致病性微生物的实验诊断学基础课件.pptx

致病性微生物试验诊疗学基础浙江省医学科学院何浙生1致病性微生物的实验诊断学基础课件第1页一、常见细菌性传染病病原学及血清学诊疗基础法定细菌性传染病种类：甲类传染病：鼠疫、霍乱；乙类传染病：细菌性痢疾、伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、流行性和地方性斑疹伤寒；丙类传染病：肺结核、麻风病、感染性腹泻。2致病性微生物的实验诊断学基础课件第2页采样注意事项：时间性针对性防护与消毒无菌操作标识昆虫、动物标本3致病性微生物的实验诊断学基础课件第3页临床与尸解取材参考表病人取样解剖取样待诊血尿便痰唾咽脑腺局肝脾肺肠淋骨脑病种液洗脊穿部巴髓液液液穿结刺斑疹伤寒+鼠疫+霍乱+炭疽+布病+伤寒、副伤寒+痢疾+肉毒毒素中毒+钩体病+注:+代表一定要取样，+代表亦应取样4致病性微生物的实验诊断学基础课件第4页样品保留：冷藏保留保留液保留5致病性微生物的实验诊断学基础课件第5页标本运输：严格包装，外表消毒，编号，登记，贴标签，严防容器破碎、滴漏，防止活标本逃逸等；附送检单，填明名称、数量、地点、时间等；专员护送，不要委托携带，尽快抵达目标地；妥善保留，运输途中防止高温、日光、过分震动等。6致病性微生物的实验诊断学基础课件第6页非污染材料检验程序动物非污染样品保留一部分(以备再查)血清学检验镜检细菌培养查Ag查Ab染色及非染色免疫荧光镜检判定镜检分菌血清学检验G染色及其它染色免疫荧光G染色及其它染色免疫荧光镜检判定查抗原查抗体7致病性微生物的实验诊断学基础课件第7页被污染材料检验程序样品处理污染样品保留一部分(以备再查)上清或滤过液(病毒)沉淀物或滤阻物(经一定稀释)接种小鼠查肉毒毒素接种幼猫查葡萄球菌肠毒素乳鼠.鸡胚.组织培养病毒、立克次体等细菌培养查抗原CFT协同SAT反向HATHAIT等镜检动物细菌培养G染色及其它染色IFT查抗原查抗体分菌镜检鉴定8致病性微生物的实验诊断学基础课件第8页细菌病原学诊疗检样处理普通样品处理：包含洗脱、提取、浓缩和抗杂菌等；节肢动物标本处理v蚤类：制作标本时挤出前胃，涂片，分菌时可用单体也可用群体，研碎后接种培养。v蜱：用消毒液浸洗后研磨，分菌。v蝇：用选择性增菌液洗，培养洗液。v蚊：对细菌性传染病意义不大，主要时对病毒性传染病意义较大9致病性微生物的实验诊断学基础课件第9页病原鉴定菌属确实定细菌种型确实定v细菌染色v细菌生化反应试验糖代谢试验有机酸、铵盐反应蛋白、氨基酸、含氮化合物呼吸酶类试验毒性酶类试验胆汁（胆盐）溶菌试验10致病性微生物的实验诊断学基础课件第10页血清学诊疗基础知识（1）抗原、抗体和补体抗原:完全Ag、半Ag、组成Ag条件，医学上主要Ag类别、共同Ag与异嗜性Ag；抗体:基本结构、特点、功效、类别等；补体:概念、组成、功效11致病性微生物的实验诊断学基础课件第11页血清学诊疗基础知识（2）抗原、抗体结合原理抗原、抗体结合原理12致病性微生物的实验诊断学基础课件第12页血清学诊疗基础知识（3）抗原、抗体反应特点特异性 阶段性 百分比性 可逆性 13致病性微生物的实验诊断学基础课件第13页血清学诊疗基础知识（4）抗原、抗体反应影响原因AgAb电解质温度pH14致病性微生物的实验诊断学基础课件第14页血清学诊疗基本方法：玻片凝集试验试管凝集试验抗球蛋白凝集试验补体结合试验ELISA试验琼脂扩散试验免疫荧光试验15致病性微生物的实验诊断学基础课件第15页二、常见病毒性传染病试验诊疗学基础法定病毒性传染病种类：（甲类传染病）乙类传染病：病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、麻疹、流行性出血质热、狂犬病、流行性乙型脑炎。丙类传染病：流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹骊、急性出血性结膜炎。16致病性微生物的实验诊断学基础课件第16页临床诊疗临床诊疗 血清学诊疗血清学诊疗试验室诊疗试验室诊疗 病毒学诊疗病毒学诊疗 分子病毒学诊疗分子病毒学诊疗病毒性疾病确实诊病毒性疾病确实诊 临床诊疗试验室诊疗临床诊疗试验室诊疗病病 毒毒 病病 诊诊 断断17致病性微生物的实验诊断学基础课件第17页采 样 标 本*血液 *脑脊液*粪便*咽分泌物（咽拭子）*尿*疱疹液*结膜拭子*痰、鼻分泌物*尸检：脑、肝、肺、肾、心、胃、淋巴结等器官*活检：病变器官 18致病性微生物的实验诊断学基础课件第18页基本方法：鸡胚病毒培养与分离动物细胞细胞阳性判断尿液中抗原阳性鸡胚绒毛尿囊膜病变死亡动物发病与死亡培养液PH改变细胞干扰试验CPE判定病毒加标准血清后中和试验含抗原材料抗原性检测电子显微镜病毒检测病病 毒毒 学学 检检 诊诊19致病性微生物的实验诊断学基础课件第19页1、查抗体IgG早期及恢复期；IgM4周内；IgA28周。基本方法：血凝抑制试验（比如流感、麻疹等）间接血凝抑制试验对流电泳琼脂扩散试验补体结合试验酶标抗体染色试验ELISA试验免疫萤光试验中和试验等血清学检诊20致病性微生物的实验诊断学基础课件第20页 基本方法：血凝试验 间接血凝试验 血球吸附试验 琼脂扩散试验 对流电泳试验 免疫萤光试验 ELISA试验 中和试验 同位素查 抗 原21致病性微生物的实验诊断学基础课件第21页分子病毒学诊疗方法基本方法：蛋白印迹法 核酸杂交试验 聚合酶联扩增试验 病毒基因序列测定22致病性微生物的实验诊断学基础课件第22页