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定量定量PCR检测乙肝病毒检测乙肝病毒-DNA临床意义临床意义 金域医学检验中心荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义1/12一、流行病学一、流行病学HBV感染呈世界性流行,但不一样地域HBV感染流行强度差异很大。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5亿人为慢性HBV感染者,每年约有100 万人死于HBV感染所致肝衰竭、肝硬化和原发性肝细胞癌(HCC)荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义2/12二、病原学二、病原学乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA 病毒科(hepadnaviridae),基因组长约3.2kb,为部分双链环状DNA。HBV 含个部分重合开放读码框(ORF),即前SS 区、前CC 区、P 区和X 区。前S/S 区编码大(前S1、前S2 及S)、中(前S2 及S)、小(S)3 种包膜蛋白;前C/C 区编码HBeAg 及HBcAg;P 区编码聚合酶;X 区编码X 蛋白。HBV因为基因序列不一样又能够分为A-H八种基因型.荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义3/12荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义4/12三 乙型肝炎发病机制HBV是经过刺激宿主免疫系统攻击受感染肝细胞来间接地引发肝损伤。受HBV感染肝细胞在其表面表示病毒蛋白质,成为CTL攻击目标。针对受染细胞免疫反应引发炎症和坏死。坏死-炎症活动连续存在造成肝纤维化。荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义5/12四 试验室检测方法一 传统试验室检测方法1.血清学检测(两对半检测)HBsAg抗-HBs HBeAg 抗-HBe 抗-HBc 2.肝功效检测(ALT,AST)二新型试验室检测方法1.乙肝病毒定量2.赖药性基因检测3.乙肝病毒基因分型荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义6/12五 为何要做乙肝病毒DNA定量 1.传统检测乙肝方法为“乙肝两对半”和“肝功效”检测范围有限.(不能测定乙肝病毒复制情况、传染程度)2.乙肝病毒定量是直接检测乙肝病毒关键成份乙肝病毒DNA.(能够直接了解病毒载量,了解乙肝病毒复制情况、传染程度)比如:1 小三阳病情判断 2.HBsAg阳性或单一抗 HBc阳性病情判断 3.二对半5项全部阴性病情判断 4.抗一HBs阳性病情判断荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义7/12六 乙肝定量测定意义1.定量方法使全程动态观察病毒含量成为可能2.选择治疗时机3.预计治疗反应5.治疗后随访和检测复发6.确定耐药株及选择适当治疗方案7.抗病毒药品疗效评价和监测8.抗病毒新药研制9.研究基因表示情况,探讨一些疾病致病机理10.围产期保健荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义8/12七 HBV-DNA在什么水平需要治疗(1)HBV DNA定量(乙肝病毒DNA定量)105 拷贝/m l(HBeAg 阴性者为HBV DNA定量104 拷贝/ml);(2)ALT(谷氨酸氨基转移酶)2ULN(ULN正常值上限);如用干扰素治疗,ALT 应10ULN,血总胆红素水平应2ULN;(3)如ALT 2 ULN,但肝组织学显示Knodell HAI 4,或G2 炎症坏死。含有(1)并有(2)或(3)患者应进行抗病毒治疗;对达不到上述治疗标准者,应监测病情改变,如连续HBV DNA定量阳性,且ALT 异常,也应考虑抗病毒治疗。荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义9/12八八 治疗方案治疗方案治疗总体目标治疗总体目标慢性乙型肝炎治疗总体目标是:最大程度地长久抑制或消除HBV,减轻肝细胞炎症坏死及肝纤维化,延缓解阻止疾病进展,降低和预防肝脏失代偿、肝硬化、HCC 及其并发症发生,从而改进生活质量和延长存活时间。慢性乙型肝炎治疗主要包含抗病毒、免疫调整、抗炎保肝、抗纤维化和对症治疗,其中抗病毒治疗是关键,只要有适应证,且条件允许,就应进行规范抗病毒治疗。荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义10/12九 详细治疗1.抗病毒治疗抗病毒治疗干扰素治疗干扰素治疗 核苷(酸)类似物治疗核苷(酸)类似物治疗(拉米夫定等)免疫调整治疗免疫调整治疗 其它抗病毒药品及中药治疗其它抗病毒药品及中药治疗2 其它对症治疗其它对症治疗抗炎保肝治疗抗炎保肝治疗 抗纤维化治疗抗纤维化治疗 荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义11/12谢谢大家!荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的临床意义12/12
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