中报告的大小。预览无误后，可单击，将报告保存为，进行打印。或单击PDF 文件。第 51 页 Breeze 2 软件现场培训教材 II Breeze 附录附录系统故障排除系统故障排除 1常规故障排除提示常规故障排除提示 1）执行系统故障排除有六个基本步骤：a.后退并查看系统。首先检查简单的事情。是否有明显的问题导致了故障（例如，仪器电源插头是否未插入或连接不正确）？b.将系统当前的运行方式与出现故障前的运行方式进行比较。为帮助用户确定正常的运行状态：i.LC 记录系统（管路及电气连接）图。ii.做好日常记录。iii.定期运行色谱测试。b 步骤指出在系统正常运行期间跟踪系统参数和色谱结果的重要性。如果用户了解系统在正常运行时的典型状态，则故障排除会更容易。n psi 例如，如果系统在使用某种方法时，通常在状态下运行，可检查系统当前的压力是在同一范围内，还是明显地升高（可能由堵塞引起）或降低（可能由渗漏引起）？压力波动是否处在与正常运行时一致的范围内？在系统安装后，和每次开发新方法时，填写“正常运行检查表”以记录系统正常运行时的各种状态。3）按下列顺序确定不同于系统正常运行的故障现象：a.系统压力（高、低、不稳定）b.基线（液路相关或检测器电子相关）c.峰保留时间的变化（错误或改变超时）d.峰分辨率降低e.峰形异常（比预期小、宽、有拖尾等）f./定性定量结果不正确4）对于每个独立的故障现象，要列出所推测的原因。有关建议的故障排除过程，请参阅 以及。排除色谱柱故障排除硬件问题故障5）对每个色谱仪器执行性能测试，以迅速确定特定仪器是否存在故障。6）3 请参阅本章故障排除表中的故障排除信息。故障排除表依据步骤的参数组织而成，可以缩小故障现象的可能原因的范围并提供建议的纠正操作。如果确定存在与其它系统组件有关的故障，请参阅相应的说明书。2.何时联系何时联系 Waters 技术服务部门技术服务部门 Waters 系统的许多故障由用户即可轻松解决。但是如果无法解决问题，请联系“技术服务”，电话 800 820-2676。Waters 当与“技术服务”部门联系时，请备好以下资料：已填好的针对用户所用方法的正常运行检查表?故障现象性质?相应仪器的型号与序列号 流量?第 52 页 Breeze 2 软件现场培训教材 操作压力?（流动相种类、比例）流动相?检测器设置（波长等）?色谱柱的类型?样品类型?Breeze 色谱管理软件 控制模式（、仪器自自控、其它）?）软件的版本号（如果报修的是软件本身，请准备好软件的序列号?3.排除色谱系统故障排除色谱系统故障 下表列出了系统的色谱故障现象、可能的原因以及建议的纠正操作。注意：为防止受伤，在处理溶剂、更换管路或操作仪器时，始终要遵守良好的实验室习惯。您必须了解所用溶剂的物理和化学性质。而且需要参考“材料安全数据表”以了解所使用溶剂的相关信息。1 表色谱系统故障排除故障现象故障现象可能的原因可能的原因纠正操作纠正操作柱塞头有气泡脱气所有溶剂，灌注溶剂管理系统。检查脱气器的功能（如果有）。保留时间不稳定/。单向阀故障清洗更换入单向阀芯圈。柱塞密封渗漏更换密封。分离化学物质检查流动相、色谱柱溶剂过滤器堵塞更换过滤器。流量不正确更改流量。保留时间增加溶剂混合。溶剂组分不正确更改溶剂组分，检查打开柱温箱，检查温度。色谱柱加热器模块未打开，温度低使用正确的流动相。流动相错误/。色谱柱已被污染清洗更换色谱柱。色谱柱不正确使用正确的色谱柱系统渗漏，损失溶剂检查接头是否渗漏。流量不正确 更改流量。溶剂组分不正确 更改组分，检查溶剂混合 色谱柱温度高 降低色谱柱温度。流动相错误 使用正确的流动相。色谱柱已被污染 清洗/更换色谱柱。色谱柱不正确 使用正确的色谱柱。保留时间缩短 溶剂脱气不完全 进行溶剂脱气。溶剂脱气不完全 进行溶剂脱气。化学物质/积分不正确 请检查化学物质/积分。重现性问题 自动进样器故障 排除自动进样器故障。第 53 页 Breeze 2 软件现场培训教材 1（续）表色谱系统故障排除故障现象故障现象可能的原因可能的原因纠正操作纠正操作色谱柱未平衡 平衡色谱柱。检测器预热不够 预热检测器，时间随波长和灵敏度变化。溶剂已被污染 使用新溶剂。溶剂脱气不完全（快速或缓慢漂移）进行溶剂脱气。检查在线脱气器。流量波动（快速或缓慢漂移）灌注溶剂管理系统、更换泵的密封、检查阀。基线快速漂移 溶剂的波长错误 确保溶剂在所用波长处无明显吸收。溶剂已被污染 使用新溶剂。UV 灯能量降低 使用检测器诊断检查灯能量。环境温度波动 稳定操作环境温度至可进行完全平衡。UV 检测器流动池渗漏(内部,连接处)检查流动池，紧固连接。基线缓慢漂移 流动池有污物 清洗流动池。流量波动通过检查渗漏和正确脱气使流量稳定（请参阅“保留时间不稳定”故障现象）。溶剂未经过很好地混合（短期或长期循环）,混匀溶剂。基线噪音循环，短期（30 到 60 秒）无线电频率噪音（短期或长期循环）消除干扰。环境温度波动 稳定环境温度。基线噪音循环，长期（大约 10 分钟到 1 小时）脱气时间不充足，无法除去 具有 UV 吸收的气体（例如，O2）将流动相脱气 检测器中有空气 去除检测器中的空气。溶剂脱气不完全 进行溶剂脱气。检测到气泡 重新灌注溶剂管理系统。溶剂已被污染 使用新溶剂。色谱柱已被污染 清洗/更换色谱柱。流动池有污物 清洗流动池。系统接地错误 接入其他电路的插座。使用功率调节器。记录器电压不正确 将记录器设置到正确的电压。无线电频率噪音 消除干扰。随机的基线噪音 检测器有故障 排除检测器故障。以前进样的浓度极高 计算进样量。保持进样量不变，尝试重新进样较大体积的低浓度溶剂。进样有明显残留 洗针液选择不正确 针头清洗溶剂的选择不正确，无法溶解所有样品组分，选择能溶解所有组份的针头清洗溶剂。第 54 页 Breeze 2 软件现场培训教材 1（续）表色谱系统故障排除故障现象故障现象可能的原因可能的原因纠正操作纠正操作无流量 检查流量。灯未开 使用检测器诊断以检查参比/样品能量。能量为零表示灯未开。接通灯的电源。如果不能解决问题，请更换灯。检测器未复零 将检测器基线复零。检测器和计算机之间的连接不正确 检查检测器和记录器之间的电缆连接。错误的波长 检查波长设置。基线平直，无峰 溶剂管路渗漏 检查接头。检测器未复零 将检测器基线复零。灵敏度过高 选择较低的敏感性检测范围。平头峰 样品浓度或进样体积超过检测 器输出电压 减少样品浓度或进样体积。进样器渗漏 排除样品管理系统的故障。样品降解