药品质量标准分析方法验证培训课件.pptx

第三节 药品质量标准分析方法验证 一、目标 证实所采取分析方法适合于对应检测要求。药品质量标准分析方法验证培训课件第1页二、用途（一）药品质量标准起草时，分析方法需经验证。（二）药品生产方法变更、制剂组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。药品质量标准分析方法验证培训课件第2页三、需验证分析项目 1.判别试验；2.杂质定量或程度检验；3.原料或制剂中有效成份含量测定；4.制剂中其它成份（降解产物、防腐剂等）测定；5.溶出度、释放度等功效检验中溶出量等测试方法。药品质量标准分析方法验证培训课件第3页四、验证内容 验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性药品质量标准分析方法验证培训课件第4页（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定结果与真实值或参考值靠近程度，用百分回收率表示。测定回收率R（recovery）详细方法可采取“回收试验法”和“加样回收试验法”。药品质量标准分析方法验证培训课件第5页 回收试验 空白+已知量A对照品（或标准品）测定，测定值为M药品质量标准分析方法验证培训课件第6页 加样回收试验 已准确测定药品含量P真实样品+已知量A对照品（或标准品）测定，测定值为M药品质量标准分析方法验证培训课件第7页 数据要求 要求范围内，最少用9次测定结果评价，如制备高、中、低三个不一样浓度样品各测三次。药品质量标准分析方法验证培训课件第8页1.1.含量测定方法准确度含量测定方法准确度 原料药原料药可用已知纯度对照品或样可用已知纯度对照品或样品进行测定，或用本法所得结果与已品进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度另一方法测定结果进行比建立准确度另一方法测定结果进行比较。较。药品质量标准分析方法验证培训课件第9页 制制剂剂可可用用含含己己知知量量被被测测物物各各组组分分混混合合物物进进行行测测定定，即即采采取取在在空空白白辅辅料料中加入原料药对照品方法。中加入原料药对照品方法。如如不不能能得得到到制制剂剂全全部部组组分分，可可向向制制剂剂中中加加入入已已知知量量被被测测物物进进行行测测定定，或或与与另另一一个个已已建建立立准准确确度度方方法法比比较较结结果。果。药品质量标准分析方法验证培训课件第10页 中药分析准确度普通用加样回收中药分析准确度普通用加样回收试验衡量。中药回收率普通要求在试验衡量。中药回收率普通要求在9595105%105%范围内，有些方法操作步骤繁范围内，有些方法操作步骤繁多时，可要求在多时，可要求在9090110%110%范围内。范围内。RSDRSD普通在普通在2%2%以内。以内。药品质量标准分析方法验证培训课件第11页2 2杂质定量测定准确度杂质定量测定准确度 可可向向原原料料药药或或制制剂剂中中加加入入已已知知量量杂杂质质进进行行测测定定。假假如如不不能能得得到到杂杂质质或或降降解解产产物物，可可用用本本法法测测定定结结果果与与另另一一成熟方法进行比较。成熟方法进行比较。药品质量标准分析方法验证培训课件第12页 （二）精密度（二）精密度（precisionprecision）精精密度是指在要求条件下，同一个均匀样密度是指在要求条件下，同一个均匀样品，经屡次取样测定所得结果之间靠近品，经屡次取样测定所得结果之间靠近程度。用偏差（程度。用偏差（d d）、标准偏差）、标准偏差(SDSD)、相对标准偏差相对标准偏差(RSDRSD)（变异系数，（变异系数，CVCV）表示。表示。药品质量标准分析方法验证培训课件第13页偏差（d）：测量值与平均值之差药品质量标准分析方法验证培训课件第14页相对偏差允许差：容量分析（中和法、非水滴定法、银量法、络合滴定法、重氮化法、氧化还原法）0.3%；重量法 0.5%；氧瓶燃烧法 0.5%；仪器分析 3%、凯氏定氮法 1%药品质量标准分析方法验证培训课件第15页标准（偏）差（SD或S）药品质量标准分析方法验证培训课件第16页相对标准（偏）差（RSD），也称变异系数（CV）药品质量标准分析方法验证培训课件第17页 1.1.重复性重复性(repeatability):(repeatability):在在相同条件下，由同一个分析人员测定相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果精密度；在要求范围内，最所得结果精密度；在要求范围内，最少用少用9 9次测定结果评价，如制备三个次测定结果评价，如制备三个不一样浓度样品各测三次或把被测物不一样浓度样品各测三次或把被测物浓度看成浓度看成100%100%，最少测，最少测6 6次进行评价。次进行评价。药品质量标准分析方法验证培训课件第18页 2.2.中间精密度中间精密度 同一试验室，同一试验室，不一样时间由不一样分析人员用不不一样时间由不一样分析人员用不一样设备所得结果精密度。一样设备所得结果精密度。3.3.重现性重现性(reproducibility)(reproducibility)不不一样试验室，不一样分析人员测定一样试验室，不一样分析人员测定结果精密度。结果精密度。数据要求：需汇报数据要求：需汇报RDRD，RSDRSD和可和可信限。信限。药品质量标准分析方法验证培训课件第19页（三）检测限（三）检测限（limit of detectionlimit of detection，LOD LOD）检测限系指试样在确定试验条检测限系指试样在确定试验条件下，被测物能被检测出最低浓度件下，被测物能被检测出最低浓度或含量。或含量。是程度检验效能指标，无需定是程度检验效能指标，无需定量测定，只要指出高于或低于该要量测定，只要指出高于或低于该要求浓度即可。求浓度即可。药品质量标准分析方法验证培训课件第20页1 1非仪器分析目视法非仪器分析目视法 用用已已知知浓浓度度被被测测物物，试试验验出出能能被被可靠地检测出最低浓度或量。可靠地检测出最低浓度或量。药品质量标准分析方法验证培训课件第21页 2 2信噪比法信噪比法 用于能显示基线噪音分析方法用于能显示基线噪音分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出信号与空白样品测出信号进试样测出信号与空白样品测出信号进行比较，算出能被可靠地检测出最低行比较，算出能被可靠地检测出最低浓度或量。普通以信噪比（浓度或量。普通以信噪比（S/NS/N）3131或或2121时对应浓度或注入仪器量确定时对应浓度或注入仪器量确定检测限。检测限。药品质量标准分析方法验证培训课件第22页（1）空白值0时；测定背景10次以上，求出标准差b。将b乘以三倍；在工作曲线上求出3b相对应浓度Xb；即为方法检出值；（2）空白值不等于0；测定背景10次以上，求出标准差b；将b 乘以三倍；在工作曲线上求出3 b 相对应浓度Xb；将求得对应浓度值加上空白值即得该方法检出限。药品质量标准分析方法验证培训课件第23页（四）定量限（1imit of quantitation，LOQ）指样品中被测物能被定量测定最低量，结果应含有一定准确度和精密度要求。药品质量标准分析方法验证培训课件第24页 惯用信噪比法确定定量限，普通以信噪比（S/N）为101时对应浓度或注入仪器量进行确定，也可按1984年国际纯粹和应用化学联合会(IVPAC)要求：用仪器所测空白背景响应标准差（SD）10倍为预计值，再经试验确定方法实际测定下限。药品质量标准分析方法验证培训课件第25页 仪器分析：经过测定一组空样品背景信号后计算标准差S。以1OS来估算定量程度。（以定量程度制备样品来验证）非仪器分析：经过分析己知被测物浓度样品并确定一个样品中被测物可被准确和精密测定出最低浓度（量）。药品质量标准分析方法验证培训课件第26页 （五）专属性（五）专属性（specificity specificity）（选择（选择性）：性）：指有其它成份（杂质、降解物、辅料指有其它成份（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采取方法能准确测定等）可能存在情况下采取方法能准确测定出被测物特征，能反应该方法在有共存物出被测物特征，能反应该方法在有共存物时对供试物准确而专属测定能力，是指该时对供试物准确而专属测定能力，是指该法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰法用于复杂样品分析时是否受到相互干扰程度度量。程度度量。药品质量标准分析方法验证培训课件第27页 通常经过分析含有加了杂质、降解产物、相关化学物质或抚慰剂成份样品，将所获分析结果与未加前述成份之样品测试结果进行比较，两组测试结果之差即专属性。药品质量标准分析方法验证培训课件第28页1判别反应 应能与可能共存物质或结构相同化合物区分，不含被分析样品，以及结构相同或组分中相关化合物，均应呈负反应。2含量测定和杂质测定 色谱法和其它方法，应附代表性图谱，亦说明专属性。图中应标明各组份位置，色谱法中分离度应符合要求。药品质量标准分析方法验证培训课件第29页（六）线性（Linearity）在设计范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系程度。线形通惯用最小二乘法处理数据求得回归曲线斜率（Slope）来表示。数据要求：最少需要五个浓度考查线形，需提供相关系数、y截距（是检定可能偏差）、回归斜率及方差等参数，应列出回归方程数和线性图。药品质量标准分析方法验证培训课件第30页（七）范围（Range）：指到达一定精密度、准确度和线性条件下，测试方法适用高、低限浓度或量区间。范围确实定可因测定项目不一样而有不一样要求：含量测定范围为80%-120%；含量均匀度范围为70%-130%；杂质测定应为被测杂质程度50%-120%；溶出度应为测定范围20%。药品质量标准分析方法验证培训课件第31页（八）（八）耐用性耐用性 指测定条件稍有变动时，指测定条件稍有变动时，结果不受影响承受程度，为常规检验提供结果不受影响承受程度，为常规检验提供依据。是衡量试验室和工作人员之间在正依据。是衡量试验室和工作人员之间在正常情况下试验结果重现性尺度。常情况下试验结果重现性尺度。分析方法重现性测定是经过在不一样分析方法重现性测定是经过在不一样试验室内不一样试验者对同一样品分别测试验室内不一样试验者对同一样品分别测试而取得。（取得这种再与正常检定下精试而取得。（取得这种再与正常检定下精密度进行比较，从而确定该法耐用性，或密度进行比较，从而确定该法耐用性，或称粗放度）称粗放度）药品质量标准分析方法验证培训课件第32页（九）应用（九）应用 1.1.判别试验除专属性、耐用性外，其判别试验除专属性、耐用性外，其它都不要求。它都不要求。2.2.杂质限量检验除专属性、检测限、杂质限量检验除专属性、检测限、耐用性外，其它都不要求。耐用性外，其它都不要求。杂质含量测定除检测限外，其它都杂质含量测定除检测限外，其它都要求。要求。3.含量测定及溶出量测定除检测限、含量测定及溶出量测定除检测限、定量限外，其它都要求。定量限外，其它都要求。药品质量标准分析方法验证培训课件第33页（十）各种含量测定方法对效能指标要求（十）各种含量测定方法对效能指标要求 1.1.容量分析法：用原料药精制品容量分析法：用原料药精制品(含量含量99.599.5)或对照品考查方法精密度，相对或对照品考查方法精密度，相对标准差普通应小于标准差普通应小于0.20.2；进行回收率试；进行回收率试验。验。回收率普通在回收率普通在99.799.7100.3100.3之间之间。药品质量标准分析方法验证培训课件第34页 2.UV2.UV法：用适当浓度精制品进行测法：用适当浓度精制品进行测定，其定，其RSDRSD普通小于普通小于1 1。制剂测定，。制剂测定，回收率普通应在回收率普通应在9898102102之间。之间。药品质量标准分析方法验证培训课件第35页 线性：吸光度线性：吸光度A A普通在普通在0.20.20.70.7，浓度点浓度点n n5 5。用浓度。用浓度c c对对A A作线性回归作线性回归处理，得一直线方程，处理，得一直线方程，r r应到达应到达0.99990.9999(n(n5)5)，方程截距应近于零。，方程截距应近于零。药品质量标准分析方法验证培训课件第36页 3.HPLC3.HPLC法：要求法：要求RSD2RSD2，回收率回收率9898102102之间。之间。线性范围：用精制品配制一系线性范围：用精制品配制一系列标准溶液，浓度点列标准溶液，浓度点n n应为应为5 57 7，用，用浓度浓度c c对峰高对峰高h h或被测物响应值之比进或被测物响应值之比进行回归处理，建立回归方程，行回归处理，建立回归方程，r r应大应大于于0.9990.999，截距应趋于零。，截距应趋于零。药品质量标准分析方法验证培训课件第37页99：73.精密度是指（B）A.测得测量值与真值靠近程度 B.测得一组测量值彼此符合程度 C.表示该法测量正确性 D.在各种正常试验条件下，对同一样品分析所得结果准确程度 E.对供试物准确而专属测定能力药品质量标准分析方法验证培训课件第38页99x：76精密度是指该法（D）A.测得测量值与真值靠近程度 B.测得测量值与回收率靠近程度 C.测量正确性 D.测得一组测量值彼此符合程度 E.对供试物准确而专属测定能力 药品质量标准分析方法验证培训课件第39页96：138在药品分析中，精密度是表示该法（BD）A.测量值与真值靠近程度 B.一组测量值彼此符合程度 C.正确性 D.重现性 E.专属性 药品质量标准分析方法验证培训课件第40页95：106110应要求效能指标：A.检测限 B.定量限 C.二者均要求 D.二者均不要求95：106.含量测定方法评定（D）95：107.杂质限量检验（A）95：108.杂质定量测定（B）95：109.溶出度测定（D）95：110.中间体含量测定（D）药品质量标准分析方法验证培训课件第41页97：126药品杂质检验所要求效能指标为（CDE）A.准确度 B.精密度 C选择性 D.检测限 E.耐用性 药品质量标准分析方法验证培训课件第42页98：138评价药品分析所用测定方法效能指标有（BCD）A.含量均匀度 B.精密度 C.准确度 D.粗放度 E.溶出度药品质量标准分析方法验证培训课件第43页例例1155A A精密度精密度 B B定量限定量限C C二者皆是二者皆是 D D二者皆不是二者皆不是1.某法测得一组测量值间彼此符合程度（A）2.测量值和真值靠近程度（D）3.测定结果重现性（A）4.可定量测得被测药品最低水平参数（B）5.药品分析方法效能指标（C）药品质量标准分析方法验证培训课件第44页例例6.6.相对标准差表示（相对标准差表示（C C）A.准确度B.回收率C.精密度D.纯净度E.程度药品质量标准分析方法验证培训课件第45页例例7.7.精密度普通表示方法有精密度普通表示方法有(AE)(AE)A.相对标准差B.相对平均偏差C.相对误差D.绝对误差E.标准差 药品质量标准分析方法验证培训课件第46页例例8.8.检测限表示方法有（检测限表示方法有（ABCABC）A.百分数 B.ppm C.ppbD.g E.ng药品质量标准分析方法验证培训课件第47页例例9.9.用用信信噪噪比比法法表表示示检检测测限限时时，信信噪噪比普通应为（比普通应为（BCBC）A.11 B.21 C.31D.41 E.51药品质量标准分析方法验证培训课件第48页例例10.10.用用碘碘量量法法测测定定维维生生素素C C原原料料药药时，要求碘量法应具备（时，要求碘量法应具备（ACDACD）A.选择性 B.定量限C.精密度 D.粗放度E.线性药品质量标准分析方法验证培训课件第49页例例11.11.测测定定药药品品片片剂剂溶溶出出度度或或释释放放度度时时，对所用测定方法应要求对所用测定方法应要求(ACD)(ACD)A.精密度 B.定量限C.耐用性 D.回收率E.检测限 药品质量标准分析方法验证培训课件第50页例例12.12.药药品品判判别别试试验验所所要要求求效效能能指指标标为（为（CECE）A.准确度B.精密度C.选择性D.检测限E.耐用性药品质量标准分析方法验证培训课件第51页