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细胞的吞噬功能可能是氯离子通道 CLC-2参与 POAG 发生、发展的重要途径之一,但具体调节作用经过何种途径达到尚需大量后续实验研究。本研究认为氯离子通道通过改变细胞电位变化、调节细胞体积等途径影响小梁细胞的吞噬功能。但小梁细胞吞噬能力是一个受多种因素控制的极为复杂的过程,其发挥作用的确切机制尚不清楚,有待于进一步研究,以期待为临床治疗 POAG提供新的思路。4 参考文献1 Zhang L,Xu L,Yang H1R isk factors and the progress of pri mary open-an-gle glaucoma1J21zhonghua Y an Ke Za Zh,i 2009;45(4):380-4 12 Jentsch T J,Stein V,W einre ich F1M olecular str ucture and physiolog icalfunction of chloride channels1J21PhysiolR ev,2002;82(2):503-6813 Comes N,G asull X,GualA,et al1D ifferential expression of the humanchloride channel genes in the trabecularmeshwork under stress conditions1J21Exp Eye Res,2005;80(2):801-1314 ComesN,Abad E,M oralesM,et al1Identification and functional charac-terization of C l C-2 chloride channels in trabecular meshwork cells 1J21Exp Eye Res,2006;83(2):877-8915 Zhang GP,ShiY1Progress in the study of background chloride channels1J21Prog Biochem Biophys,1998;25(4):324-8112009-12-27收稿 2010-03-09修回2(编辑 曲 莉)不同类型人参和西洋参十二种必需元素的比较雷秀娟 孙立伟1 麻 锐1 申 野 李昌禹 王英平 (中国农业科学院特产研究所,吉林 吉林 132109)1摘 要2 目的 比较野山参、林下参、园参和西洋参中机体必需元素种类、含量的差别,并探讨其与功效的关系。方法 用 I CP-AES、ICP-M S法测定样品中机体必需元素种类、含量,并对所测结果进行统计学分析。结果 四种样品均含有 Ca、Fe、Zn、Cu、Se等十二种机体必需元素,但同种必需元素在四样品中的含量各不相同,K、Ca、M g、Fe、Zn、Cr、Sr、Na、Se在野山参中含量显著高于其他三者(P 0105),但显著高于西洋参和林下参(P 0101);M n含量林下参显著高于其他三者(P Objective To provide a theoreticalbasis for the illustration of the mechanis m of their biolog icaleffects,types and con-tents of the essentialele ments of four sa mples and analyze their relationshipswith effects 1 M ethods(1)The types and contents of essentialele mentswere tested by ICP-AES,ICP-M S1(2)The resultsweremeasured bymean comparison and statistical analysis1 Results Four sa m-ples all contained t welve essential ele ments such asCa,Fe,Zn,Cu,Se and so on,but the contents of the sa me elementwere different infour sa mples 1 The contents ofK,Ca,M g,Fe,Zn,Cr,Sr,Na,Se in wild Panax g inseng were higher than those of the other groups(P 0105)butwas obviously higher thanthat of Panax quinquefolius and forest Panax ginseng(P 0101)1 The content ofM n in forestPanax ginseng was notably higher than that ofthe other groups(P Different species of panax ginseng;Panax quinquefolius;Essential ele ment;Protein基金项目:国家科技支撑项目(2007BAI38B02);吉林市科技发展计划(200813)1 北华大学生命科学研究中心通讯作者:孙立伟(1970-),女,博士,教授,硕士生导师,主要从事中药蛋白质组学、基因结构与功能的研究。第一作者:雷秀娟(1984-),女,在读硕士,主要从事中药蛋白质组学的研究。大量实验表明,必需元素是决定中药四性(寒热温凉)的主要因素之一11,22。在某些栽培型不能完全代替其野生型功效的中药中,元素种类和含量明显不同,如野生型菊花、黄芩等与栽培型功效不同,并且其元素含量存在显著差异13,42。野山参具有/回阳救逆0之功效,而栽培参(林下参、园参)远不能及;并且人参性温、西洋参性凉,在药效方面也完全不同。因此,本研究选取长白山野山参、林下参、园参三种不同类型的人参和西洋参,检测某些机体必需元素种类、含量,并比较其在元素含量和功效上的差别,并探讨其元素含量与功效的关系,为阐明不同类型人参、西洋参生物学功能的作用机制提供理论依据。1 材料与方法111 实验材料 野山参、林下参、栽培园参和西洋参均来自吉林省长白山地区。样品用去离子水冲洗后放于 60e 烘箱干燥,#908#中国老年学杂志 2010年 4月第 30卷至质量不再发生变化后,密封保存,待用。112 主要仪器 全谱直读等离子体发射光谱仪(I CP-AES):Varian,美国;电感耦合等离子体质谱(ICP-M S):Ther mo Scien-tific,美国;纯水仪:Ther mofisher,美国。113 主要试剂 硝酸(德国 M erck公司,mos级);高氯酸(德国 M erck公司,mos级);超纯水;多元素混合标准液;Se元素标准液。114 实验方法 取四种参粉末,每种各准确称取 5份,每份015 g,加入 HNO3/HCl O4(4B1)混合溶液共 10 m,l 置于电热板上加热消解样品,消解温度为 90e,待消解完全后,使用超纯水将溶液定容至 25 m,l同时制备空白溶液。利用 ICP-AES进行机体必需常量、微量元素测定,仪器工作参数设置见表 1。利用ICP-MS进行机体必需痕量元素 Se的测定,仪器工作参数设置见表 2。表 1 ICP-AES仪器工作参数参数设定值参数设定值RF功率1 000W等离子体流量15 L/m in辅气流量115 L/m in雾化气压180 kPa蠕动泵速100 r/m in积分时间15 S表 2 ICP-M S仪器工作参数参数设定值参数5雾化气流速0195 ml/min测量时间100 ms冷却气流速13 L/m in检测模式峰跳辅助气流速018 L/m in碰撞气流速5145 m l/m in115 统计学分析 实验数据以 x?s表示,采用 SPSS1210统计软件进行组间差异性 t检验。2 结 果211 野山参、林下参、园参和西洋参中机体必需常量元素种类及含量 四味中药中均含有机体必需的 K、Ca、M g、P四种常量元素,但同种元素在四者中的含量分布各不相同,其中,野山参中 K、Ca、M g的含量均显著高于其他三者(P 0105);P的含量四者均存在显著差异,其中园参中 P含量最高,其次为野山参,西洋参和林下参。见表 3。212 野山参、林下参、园参和西洋参中机体必需微量元素种类及含量 四味中药均含有机体必需的 Fe、Zn、Cu、M n、Cr、Sr、Na等七种微量元素,但它们在含量上存在很大差异,其中 Fe、Zn、Cr、Sr、Na含量均属野山参最高,与其他三者之间有显著差异(P 0101)。尤其是野山参中 Fe的含量为西洋参的 20191倍,园参的 12196倍和林下参的 10108倍;Zn的含量为林下参的2138倍,西洋参的 2153倍和园参的 4105倍;M n的含量林下参最高,显著高于其他三者(P 0105),但显著高于林下参和西洋参(P 0101)。见表 4。213 野山参、林下参、园参和西洋参中机体必需痕量元素 Se的含量 野山参中 Se元素含量 101066?01006)Lg/g2 显著高于 林 下 参 1(01041?01004)Lg/g2、西 洋 参 1(01040?01003)Lg/g2 和园参1(01038?01001)Lg/g2(P 0101),但后三者之间没有统计学差异。表 3 四种参中机体必需常量元素种类和含量(n=5,x?s,m g/g)野山参林下参园参西洋参K16100?01895147?01451)8169?01441)8174?01481)Ca6178?01621126?01051)1140?01021)0180?01021)M g1158?01121108?01101)1116?01091)1101?01061)P2180?01102)0161?01032)3139?01321165?01152)与野山参比较:1)P 0101;与园参比较:2)P 0101表 4 四种参中必需微量元素种类和含量(n=5,x?s,Lg/g)野山参林下参园参西洋参Fe 519192?201792)51156?31951)40111?21741)2)24186?21212)Zn30181?118612195?11111)7159?01841)12116?11001)M n 39 121?11582)92156?319564159?21192)24160?11382)Cr6160?01353131?01141)5139?01121)0149?01051)Sr169139?10146 33187?11741)24192?11981)16130?11051)Cu7158?01594106?01093)8124?01946104?01833)Na204178?317137118?11981)85134?21541)6151?01411)与野山参比较:1)P 0101;与林下参比较:2)P 0101;与野山参和园参比较:3)P 01013 讨 论 机体必需元素是指构成机体组织,维持机体生理功能、生化代谢所必需的元素152。按照在机体内含量的不同,机体必需元素可分为必需常量元素(K、Ca、M g、P等)、必需微量元素(Fe、Zn、Cu、M n等)和必需痕量元素(Se、V等),其中前者是构成机体生命活动的物质基础,后两者则与机体健康密切相关,多种必需微量、痕量元素是体内重要物质(蛋白质、酶、核酸、激素等)不可缺少的组成部分162,在特定状态下它们是维持机体生命健康的必要条件和物质基础172;同时,一些必需元素也以离子形式参与到机体渗透压和酸碱度的调节中,从而维持机体内生理功能的正常进行。研究表明,野山参与园参这两种不同类型的人参中所含机体必需元素有很大差异,在测定的十二种机体必需元素中,其中九种(K、Ca、Mg、Fe、Zn、Cr、Sr、Na、Se)元素含量野生山参均显著高于栽培园参。元素含量的不同很可能是导致野山参药效优于园参的原因之一;野山参中机体必需元素总量最高,可能与其高效性密切相关。不同品种参(栽培园参和西洋参)间机体必需元素含量也有较大差异,其中 P、M n、Cr、Cu、N a、Sr的含量,园参均显著高于西洋参,这种差异很可能与两者品种不同有关,园参、西洋参元素含量上的差异,也一定程度影响了两者的性味归经;林下参是一种人工播种、自然生长于深山密林下的人参,具有与野山参极为相似的外表,但从微量元素含量来看,其差异很大,所测十二种元素在两者中均有显著差异。与园参相比,Ca、M g、Fe、Se这四种重要的必需元素在两者并中#909#雷秀娟等 不同类型人参和西洋参十二种必需元素的比较 第 7期没有显著差异。因此,从元素含量分析,林下参虽貌似野山参,但其在某些化学成分上更接近于园参。Se是维持人类健康的一种必需痕量元素,在植物体里的含量虽少但具有广泛的生物学作用,如保护机体的遗传物质,调节机体免疫功能等182。而 Se最主要的生物学功能则是构成谷胱甘肽过氧化物酶的重要成分,催化还原型谷胱甘肽变成氧化型谷胱甘肽,使有毒的过氧化物变成无毒的羟基化物192。人参中化学成分极为复杂,为此,对 Se的测定本实验采用目前痕量元素测定领域中最为先进、准确的分析测试手段1102)电感耦合等离子体质谱法(ICP-M S)。测定结果野山参中 Se元素含量显著高于林下参、西洋参和园参,而后三者之间没有统计学意差异。利用蛋白质组学技术鉴定出了野山参中含有高丰度的磷脂谷胱甘肽过氧化氢酶(PHGPx)(质谱数据未显示),一种重要的含 Se过氧化物酶,这一结果表明机体内 PHGPx活力的大小可以直接反映其 Se含量,也印证了 PHGPx的表达受 Se含量调控的理论事实1112。4 参考文献1 杨克敌 1 微量元素与健康1M21北京:科学出版社,2003:9-13612 朱胤龙,刘军锋 1 微量元素与中药功效关系的探讨1J21 陕西中医,2000;21(8):373-413 程存归,李丹婷,刘幸海,等 1杭白菊与野菊花的微量元素比较研究1J21光谱学与光谱分析,2006;26(1):156-814 李东霞,高 明,孟庆刚 1野生与栽培黄芩的比较研究1 J21 天津中医药,2007;24(4):332-515 王翔朴,王营通,李珏声 1 卫生学大辞典1M21 青岛:青岛出版社,2000:27-816 颜世铭,李增禧,熊丽萍 1微量元素的生理作用和体内平衡1J21广东微量元素科学,2002;9(9):47-817 范文秀,杨素兰,荆瑞俊,等 1火焰原子吸收法测定藿香中的微量元素1J21广东微量元素科学,2005;12(7):52-5 18 吴 坤,孙秀发 1 营养与食品卫生学1M21第 5版 1 北京:人民卫生出版社,2004:41-5519 罗海吉,吉雁鸿 1 硒的生物学作用及意义1J21 微量元素与健康研究,2000;17(2):70-1 110 Jarvis KE,Gray AL,Houk RS1Handbook of inductively coupled plasmamass spectrometry1M21New York:V ieweg Verlag,1992;11111 于海涛,张春晶 1磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶的生物学活性及其与人类疾病的关系1J21中国基层医药,2005;12(10):1447-8112010-01-14收稿 2010-02-10修回2(编辑 袁左鸣)人胚肺间充质干细胞对放射性肺炎肺组织损伤的修复作用刘 伟 李晓辕 彭丽萍 (吉林大学第一医院呼吸科,吉林 长春 130021)1摘 要2 目的 研究人胚肺间充质干细胞(MSC)对放射性肺炎肺组织的修复作用。方法 取 3 5个月的流产胎儿,按照人骨髓 M SC的体外培养方法,获得贴壁的人胚肺细胞,观察其形态、细胞周期和体外诱导分化潜能。通过培养放射性肺炎肺泡上皮细胞,利用细胞培养技术体外测定人胚肺 M SC修复放射损伤肺组织的能力,对比检测实验及对照组 TGF-B1的含量。结果 人胚肺 MSC可在体外扩增培养,可传至 17代以上,其形态及生长特点不发生明显改变,处于 G0/G1期的细胞多,具有典型的干细胞增殖特点。其免疫表型与骨髓来源的 M SC相似,并能有效调控放射性损伤后的肺泡上皮的生长。结论 人胚肺 MSC能有效修促进肺泡上皮细胞的生长,且能对放射性损伤后肺上皮细胞进行修复。1关键词2 人胚胎肺;间充质干细胞;放射性肺炎1中图分类号2 R33 1文献标识码2 A 1文章编号2 1005-9202(2010)07-0910-04基金项目:吉林省科技厅资助课题(200505184)通讯作者:彭丽萍(1964-),女,副教授,博士,主要从事呼吸系统疾病的研究。第一作者:刘 伟(1980-),男,医师,硕士,主要从事呼吸内科疾病的基础研究。放射性肺损伤是最为常见和严重的胸部放疗并发症之一,其高发病率限制了肿瘤的放疗剂量,从而使肿瘤治疗疗效下降,部分重度放射性肺损伤明显增加了患者的死亡风险。因此积极寻找能够预防、逆转和治疗放射性肺损伤并且副作用小的治疗方法成为非常重要的课题。人们在许多组织和器官中都发现和分离了具有多分化潜能的相应干细胞,但在肺组织证实和分离肺干细胞的研究进展缓慢,呼吸道黏膜上皮及肺泡上皮细胞终生不断自我更新,尤其在肺组织严重损伤以后,上皮更新,促进创伤修复,在理论上肯定存在多能干细胞,人们用同位素标记的方法取得了一些肺干细胞存在的证据,肺泡上皮型细胞中可能存在具有干细胞特征的细胞类型。本研究通过对人胚肺 M SC分离、传代培养、生物学特性及多向分化能力的测定,明确了人胚肺 MSC的干细胞特性。通过动物体内实验及体外细胞培养试验,证实了人胚肺 MSC能有效促进肺泡上皮细胞的生长,且能对放射性损伤后肺上皮细胞进行修复11,22。1 材料与方法111 M SC的分离和培养 选取 15例水囊引产胎儿,胎龄为3 5个月。取胎儿肺脏,用 D-H anks液反复冲洗,剪成碎块,用012%型胶原酶(Sigma)消化,37e、30 m in,过 100目钢网,制成单细胞悬液,细胞密度为 2 106/m,l 用含 D M EM/F12,M CDB-201,2%FCS(G ibco BRL公司)培养液,置 37e,5%CO2培养箱培养,3 d后换液,弃去非贴壁的细胞,以后每 3天半量换液。当细胞达 80%90%融合时,0125%胰酶(Sigma)常规#910#中国老年学杂志 2010年 4月第 30卷