2016高考生物全国通用二轮专题复习专题一.pptx

真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联专题一基因工程与细胞工程专题一基因工程与细胞工程考考纲纲要要求求1.基基因因工工程程的的诞诞生生()。2.基基因因工工程程的的原原理理及及技技术术()。3.基基因因工工程程的的应应用用()。4.蛋蛋白白质质工工程程()。5.植植物物的的组组织织培培养养()。6.动动物物的的细细胞胞培培养养与与体体细细胞胞克克隆隆()。7.细细胞胞融融合合与与单单克克隆隆抗体抗体()。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联DNA连接酶连接酶基因表达载体的构建基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞药物药物基因基因自然界中没有自然界中没有全能性全能性体细胞杂交体细胞杂交细胞增殖细胞增殖动物细胞核动物细胞核化学法化学法抗原抗原真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联1.(2015课课标标卷卷，40)已已知知生生物物体体内内有有一一种种蛋蛋白白质质(P)，该该蛋蛋白白质质是是一一种种转转运运蛋蛋白白，由由305个个氨氨基基酸酸组组成成。如如果果将将P分分子子中中158位位的的丝丝氨氨酸酸变变成成亮亮氨氨酸酸，240位位的的谷谷氨氨酰酰胺胺变变成成苯苯丙丙氨氨酸酸，改改变变后后的的蛋蛋白白质质(P1)不不但但保保留留P的的功功能能，而而且且具具有有了了酶酶的的催催化化活活性性。回答下列问题：回答下列问题：考点一基因工程考点一基因工程典例引领典例引领真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(1)从从上上述述资资料料可可知知，若若要要改改变变蛋蛋白白质质的的功功能能，可可以以考考虑虑对对蛋蛋白白质质的的_进行改造。进行改造。(2)以以P基基因因序序列列为为基基础础，获获得得P1基基因因的的途途径径有有修修饰饰_基基因因或或合合成成_基基因因，所所获获得得的的基基因因表表达达时时是是遵遵循循中中心心法法则则的的，中中心心法法则则的的全全部部内内容容包包括括_的的复复制制，以以及及遗遗传传信信息息在在不不同同分子之间的流动，即：分子之间的流动，即：_。(3)蛋蛋白白质质工工程程也也被被称称为为第第二二代代基基因因工工程程，其其基基本本途途径径是是从从预预期期蛋蛋白白质质功功能能出出发发，通通过过_和和_，进进而而确确定定相相对对应应的的脱脱氧氧核核苷苷酸酸序序列列，据据此此获获得得基基因因，再再经经表表达达、纯纯化化获获得得蛋蛋白白质质，之之后还需要对蛋白质的生物后还需要对蛋白质的生物_进行鉴定。进行鉴定。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联解解析析对对蛋蛋白白质质的的氨氨基基酸酸序序列列(或或结结构构)进进行行改改造造，可可达达到到改改变变蛋蛋白白质质的的功功能能的的目目的的。(2)以以P基基因因序序列列为为基基础础，获获得得P1基基因因，可可以以对对P基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成基因进行修饰改造，也可以用人工方法合成P1基因；中心法基因；中心法则的全部内容包括则的全部内容包括，即即：DNA、RNA的的复复制制、DNARNA、RNADNA、RNA蛋蛋白白质质(或或转转录录、逆逆转转录录、翻翻译译)。(3)蛋蛋白白质质工工程程的的基基本本途途径径是是从从预预期期蛋蛋白白质质功功能能出出发发，通通过过设设计计蛋蛋白白质质结结构构和和推推测测氨氨基基酸酸序序列列，推推测测相相应应的的核核苷苷酸酸序序列列，并并获获取取基基因因。经经表表达达的的蛋蛋白白质质，要要对对其其进进行生物功能鉴定。行生物功能鉴定。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联答案答案(1)氨基酸序列氨基酸序列(或结构或结构)(其他答案合理也给分其他答案合理也给分)(2)PP1DNA和和RNA(或或遗遗传传物物质质)DNARNA、RNADNA、RNA蛋白质蛋白质(或转录、逆转录、翻译或转录、逆转录、翻译)(3)设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能设计蛋白质的结构推测氨基酸序列功能真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联2.(2014全全国国课课标标，40)植植物物甲甲具具有有极极强强的的耐耐旱旱性性，其其耐耐旱旱性性与与某某个个基基因因有有关关。若若从从该该植植物物中中获获得得该该耐耐旱旱基基因因，并并将将其其转转移移到到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性。回答下列问题：回答下列问题：(1)理理论论上上，基基因因组组文文库库含含有有生生物物的的_基基因因；而而cDNA文文库中含有生物的库中含有生物的_基因。基因。(2)若若要要从从植植物物甲甲中中获获得得耐耐旱旱基基因因，可可首首先先建建立立该该植植物物的的基基因因组文库，再从中组文库，再从中_出所需的耐旱基因。出所需的耐旱基因。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(3)将将耐耐旱旱基基因因导导入入农农杆杆菌菌，并并通通过过农农杆杆菌菌转转化化法法将将其其导导入入植植物物_的的体体细细胞胞中中，经经过过一一系系列列的的过过程程得得到到再再生生植植株株。要要确确认认该该耐耐旱旱基基因因是是否否在在再再生生植植株株中中正正确确表表达达，应应检检测测此此再再生生植植株株中中该该基基因因的的_，如如果果检检测测结结果果呈呈阳阳性性，再再在在田田间间试试验验中中检检测测植植株的株的_是否得到提高。是否得到提高。(4)假假如如用用得得到到的的二二倍倍体体转转基基因因耐耐旱旱植植株株自自交交，子子代代中中耐耐旱旱与与不不耐耐旱旱植植株株的的数数量量比比为为31时时，则则可可推推测测该该耐耐旱旱基基因因整整合合到到了了_(填填“同同源源染染色色体体的的一一条条上上”或或“同同源源染染色色体体的两条上的两条上”)。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联解解析析(1)基基因因文文库库有有两两种种：基基因因组组文文库库和和部部分分基基因因文文库库，基基因因组组文文库库含含有有生生物物的的全全部部基基因因；cDNA是是以以mRNA为为模模板板逆逆转转录录得得到到的的，而而细细胞胞中中只只有有部部分分基基因因表表达达，所所以以cDNA文文库库含含有有生生物物的的部部分分基基因因。(2)建建立立基基因因文文库库后后要要根根据据目目的的基基因因的的特特性性从从中中筛筛选选出出目目的的基基因因。(3)目目的的基基因因与与载载体体构构建建基基因因表表达达载载体体后后，导导入入乙乙植植物物细细胞胞(受受体体细细胞胞)，需需要要进进行行表表达达产产物物(蛋蛋白白质质)和和生生物物个个体体水水平平(耐耐旱旱性性)等等的的检检测测。(4)若若是是整整合合到到同同源源染染色色体体的的两两条条上上，则则此此耐耐旱旱二二倍倍体体植植株株为为纯纯合合子子，自自交交后后代代不不会会发发生生性性状状分分离离，所所以以根根据据实实验验结结果可推测：该耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。果可推测：该耐旱基因整合到了同源染色体的一条上。答案答案(1)全部部分全部部分(2)筛选筛选(3)乙表达产物乙表达产物 耐旱性耐旱性(4)同源染色体的一条上同源染色体的一条上真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联提分必记的关键点提分必记的关键点1.基因工程常考的基因工程常考的3种基本工具种基本工具限制性核酸内切酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体。连接酶和载体。2.基因表达载体的组成基因表达载体的组成目的基因启动子终止子标记基因复制原点等。目的基因启动子终止子标记基因复制原点等。3.基因工程的四大操作程序基因工程的四大操作程序(1)目的基因的获取目的基因的获取(三大方法三大方法)从基因文库中获取。从基因文库中获取。利用利用PCR技术扩增技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。其实质是在体外对目的基因进行大量复制。用化学方法人工合成用化学方法人工合成真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(2)基因表达载体的构建基因表达载体的构建(此为此为“核心步骤核心步骤”)。(3)将目的基因导入受体细胞的将目的基因导入受体细胞的“三大方法三大方法”：导入植物细胞导入植物细胞农杆菌转化法农杆菌转化法(花粉管通道法、基因枪法花粉管通道法、基因枪法)。导入动物细胞导入动物细胞显微注射法显微注射法(导入受精卵导入受精卵)。导入微生物细胞导入微生物细胞使用使用Ca2处理细胞。处理细胞。(4)目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定DNA分子杂交分子杂交分子杂交分子杂交抗原抗原抗体杂交抗体杂交抗性实验抗性实验是否出现了杂交带是否出现了杂交带抗性是否存在抗性是否存在真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联题组题组1基因工程的操作工具与操作步骤基因工程的操作工具与操作步骤1.(2015江江苏苏卷卷，32)胰胰岛岛素素A、B链链分分别别表表达达法法是是生生产产胰胰岛岛素素的的方方法法之之一一。图图1是是该该方方法法所所用用的的基基因因表表达达载载体体，图图2表表示示利利用用大大肠肠杆杆菌菌作作为为工工程程菌菌生生产产人人胰胰岛岛素素的的基基本本流流程程(融融合合蛋蛋白白A、B分分别别表表示示半半乳乳糖糖苷苷酶酶与与胰胰岛岛素素A、B链链融融合合的的蛋蛋白白)。请请回回答答下下列列问题：问题：图图1真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联图图2(1)图图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是基因表达载体中没有标注出来的基本结构是_。(2)图图1中中启启动动子子是是_酶酶识识别别和和结结合合的的部部位位，有有了了它它才才能能启启动动 目目 的的 基基 因因 的的 表表 达达；氨氨 苄苄 青青 霉霉 素素 抗抗 性性 基基 因因 的的 作作 用用 是是_。(3)构建基因表达载体时必需的工具酶有构建基因表达载体时必需的工具酶有_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(4)半半乳乳糖糖苷苷酶酶与与胰胰岛岛素素A链链或或B链链融融合合表表达达，可可将将胰胰岛岛素素肽肽链链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于_。(5)溴溴化化氰氰能能切切断断肽肽链链中中甲甲硫硫氨氨酸酸羧羧基基端端的的肽肽键键，用用溴溴化化氰氰处处理理相相应应的的融融合合蛋蛋白白能能获获得得完完整整的的A链链或或B链链，且且半半乳乳糖糖苷苷酶酶被被切切成成多个肽段，这是因为多个肽段，这是因为_。(6)根根据据图图2中中胰胰岛岛素素的的结结构构，请请推推测测每每个个胰胰岛岛素素分分子子中中所所含含游游离离氨基的数量。你的推测结果是氨基的数量。你的推测结果是_，理由是，理由是_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联答案答案(1)终止子终止子(2)RNA聚聚合合作作为为标标记记基基因因，将将含含有有重重组组质质粒粒的的大大肠肠杆杆菌菌筛筛选选出出来来(3)限制酶和限制酶和DNA连接酶连接酶(4)防止胰岛素的防止胰岛素的A、B 链被菌体内蛋白酶降解链被菌体内蛋白酶降解(5)半半乳乳糖糖苷苷酶酶中中含含多多个个甲甲硫硫氨氨酸酸，而而胰胰岛岛素素A、B 链链中中不不含含甲甲硫氨酸硫氨酸(6)至至少少2个个两两条条肽肽链链的的一一端端各各有有一一个个游游离离的的氨氨基基，氨氨基基酸酸R 基基团中可能还含有游离的氨基团中可能还含有游离的氨基真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联2.(2015福福建建卷卷，33)GDNF是是一一种种神神经经营营养养因因子子，对对损损伤伤的的神神经经细细胞胞具具有有营营养养和和保保护护作作用用。研研究究人人员员构构建建了了含含GDNF基基因因的的表表达达载载体体(如如图图1所所示示)，并并导导入入到到大大鼠鼠神神经经干干细细胞胞中中，用用于于干干细细胞胞基因治疗的研究。请回答：基因治疗的研究。请回答：真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(1)在在分分离离和和培培养养大大鼠鼠神神经经干干细细胞胞的的过过程程中中，使使用用胰胰蛋蛋白白酶酶的的目目的的是是_。(2)构构建建含含GDNF基基因因的的表表达达载载体体时时，需需选选择择图图1中中的的_限限制制酶进行酶切。酶进行酶切。(3)经经酶酶切切后后的的载载体体和和GDNF基基因因进进行行连连接接，连连接接产产物物经经筛筛选选得得到到的的载载体体主主要要有有3种种：单单个个载载体体自自连连、GDNF基基因因与与载载体体正正向向连连接接、GDNF基基因因与与载载体体反反向向连连接接(如如图图1所所示示)。为为鉴鉴定定这这3种种连连接接方方式式，选选择择Hpa I酶酶和和BamH I酶酶对对筛筛选选得得到到的的载载体体进进行行双双酶酶切切，并并对对酶酶切切后后的的DNA片片段段进进行行电电泳泳分分析析，结结果果如如图图2所所示示。图图中中第第_泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(4)将将正正向向连连接接的的表表达达载载体体导导入入神神经经干干细细胞胞后后，为为了了检检测测GDNF基基因因是是否否成成功功表表达达，可可用用相相应应的的_与与提提取取的的蛋蛋白白质质杂杂交交。当当培培养养的的神神经经干干细细胞胞达达到到一一定定密密度度时时，需需进进行行_培培养养以以得得到到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。解解析析(1)动动物物细细胞胞间间的的物物质质主主要要成成分分是是蛋蛋白白质质，用用胰胰蛋蛋白白酶酶或或胶胶原蛋白酶处理一段时间，目的是使组织中的细胞分散成单个细胞。原蛋白酶处理一段时间，目的是使组织中的细胞分散成单个细胞。(2)据据图图1可可知知，GDNF基基因因两两端端和和载载体体上上都都有有Xho I限限制制酶酶的的酶酶切切位点。位点。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(3)据据图图1可可知知，用用Hpa I和和 BamH I限限制制酶酶对对三三种种载载体体进进行行酶酶切切，单单个个载载体体自自连连只只有有Hpa I限限制制酶酶的的酶酶切切位位点点，得得到到6 000 bpDNA的的片片段段；正正向向连连接接重重组组载载体体有有Hpa I和和 BamH I限限制制酶酶的的酶酶切切位位点点，得得到到700 bpDNA的的片片段段和和6 000 bpDNA的的片片段段；反反向向连连接接重重组组载载体体有有Hpa I和和 BamH I限限制制酶酶的的酶酶切切位位点点，得得到到200 bpDNA的的片片段段和和6 500 bpDNA的片段。的片段。(4)检检测测目目的的基基因因是是否否成成功功表表达达，可可采采用用抗抗原原抗抗体体杂杂交交法法。培培养养的的原原代代细细胞胞贴贴满满瓶瓶壁壁重重新新用用胰胰蛋蛋白白酶酶等等处处理理，然然后后分分瓶瓶继继续续培培养养，让让细细胞胞继继续续增增殖殖，这这样样的的培培养养过过程程通通常常称称为为传传代代培培养养。传传代代培培养养的的细细胞胞一一般般传传至至10代代后后就就不不易易传传下下去去，科科研研上上使使用用的的正正常常细细胞胞通通常为常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。答案答案(1)使细胞分散开使细胞分散开(2)Xho I(3)(4)抗体传代抗体传代真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联1.区分区分DNA连接酶和连接酶和DNA聚合酶、限制性核酸内切酶和解旋酶聚合酶、限制性核酸内切酶和解旋酶(1)DNA连连接接酶酶连连接接两两个个DNA片片段段，而而DNA聚聚合合酶酶只只能能将将单单个个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上。(2)限限制制性性核核酸酸内内切切酶酶是是切切割割某某种种特特定定的的脱脱氧氧核核苷苷酸酸序序列列，并并使使两两条条链链在在特特定定的的位位置置断断开开，而而解解旋旋酶酶是是将将DNA的的两两条条链链间间的的氢氢键打开形成两条单链。键打开形成两条单链。2.启动子启动子起始密码；终止子起始密码；终止子终止密码终止密码真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联3.根据受体种类确定基因工程的受体细胞：根据受体种类确定基因工程的受体细胞：(1)植物：植物体细胞或受精卵植物：植物体细胞或受精卵(2)动物：受精卵或体细胞动物：受精卵或体细胞(3)微生物：细菌。微生物：细菌。注注：目目的的基基因因导导入入受受体体细细胞胞不不是是基基因因工工程程成成功功的的标标志志，基基因因工工程是否成功在于目的基因是否成功表达。程是否成功在于目的基因是否成功表达。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联题组题组2综合考查基因工程的应用及蛋白质工程综合考查基因工程的应用及蛋白质工程1.(2015课课标标卷卷，40)HIV属属于于逆逆转转录录病病毒毒，是是艾艾滋滋病病的的病病原原体体。回答下列问题：回答下列问题：(1)用用基基因因工工程程方方法法制制备备HIV的的某某蛋蛋白白(目目的的蛋蛋白白)时时，可可先先提提取取HIV中中的的_，以以其其作作为为模模板板，在在_的的作作用用下下合合成成_，获获取取该该目目的的蛋蛋白白的的基基因因，构构建建重重组组表表达达载载体体，随随后后导入受体细胞。导入受体细胞。(2)从从受受体体细细胞胞中中分分离离纯纯化化出出目目的的蛋蛋白白，该该蛋蛋白白作作为为抗抗原原注注入入机机体体后后，刺刺激激机机体体产产生生的的可可与与此此蛋蛋白白结结合合的的相相应应分分泌泌蛋蛋白白是是_，该该分分泌泌蛋蛋白白可可用用于于检检测测受受试试者者血血清清中中的的HIV，检检测测的原理是的原理是_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(3)已已知知某某种种菌菌导导致致的的肺肺炎炎在在健健康康人人群群中中罕罕见见，但但是是在在艾艾滋滋病病患患者者中中却却多多发发。引引起起这这种种现现象象的的根根本本原原因因是是HIV主主要要感感染染和和破破坏坏了了患患者的部分者的部分_细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)人人的的免免疫疫系系统统有有_癌癌细细胞胞的的功功能能。艾艾滋滋病病患患者者由由于于免免疫疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。功能缺陷，易发生恶性肿瘤。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联解解析析(1)HIV是是RNA病病毒毒，其其核核酸酸是是单单链链RNA，而而在在基基因因工工程程中中构构建建目目的的基基因因表表达达载载体体时时，载载体体一一般般用用的的是是质质粒粒，为为双双链链DNA，故故先先用用逆逆转转录录酶酶催催化化HIV的的RNA逆逆转转录录为为DNA分分子子再再进进行行基基因因工工程程操操作作。(2)本本题题涉涉及及到到了了免免疫疫学学方方面面知知识识，抗抗原原进进入入机机体体后后可可以以产产生生特特异异性性免免疫疫反反应应，产产生生相相应应的的抗抗体体，抗抗体体与与抗抗原原特特异异性性结结合合。(3)HIV病病毒毒主主要要破破坏坏人人体体T细细胞胞。(4)免免疫疫系系统统除除了了具具有有防防卫卫功功能能外外，还还有有监监控控和和清清除除功功能能：监监控控并并清清除除体体内内已已经经衰衰老老或或因因其其他他因因素而被破坏的细胞，以及癌变的细胞。素而被破坏的细胞，以及癌变的细胞。答答案案(1)RNA逆逆转转录录酶酶cDNA(或或DNA)(2)抗抗体体抗抗原原抗抗体体特异性结合特异性结合(3)T(或或T淋巴淋巴)(4)监控和清除监控和清除真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联2.(2015山山东东日日照照模模拟拟)转转基基因因育育种种是是利利用用遗遗传传转转化化方方法法将将有有价价值值的的外外源源基基因因导导入入受受体体物物种种获获得得转转化化体体，再再将将转转化化体体植植株株经经过过常常规规育育种种程程序序加加以以选选择择和和培培育育，最最后后选选育育出出具具有有优优良良性性状状的的新新品品种种，对对于于作作物物育育种种具具有有重重大大的的意意义义。图图甲甲表表示示我我国国自自主主研研发发的的转转基基因因抗抗虫虫玉玉米米的的主主要要培培育育流流程程，图图乙乙表表示示天天然然土土壤壤农农杆杆菌菌Ti质质粒粒结结构构(部部分分基基因因及及限限制制性性内内切切酶酶作作用用位位点点如如图图所示所示)。请回答：。请回答：真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(1)若若限限制制酶酶的的识识别别序序列列和和切切割割位位点点是是GATC，限限制制酶酶的的识识别别序序列列和和切切割割位位点点是是GGATCC，那那么么在在过过程程中中，应应用限制酶用限制酶_切割质粒，用限制酶切割质粒，用限制酶_切割抗虫基因。切割抗虫基因。(2)为为了了保保证证改改造造后后的的质质粒粒进进入入玉玉米米细细胞胞后后不不会会引引起起细细胞胞的的无无限限分分裂裂和和生生长长，必必须须用用限限制制酶酶去去除除质质粒粒上上_和和_(基基因因)。(3)将将构构建建的的重重组组Ti质质粒粒，导导入入土土壤壤农农杆杆菌菌，在在选选择择培培养养基基上上进进行行培培养养，观观察察农农杆杆菌菌在在含含_的的培培养养基基中中能能够够生生长长、在在含含_的培养基中不能生长。的培养基中不能生长。(4)过过程程应应用用的的生生物物技技术术主主要要是是_，从从个个体体水水平平检检测测玉玉米米具有抗虫性状的方法是具有抗虫性状的方法是_。答答案案(1)(或或和和)(2)tmstmr(3)卡卡那那霉霉素素四四环环素素(4)植物组织培养害虫抗性接种实验法植物组织培养害虫抗性接种实验法真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(2014全全国国课课标标，40)某某研研究究者者用用抗抗原原(A)分分别别免免疫疫3只只同同种种小小鼠鼠(X、Y和和Z)，每每只只小小鼠鼠免免疫疫5次次，每每次次免免疫疫一一周周后后测测定定各各小小鼠鼠血血清清抗抗体体的的效效价价(能能检检测测出出抗抗原原抗抗体体反反应应的的血血清清最最大大稀稀释释倍倍数数)，结果如下图所示。结果如下图所示。考点二细胞工程考点二细胞工程典例引领典例引领真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联若若要要制制备备杂杂交交瘤瘤细细胞胞，需需取取免免疫疫后后小小鼠鼠的的B淋淋巴巴细细胞胞(染染色色体体数数目目40条条)，并并将将该该细细胞胞与与体体外外培培养养的的小小鼠鼠骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞(染染色色体体数数目目60条条)按按一一定定比比例例加加入入试试管管中中，再再加加入入聚聚乙乙二二醇醇诱诱导导细细胞胞融融合合，经经筛筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。抗体的杂交瘤细胞。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联回答下列问题。回答下列问题。(1)制制备备融融合合所所需需的的B淋淋巴巴细细胞胞时时，所所用用免免疫疫小小鼠鼠的的血血清清抗抗体体效效价价需需达达到到16 000以以上上，则则小小鼠鼠最最少少需需要要经经过过_次次免免疫疫后后才才能能有有符符合合要要求求的的。达达到到要要求求后后的的X、Y、Z这这3只只免免疫疫小小鼠鼠中中，最最适适合用于制备合用于制备B淋巴细胞的是淋巴细胞的是_小鼠，理由是小鼠，理由是_。(2)细细胞胞融融合合实实验验完完成成后后，融融合合体体系系中中除除含含有有未未融融合合的的细细胞胞和和杂杂交交瘤细胞外，可能还有瘤细胞外，可能还有_，体系中出现多种类型细胞的原因是体系中出现多种类型细胞的原因是_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(3)杂杂交交瘤瘤细细胞胞中中有有_个个细细胞胞核核，染染色色体体数数目目最最多多是是_条。条。(4)未未融融合合的的B淋淋巴巴细细胞胞经经多多次次传传代代培培养养后后都都不不能能存存活活，原原因因是是_。解解析析(1)据据图图分分析析，第第4次次免免疫疫后后X、Y、Z小小鼠鼠的的血血清清抗抗体体效效价价均均达达到到16 000以以上上，小小鼠鼠Y的的B淋淋巴巴细细胞胞产产生生抗抗体体效效价价最最高高，最最适适合用于制备单克隆抗体。合用于制备单克隆抗体。(2)融融合合体体系系中中除除了了未未融融合合的的细细胞胞和和杂杂交交瘤瘤细细胞胞之之外外，还还有有骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞和和B淋淋巴巴细细胞胞的的自自身身融融合合产产物物，由由于于细细胞胞膜膜具具有有流流动动性性，且且诱诱导导之之后后的的细细胞胞融融合合不不具具有有特特异异性性，故故体体系系中中会会出出现现多多种种类类型型的的细胞。细胞。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(3)杂杂交交瘤瘤细细胞胞形形成成后后，小小鼠鼠的的B淋淋巴巴细细胞胞核核与与其其骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞核核会会融融合合形形成成一一个个细细胞胞核核。小小鼠鼠的的B淋淋巴巴细细胞胞(染染色色体体数数目目40条条)和和骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞(染染色色体体数数目目60条条)融融合合后后，染染色色体体数数目目为为100条条，有有丝丝分分裂裂后期染色体数目最多为后期染色体数目最多为200条。条。(4)未未融融合合的的B淋淋巴巴细细胞胞经经多多次次传传代代培培养养后后，仍仍然然不不是是能能无无限限增增殖殖的细胞，同时正常细胞的分裂次数是有限的。的细胞，同时正常细胞的分裂次数是有限的。答案答案(1)4YY小鼠的抗体效价最高小鼠的抗体效价最高(2)B淋淋巴巴细细胞胞相相互互融融合合形形成成的的细细胞胞，骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞相相互互融融合合形形成成的的细细胞胞细细胞胞融融合合是是随随机机的的，且且融融合合率率达达不不到到100%(3)1200(4)B淋巴细胞高度分化，不能无限增殖淋巴细胞高度分化，不能无限增殖真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联1.高考必记关键点高考必记关键点(1)植物组织培养的关键植物组织培养的关键条件：离体，一定营养物质，激素条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素)等。等。培培养养基基状状态态：固固体体培培养养基基(需需脱脱分分化化生生根根培培养养基基及及生生芽芽培培养养基基)。体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。(2)植物激素的使用植物激素的使用脱脱分分化化阶阶段段细细胞胞分分裂裂素素比比例例较较高高，以以促促进进细细胞胞的的分分裂裂；再再分分化化阶阶段生长素比例较高，以促进芽与根的形成。段生长素比例较高，以促进芽与根的形成。(3)光照的使用光照的使用脱脱分分化化阶阶段段不不需需要要给给予予光光照照，再再分分化化阶阶段段需需要要给给予予光光照照，以以利利于于叶绿素的形成。叶绿素的形成。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联2.植物体细胞杂交的关键植物体细胞杂交的关键(1)酶解法酶解法用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)促融剂促融剂聚乙二醇。聚乙二醇。(3)杂种细胞的形成标志杂种细胞的形成标志新细胞壁的形成。新细胞壁的形成。(4)培养杂种植株的技术培养杂种植株的技术植物组织培养。植物组织培养。(5)培养成功的原理培养成功的原理细胞全能性。细胞全能性。3.动物细胞培养的特殊条件动物细胞培养的特殊条件(1)胰胰蛋蛋白白酶酶的的两两次次使使用用：首首先先用用胰胰蛋蛋白白酶酶处处理理动动物物的的器器官官或或组组织织，以以制制备备单单细细胞胞悬悬液液；培培养养过过程程中中发发生生接接触触抑抑制制时时，同同样样要要用用胰胰蛋蛋白酶使细胞分散开。白酶使细胞分散开。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(2)避避免免杂杂菌菌污污染染的的措措施施：培培养养液液及及培培养养用用具具灭灭菌菌处处理理，加加入入一一定定量的抗生素，定期更换培养液。量的抗生素，定期更换培养液。(3)特殊的营养条件：特殊的营养条件：液体培养基。液体培养基。加入动物血清、血浆等。加入动物血清、血浆等。通入氧气以满足代谢的需要。通入氧气以满足代谢的需要。通入二氧化碳以维持培养液的通入二氧化碳以维持培养液的pH。4.克隆动物的技术手段克隆动物的技术手段动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养和胚胎移植。动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养和胚胎移植。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联题组题组1植物细胞工程植物细胞工程1.(2015天天津津卷卷，7)DHA对对脑脑神神经经发发育育至至关关重重要要。以以A、B两两种种单单细细胞胞真真核核藻藻为为亲亲本本，利利用用细细胞胞融融合合技技术术选选育育高高产产DHA融融合合藻藻。两种藻特性如下表。两种藻特性如下表。亲本藻亲本藻优势代优势代谢类型谢类型固体培养基固体培养基上藻落直径上藻落直径A藻藻自养自养0.06小小0.7B藻藻异养异养0.14大大无无真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联据表回答：据表回答：(1)选育的融合藻应具有选育的融合藻应具有A藻藻_与与B藻藻_的优点。的优点。(2)诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得诱导融合前需用纤维素酶处理两种藻，其目的是获得_。(3)通通过过以以下下三三步步筛筛选选融融合合藻藻，步步骤骤_可可淘淘汰汰B藻藻，步步骤骤_可可淘淘汰汰生生长长速速率率较较慢慢的的藻藻落落，再再通通过过步步骤骤_生生产产所需的融合藻。所需的融合藻。步骤步骤a：观察藻落的大小：观察藻落的大小步步骤骤b：用用不不含含有有机机碳碳源源(碳碳源源生生物物生生长的的碳碳素素来来源源)的的培培养养基基进行光照培养进行光照培养步骤步骤c：测定：测定DHA含量含量真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(4)以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。以获得的融合藻为材料进行甲、乙、丙三组试验，结果如下图。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联甲甲组组条条件件下下，融融合合藻藻产产生生H的的细细胞胞器器是是_；丙丙组组条条件件下下产生产生ATP的细胞器是的细胞器是_。与与甲甲、丙丙两两组组相相比比，乙乙组组融融合合藻藻生生长长速速率率较较快快，原原因因是是在在该该培培养条件下养条件下_。甲甲、乙乙两两组组DHA产产量量均均较较高高，但但实实际际生生产产中中往往往往采采用用甲甲组组的的培培养养条件，其原因是条件，其原因是_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联解析解析(1)根据表中两种藻的特性可知，根据表中两种藻的特性可知，A藻具有产生藻具有产生DHA、自养、自养特性的优点，特性的优点，B藻具有快速增长的优点，选育的融合藻应该具有藻具有快速增长的优点，选育的融合藻应该具有两种藻的优点。两种藻的优点。(2)由于植物细胞具有细胞壁，影响了原生质体的融合，所以在融由于植物细胞具有细胞壁，影响了原生质体的融合，所以在融合前，需用纤维素酶和果胶酶处理，以获得原生质体。合前，需用纤维素酶和果胶酶处理，以获得原生质体。(3)从题中信息可以看出，融合藻是通过培养过程的观察和测定从题中信息可以看出，融合藻是通过培养过程的观察和测定DHA进行筛选的。在培养过程中，在无机物选择培养基中不能生进行筛选的。在培养过程中，在无机物选择培养基中不能生长的是长的是B藻，淘汰藻，淘汰B藻，生长比较慢的是藻，生长比较慢的是A藻，最后再通过测定藻，最后再通过测定DHA含量获得所需的融合藻。含量获得所需的融合藻。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(4)甲甲组组条条件件是是光光照照下下，培培养养基基中中含含有有无无机机物物，该该条条件件下下融融合合藻藻既既可可以以进进行行呼呼吸吸作作用用也也可可以以进进行行光光合合作作用用，产产生生H的的细细胞胞器器有有线线粒粒体体和和叶叶绿绿体体；而而在在丙丙组组黑黑暗暗条条件件下下，培培养养基基中中含含有有葡葡萄萄糖糖，该该条条件件下下融融合合藻藻只只进进行行呼呼吸吸作作用用，产产生生ATP的的细细胞胞器器只只有有线线粒粒体体。乙乙组组条条件件有有光光照照，培培养养基基中中又又含含有有有有机机物物葡葡萄萄糖糖，融融合合藻藻既既能能光光能能自自养养又又能能异异养养，所所以以融融合合藻藻生生长长速速度度较较快快；与与乙乙组组相相比比，甲甲组组不不需需要要添添加加葡葡萄萄糖糖，可可降降低低成成本本，同同时时甲甲组组的的培培养养基基中中不不含含有有机机物物，杂杂菌菌无无法法生生长长，所所以以在在实实际际生生产产中中往往往往采采用用甲甲组组的的培培养养条件。条件。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联答案答案(1)产生产生DHA、自养特性快速增长、自养特性快速增长(2)原生质体原生质体(3)bac(4)线线粒粒体体、叶叶绿绿体体线线粒粒体体融融合合藻藻既既能能光光能能自自养养又又能能异异养养融融合合藻藻利利用用光光能能和和简简单单的的无无机机物物能能较较快快生生长长，不不需需要要添添加加葡葡萄萄糖糖，既可降低成本，也可防止杂菌生长既可降低成本，也可防止杂菌生长真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联2.根据图示回答相关问题：根据图示回答相关问题：真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联(1)过过程程中中使使用用了了_酶酶，以以使使植植物物原原生生质质体体相相互互分分离离，此此处处使使用用的的溶溶液液浓浓度度较较大大，保保证证植植物物细细胞胞会会发发生生_，以以保保护护细细胞胞原原生生质质体体不不被被破破坏坏；在在动动物物细细胞胞培培养养技技术术中中，使使细细胞胞分分离离开来的酶是开来的酶是_。(2)处处的的细细胞胞与与处处的的细细胞胞相相比比，最最大大的的区区别别是是不不具具有有_；动动物物细细胞胞与与处处的的细细胞胞相相比比，在在功功能能上上的的特特点点是是不不具具有有_。(3)过过程程_属属于于再再分分化化；动动植植物物细细胞胞发发生生分分化化的的根根本本原原因因都都是是_。(4)处处的的细细胞胞在在化化学学药药剂剂_的的作作用用下下，会会发发生生细细胞胞融融合合；动动物细胞融合方法与植物细胞不相同的是物细胞融合方法与植物细胞不相同的是_。真题领悟真题领悟融会贯通融会贯通知识主线知识主线思维串联思维串联解解析析从从题题中中图图示示可可知知，过过程程是是使使用用含含有有纤纤维维素素酶酶和和果果胶胶酶酶的的高高浓浓度度溶溶液液处处理理植植物物叶叶片片的的细细胞胞，使使植植物物叶叶片片的的细细胞胞发发生生质质壁壁分分离离且且原原生生质质体体相相互互分分离离，处处植植物物细细胞胞的的部部分分细细胞胞壁壁已已经经被被水水解解，处处是是去去除除了了细细胞胞壁壁的的植植物物细细胞胞原原生生质质体体，处处是是再再生生出出细细胞胞壁壁的的植植物物细细胞胞，处处是是再再生生出出细细胞胞壁壁的的细细胞胞进进行行了了第第一一次次分分裂裂，处处是是再再生生出出细细胞胞壁壁的的细细胞胞进进行行了了第第二二次次分分裂裂，处处是是再再生生出出细细胞胞壁壁的的细细胞胞经经多多次次细细胞胞分分裂裂形形成成了了集集群群的的细细胞胞团团，处处是是形形成成的的愈愈伤伤组织，组织，是发生再分化的过程，是发生再分化的过程，是胚状体继续分化的过程。是胚状体继续分化的过程。答案答案(1)纤维素酶和果胶质壁分离胰蛋白酶纤维素酶和果胶质壁分离胰蛋白酶(2)细细胞胞壁壁分分化化的的全全能能性性(3)基基因因的的选选择择