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痰液脱落细胞检查专家讲座.pptx

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第六章第六章 细胞病理学诊疗工作相关技术细胞病理学诊疗工作相关技术指南指南第一节第一节 痰液脱落细胞病理学检验痰液脱落细胞病理学检验痰液脱落细胞检查第1页一、目标 是经过检验痰液中脱落细胞形态学改变来检验是经过检验痰液中脱落细胞形态学改变来检验呼吸道及肺部病变一个细胞病理学方法。呼吸道及肺部病变一个细胞病理学方法。检验含有非损伤性、非介入性且经济、方便、检验含有非损伤性、非介入性且经济、方便、特异性高等优点,与其它部位细胞病理学检验特异性高等优点,与其它部位细胞病理学检验不一样是痰液细胞病理学检验主要是检出恶性不一样是痰液细胞病理学检验主要是检出恶性肿瘤细胞(癌细胞),而对癌前病变检验无意肿瘤细胞(癌细胞),而对癌前病变检验无意义。义。痰液脱落细胞检查第2页 采集痰液方法和质量直接影响痰检验阳性率,采集痰液方法和质量直接影响痰检验阳性率,采集痰液分析基本要求是:采集痰液分析基本要求是:痰液必须是从肺部咳出;痰液必须是从肺部咳出;痰液必须新鲜;痰液必须新鲜;对首次痰检验患者,应亲自指导和观察患者对首次痰检验患者,应亲自指导和观察患者咳痰。咳痰。痰液脱落细胞检查第3页痰液检验痰液检验 v起源:起源:肺泡、支气管、气管所产生分泌物肺泡、支气管、气管所产生分泌物v目标目标:辅助诊疗:支气管哮喘、支气管扩张辅助诊疗:支气管哮喘、支气管扩张 确诊:肺结核、肺癌确诊:肺结核、肺癌 观察疗效和预后判断观察疗效和预后判断对原发肺癌敏感性可达对原发肺癌敏感性可达60%-80%,特异性到,特异性到达达100%。痰液脱落细胞检查第4页二、方法学二、方法学(一)标本准备(一)标本准备1、咳痰、咳痰v提议用晨痰,涮牙、嗽口后进行,深咳。提议用晨痰,涮牙、嗽口后进行,深咳。v有条件者可采取雾化吸入后诱咳采痰。有条件者可采取雾化吸入后诱咳采痰。v纤维支气管镜检后咳取痰液能提升阳性率。纤维支气管镜检后咳取痰液能提升阳性率。痰液脱落细胞检查第5页2、采集、采集v一次咳痰提议留取一次咳痰提议留取3-5口痰液。口痰液。v存放标本容器必须是无吸水性干燥塑料或玻璃器存放标本容器必须是无吸水性干燥塑料或玻璃器皿皿,须有盖子密封须有盖子密封,标签明确,标签应统计相关内容标签明确,标签应统计相关内容,包含姓名、门诊号(住院号)、送检时间等。包含姓名、门诊号(住院号)、送检时间等。v二种标准送检方法:二种标准送检方法:每日一次,连续三天送检,天天制片。每日一次,连续三天送检,天天制片。每日一次,连续三天,天天搜集后先预固定,一次每日一次,连续三天,天天搜集后先预固定,一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块(CB)。)。痰液脱落细胞检查第6页3、送检:、送检:标准上留取后马上送检,保持标本新标准上留取后马上送检,保持标本新鲜;普通夏天存放时间应鲜;普通夏天存放时间应2小时,冬天小时,冬天4小时,如确有困难或须做沉渣切片则能够预小时,如确有困难或须做沉渣切片则能够预固定后放置冰箱内冷藏,但不宜固定后放置冰箱内冷藏,但不宜5天。天。4、接收:、接收:查对送检单与样本盒(瓶)上相关信查对送检单与样本盒(瓶)上相关信息,一致后签收标本,若信息不一致则需重息,一致后签收标本,若信息不一致则需重新与相关人员、科室查对,标本签收制度必新与相关人员、科室查对,标本签收制度必须严格按要求执行。须严格按要求执行。痰液脱落细胞检查第7页注意事项:注意事项:l留痰:先漱口,取深部痰液。留痰:先漱口,取深部痰液。l查查24小时痰量和分层检验:无色广口瓶。小时痰量和分层检验:无色广口瓶。细菌学检验:无菌容器,及时送检。细菌学检验:无菌容器,及时送检。细胞学检验:细胞学检验:3-5口(约口(约5ml),或早晨或早晨9-10时新鲜痰液。时新鲜痰液。无痰或痰少患者:化痰药无痰或痰少患者:化痰药(雾化吸入法雾化吸入法)。昏迷患者:清理口腔,负压吸引法吸痰。昏迷患者:清理口腔,负压吸引法吸痰。幼儿:棉拭刺激喉部,棉拭刮取。幼儿:棉拭刺激喉部,棉拭刮取。纤维支气管镜检验:直接病灶采集。纤维支气管镜检验:直接病灶采集。痰液脱落细胞检查第8页l痰标本应尽快涂片,在室温下,能够保留痰标本应尽快涂片,在室温下,能够保留24小时,在冰箱内可保留两天;痰液量普通以小时,在冰箱内可保留两天;痰液量普通以3ml-5ml(3-5口痰口痰)为宜;为宜;l采痰时应采取内面涂蜡痰盒,可预防痰液被采痰时应采取内面涂蜡痰盒,可预防痰液被吸收而难于挑痰制片;吸收而难于挑痰制片;l采集痰标本没有禁忌证,但假如病人在行支采集痰标本没有禁忌证,但假如病人在行支气管镜检验之后,马上进行痰细胞学检验,气管镜检验之后,马上进行痰细胞学检验,往往会混有一些嗜酸性细胞碎片和炎性细胞,往往会混有一些嗜酸性细胞碎片和炎性细胞,而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检验而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检验510天后再行痰细胞学检验。天后再行痰细胞学检验。痰液脱落细胞检查第9页(二)制片(二)制片1、标本取样、标本取样(1)大致观察:)大致观察:v 量:量:无或少许,呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。无或少许,呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。v 颜色颜色:正常:无色或灰白色,正常:无色或灰白色,病理情况有以下改变:病理情况有以下改变:水样痰:黏液少,呈水样,常有泡沫。水样痰:黏液少,呈水样,常有泡沫。灰白色黏液痰:黏液丰富,胶样。灰白色黏液痰:黏液丰富,胶样。红色或棕红色:含血液或血红蛋白红色或棕红色:含血液或血红蛋白 血性痰血性痰:血液量多,肺癌、肺结核、支气管扩张血液量多,肺癌、肺结核、支气管扩张 粉红色泡沫样粉红色泡沫样:急性肺水肿急性肺水肿 铁锈色铁锈色:大叶性肺炎大叶性肺炎,肺梗死肺梗死 黄色脓痰黄色脓痰:呼吸道化脓性感染,化脓性支气管炎呼吸道化脓性感染,化脓性支气管炎,肺结核肺结核;黄绿色黄绿色:绿脓杆菌绿脓杆菌,干酪性肺炎干酪性肺炎 烂桃样灰黄色烂桃样灰黄色:肺吸虫病肺吸虫病;棕褐色棕褐色:阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血 黑色黑色:煤矿煤矿,锅炉工人或大量吸烟者锅炉工人或大量吸烟者 痰液脱落细胞检查第10页性状性状:粘液痰:粘液痰:多见于慢性支气管炎缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透多见于慢性支气管炎缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠,用镊子牵拉时,往往可拉成很长细丝。假如其中有乳明、无色、粘稠,用镊子牵拉时,往往可拉成很长细丝。假如其中有乳白色颗粒状物,往往提醒有肺癌可能,必须取这部分痰液做涂片检验。白色颗粒状物,往往提醒有肺癌可能,必须取这部分痰液做涂片检验。粘液脓性痰:粘液脓性痰:是在粘液痰基础上混有一部分脓液。检验时必须仔细挑选是在粘液痰基础上混有一部分脓液。检验时必须仔细挑选粘液丝部分做细胞学检验,以提升癌细胞检验阳性率。粘液丝部分做细胞学检验,以提升癌细胞检验阳性率。脓性痰:脓性痰:为黄色或黄绿色粘痰,因细菌种类不一样,痰粘稠度和颜色可为黄色或黄绿色粘痰,因细菌种类不一样,痰粘稠度和颜色可有不一样。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细有不一样。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检,以取得很好结果。胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检,以取得很好结果。泡沫痰:泡沫痰:即痰呈泡沫状,此种痰应在除去泡沫后,采取其中粘液丝做涂即痰呈泡沫状,此种痰应在除去泡沫后,采取其中粘液丝做涂片检验。片检验。血丝痰:血丝痰:即痰内带有少许血液,这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出即痰内带有少许血液,这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核,有时也见于支气管炎。血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核,有时也见于支气管炎。为了明确出血原因,应将带血丝及其附近部分痰全部制成涂片,进行检为了明确出血原因,应将带血丝及其附近部分痰全部制成涂片,进行检验。验。气味气味:正常无特殊气味正常无特殊气味,血腥味血腥味(血性痰血性痰),恶臭恶臭(合并厌氧感染合并厌氧感染),特殊臭味特殊臭味(晚期肺癌晚期肺癌)痰液脱落细胞检查第11页(2)取样:)取样:选择性取有价值部分选择性取有价值部分 用镊子、竹签等无吸水性材料夹取用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张不主张用玻璃制品、棉签等取样。用玻璃制品、棉签等取样。标准上优先选取以下部位:标准上优先选取以下部位:含血丝粘液痰。含血丝粘液痰。灰白色豆渣样痰丝(形似白色细线)。灰白色豆渣样痰丝(形似白色细线)。透明粘液丝丰富处。透明粘液丝丰富处。血液与粘液交界处痰液。血液与粘液交界处痰液。黏液丰富样本与水样样本应注意区分取样痰黏液丰富样本与水样样本应注意区分取样痰液量,普通情况下后者取样量应多于前者。液量,普通情况下后者取样量应多于前者。痰液脱落细胞检查第12页2、制片、制片普通涂片:普通涂片:直接涂片:用镊子或竹签直接涂抹在玻片上,尽直接涂片:用镊子或竹签直接涂抹在玻片上,尽可能分开粘液丝及血性部份,做到相对均匀,涂片可能分开粘液丝及血性部份,做到相对均匀,涂片面积应超出玻片空白部位三分之二,其优点是粘液面积应超出玻片空白部位三分之二,其优点是粘液丝分布显著,病变细胞相对集中,缺点是涂片厚薄丝分布显著,病变细胞相对集中,缺点是涂片厚薄不匀、重合现象多见而影响观察及封片,普通一次不匀、重合现象多见而影响观察及封片,普通一次制片二张以上。制片二张以上。压拉涂片:将取样标本置于一张玻片上后另一张压拉涂片:将取样标本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片,屡次推拉、挤压均玻片正面朝下压拉下一张玻片,屡次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片;优点是相对厚薄均匀,匀后二边分开得到二张涂片;优点是相对厚薄均匀,但可能细胞挤压分散,镜下沿粘液丝查找线索相对但可能细胞挤压分散,镜下沿粘液丝查找线索相对不显著。不显著。痰液脱落细胞检查第13页液基制片:液基制片:是指经过标本预处理后先把痰液粘液是指经过标本预处理后先把痰液粘液溶解、液化且细胞固定后再经过一定技术伎俩把细溶解、液化且细胞固定后再经过一定技术伎俩把细胞成份转移到玻片上制片方法,制作过程等同普通胞成份转移到玻片上制片方法,制作过程等同普通液基片,然应注意标本预处理中以下方面。液基片,然应注意标本预处理中以下方面。v选取痰液样本量通常为一张普通制片痰液量选取痰液样本量通常为一张普通制片痰液量3-5倍。倍。v在清洗、固定作用保留液内存放在清洗、固定作用保留液内存放15分钟以上,保留分钟以上,保留液各厂家不尽相同,但主要成份类似:酒精、甲醛、液各厂家不尽相同,但主要成份类似:酒精、甲醛、甲醇等。甲醇等。v1,4-二硫苏糖醇(二硫苏糖醇(DTT)液消化粘液:用清洗液加)液消化粘液:用清洗液加10%DTT粉剂配制成粉剂配制成DTT液加入到保留液中液加入到保留液中1-2ml,震荡震荡10分钟以上,即可完全溶解保留液中粘液,使分钟以上,即可完全溶解保留液中粘液,使标本完全液体化。标本完全液体化。痰液脱落细胞检查第14页沉渣涂片或细胞蜡块制作:沉渣涂片或细胞蜡块制作:v需要较大样本量,通常是用三天咳痰量混合需要较大样本量,通常是用三天咳痰量混合在一起制作取样,须注意标本预固定及适当在一起制作取样,须注意标本预固定及适当保留。保留。v标本需作液化、离心沉淀预处理(同前)。标本需作液化、离心沉淀预处理(同前)。v沉淀后细胞量少作涂片用,沉淀后细胞量少作涂片用,3-5张;沉淀后细张;沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。胞丰富者作细胞蜡块。v普查、科研等情况下应用较多,因其样本量普查、科研等情况下应用较多,因其样本量大也可深入应用分子、免疫等新技术。大也可深入应用分子、免疫等新技术。痰液脱落细胞检查第15页3、制片质量控制、制片质量控制v 样本选取:直接关系到检验阳性率,屡次样本选取:直接关系到检验阳性率,屡次检验多张涂片结果前后一致性应大于检验多张涂片结果前后一致性应大于80%以以上。上。v 涂片应相对均匀,重合部份面积涂片应相对均匀,重合部份面积20%,涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上,涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上,合格涂片百分比应合格涂片百分比应80%。痰液脱落细胞检查第16页(三)固定(三)固定 必须采取必须采取湿固定湿固定,即制片后马上固定,一旦固定不,即制片后马上固定,一旦固定不及时,涂片在空气中干燥后,细胞形态特征将显著及时,涂片在空气中干燥后,细胞形态特征将显著受损,所以及时固定非常主要。受损,所以及时固定非常主要。普通要求制片后马上固定,通常普通要求制片后马上固定,通常5秒钟。秒钟。固定时间涂片固定时间涂片15分钟,细胞蜡块分钟,细胞蜡块30分钟。分钟。固定液:为常规固定液。固定液:为常规固定液。垂直快速放入或自由落体放入固定液,不然会出现细胞垂直快速放入或自由落体放入固定液,不然会出现细胞堆积而引发皱折现象。堆积而引发皱折现象。必须注意固定液及时更换。必须注意固定液及时更换。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间交叉污染。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间交叉污染。痰液脱落细胞检查第17页(四)染色(四)染色痰液脱落细胞病理学检验常规染色方法是痰液脱落细胞病理学检验常规染色方法是H.E染色和巴氏染色染色和巴氏染色,特殊需要时也可使用特殊需要时也可使用抗酸染色,抗酸染色,(五)透明及封片(五)透明及封片为保留痰液中细胞结构清楚,涂片染色脱为保留痰液中细胞结构清楚,涂片染色脱水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。痰液脱落细胞检查第18页(六)痰液标本安全管理与院感控制(六)痰液标本安全管理与院感控制 痰液样本因经常伴随特异性感染,而且需开放性处痰液样本因经常伴随特异性感染,而且需开放性处理,所以其试验室安全管理及院感控制必须引发重理,所以其试验室安全管理及院感控制必须引发重视。视。v必须使用密闭性器皿来存放标本。必须使用密闭性器皿来存放标本。v制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离办法。制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离办法。v有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒固定处理固定处理,惯用预固定液为惯用预固定液为2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇混合。乙醇混合。v 每日一次空气、环境紫外线消毒,并统计时每日一次空气、环境紫外线消毒,并统计时间,定时检测紫外灯管紫外线强度。间,定时检测紫外灯管紫外线强度。v残留样本及盛具统一残留样本及盛具统一1%过氧乙酸液消毒处理过氧乙酸液消毒处理,统一存放专用医疗垃圾袋后处理,处理标本过统一存放专用医疗垃圾袋后处理,处理标本过程中产生相关污染液体经专用医用污水管道排程中产生相关污染液体经专用医用污水管道排放。放。痰液脱落细胞检查第19页其配制方法:其配制方法:10g聚乙二醇聚乙二醇(熔点为熔点为43-46)在在50-100温箱中溶化后倒入温箱中溶化后倒入500ml 50%乙醇液中混匀成乙醇液中混匀成聚乙二醇溶解液备用聚乙二醇溶解液备用(此液不会凝固此液不会凝固).。1升升2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇溶解混合液组成乙醇溶解混合液组成配方为:配方为:水水 437ml 95%乙醇液乙醇液 526ml 聚乙二醇乙醇液聚乙二醇乙醇液 40ml痰液脱落细胞检查第20页(七)分子病理学技术在痰液样本中应用(七)分子病理学技术在痰液样本中应用 痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应用较少,但在科研、专题普查等领域则经常用较少,但在科研、专题普查等领域则经常开展,应用最多是经过开展,应用最多是经过PCR或原位杂交技术或原位杂交技术检测上皮细胞以下项目:检测上皮细胞以下项目:v端粒及端粒酶检测端粒及端粒酶检测vP16基因甲基化检测基因甲基化检测v异源核糖核蛋白异源核糖核蛋白A2及其异构体及其异构体vP53基因基因vEGFR相关基因等相关基因等痰液脱落细胞检查第21页痰液检验痰液检验镜检:镜检:观察有形成份种类、数量、形态改变观察有形成份种类、数量、形态改变 1、白细胞:正常少许、白细胞:正常少许 2、中性粒细胞、中性粒细胞/脓细胞脓细胞:化脓性炎症或有混合感染:化脓性炎症或有混合感染 3、嗜酸性粒细胞、嗜酸性粒细胞:支气管哮喘、过敏性支气管炎、:支气管哮喘、过敏性支气管炎、肺吸虫病等肺吸虫病等 4、淋巴细胞、淋巴细胞:肺结核病:肺结核病 5、红细胞:正常无、红细胞:正常无 6、呼吸道疾病、出血性疾病(镜检、呼吸道疾病、出血性疾病(镜检/隐血试验)隐血试验)痰液脱落细胞检查第22页痰液检验痰液检验7、上皮细胞:正常少许、上皮细胞:正常少许 炎症炎症/其它呼吸系统疾病时大量增加其它呼吸系统疾病时大量增加8、肺泡巨噬细胞:、肺泡巨噬细胞:炭末细胞:吞噬炭粒(炭末从容症及大量烟尘吸入者)炭末细胞:吞噬炭粒(炭末从容症及大量烟尘吸入者)含铁血黄素细胞含铁血黄素细胞/心力衰竭细胞:吞噬含铁血黄素心力衰竭细胞:吞噬含铁血黄素 心力衰竭引发肺淤血、肺梗死、肺出血心力衰竭引发肺淤血、肺梗死、肺出血9、硫磺样颗粒:黄色小颗粒,放线菌病、硫磺样颗粒:黄色小颗粒,放线菌病 压平可见菌丝放射状排列呈菊花形压平可见菌丝放射状排列呈菊花形(放线菌放线菌)10、寄生虫及虫卵、寄生虫及虫卵 肺吸虫卵:肺吸虫病肺吸虫卵:肺吸虫病 溶组织阿米巴滋养体:阿米巴肺脓肿溶组织阿米巴滋养体:阿米巴肺脓肿/阿米巴肝脓肿入肺阿米巴肝脓肿入肺痰液脱落细胞检查第23页痰液检验痰液检验镜检镜检 染色染色:脱落细胞:肺部咳出,标本新鲜,一小时内固定脱落细胞:肺部咳出,标本新鲜,一小时内固定 巴氏巴氏(papanicolaou)染色、染色、苏木素苏木素-伊红伊红(H-E)染色染色 细菌学涂片检验:细菌学涂片检验:革兰革兰(Gram)染色:检测细菌、真菌染色:检测细菌、真菌 抗酸染色:检测结核杆菌抗酸染色:检测结核杆菌 荧光染色:检测真菌、支原体荧光染色:检测真菌、支原体痰液脱落细胞检查第24页 镜检前准备及镜检规范:镜检前准备及镜检规范:镜检内容镜检内容1、标本满意度评定:、标本满意度评定:在满意标本前提下检验样本才含有可信性,才可确保检验敏在满意标本前提下检验样本才含有可信性,才可确保检验敏感性与特异性。感性与特异性。满意样本要求:满意样本要求:合格申请单,有详细临床资料和病史提供,咳痰方法已经过指导,方合格申请单,有详细临床资料和病史提供,咳痰方法已经过指导,方法正确。法正确。涂片面积大于玻片面积三分之二以上,分布均匀,厚薄相对一致,可涂片面积大于玻片面积三分之二以上,分布均匀,厚薄相对一致,可见粘液丝(普通涂片)。见粘液丝(普通涂片)。镜下见到以下成份表明此样本合格:镜下见到以下成份表明此样本合格:v吞噬反应组织细胞(尘细胞)。吞噬反应组织细胞(尘细胞)。v柱状上皮细胞(伴或不伴退变)。柱状上皮细胞(伴或不伴退变)。v支气管形成粘液丝(枯丝曼氏螺旋体)。支气管形成粘液丝(枯丝曼氏螺旋体)。三、痰液涂片脱落细胞病理学诊疗三、痰液涂片脱落细胞病理学诊疗痰液脱落细胞检查第25页 不满意样本:不满意样本:不能作出诊疗意见,提议重新不能作出诊疗意见,提议重新取样制片。取样制片。申请单内容不全,咳痰时未经专业指导。申请单内容不全,咳痰时未经专业指导。不能确认标本与申请单一致性。不能确认标本与申请单一致性。涂片面积少于二分之一阴性标本。涂片面积少于二分之一阴性标本。缺乏满意样本应有三种成份阴性标本。缺乏满意样本应有三种成份阴性标本。固定、染色效果差,细胞严重变形。固定、染色效果差,细胞严重变形。v以上评定可写入汇报单内容中,以将标本满以上评定可写入汇报单内容中,以将标本满意度信息反馈给临床医师及患者。意度信息反馈给临床医师及患者。痰液脱落细胞检查第26页 脱落细胞检验基本知识脱落细胞检验基本知识 第一节第一节 细胞诊疗学基本概念细胞诊疗学基本概念一、细胞增生活跃一、细胞增生活跃 细胞体积增大,核显著增大,核染色质增多,颗粒细胞体积增大,核显著增大,核染色质增多,颗粒 增粗,核仁增大增多,核浆百分比失常,胞浆蓝染(增粗,核仁增大增多,核浆百分比失常,胞浆蓝染(巴氏),可伴核分裂像。巴氏),可伴核分裂像。二、组织修复细胞二、组织修复细胞 组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来细胞。组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来细胞。特特征征:细细胞胞多多成成片片出出现现,似似合合体体细细胞胞,排排列列规规则则;细细胞胞稍稍增增大大,胞胞核核也也增增大大,核核不不深深染染,胞胞浆浆尚尚丰丰富富,深深染染;核核仁仁显显著著增大或增多;可能出现核分裂像增大或增多;可能出现核分裂像。10/25/202427痰液脱落细胞检查第27页组织修复细胞痰液脱落细胞检查第28页三、细胞化生三、细胞化生1、未成熟鳞状上皮化生细胞特征:、未成熟鳞状上皮化生细胞特征:似似正正常常上上皮皮外外底底层层细细胞胞大大小小;多多成成群群出出现现,可可呈呈铺铺砖砖式式排排列列;细细胞胞呈呈圆圆或或卵卵圆圆形形,边边缘缘有有小小突突起起;胞浆常有小空泡使胞浆透亮。胞浆常有小空泡使胞浆透亮。2、成熟鳞状上皮化生细胞特征:、成熟鳞状上皮化生细胞特征:细细胞胞似似正正常常鳞鳞状状上上皮皮中中层层细细胞胞大大小小;多多成成群群出出现现,细细胞胞呈呈多多边边形形,有有锐锐角角突突起起,形形态态多多样样;胞胞浆浆中中常常见小空泡。胞浆少,排列紧密,无细胞间桥。见小空泡。胞浆少,排列紧密,无细胞间桥。痰液脱落细胞检查第29页鳞状化生痰液脱落细胞检查第30页痰液脱落细胞检查第31页痰液脱落细胞检查第32页四、贮备细胞增生四、贮备细胞增生 贮备细胞是柱状上皮细胞下一层含有分化潜能幼稚细贮备细胞是柱状上皮细胞下一层含有分化潜能幼稚细胞(或未分化细胞)。胞(或未分化细胞)。形态特征:形态特征:细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;圆或卵圆形,胞浆有小突起;圆或卵圆形,胞浆有小突起;胞浆淡染可见小空泡;胞浆淡染可见小空泡;核偏位,可能大小稍不一致;核偏位,可能大小稍不一致;核染色质匀细,可见核仁和几个大小一致核粒;核染色质匀细,可见核仁和几个大小一致核粒;细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。痰液脱落细胞检查第33页成团增生基底细胞支气管黏膜支气管黏膜痰液脱落细胞检查第34页五、细胞增生五、细胞增生细胞分裂增强,数目增多,体积可增大,形态可出现异常。细胞分裂增强,数目增多,体积可增大,形态可出现异常。细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁显细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁显著,核膜增厚,甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。著,核膜增厚,甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。六、细胞分化六、细胞分化从幼稚细胞发育成含有完备结构和功效成熟细胞过程。从幼稚细胞发育成含有完备结构和功效成熟细胞过程。上皮细胞分化形态表现:上皮细胞分化形态表现:1 细胞体积由小到大细胞体积由小到大2 胞浆量由少到多胞浆量由少到多3 核浆比由大到小核浆比由大到小4 饱和由大到小饱和由大到小5 染色质排列由疏松到致密染色质排列由疏松到致密6 核仁由大到小,由多到少核仁由大到小,由多到少 痰液脱落细胞检查第35页七、细胞核分裂像七、细胞核分裂像 病理性分裂像应与核碎裂判别(核染色质呈大小不病理性分裂像应与核碎裂判别(核染色质呈大小不 等块状)等块状)八、细胞退行性变八、细胞退行性变 细胞退变包含变性和坏死,涂片中二者判别较困难,细胞退变包含变性和坏死,涂片中二者判别较困难,统称退变。统称退变。1 人工引发退变人工引发退变 原因:原因:标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或低渗溶液中;固定液浓度或时间不适合,过湿或过干低渗溶液中;固定液浓度或时间不适合,过湿或过干 形态特征:形态特征:细胞呈大片结构不清,细胞均增大或均缩细胞呈大片结构不清,细胞均增大或均缩小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变形式一致。小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变形式一致。痰液脱落细胞检查第36页2 细胞自然退变细胞自然退变 原原因因:细细胞胞脱脱落落过过久久,细细胞胞营营养养不不良良,炎炎症症、放放疗疗、化化疗影响,肿瘤表面供血不足,细胞生理性衰老疗影响,肿瘤表面供血不足,细胞生理性衰老 类型类型:(1)肿肿胀胀性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核肿肿大大,染染色色质质含含糊糊、断断裂裂并并淡淡染染,核核内内有有空空泡泡。胞胞浆浆空空泡泡状状、蜂蜂窝窝状状或或网网孔孔状状,胞界不清胞膜消失。胞界不清胞膜消失。(2)固固缩缩性性退退变变细细胞胞及及胞胞核核缩缩小小,胞胞浆浆红红染染、橘橘黄黄、淡淡黄黄或或多多彩彩,常常出出现现核核周周晕晕,核核固固缩缩,染染色色质质致致密密,核核碎裂核膜消失。碎裂核膜消失。痰液脱落细胞检查第37页脱落细胞肿胀性退变过程痰液脱落细胞检查第38页细胞退行性变痰液脱落细胞检查第39页细胞退行性变痰液脱落细胞检查第40页第二节第二节 正常脱落细胞形态正常脱落细胞形态 一、上皮细胞一、上皮细胞(一)复层鳞状上皮(一)复层鳞状上皮 痰液涂片中占痰液涂片中占80%-90%由底层到表层分为:基底层、中层、表层由底层到表层分为:基底层、中层、表层 1.基底层细胞:基底层细胞:(1)内底层细胞:)内底层细胞:单层立方或柱状,极少脱落。核浆比单层立方或柱状,极少脱落。核浆比1:1(2)外底层细胞:)外底层细胞:23层,核浆比层,核浆比1:3-1:210/25/202441痰液脱落细胞检查第41页2.中层细胞:中层细胞:形态多样,核浆比形态多样,核浆比1:3-1:5 3.表层细胞:表层细胞:多角形,核浆比多角形,核浆比1:5-1:10 (1)角化前细胞角化前细胞 (2)不全角化细胞不全角化细胞 (3)完全角化细胞完全角化细胞10/25/202442痰液脱落细胞检查第42页痰液脱落细胞检查第43页痰液脱落细胞检查第44页痰液脱落细胞检查第45页(二)柱状细胞(二)柱状细胞 正常痰液涂片中占正常痰液涂片中占10%-20%类型:单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上类型:单层柱状上皮、假复层纤毛柱状上 皮、复层柱状上皮皮、复层柱状上皮涂片中常见:涂片中常见:1 纤毛柱状上皮细胞纤毛柱状上皮细胞 2 黏液柱状上皮细胞黏液柱状上皮细胞 3 贮备细胞贮备细胞10/25/202446痰液脱落细胞检查第46页气管壁:黏膜、黏膜下层、外膜气管壁:黏膜、黏膜下层、外膜支气管黏膜:黏膜上皮及固有层支气管黏膜:黏膜上皮及固有层痰液脱落细胞检查第47页支气管黏膜痰液脱落细胞检查第48页成团、多核纤毛柱状上皮痰液脱落细胞检查第49页多核纤毛柱状上皮痰液脱落细胞检查第50页成团增生基底细胞支气管黏膜支气管黏膜痰液脱落细胞检查第51页纤毛柱状上皮细胞痰液脱落细胞检查第52页增生柱状上皮痰液脱落细胞检查第53页二、非上皮细胞二、非上皮细胞 1 内皮细胞内皮细胞 2 成纤维细胞成纤维细胞 3 组织细胞组织细胞 4 多核异物巨细胞多核异物巨细胞 5 血细胞血细胞10/25/202454痰液脱落细胞检查第54页肺泡吞噬细胞 多核痰液脱落细胞检查第55页三、背景成份三、背景成份 红细胞红细胞 炎细胞炎细胞 多核巨细胞多核巨细胞 坏死物坏死物 黏液等黏液等10/25/202456痰液脱落细胞检查第56页炎症增生时脱落细胞形态一、普通形态特征一、普通形态特征(一)上皮细胞(一)上皮细胞 急性炎症:退化、变性、坏死急性炎症:退化、变性、坏死 慢性炎症:增生、再生、化生,退化、变性慢性炎症:增生、再生、化生,退化、变性 1.鳞状上皮细胞:鳞状上皮细胞:退化变性、退化变性、巴氏细胞巴氏细胞(鳞化)(鳞化)(1)细胞核:核肥大、核固缩、核碎裂)细胞核:核肥大、核固缩、核碎裂10/25/202457痰液脱落细胞检查第57页 (2)细胞形态:变形(梭性、星形、蝌蚪形、不规则形),)细胞形态:变形(梭性、星形、蝌蚪形、不规则形),核改变不显著核改变不显著 柱状上皮鳞状化生柱状上皮鳞状化生。常见常见底层和中层细胞团底层和中层细胞团(正常或轻度畸形)(正常或轻度畸形)2 柱状上皮细胞:柱状上皮细胞:纤毛柱状上皮常成片脱落,以纤毛柱状上皮常成片脱落,以固缩退变固缩退变为主。为主。多多核核纤纤毛毛柱柱状状细细胞胞;核核增增大大柱柱状状细细胞胞;纤纤毛毛柱柱状状上上皮皮增增生生;贮贮备备细细胞胞增增生生;鳞鳞状状化化生生细细胞胞;纤纤毛毛柱柱状状上上皮皮细细胞胞退退变变;纤纤毛柱状上皮细胞核、浆包涵体;增生细支气管和肺泡管上皮。毛柱状上皮细胞核、浆包涵体;增生细支气管和肺泡管上皮。(1)细胞核:固缩退变)细胞核:固缩退变 (2)细胞形态:缩小)细胞形态:缩小10/25/202458痰液脱落细胞检查第58页痰液脱落细胞检查第59页贮备细胞增生贮备细胞增生 不成熟鳞化不成熟鳞化成熟化生细胞成熟化生细胞痰液脱落细胞检查第60页变性,无核纤毛丛痰液脱落细胞检查第61页 3 病毒感染所致上皮细胞改变病毒感染所致上皮细胞改变 (1)单纯疱疹病毒:鳞状细胞核肿大,弱嗜)单纯疱疹病毒:鳞状细胞核肿大,弱嗜 碱性不透明,碱性不透明,大嗜酸性包涵体,多核大嗜酸性包涵体,多核 巨细胞巨细胞细胞变性。细胞变性。(2)巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞浆见)巨细胞病毒:胞体增大,胞核、胞浆见 嗜酸性包涵体。嗜酸性包涵体。10/25/202462痰液脱落细胞检查第62页病毒感染柱状上皮痰液脱落细胞检查第63页多核纤毛柱状上皮细胞痰液脱落细胞检查第64页增生纤毛柱状上皮细胞痰液脱落细胞检查第65页增生基底细胞痰液脱落细胞检查第66页鳞状上皮化生痰液脱落细胞检查第67页退变纤毛柱状上皮痰液脱落细胞检查第68页病毒感染,核内包涵体痰液脱落细胞检查第69页(二)炎细胞成份(二)炎细胞成份 1 肺泡吞噬细胞肺泡吞噬细胞 2 其它炎细胞其它炎细胞(三)其它成份(三)其它成份黏液管型;植物细胞;钙化凝结物;非致病菌黏液管型;植物细胞;钙化凝结物;非致病菌痰液脱落细胞检查第70页肺泡吞噬细胞痰液脱落细胞检查第71页黏液管型 线虫v黏液管型痰液脱落细胞检查第72页痰液脱落细胞检查第73页(二)上皮增生、再生、化生时形态(二)上皮增生、再生、化生时形态1 增生增生共同特点:胞浆嗜碱性共同特点:胞浆嗜碱性 胞浆相对降低,核浆比略大胞浆相对降低,核浆比略大 核增大可见核仁核增大可见核仁 核分裂活跃核分裂活跃(1)鳞状上皮)鳞状上皮(2)纤毛柱状上皮)纤毛柱状上皮10/25/202474痰液脱落细胞检查第74页增生基底细胞痰液脱落细胞检查第75页增生柱状细胞及少许基底细胞痰液脱落细胞检查第76页2 再生:再生上皮和基底层细胞再生:再生上皮和基底层细胞 再再生生细细胞胞核核大大染染色色深深,染染色色质质结结块块及及有有丝丝分分裂裂,核核仁仁大大、多多,浆浆略略嗜嗜碱碱性性,见见双双核核多多核核,常常见见炎炎细胞。细胞。3 化生:化生:不不成成熟熟鳞鳞状状化化生生上上皮皮似似基基底底层层与与棘棘层层细细胞胞之之间间过过渡渡细细胞胞,成成熟熟鳞鳞状状化化生生上上皮皮与与正正常常鳞鳞状状上上皮皮极极难难区分。区分。如如化化生生细细胞胞核核染染色色质质增增粗粗,染染色色深深,核核大大,染染色色大小异常称不经典化生或异型化生。大小异常称不经典化生或异型化生。10/25/202477痰液脱落细胞检查第77页鳞状化生痰液脱落细胞检查第78页(三)各种炎症时脱落细胞特征1急性炎症:急性炎症:上皮细胞常严重退变,有较多上皮细胞常严重退变,有较多 中性粒细胞、吞噬细胞、坏死中性粒细胞、吞噬细胞、坏死 细胞碎屑,纤维素。细胞碎屑,纤维素。2亚急性炎症:亚急性炎症:退变上皮细胞、坏死细胞碎退变上皮细胞、坏死细胞碎 屑和增生上皮细胞,中性粒细屑和增生上皮细胞,中性粒细 胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞 和淋巴细胞。和淋巴细胞。3慢性炎症:慢性炎症:较多成团增生上皮细胞,淋较多成团增生上皮细胞,淋 巴细胞、浆细胞。巴细胞、浆细胞。痰液脱落细胞检查第79页4 肉芽肿性炎肉芽肿性炎v上皮样细胞:上皮样细胞:v朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊疗结核不可靠,朗格汉斯巨细胞:仅靠此细胞诊疗结核不可靠,需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。需同时见到上皮样细胞和干酪样坏死。v干酪样坏死:若邻近出现上皮样细胞,更支持结干酪样坏死:若邻近出现上皮样细胞,更支持结核诊疗。核诊疗。v其它细胞:大量单核细胞、淋巴细胞其它细胞:大量单核细胞、淋巴细胞痰液脱落细胞检查第80页类上皮细胞痰液脱落细胞检查第81页核异质和角化不良脱落细胞形态核异质和角化不良脱落细胞形态(一)核异质(一)核异质 1 轻度核异质细胞:轻度核异质细胞:又称炎性核异质又称炎性核异质病病因因:去去除除多多能能恢恢复复。多多见见于于鳞鳞状状上上皮皮中中、表表层细胞。层细胞。与炎性增生细胞判别:与炎性增生细胞判别:核虽大,但染色核虽大,但染色 质仍为细颗粒状,分布均匀,无染色加深质仍为细颗粒状,分布均匀,无染色加深 和核畸形。和核畸形。痰液脱落细胞检查第82页痰液脱落细胞检查第83页痰液脱落细胞检查第84页2重度核异质细胞:重度核异质细胞:3 见见于于慢慢性性炎炎症症,可可发发展展为为癌癌细细胞胞,又又称称癌癌前前核核异异质质。核核增增大大12倍倍,染染色色质质粗粗颗颗粒粒状状,分分布布略略不不均均,核核膜膜增增厚厚,核核仁仁大大、多多,胞胞浆浆与与正正常常细细胞胞相相同同,核核浆浆比比轻轻度度增增大。大。见于癌前病变、原位癌、浸润癌细胞见于癌前病变、原位癌、浸润癌细胞 与与癌癌细细胞胞判判别别:核核异异型型性性中中等等,核核浆浆比比无无显显著改变。著改变。痰液脱落细胞检查第85页痰液脱落细胞检查第86页痰液脱落细胞检查第87页(二)角化不良(二)角化不良v又称异常角化、不成熟角化、细胞内角化又称异常角化、不成熟角化、细胞内角化v细细胞胞呈呈圆圆形形,核核深深染染,胞胞浆浆呈呈深深红红色色,巴巴氏氏染染色色呈呈桔桔黄黄色色,此此种种细细胞胞出出现现在在底底层层、中中层层时时,可可能能为为癌癌前前病病变变表表现现,在在老老年年和和更更年年期期妇女应高度重视。妇女应高度重视。痰液脱落细胞检查第88页角化不良痰液脱落细胞检查第89页三、放疗对细胞形态影响三、放疗对细胞形态影响 放疗是治疗癌症主要方法之一,受照射部位放疗是治疗癌症主要方法之一,受照射部位癌细胞和其周围正常细胞均会受射线影响而癌细胞和其周围正常细胞均会受射线影响而发生形态改变。发生形态改变。了解这些改变对明确是否复发非常必要。了解这些改变对明确是否复发非常必要。细胞核增大、空泡变性、核碎裂和核溶解;细胞核增大、空泡变性、核碎裂和核溶解;细胞质内细胞器空泡变,溶酶体破坏释放蛋细胞质内细胞器空泡变,溶酶体破坏释放蛋白水解酶,使细胞自溶。白水解酶,使细胞自溶。痰液脱落细胞检查第90页(一)良型上皮细胞改变(一)良型上皮细胞改变1.急性放射反应急性放射反应(1)细胞体积增大,可增大一倍以上,胞质膨)细胞体积增大,可增大一倍以上,胞质膨胀而向微弱处外突,呈不规则形或蝌蚪形。胀而向微弱处外突,呈不规则形或蝌蚪形。胞核与胞质百分比不大。胞核与胞质百分比不大。(2)核边增厚,核空泡变,胞质核染色质同质)核边增厚,核空泡变,胞质核染色质同质化,呈淡蓝云雾状染色,有空泡形成,染色化,呈淡蓝云雾状染色,有空泡形成,染色质被推向核边,使核边增厚,最终核碎裂溶质被推向核边,使核边增厚,最终核碎裂溶解,可见中性粒细胞侵入胞质内。解,可见中性粒细胞侵入胞质内。(3)放射作用影响细胞有丝分裂过程,使之形)放射作用影响细胞有丝分裂过程,使之形成多核或分叶核等畸形核。成多核或分叶核等畸形核。痰液脱落细胞检查第91页2.上皮细胞连续性放射改变上皮细胞连续性放射改变 因为放疗后上皮细胞改变连续时间较长,涂因为放疗后上皮细胞改变连续时间较长,涂片中可发觉核异质细胞,片中可发觉核异质细胞,胞核
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