实验脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定.ppt

医学生物学实验医学生物学实验医学微生物教研室医学微生物教研室 20112011年年6 6月月实验八实验八脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定实验内容实验内容l脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定 目的目的l熟熟悉悉临临床床标标本本中中常常见见化化脓脓性性细细菌菌的的分分离离鉴鉴定定程程序序；掌掌握握细菌分离培养的基本技术。细菌分离培养的基本技术。实验器材实验器材l标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本l菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌l培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管l其他：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管其他：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管 培养箱、培养箱、酒精灯、接种环等酒精灯、接种环等检查原则检查原则l 在脓汁标本中，以化脓性球菌最为常见，本实在脓汁标本中，以化脓性球菌最为常见，本实 验主要验主要检测金黄色葡萄球菌检测金黄色葡萄球菌 l用药前采集标本用药前采集标本 l无菌操作无菌操作标本检测程序标本检测程序 脓脓汁汁、脓脓性性分分泌泌物物（未未知知菌菌液液/固固体体培养物）培养物）涂涂 片片革兰染色革兰染色镜镜 检检血血琼琼脂脂平平板板接种接种直接直接菌菌落落观观察察血血浆浆凝凝固固酶酶试试验验甘甘露露醇醇发发酵酵诊诊断断报报告告检查方法和结果报告检查方法和结果报告 l直接显微镜检查：取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干直接显微镜检查：取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干燥，固定后革兰染色，油镜观察。燥，固定后革兰染色，油镜观察。l注：若染色后未发现细菌，可报告注：若染色后未发现细菌，可报告“直接镜检未发现细菌直接镜检未发现细菌”革兰染色镜检革兰染色镜检 形态形态 排列排列 染色性染色性 金黄色金黄色 葡萄球菌葡萄球菌检查方法和结果报告检查方法和结果报告 l细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上（接种后（接种后44保存），划线分离，保存），划线分离，3737培养培养1824h1824h后，观察菌后，观察菌落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。l注：第注：第2 2天观察记录结果；如培养天观察记录结果；如培养4872h4872h后仍然无菌生长，则后仍然无菌生长，则报告报告“无细菌生长无细菌生长”。血平板培养结果观察血平板培养结果观察 菌落特点菌落特点 溶血性溶血性 菌落颜色菌落颜色金黄色金黄色葡萄球菌葡萄球菌检查方法和结果报告检查方法和结果报告l血浆凝固酶试验（玻片法）：血浆凝固酶试验（玻片法）：l用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许，分用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许，分别与玻片左右二侧的生理盐水制成均匀菌悬别与玻片左右二侧的生理盐水制成均匀菌悬l于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀l1313分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验阳性，分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验阳性，否则为阴性否则为阴性结果报告：结果报告：标本标本+血浆血浆 白葡菌白葡菌+血浆血浆阳性（阳性（+）/阴性（阴性（）检查方法和结果报告检查方法和结果报告l甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对照）甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对照）培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌液体石培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌液体石蜡油，蜡油，3737培养培养18241824小时，观察结果。金葡菌发酵甘小时，观察结果。金葡菌发酵甘露醇产酸，使培养基变混露醇产酸，使培养基变混浊浊，颜色由紫色变黄色，是为，颜色由紫色变黄色，是为甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。l注：第注：第2 2天观察记录结果天观察记录结果 标本标本+甘露醇甘露醇 白葡菌白葡菌+甘露醇甘露醇 阳性（阳性（+）/阴性（阴性（）实验报告实验报告l本次实验的目的要求、器材、检查原则、标本检测程序本次实验的目的要求、器材、检查原则、标本检测程序 （简要）、结果报告和结论（简要）、结果报告和结论 后面内容直接删除就行后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用主要经营：网络软件设计、图文设计制作、主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！到让客户满意！致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPTPPT设计、计划书、策划案、学习课件、各设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求类模板等方方面面，打造全网一站式需求The user can demonstrate on a projector The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a and make it into a film to be used in a wider fieldwider field