DB14T+2664—2023实验用小型猪 病理学诊断 .pdf

ICS 65.020.30 CCS B 44 14山西省地方标准 DB 14/T 26642023 实验用小型猪 病理学诊断 2023-01-18 发布 2023-04-18 实施 山西省市场监督管理局 发 布 DB 14/T 26642023 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 缩略语.1 5 检查规则.2 6 检查程序.3 7 临床病理学检查.3 8 解剖病理学检查.5 9 结果判定.6 10 诊断.7 11 病理学检测报告.7 附录 A（资料性）实验用小型猪外观检查.8 附录 B（资料性）实验用小型猪组织标本取材规范.12 DB 14/T 26642023 II 前言 本文件按照 GB/T 1.12020标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。本文件由山西省科学技术厅提出、组织实施和监督检查。山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。本文件由山西省实验动物标准化技术委员会归口。本文件起草单位：山西医科大学、太原动物园。本文件主要起草人：陈朝阳、皇甫冰、宋国华、高继萍、张锐虎、薛瑞。DB 14/T 26642023 1 实验用小型猪 病理学诊断 1 范围 本文件规定了实验用小型猪病理学诊断的检查规则、检查程序、临床病理学检查、解剖病理学检查、结果判定、诊断和病理学检测报告。本文件适用于实验用小型猪的病理学诊断。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 实验用小型猪 experimental minipig 经人工饲育，对其携带的病原微生物和寄生虫实行控制，遗传背景明确或者来源清楚，用于科学研究、教学、生产、检定以及其他科学实验的小型猪。3.2 临床病理学诊断 clinical pathology diagnosis 采用生物化学、微生物学、血液学和分子生物学的方法对体液（血液和尿液）和组织等进行实验分析，从而对疾病做出判断。3.3 解剖病理学诊断 anatomical pathology diagnosis 通过肉眼、显微镜、生物化学、免疫学和分子生物学方法对整体、器官和组织的形态进行检查从而对疾病做出诊断的医学学科。4 缩略语 RBC：红细胞(Red Blood Cell)HCT：红细胞比积(Hematocrit)MCV：平均红细胞体积(Mean Corpuscular Volume)HGB：血红蛋白(Hemoglobin)MCH：平均红细胞血红蛋白含量(Mean Corpuscular Hemoglobin)MCHC：平均红细胞血红蛋白浓度(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration)RDW：红细胞分布宽度(Red Cell Distribution Width)DB 14/T 26642023 2 PLT：血小板(Platelet)PCT：血小板压积(Thrombocytocrit)MPV：平均血小板体积(Mean Platelet Volume)PDW：血小板分布宽度(Platelet Distribution Width)WBC：白细胞(White Blood Cell)ALT：丙氨酸氨基转移酶(Alanine Aminotransferase)AST：天门冬氨酸氨基转移酶(Asparagus Aminotransferase)CRE：肌酐(Creatinine)BUN：尿素氮(Blood Urea Nitrogen)ALP：碱性磷酸酶(Alkalin Phosphatase)CK：肌酸激酶(Creatine Kinase)LDH：乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase)TP：总蛋白(Total Protein)ALB：白蛋白(Albumin)GLU：血糖(Glucose)T-BIL：总胆红素(Total Bilirubina)TG：甘油三酯(Triglyceride)T-CHO：总胆固醇(Total Cholesterol)BAS：嗜碱性粒细胞(Basophile Granulocyte)EOS：嗜酸性粒细胞(Eosinophile Granulocyte)NEUT：中性粒细胞(Neutrophile Granulocyte)LYM：淋巴细胞(Lymphocyte)MON：单核细胞(Monocyte)5 检查规则 检查频率 5.1 普通级实验用小型猪每年至少检查 1 次；SPF 级实验用小型猪每半年至少检查 1 次。抽样要求 5.2 5.2.1 方法 选择 6 月龄以上的实验用小型猪用于检查，随机抽样。采样方法按照 NY/T 541 执行。5.2.2 数量 根据实验用小型猪群体大小确定抽样数量，按照表 1 的规定执行。表1 抽样数量 群体大小（N头）抽样数量（头）N100 5 100N500 10 N500 20 DB 14/T 26642023 3 6 检查程序 检查程序见图 1。图1 检查程序 7 临床病理学检查 外观检查 7.1 精神状态、被毛、皮肤、皮下组织、天然孔、可视黏膜、营养与发育状况、运动与行为状态、姿势与体态、呼吸状态、浅表淋巴结、排泄情况。外观检查内容见附录 A。血液学检查 7.2 7.2.1 采样要求 a)采血时间：采血前禁食 12h20h。b)采血位置：耳静脉、前腔静脉或后肢外侧隐静脉。c)采血量：2.0mL，采用相应规格的 EDTA-K2 抗凝管。d)样本储存条件：室温条件下不超过 8h，4条件下不超过 12h。7.2.2 检查项目 RBC、HCT、MCV、HGB、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW、WBC。7.2.3 正常参考值 实验用小型猪血液学指标正常值参考范围见表 2。表2 实验用小型猪的血液学指标正常值参考范围DB 14/T 26642023 4 项目 单位 五指山小型猪 广西巴马小型猪 贵州小型猪 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 RBC 1012/L 6.609.90 6.8010.00 7.508.50 7.508.50 5.608.50 6.008.80 HCT%43.0052.00 46.0054.00 40.0050.00 42.0051.00 35.0045.00 40.0050.00 MCV fL 52.0064.00 52.0064.00 54.0062.00 54.0062.00 50.0065.00 50.0065.00 HGB g/L 130.00180.00 140.00190.00 130.00160.00 130.00160.00 120.00150.00 130.00160.00 MCH pg 17.0022.00 18.0023.00 17.0021.00 17.0021.00 17.0022.00 17.0022.00 MCHC g/L 320.00370.00 320.00370.00 320.00350.00 320.00350.00 310.00350.00 310.00350.00 RDW fL 14.0019.00 14.0019.00 15.0020.00 15.0020.00 12.0019.00 12.0019.00 PLT 109/L 250.00600.00 280550 220.00650.00 250.00650.00 100.00400.00 150.00450.00 PCT%0.160.24 0.160.24 0.160.24 0.160.24 0.120.30 0.120.30 MPV fL 8.5015.50 8.5015.50 9.00015.00 9.00015.00 8.0014.00 8.0014.00 PDW fL 15.0018.00 15.0018.00 14.0017.00 14.0017.00 13.0017.00 13.0017.00 WBC 109/L 10.0023.00 8.0019.00 10.0024.00 7.0020.00 10.0018.00 8.0017.00 注：数据主要来自38月龄的五指山小型猪、48月龄的广西巴马小型猪、28月龄的贵州小型猪，、动物合并统计。血液生物化学检测 7.3 7.3.1 采样要求 a)采血时间：采血前禁食 12h20h。b)采血位置：耳静脉、前腔静脉或后肢外侧隐静脉。c)采血量：2.0mL。d)样本处理：室温放置 30min60min，3000rpm 离心 5min，取血清用于检测；若静置后不能及时处理，则应确保冷链运输直至离心。e)样本储存条件：血清样本密封、避光保存，室温条件下不超过 12h，4条件下不超过 24h。7.3.2 检查项目 ALT、AST、CRE、BUN、ALP、CK、LDH、TP、ALB、GLU、T-BIL、TG、T-CHO。7.3.3 正常参考值 实验用小型猪血液生物化学指标正常值参考范围见表3。表3 实验用小型猪血液生物化学指标正常值参考范围 项目 单位 五指山小型猪 广西巴马小型猪 贵州小型猪 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 ALT U/L 60.00130.00 60.00110.00 25.0090.00 2585.00 20.0080.00 20.0075.00 AST U/L 70.00270.00 70.00250.00 20.0080.00 20.0075.00 30.00250.00 30.00240.00 CRE mol/L 110.00210.00 110.00180.00 50.00190.00 50.00170.00 50.00150.00 50.00140.00 BUN mmol/L 2.508.00 2.507.50 1.007.50 1.007.00 2.508.00 2.507.50 ALP U/L 60.00380.00 60.00380.00 60.00380.00 60.00380.00 40.00350.00 40.00350.00 CK U/L 150.001100.00 150.001100.00 80.001000.00 80.001000.00 150.001100.00 150.001100.00 LDH U/L 300.001200.00 300.001200.00 250.00800.00 250.00800.00 500.001200.00 500.001200.00 DB 14/T 26642023 5 表3 实验用小型猪血液生物化学指标正常值参考范围（续）项目 单位 五指山小型猪 广西巴马小型猪 贵州小型猪 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 普通级 无特定病原体级 TP g/L 60.0090.00 60.0090.00 55.0085.00 55.0085.00 55.0085.00 55.0085.00 ALB g/L 30.0050.00 35.0050.00 30.0050.00 30.0050.00 25.0045.00 25.0045.00 GLU mmol/L 2.509.00 2.509.00 4.508.50 4.508.50 2.509.00 2.509.00 T-BILmol/L 3.206.00 3.206.00 1.503.60 1.503.60 1.503.60 1.503.60 TG mmol/L 0.151.20 0.151.20 0.200.90 0.200.90 0.150.90 0.150.90 T-CHOmmol/L 1.102.80 1.102.80 1.202.70 1.202.70 1.102.80 1.102.80 注：数据主要来自38月龄的五指山小型猪、48月龄的广西巴马小型猪、28月龄的贵州小型猪，、动物合并统计。8 解剖病理学检查 解剖检查 8.1 8.1.1 解剖程序 体表检查皮下检查剖开腹腔做一般视查摘出腹腔脏器并检查摘出骨盆腔脏器并检查剖开胸腔做一般视查摘出胸腔脏器并检查摘出口腔和颈部器官并检查剖开颅腔，摘出头部器官并检查剖开脊椎管，摘出脊髓并检查肌肉、关节和淋巴结检查骨和骨髓检查。8.1.2 检查内容 a)体表：被毛、皮肤、天然孔、营养状况、精神状况、发育状况、感觉器官、呼吸系统。b)皮下：脂肪、乳腺、睾丸、附睾。c)头颈部：口腔、鼻腔、大脑、小脑、脑干、垂体、扁桃体、甲状腺、甲状旁腺。d)胸腔：胸腔液、胸腺、肺、心包、心包液和心脏、主动脉、气管和支气管。e)腹腔：腹腔液、脾脏、肝脏、胆囊、肝门部位的血管、胆管、胰腺、肾脏、肾上腺、胃、肠道（十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠、直肠）。f)盆腔：膀胱、输尿管、前列腺、精囊腺、卵巢、输卵管、子宫、阴道。g)骨骼与肌肉：肌肉、关节、淋巴结（腹股沟淋巴结、下颌淋巴结、颈浅淋巴结、腋下淋巴结、膝上淋巴结、腘淋巴结、肺门淋巴结、脾门淋巴结、胆管淋巴结、肠系膜淋巴结）、骨、骨髓。如发现异常，应对异常部位进行切片检查。组织病理学检查 8.2 8.2.1 组织标本取材 实验用小型猪组织标本取材规范见附录 B。8.2.2 制片 常规石蜡切片，伊红-苏木精染色，必要时进行免疫组织化学或特殊染色等方法进行染色。8.2.3 检查内容 DB 14/T 26642023 6 心、肺、肝、脾、肾、胃、肠、睾丸/卵巢、输卵管，解剖检查发现异常的组织和器官，以及根据实验目的需要检查的组织和器官。9 结果判定 临床病理学检查结果判定 9.1 9.1.1 判定标准 临床病理学检查结果分为四个等级，分别为未见异常、轻微异常、轻度异常和明显异常，判定标准如下：a)未见异常：动物病理形态学无异常，同时血液化验指标均在正常值参考范围内。b)轻微异常：动物病理形态学无明显异常，但是血液化验指标有 12 项异常升高或降低，最大变异不超过正常值参考范围临界值的 20%。c)轻度异常：1)动物病理形态学无明显异常，但是超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异达到正常值参考范围临界值 20%50%；2)动物病理形态学轻微或轻度异常，同时超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异达到正常值参考范围临界值 20%50%。d)明显异常：1)动物病理形态学无明显异常，但是超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异超过正常值参考范围临界值的 50%；2)动物病理形态学轻微或轻度异常，同时超过 2 项血液化验指标异常升高或降低，最大变异超过正常值参考范围临界值的 50%；3)动物病理形态学明显异常。9.1.2 结果确认 临床病理学检查结果若出现异常变化需要重复检测一次。如果两次检测结果不相符，对于血液学指标需再以显微镜检测做最终判定，对于血液生物化学指标则需再做第三次检测，以其中两次一致的结果为准。如临床病理学检查结果不能明确判定动物健康与否时，普通级实验用小型猪判定为轻度异常；无特定病原体级判定为轻微异常、轻度异常时，需结合微生物和寄生虫检测结果，进行解剖病理学检查。解剖病理学检查结果判定 9.2 9.2.1 判定标准 解剖病理学检查结果分为四个等级，分别为未见异常、轻微异常、轻度异常和明显异常，判定标准如下：a)未见异常：未发现病理形态学异常变化；b)轻微异常：发现轻微的病理形态学变化，推测动物仍然能够表现正常的生理功能；c)轻度异常：发现轻度的病理形态学变化，推测动物正常生理功能已经出现偏差；d)明显异常：有明显的病理形态学变化，推测动物出现生理功能障碍。9.2.2 结果确认 DB 14/T 26642023 7 解剖病理学检查结果要求由兽医病理师或病理学专业技术人员完成并签署，必要时检查结果需要同行复核。10 诊断 动物个体 10.1 普通级实验用小型猪病理学检查结果为未见异常或轻微异常或轻度异常时，判定合格；发现明显异常判定为不合格。无特定病原体级小型猪病理学检查未见异常或轻微异常时，判定合格；发现轻度异常或明显异常判定为不合格。临床病理学与解剖病理学检查结果不一致时，依据解剖病理学检查结果做出检查结论。动物群体 10.2 超过 20%的抽检小型猪不合格时，判定该群实验用小型猪不合格。11 病理学检测报告 报告书要求 11.1 病理学检测报告书应使用规范的病理学术语及诊断标准，表述准确，条理清晰，具有时效性、真实性、科学性。报告内容 11.2 a)背景信息：送检单位、动物来源、动物编号、品种/品系、性别、年龄、体重、标本取材部位、固定方法等；b)临床病理学检查结果：检查所用仪器，外观临床检查描述（未进行解剖病理学检查时），血液学及血液生物化学检查指标、检查结果及正常值参考范围，临床病理学检查结果等。如外观发现有异常变化，应附有相应的图片；c)解剖病理学检查结果：检查所用仪器，解剖病理变化描述，组织切片病理变化描述，解剖病理学检查结果等。如发现有异常变化，应附有相应的图片；d)结论与讨论：给出病理诊断结论，若出现病变则需对可能的原因进行分析讨论，必要时附参考文献。确认报告 11.3 诊断报告应由兽医病理师或病理学专业技术人员出具并签字。诊断结果如有争议则可进行同行评议。DB 14/T 26642023 8 A A 附录A（资料性）实验用小型猪外观检查 A.1 精神状态检查健康动物通常表现为两眼有神，耳、尾活动灵活，对外界刺激反应迅速，行动敏捷，动作协调，对检查人员的行为有正常反应。精神状态异常表现为精神兴奋、精神抑制、精神沉郁、嗜睡和昏迷等，具体如下：a)精神兴奋：表现亢奋、躁动不安，竖耳、刨地、嚎叫，严重者乱冲乱撞、狂奔乱跑，对人类活动反应过激，踢咬；b)精神抑制：表现为离群呆立，萎靡不振，低头耷耳、双目半闭，对外界刺激反应迟钝，行动迟缓，严重者卧地不起；c)精神沉郁：为轻度抑制现象，动物表现为对周围事物注意力减弱，反应迟钝，离群呆立，低头耷耳，双目半闭或全闭，行动无力，躲于角落，对饲养员召唤无反应；d)嗜睡：为中度抑制现象，患病动物重度萎靡，闭眼似睡，只在受到强烈刺激时，才能产生迟钝的和暂时的反应，但很快又陷入沉睡状态；e)昏迷：为高度抑制现象，患病动物意识完全丧失，卧地不起，呼唤不应，全身肌肉松弛，反射消失，甚至出现瞳孔散大，粪尿失禁；对外界刺激无反应，仅保留自主神经系统活动，心搏和呼吸虽仍然存在，但多变慢且节律不齐。A.2 被毛检查健康动物的被毛整洁，平滑而有光泽。常见的被毛异常包括被毛粗乱、无光，换毛迟缓，易脱落，局部性脱毛，尾部及后肢被毛被粪便、尿液及其他分泌物或排泄物污染，毛色异常等。A.3 皮肤检查健康动物的皮肤应呈淡粉红色；温度以股内侧最高，头颈、躯干次之，尾及四肢最低，且具有一定的均匀性；在安静状态下，皮肤具有湿润感；弹性良好，完整无破溃。常见的皮肤异常表现为颜色异常、皮温异常、湿度异常，以及皮肤疱疹、创伤和溃疡等皮肤损伤，具体如下：a)常见的皮肤颜色异常包括皮肤苍白、皮肤黄染、皮肤发绀和皮肤潮红等；b)皮温不整指身体不同部位皮温相差悬殊，对称部位皮温不均匀；c)常见的皮肤湿度异常包括出汗减少或无汗，鼻部干燥或龟裂，病理性出汗和出冷汗等；d)皮肤疱疹：应注意疱疹出现和消失的时间、分布部位、形态大小、颜色及变化规律等，同时注意有无瘙痒、脱屑等现象。根据形态或发生原因可以分为斑疹、丘疹、荨麻疹、饲料疹、痘疹、水疱、脓疱、脱磷屑等；e)创伤：外力作用引起皮肤、黏膜及深部软组织发生破裂或缺损；f)溃疡：皮肤溃疡指皮肤组织坏死造成缺损所形成的经久不愈的肉芽创面。A.4 皮下组织检查主要检查皮下组织肿胀，应注意肿物的部位、大小、形态、内容物性状、硬度、温度、移动性及敏感性。常见异常列举如下：DB 14/T 26642023 9 a)皮下组织水肿；b)皮下气肿界限不明，触压时柔软而容易变形，并可感觉到由于气泡破裂和移动所产生的捻发音。c)血肿发生迅速，触诊有波动感，穿刺有血液流出；d)脓肿初期表现为肿胀、热、痛，而中后期脓肿中央变软，表面脱毛，有波动感，穿刺有脓液排出；e)淋巴外渗可见局部皮肤逐渐肿大，隆起界限明显，触诊有波动感，局部温度不高，穿刺有淡黄的淋巴液排出；f)皮下组织肿物中还包括疝和肿瘤。A.5 天然孔检查动物耳朵、眼睛、鼻子、嘴巴的色泽、形态等是否正常，是否有异常分泌物。异常表现为：颜色异常；耳朵出现肿胀、耳软骨病、溃烂、出现分泌物等；眼睛斜视，瞳孔异常，角膜混浊，凸眼或凹眼，结膜潮红，有分泌物等；流鼻涕（鼻涕颜色为红色、黄色、白色等）、打喷嚏或鼻子周围有渗出，鼻子发红疼痛、出现硬皮；流涎，面部肿胀等。A.6 可视黏膜检查主要检查眼结膜，鼻腔、口腔、直肠、阴道等部位的黏膜颜色、完整性。黏膜颜色异常与皮肤颜色异常相同。A.7 营养与发育状况检查A.7.1 营养状况检查a)营养良好：表现为肌肉丰满，皮下脂肪充实，躯体圆润，骨骼棱角不显露，被毛平顺有光泽，皮肤富有弹性；b)营养不良：表现为消瘦，肌肉和皮下脂肪薄，骨骼棱角显露，肋骨明显可见，被毛蓬乱、无光泽，皮肤缺乏弹性，常伴有精神不振和乏力；c)营养中等：表现介于营养良好和营养不良之间；d)营养过剩：主要指体内中性脂肪蓄积过多，表现为超重。A.7.2 发育状况检查a)发育良好：动物结构匀称，肌肉丰满，体格强壮有力；b)发育不良：动物多表现为躯体矮小，结构不匀称，关节粗大，胸廓狭窄，肢体扭曲变形，体格纤弱无力。A.8 运动与行为状态检查健康动物在运步时，肢体动作协调一致，灵活自然。A.9 姿势与体态检查动物的姿势与体态，指其在相对静止或运动过程中的空间位置和呈现的状态。异常情况表现如下：a)典型木马样姿态：出现头颈平伸、肢体僵硬、四肢关节不能屈曲、尾根挺起、鼻孔张开、瞬膜露出、牙关紧闭等表现；b)站立不稳：呈躯体歪斜、摇晃，四肢叉开或依靠墙壁等支撑物站立的姿态；DB 14/T 26642023 10 c)持久站立：指动物较长时间（超过数小时）站立而不愿意卧下的现象；d)肢蹄避免负重：动物四肢发生疼痛性疾病时，站立时呈不自然的姿势；e)其他典型的异常站立姿势包括保持前高后低体位、前肢交叉长时间不改变的站立姿势、头颈歪斜、转圈、低头静立、劈叉站立姿态等；f)强迫躺卧：当驱赶和吆喝时动物仍卧地不起，不能自行起身和站立；g)犬坐姿势：动物呈前肢直立而后肢弯曲，类似犬猫常见坐姿的姿势。A.10 呼吸状况检查A.10.1 呼吸频率检查猪的呼吸频率为 12 次/min18 次/min。A.10.2 呼出气检查健康动物两侧鼻孔呼出气的气流强度一致，稍有温热感，无特殊气味。A.10.3 鼻及鼻液检查检查鼻部外形；观察鼻黏膜的颜色，有无肿胀、水疱、溃疡、结节和损伤等；检查鼻液的量与性质。A.11 浅表淋巴检查检查淋巴结的大小、结构、形状、表面形态、硬度、温度、敏感度和活动性，小型猪主要检查下颌淋巴结、颈浅淋巴结、膝上淋巴结、腹股沟浅淋巴结；常见的淋巴结异常如下：a)淋巴结可发生全身性肿胀和局部性肿胀；b)急性淋巴结肿胀表现为淋巴结明显增大、坚实、表面光滑、分叶结构不明显、具有游离性，且伴有明显的热痛反应；c)慢性淋巴结肿胀表现为淋巴结轻度肿大，质地变硬，表面不平，无热痛，且多与周围组织粘连，不能活动；d)化脓性淋巴结肿胀表现为淋巴结明显肿胀，有热痛反应，同时触诊有明显波动感，穿刺有脓液排出。A.12 排泄情况检查A.12.1 排尿动作和排尿次数检查猪在 24h 内的正常排尿次数为 2 次3 次。A.12.2 排尿异常情况频尿：指排尿次数增多，单次尿量不多甚至减少或呈滴状排出，而 24h 内尿的总量不多；多尿：指 24h 内尿的总量增多，其表现为排尿次数增多而每次的尿量并不减少，或表现为排 尿次数虽不明显增加，但排尿量显著增多；少尿或无尿：指动物 24h 内排尿总量减少甚至几乎没有尿液排出；尿闭：肾脏的尿生成功能正常，但尿液滞留在膀胱内而不能排出，又称尿潴留；排尿困难和疼痛：动物排尿时感到不适，甚至呈现腹痛样症状和排尿困难；尿失禁：动物未采取一定的准备动作和排尿姿势，但尿液经常不自主地流出。DB 14/T 26642023 11 A.12.3 尿液感观检查检查内容包括尿量、尿色、透明度、黏稠度、气味。猪的正常尿量应为 2L/24h5L/24h，尿色淡黄至无色，鲜尿清亮，呈稀薄水样，无特殊气味。A.12.4 尿比重的检查应一天之内检查多次，猪的正常尿比重为 1.0181.050。A.12.5 排粪动作、次数和量的检查：24h 内，猪的正常排粪次数为 2 次5 次、正常排粪量为 1kg3kg；排粪异常情况如下：腹泻：动物排粪次数增多，排粪量也增加，同时粪便稀薄，有时还带有脓液和血液；大便失禁：动物未采取排粪姿势而不自主地排出粪便；便秘：动物排粪次数减少、排粪费力、排粪量少、粪便质地干硬而色暗，常被覆黏液；排粪痛苦：动物排粪时，表现疼痛不安、惊恐、呻吟，弓腰努责；里急后重：动物频繁作出排便姿势，并强力努责，但仅排出少量粪便或黏液。A.12.6 粪便的感官检查包括粪便的硬度和形状、有无异物和寄生虫，猪的正常粪便呈圆柱状。DB 14/T 26642023 12 B B 附录B（资料性）实验用小型猪组织标本取材规范 B.1 组织标本取材基本要求B.1.1 组织标本应及时取材、固定，切取的组织块应新鲜，切取后立即投入固定液中，以防组织发生死后变化。明确针对大脑等中枢神经系统的病理组织学检查，应在处死小型猪的同时进行固定液灌注后再取材；明确针对胃肠道组织的取材和固定，应控制在小型猪死后 20min 以内。B.1.2 取材要全面且具有代表性，能显示病变的发展过程。应选择有病变的器官或组织，特别是病变显著部分、眼观变化特殊部分、可疑病灶。较大而关键的病变可从病灶中心到外周不同部位取材，如与病灶交界的“正常”结构和坏死组织，以反映病变各阶段的形态学变化。采取的病理组织材料，要包括各器官的重要结构部分，如肾脏应包括皮质、髓质、肾盂粘膜及被膜，心脏应包括心房、心室及其瓣膜各部分。B.1.3 切取组织块所用的刀剪要锋利。修切时必须迅速而准确，由前向后一次切开，避免来回用力，勿使组织块受牵拉、挤压、刮抹和冲洗（胃肠内容除外）等损伤，以保持组织完整，避免人为变化。为使胃肠黏膜保持原有形态，应避免挤压，用生理盐水冲洗内容物后投入固定液内。黏膜面所附着的病理性产物，一经触摸，即被破坏，故在取材时应注意。B.1.4 组织块的大小应适当，一般以长、宽、厚 1.5cm 1cm 0.5cm 为宜，不宜太厚或太薄，便于固定液浸透彻底。剖检时病理组织块可切得稍大些，待充分固定后再修切至适当大小。B.1.5 取材时应尽量保持组织的自然状态与完整性，避免对标本造成人为的“病变”，出现人工假象。为了防止组织块在固定时扭曲变形，对于食管、胃、肠、胆囊及膀胱等易变形的空腔脏器，应剪开，将其浆膜面朝下平放于硬纸上，然后缓慢投入固定液中。组织块投入固定液后切忌卷曲、互相粘贴或贴靠瓶壁。B.1.6 对于特殊病灶应做适当标记。在切取组织块时，需将病变显著的部分切平，另一面切为斜面，加以区别，使包埋时不致倒置。如果组织块过小或易碎，采样后装入特制的标本分载盒内再行固定，以防丢失或破裂。B.1.7 注意避免相似的组织块混淆。当相似的组织块较多，容易彼此混淆时，可分别固定于不同的小瓶中，或用分载盒分装固定，或将组织切成不同的形状（如长方形、正方形，三角形等），使易于辨认。此外，还可用铅笔标明的小纸片和组织块一同用纱布包裹，再行固定。B.1.8 应依据被检物的性质选用适当的固定液，以便正确的保存其固有成分和结构。例如福尔马林液能固定一般组织，但有溶解肝糖原和某些色素的作用；酒精能很好的固定肝糖原和蛋白性抗原物质，但可溶解脂肪。常规的固定液是 10%的福尔马林水溶液（市售甲醛用水稀释 10 倍）或中性福尔马林液；Bouin 液用于胰腺、睾丸组织的固定；Carnoy 液用于肝、肌肉组织糖原染色的固定；戊二醛-甲醛液用于眼球固定。固定液的量应为被固定组织块体积的 510 倍。将组织块投入固定液之后应及时摇动，使组织充分接触固定液，固定液容器不宜过小，且应使用广口容器，容器底部可垫以脱脂棉，以防止组织与容器粘连，避免组织固定不良或变形。肺脏等比重较轻的组织，易漂浮于固定液面，应盖上薄片脱脂DB 14/T 26642023 13 棉，利用脱脂棉的虹吸现象，确保固定液持续浸湿标本。脏器组织如有血液、污染物和污染固定液，应及时更换固定液。B.1.9 固定时间应适当，依据固定组织块大小和固定液的性质而定。一般为数小时至数天。时间过短组织固定不充分，影响染色效果，使组织原有结构不清楚；固定时间过长或固定液浓度过高，则使组织收缩、过硬，影响切片染色质量。福尔马林水溶液固定 48h72h 后，用水冲洗 12h，即可使用。将组织块充分固定之后应进行脱钙，组织内的非病理性异物应予以剔除。B.1.10 在病变组织取材之前，登记组织器官大小，质地性质及硬度，包膜的厚度和完整性以及与周围其他脏器之间的位置关系，必要时称其重量。B.1.11 病理组织块应合理寄送。将固定完全和修整后的组织块，用浸渍固定液的脱脂棉包裹，放置于广口瓶或塑料袋内，并将其口封固。瓶外再裹以油纸或塑料纸，然后用大小适当的木盒包装，即可寄送，同时应将整理过的尸体剖检记录及有关材料一同寄出。并在送检单上说明送检的目的要求，组织块的名称、数量以及其他应说明的问题。除寄送的病理组织块外，本单位还应保留一套病理组织块，以备必要时复查之用。B.1.12 接收时应仔细检查送检标本。接收送检标本时，应依据送检单仔细检查送检物。注意标本名称、大小及数目等，是否与送检单相符，负责人及地址是否填写清楚。如发现送检标本不符，或送检单填写有误，应立即退回更正；标本固定不当，组织干涸或坏死不能制片时，也应退回。经检查无误后，即将标本编号登记，并在标本瓶上贴上标签（即病例号），以防错乱。B.2 实验用小型猪组织或器官取材要求B.2.1 体表取肩背部皮肤组织和其他有病变皮肤。取材时皮下脂肪面朝上；若有病变，记录其大小、颜色及其他特征。B.2.2 皮下组织B.2.2.1 乳腺沿乳头周围连同皮肤剪取乳腺组织，皮肤面朝下放在取材板上，在乳头中心处切开组织取 12 块。如果发现乳腺肿瘤，同时取乳腺淋巴结。记录肿瘤大小、切面及表面状况和乳腺淋巴结的情况。B.2.2.2 睾丸和附睾采用锋利的手术刀将睾丸作矢状切面剖开，取组织 1 块。沿附睾长轴纵向剖开附睾，取组织 1 块。记录睾丸和附睾的表面和切面情况。B.2.2.3 神经与肌肉后肢外侧基部 T 形切口，剥离皮肤。股骨后侧纵形切口，查找坐骨神经。股二头肌连同坐骨神经取材 2 块。记录肌肉和坐骨神经的情况。B.2.2.4 淋巴结将淋巴结垂直于长轴切开，取组织 12 块。记述淋巴结的大小，与周围组织的粘连情况，剖面病理状况，必要时称其重量。DB 14/T 26642023 14 B.2.3 头颈部B.2.3.1 脑剖开颅腔，剪开硬脑膜、大脑镰和小脑天幕，离断颅神经根，将截断刀从枕骨大孔前侧插入孔内，尽量深入椎管，斜行离断脊髓，将大脑、小脑和脑干一同取出。进而由蝶鞍中取出垂体。将大脑额叶面朝上置于取材板上，自额叶至枕叶每间隔约 1cm 平行切成数个额状断面，并将每片大脑断面顺序地平放于解剖板上进行检查，取材 2 块。经小脑蚓部做水平切面或矢状切面，检查小脑实质和第四脑室。分别沿中脑、脑桥、延髓作横切面，取材 2 块。观察和记录颅骨的完整性，硬脑膜、蛛网膜和软脑膜情况，以及脑底动脉环有无异常。大脑的体积、对称与否以及脑组织切面变化。小脑表面和切面有无异常，垂体情况。B.2.3.2 眼珠以剪刀剥离眼球周围的软组织，剪断视神经，连同泪腺一同取出，至固定液中，切片取材待固定后进行。观察记录眼球表面有无异常。B.2.3.3 甲状腺和甲状旁腺位于喉下方的气管表面，横切检查后放入固定液。记录其大小和颜色。B.2.3.4 气管从喉的下方剪断气管，向下纵向剪开，取全层结构组织 1 块。若有病变，记录病变情况，于主要病变区取组织 23 块，病健交界处取组织 2 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。检查气管内是否有分泌物，气管黏膜有无异常，并记录。B.2.3.5 唾液腺和泪腺切开检查，每种组织取材 1 块，若有病变，于主要病变区取组织 23 块，病健交界处取组织 2 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。观察记录其大小、色泽和质地。B.2.4 胸腔B.2.4.1 胸腺左叶和右叶各取组织 1 块。记录胸腺的大小、质地和有无异常。B.2.4.2 肺间隔 0.5 cm1.0 cm 切开肺叶，左右肺叶各取 1 块，支气管断端 1 块。若有病变，于主要病变区取组织 23 块，病健交界处取组织 2 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。用手触摸标本，注意有无质地不均匀之处（如硬块、实变、囊性变、气肿或气泡等）。记录肺表面和切面的情况，若有病灶，应记录病灶部位（肺叶、肺段）。B.2.4.3 心脏沿左纵沟左侧的切口，切至肺动脉起始处；沿左纵沟右侧的切口，切至主动脉的起始处。然后将心脏翻转过来，再沿右纵沟左右两侧作平行切口，切至心尖部与左侧心切口相连接；切口再通过房室口切至左心房及右心房。将心脏全部剖开。左右心各取 1 块，每块组织应包括心房、瓣膜、心室壁各层结构及冠状动脉。记录心脏纵沟、冠状沟的脂肪量，以及心外膜、心内膜和切面变化。DB 14/T 26642023 15 B.2.5 腹腔B.2.5.1 脾脏以 0.5cm1.0cm 间距对脾作多个平行横切面，检查每块脾脏薄片的局部形态。取组织 2 块。记录脾脏的形态、色泽和切面的情况。B.2.5.2 肝脏左外叶和右外叶各取组织 1 块（包括包膜）。发现病灶的肝叶应沿标本长轴作垂直肝包膜的横切面，切面经过病变中心，于主要病变区取组织23块，病健交界处取组织2块，无病变区域（远离病灶35cm）取组织 2 块。记录肝脏表面和切面情况，门脉做剖开检查。B.2.5.3 胆囊沿长轴剪开胆囊壁，取材 1 块。记录胆囊大小、色泽，以及胆囊壁和胆汁的情况。B.2.5.4 胰腺胰腺的左、中、右叶各取 1 块。若有病变，应切出病变区域的最大截面，于主要病变区取组织 23块，病健交界处取组织 2 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。记录胰腺的大小、形态、位置、毗邻及胰管开口的情况。B.2.5.5 肾脏自肾外侧缘沿长轴经肾门纵向剖开肾脏，小心剖开肾盂、肾盏和输尿管。采样区域应包括肾脏的皮质和髓质。在肾皮质和髓质最大剖面的不同部位切取 2 块组织。若有病变，于主要病变区取组织 23块，病健交界处取组织 2 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。记录肾脏表面、皮质、髓质、肾盂和输尿管的情况。B.2.5.6 肾上腺将肾上腺垂直于长轴切开，检查后放入固定液中。记录肾上腺的形态、色泽和切面的情况。B.2.5.7 胃沿胃长轴剪开胃壁（病变位于长轴时沿小短轴剪开），单胃动物及复胃动物真胃各胃区、复胃动物各胃室取全层结构组织 1 块。沿大弯剪开胃壁，胃底、胃体、胃窦和十二指肠球部各取全层结构组织 1块。有病变时（肿瘤、溃疡或胃炎），于主要病变区取组织 2 块，病健交界处取组织 23 块，无病变区域（远离病灶 35cm）取组织 2 块。观察胃内容物的性状，用生理盐水轻轻洗净胃内容物。记录粘膜的色泽及有无异常。B.2.5.8 肠道十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠各取横切全层肠组织 1 块。若发现病灶，病变组织、病健交界处组织、正常组织（远离病灶 35cm）纵向切取各 2 块。记录肠系膜、肠道浆膜面、肠壁和肠道粘膜面的情况，注意记录病变所处肠段的位置，以及肠腔内有无寄生虫或异物。B.2.6 盆腔B.2.6.1 膀胱DB 14/T 26642023 16 由膀胱的尿道口断端至膀胱底部，将膀胱壁做 Y 形剪开和展平