采样方法新版.doc

采样方法
一.即食类预包装食品：
􀂄 取相同批次的最小零售原包装，检验前要保持包装的完整，避免污染。
二.非即食类预包装食品：
包装小于500g的固态食品或小于500mL的液态食品，取相同批次最小零售包装；
大于500mL的液态食品，应在采样前摇动或用无菌棒搅拌液体，使其达到均质后分别从相同批次的n个容器中采集5倍或以上检验单位的样品；
大于500g的固态食品，应用无菌采样器从同一包装的几个不同部位分别采取适量样品，放入同一个无菌采样容器内, 采样总量应满足微生物指标检验的要求。
三． 散装食品或现场制作食品：
􀂄 根据不同食品的种类和状态及相应检验方法中规定的检验单位，用无菌采样器现场采集5倍或以上检验单位的样品，放入无菌采样容器内, 采样总量应满足微生物指标检验的要求。
.四。 食源性疾病及食品安全事件的食品样品：
采样量应满足食源性疾病诊断和食品安全事件病因判定的检验要求。
（1）采样工具：注射器、肛拭子、咽拭子、消毒棉签、消毒纱布、调匙、勺子、夹子、镊子、剪刀、屠工用刀、酒精灯、标号用品、75%酒精、其它消毒灭菌器具等。
（2）样品容器：灭菌塑料袋、广口瓶、灭菌试管、灭菌粪便盒、样品冷藏设施等
（3）防护用品：工作衣或隔离衣、口罩、白帽子、手套、靴子等。
（4）调查用表：食物中毒个案调查登记表、调查结果汇总表、卫生监督文书等。
（5）检验设备：血平板、毒物快速分析设备、深部温度计等。
6）取证工具：照相机、录音机、摄象机等。
（7）参考资料：各种食物中毒诊断标准及处理原则、食品卫生相关法律法规、标准及其它有关专业技术参考资料等。
（8）其它：通讯工具、交通工具、生活用品等。
采集标本应使用无菌容器，一个标本一个容器。
对容器基本要求是选耐用材料制成，容器包装好后可防渗漏。
能承受空中地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。
标本标签内容应齐全。
包括种类、原始采样容器、标本性质、数量、运送人和接受人及其包装日期、运输日期、统一的识别编号及病人联系方式、姓名、检验目的、临床诊断等信息。

应尽一切努力完成对中毒发生现场可疑中毒食品的样品采集工作，根据具体情况采集病人排泄物、呕吐物、血液样本、尿液。
样品采集、保存、运送是微生物检验最重要的前提条件。
(一)、病人粪便标本的采集和运送
1. 选取有脓血、粘液部分的粪便3-5克，液体粪便则取絮状物2-5ml ，盛于灭菌的容器中，或用采便管采集腹泻病人大便，及时送检和接种。
2. 在无法获得粪便的情况下，可用经无菌生理盐水（或保存液）或增菌液用湿润的棉拭子插入肛门4-5cm深处（小儿2-3cm），轻轻转动一圈，擦取直肠表面的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检。
* 注意为保证多个检验项目的开展，同一病人应至少采集2支肛拭。
3.粪便标本应尽量在病程早期和治疗前采集；无论中毒病人是否已经服药，均应进行大便采集。同时应采集新鲜粪便。若无法获得时，可用采便管或棉拭子采集。
4. 标本采集后要立即送检。拖延送检可使病原菌数量迅速减少或杂菌过度生长，影响致病菌的检出率。
5.应采集严重腹泻中毒病人的大便。
不同病原菌导致的腹泻，其粪便的性状不同，在采样过程中既要采集有价值的部分（如脓血部分），又要从大便性状上判断引起食物中毒的病因。
典型的黏液脓血相兼大便：志贺菌
脓便：志贺菌、EIEC
血便：沙门、弯曲菌、志贺菌、EIEC
米泔样大便：霍乱
水样便腹泻：各种食物中毒
血水样大便 ：肠出血性大肠杆菌
阑尾炎症状：耶尔森菌
(二)血液样本的采集
作血液病原培养时，严格用无菌穿刺法采静脉血，移入无菌的有螺口的抗凝的容器或培养瓶中送检。
(三)尿液采集
中段尿采集法，先用肥皂水清洗外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿10～20ml于无菌试管内。
(四)皮肤样品采集
依据体格检查和临床病史诊断皮肤病。在诊断不明确等情况下，可能需要采集皮疹或皮肤病变标本。
五。 咽拭子（一端弯曲的金属棉拭子）由口腔进入伸向鼻咽部，到达咽后壁擦取标本。标本采集后应立即保温送检
六. 咽喉漱洗液及鼻拭子。儿童为咽拭子。
采样液为20%牛肉汤生理盐水，成人咽喉漱洗液用10ml，儿童咽拭子用3ml。
病人先咳嗽数次，然后将采样液倒入口内，仰头漱洗咽部约1分钟，吐回采样杯中，倒入无菌试管，塞紧塞子，再取棉拭子沾取鼻腔分泌物，放在同一采样试管中。
儿童采样用棉拭子涂抹咽壁及扁桃体，放入3ml采样液中，置冰瓶中立即送检。
注：取鼻洗液和漱口液时，需预先了解患者是否对抗菌素有过敏史，如有，则洗液和漱口液不应含有抗菌素。如为细菌检验，也不应有抗生素。
采样要规范：
1.采集食品要保证一定的数量；
2.肛拭采样必须保证运送培养基的质量，用二根棉拭进行采样，采样时必须有一定的深度，否则即使是肛拭样本也会造成无细菌生长现象；
3.采样要及时，用于细菌性食物中毒检验的样品尽量在服用抗生素以前采集。
4.不同样品采样方法不同。采集样品时应尽量符合无菌要求；
5.样品采集后应妥善保管，有条件时备检样品应置冰箱内或冰盒中保存（温度通常控制在4℃左右）；
6.采样时应注明样品名称、来源、建议检验项目等。
标本运送：标本采集后应根据检验目的及时送检。
一般情况下，标本应在低温下，24小时内运送至实验室后，病毒分离标本应尽快进行接种分离，48小时内能进行接种的可置于4℃保存，如未能接种应置-70℃或以下保存。血清标本可在4℃存放一周，长期保存置-20℃或以下。
微生物采样方法----通用要求
样品种类 采样数量 采样方法
粪便 2ml(g) 置无菌样品容器内
呕吐物 50-200g 置无菌样品容器内
血液 不少于3ml 静脉无菌采样
尿液 30-50ml 取清洁中段尿
固体食品 200-500g 置无菌样品容器内
液体食品 200-500ml 摇匀后置无菌样品容器内
其他样品 根据检验需要 视情况采集可能
含有毒物的样