选修一第2专题习题1.doc

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学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
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第2专题习题
1． [生物－选修1：生物技术实践]（15分）
最新研究表明，地球历史上最悲剧的物种大灭绝事件可能是由细菌导致的。该物种大灭绝事件发生于2.52亿年前二叠纪末期(在恐龙出现之前)，无数物种由于无法及时适应当时气候变化，而逐渐消失灭绝。与此同时，某种细菌A得到快速大量繁殖，原因有二：第一，该细菌A能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷，显著改变气候和海洋化学成分；第二，火山喷发导致镍元素迅速增多，这种至关重要的营养物质帮助微生物（细菌A）增殖。
(1)从生态系统成分的角度看，该细菌A属于 。
(2)在进行微生物培养时必须防止外来其他杂菌的干扰。为此，在接种前，除了必须对培养皿、接种用具和培养基进行严格灭菌外，还必须对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外；在接种操作时，必须 、 、 。
(3)鉴于细菌A在高浓度有机废水的生物处理中能发挥很大作用，要对其进行筛选，则应选用下表中的__ _培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：

① ，② 。
(4)分离并观察细菌A，可采用 法将初筛菌液接种在配方适宜的 培养基上。接种前，必须对培养基进行灭菌的方法是 。
(5)细菌A计数，可吸取菌液１ml稀释1000倍，然后吸取稀释后的菌液0.2ml，接种于培养基上培养，接种所使用的工具是 。一段时间后观察菌落并计数，实验重复三次结果如下图，则该菌液的浓度是 个细菌/ml。

【答案】(1)生产者
(2)在超净台上进行操作（在酒精灯火焰旁操作） 接种环放在火焰上灼烧并冷却 试管口火焰灼烧灭菌
(3)C ①A培养液缺少氮源，细菌不能很好生长 ②B培养液所含营养物质比较齐全，不能筛选出细菌A
(4)平板划线法或涂布平板操作 固体 高压蒸汽灭菌
(5)无菌涂布器 40000
【解析】
试题分析：
（1）根据题意，该细菌A能利用海洋沉积层的二氧化碳和氢气合成并释放甲烷，故该生物为生产者。
（2）微生物培养时必须防止外来其他杂菌的干扰．在接种或倒平板操作时，必须在超净台上进行操作、在酒精灯火焰旁操作、接种环放在火焰上灼烧并冷却、锥形瓶的瓶口火焰灼烧灭菌。
（3）细菌A在高浓度有机废水的生物处理中能发挥很大作用，所以选择培养该细菌时，培养基中不应含有有机碳源，但必须提供氮源，故C正确；不选用的其他培养液，分别说明原因是A培养液缺少氮源，细菌不能很好生长；B培养液所含营养物质比较齐全，但不能筛选出细菌A。
（4）分离细菌时，可以采用平板划线法和稀释涂布平板法；要想观察细菌的菌落特征，所用培养基必须为固体培养基；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。
（5）要想对菌落进行计数，必须采用稀释涂布平板法，接种所用工具为无菌涂布器；分析题图，三个培养基上的生长的菌落数目为（7+8+9）÷3=8（个/培养基），由于菌液稀释倍数为1000倍，菌液的体积为0.2ml，因此该菌液的浓度=（7+8+9）÷3×1000÷0.2=40000（个细菌/ml）。
考点：本题考查微生物的实验室培养和生态系统的结构微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
2．（8分）大肠杆菌有许多菌株，菌株A：met- bio- thr+ leu+ thi+（需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素），菌株B：met+ bio+ thr- leu- thi-（需要在基本培养基中补充苏氨酸、 亮氨酸和硫胺）。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验，请分析回答：

（1）菌株 A 和 B混合培养几小时，把细菌细胞洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上，发现长出了若干野生型菌落，对此实验现象可作出三种假设：
①营养上发生了互补，即菌株 A 所需的met- bio-从菌株 B 泄漏得到，菌株 B 所需的thr- leu- thi-从菌株 A 泄漏得到。
② ；
③ ；
（2）为了证明上述假设①，有人设计了一种 U 型管（如右图），中间有过滤器隔开，细菌不能通过，但培养液和营养物质可通过，实验如下。请你补充相关实验内容：

实验步骤：①在U型管中加入 ；
②U型管两端各加入菌株 A、菌株 B，培养几小时；
③将U 型管两端的细菌各自取出 后， ，观察其数量和存活状态。
实验结果： 。
实验结论: 菌株 A 与菌株 B 不可能通过营养互补产生菌落
( 3)发现大肠杆菌野生型菌株对青霉素有抗性。某兴趣小组为探究母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对菌株生长的影响，实验设计及结果如下表。请补充组别2的相关信息。

组别
培养基中的添加物
野生型菌株
1
100μg/mL蛋白质H
生长正常
2

3
2μg/mL 青霉素+100μg/mL蛋白质H
死亡

【答案】（1）②基因突变 ③不同细菌间遗传物质发生交换（发生细胞融合也可）
（2）实验步骤：①液体基本培养基 ③洗涤 分别涂布在基本培养基的固体平板
实验结果: 没有任何新细菌或菌落产生 （3）2μg/mL青霉素 生长正常
【解析】
试题分析：（1）根据题意可知，菌株A与菌株B都不能在基本培养基中生长，都属于营养缺陷型菌株，但菌株A和B混合培养后，发现长出了若干野生型菌落，则其可能的原因有：①营养上发生了互补，即菌株A所需的met- bio-从菌株B泄漏得到，菌株B所需的thr- leu- thi-从菌株A泄漏得到；②基因突变；③不同细菌间遗传物质发生交换或两类菌株细胞发生细胞融合。
（2）为了证明两类菌株营养上发生了互补，根据题意和装置图，应安排实验步骤为：①在U型管中加入液体基本培养基；②U型管两端各加入菌株 A、菌株 B，培养几小时；③将U 型管两端的细菌各自取出洗涤后，分别涂布在基本培养基的固体平板，观察其数量和存活状态。验证性实验的结果与结论是唯一的，即一定支持实验假设，本实验假设为两类菌株营养上发生了互补，所以该实验的结果只能为基本培养基的固体平板上没有任何新细菌或菌落产生。实验结论为菌株 A 与菌株 B 不可能通过营养互补产生菌落。
（3）要设计实验探究母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对菌株生长的影响，根据实验设计应遵循单一变量原则，可将实验分为3组，即单独用蛋白质H处理组、单独用青霉素处理组、同时用蛋白质H与青霉素混合处理组；对照实验还应遵循等量原则，所以不同组别中使用的蛋白质H或青霉素的量要相同；根据题意，大肠杆菌野生型菌株对青霉素有抗性，所以组别2的操作是培养基中添加2μg/mL青霉素，实验结果是生长正常。
考点：本题考查微生物培养的相关实验，意在考查考生能理解所学知识的要点，具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理的能力。
3．（12分）大肠杆菌是人和动物肠道中普遍存在的一种兼性厌氧菌，在无氧条件下，大肠杆菌通过发酵能将葡萄糖转变为多种有机酸并产生CO2等气体。某研究机构使用“滤膜法”对受污染的河流水体进行了大肠杆菌活菌数目的测定。请回答：

（1）研究人员向葡萄糖蛋白胨培养液中加入适量的溴麝香草酚蓝水条件下培养一段时间后可观察到溶液颜色的变化为 ，并且在倒置的小管中出现 。
（2）测定大肠杆菌活菌数目时，需制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，该培养基中为细菌提供氮源的物质是 。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入 作为指示剂。
（3）为了便于统计污染严重的水体中活菌的数目，需将水样进行适当稀释，例如取水样1mL加入无菌水 mL制备稀释倍数为102的稀释液，并照此依次制备更高倍数的稀释液。每个稀释们数的菌液取10mL进行过滤，然后将滤膜放置在培养基上。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在 附近进行。
（4）将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12h统计一次菌落数目，应选取菌落数目 时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大砀杆菌 个。用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少，这是因为 。
【答案】（1）由蓝变绿再变黄 气泡 （2）牛肉膏和蛋白胨 伊红美兰 （3）9 酒精灯火焰
（4）稳定 4.5x105 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
【解析】
试题分析：（1）大肠杆菌细胞呼吸产生的二氧化碳气体可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。
（2）牛肉膏蛋白胨固体培养基中为细菌提供氨源的物质是牛肉膏和蛋白胨。为了鉴别大肠杆菌菌落，可向培养基中加入伊红美兰作为指示剂，观察是否出现深紫色并伴有金属光泽的菌落。
（3）对水样进行适当稀释时，取水样1mL加入无菌水9mL可制备稀释倍数为102的稀释液。为了防止杂菌污染，稀释、过滤和旋转滤膜等操作都应该在酒精灯火焰附近的无菌区进行。
（4）将放有滤膜的平板置于适宜条件下培养，每隔12h统计一次菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果。如果经过培养后稀释倍数为102的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48，那么每升河水中约含大砀杆菌（43+47+42+48）/4/102/1000= 4.5x105个。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以用这种方法测定的细菌数量比实际活菌数量要少。
考点：本题考查微生物培养及计数的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
4．（12分）土壤微生物是陆地生态系统中最活跃的组分，影响着土壤有机质的转化，在陆地生态系统的物质循环和能量流动中起重要作用。下表是对某生态系统中不同植被类型土壤碳释放的研究结果。请回答：

（1）将无机环境中的CO2转化为生物群落中有机碳的主要生理过程是________作用； 土壤微生物在生态系统的成分中，可属于__________________________。
（2）草丛群落在垂直方向上具有____现象。与草丛相比，灌丛抵御环境变化的能力更强，原因是__________。
（3）对不同植被类型土壤的相关指标进行测定时，为尽量减小实验误差，取样时应该_________选取多个样方，然后将____________________________记录在上表中。
（4）实验结果表明，在森林生态系统的正向演替过程中，植被类型为______阶段时土壤微生物含碳量最大；土壤中有机碳含量在成熟林阶段最小，最可能的原因是______________。
（5）土壤微生物的代谢熵是指土壤微生物呼吸速率与土壤微生物含碳量的比值，代谢熵越低，土壤微生物对有机碳的利用效率就越高。根据表中数据分析，成熟林中微生物代谢熵的值_________于次生林，微生物对有机碳利用效率最低的是_______________林。
【答案】（1）光合 生产者、消费者或分解者 （2）分层 群落的结构更复杂，抵抗力稳定性更高
（3）随机 多个样方实测数据的平均值 （4）次生林 此阶段微生物呼吸作用强，有机碳被快速分解
（5）高 成熟
【解析】
试题分析：（1）碳循环是组成生物体的碳元素在无机环境和生物群落之间不断循环的过程，有机碳主要通过植物的光合作用将无机碳固定下来。土壤微生物在生态系统的成分中，可属于生产者、消费者或分解者。（2）草丛群落在垂直方向上具有分层现象。与草丛相比，灌丛的群落结构更复杂，抵抗力稳定性更高，所以灌丛抵御环境变化的能力更强。
（3）对不同植被类型土壤的相关指标进行测定时，为尽量减小实验误差，取样时应该随机选取多个样方，然后将多个样方实测数据的平均值记录在表格中。
（4）从表格中看，植被类型为次生林阶段时土壤微生物含碳量最大；在成熟林阶段，由于此阶段微生物呼吸作用强，有机碳被快速分解，所以土壤中有机碳含量最小。
（5）土壤微生物的代谢熵是指土壤微生物呼吸速率与土壤微生物含碳量的比值，所以成熟林中的微生物的代谢熵是2.265/2.243=1.01 (mg·g-1·h-1），因此成熟林中微生物代谢熵的值高于次生林。从表格中看，成熟林中微生物代谢熵的值最高，因此微生物对有机碳利用效率最低。
考点：本题考查生态系统的结构、功能和稳定性的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；能从题干和表格中获取有效信息，运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
5．请分析回答有关微生物及其应用的问题：（10分）
Ⅰ、柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如图1）。
图1
图2
图1

（1）欲分离筛选出能分泌脂肪酶的微生物M，应选择下列固体培养基（仅列出了碳氮源）中的 。（填编号）
A．蛋白胨、柠檬酸铁铵 B．橄榄油、硫酸铵 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨
（2）微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测酶活性来确定其应用价值。为降低生物柴油生产成本，可利用________________技术使脂肪酶能够重复使用，比较图2中的三种工艺，最好选择_________ 工艺。
Ⅱ、苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图3所示，①为土壤样品。

图3

（3）④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于 ；使用 法可以在⑥上获得单个菌落。
（4）采用固体培养基培养细菌时为什么要倒置培养？ 。
Ⅲ、急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌、病毒通过消化道进入人体导致的，因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施。
（5）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；
（6）分别取0.1mL已稀释了103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为 个。
（7）噬菌斑（如图4）是在长满细菌的培养基上，由一个噬菌体侵染细菌后，不断裂解细菌产生的一个不长细菌的透明小圆区，它是检出噬菌体数量的重要方法之一。现利用连续取样、在培养基中培养的方法，测得噬菌体在感染大肠杆菌后数量变化曲线（图5）。下列有关该曲线的叙述中错误的是( ) (多选，填编号)
图4 图5

A．曲线a～b段噬菌体数量不变，说明此阶段噬菌体还没有开始侵染细菌
B．曲线a～b段细菌细胞中正旺盛地进行细菌 DNA 的复制和有关蛋白质的合成
C．由b到c对应时间内噬菌体共繁殖了10代
D．限制c～d段噬菌斑数量增加的因素最可能是细菌已经绝大部分被裂解
【答案】（1）B （2）酶的固定化 C
（3）④的培养基中没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基中加入苯酚作为碳源 平板划线法（或稀释涂布平板）
（4）防止冷却过程中凝结形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
（5）检测培养基平板灭菌是否合格 （6）5.6×108个 （7）ABC
【解析】
试题分析：
（1）橄榄油属于脂肪，欲分离筛选出能分泌脂肪酶的微生物M，应选择的固体培养基中应含有脂肪，通过观察培养基中的脂肪变化来选择该微生物，所以选B。
（2）为降低生物柴油生产成本，可利用酶的固定化技术使脂肪酶能够重复使用，酶的固定常用包埋法，三种工艺中，最好选择C。
（3）分析筛选过程图可知，若微生物在④中不生长、在⑤中生长，由于该细菌只能降解利用苯酚，则④与⑤培养基的主要区别在于④的培养基中没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基中加入苯酚作为碳源；分离获得单个菌落的方法是平板划线法或稀释涂布平板法。
（4）固体培养基培养细菌时，要防止冷却过程中凝结形成的水珠滴落在培养基上污染培养基，因此需要倒置培养皿。
（5）涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，目的是检测培养基平板灭菌是否合格。
（6）若分别取0.1mL已稀释了103倍的水样分别涂布到三个琼脂固体培养基的表面进行培养，培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为（55+56+57）/3x1000/0.1x103=5.6×108个。
（7）根据题意分析曲线可知，曲线a～b段噬菌体数量不变，说明此阶段还没有子代噬菌体释放出来，A错误；曲线a～b段细菌细胞中正旺盛地进行噬菌体DNA 的复制和有关蛋白质的合成，B错误；100x2n=1000，所以由b到c对应时间内噬菌体繁殖n<10代，C错误；限制c～d段噬菌斑数量增加的因素最可能是细菌已经绝大部分被裂解，D正确。
考点：本题考查微生物培养及其应用的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。
6．回答下列有关微生物的问题。（9分）
Ⅰ.苯酚(C6H5OH)是广泛存在于化工行业废水中的一种污染物。为了分离和纯化高效分解苯酚的细菌，科研人员进行了如下图所示的实验。

（1）该实验中步骤②使用了LB培养基，其主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和氯化钠，请推测步骤②的目的是 。
（2）该实验步骤③中的培养基成分的与LB最大区别是以苯酚作为唯一的________。
（3）在接种过程中需要严格保证无菌操作，请举出两例 、 。
（4）步骤④的目的是_____________________。
Ⅱ.某种链球菌能引起人的咽喉感染，研究人员欲测试一种新抗生素（P）对该种链球菌的杀菌效果。将此链球菌分别接种在三个培养皿中，在2号培养皿中放入一片浸过抗生素（P）的滤纸圆片，在3号培养皿中放入没有浸抗生素的滤纸圆片，如下图所示。

（5）三个培养皿中，实验项是____________________，对照项是________________________；
判断实验项的理由是____________________________________________________________。
（6）培养皿3中的小圆片在放置前需做处理，具体步骤是：_________________________。
【答案】（1）能使菌种成倍扩增（使微生物大量繁殖）
（2）碳源
（3）每次划线前灼烧接种环；接种过程在酒精灯火焰附近进行（共2分，每条一分，合理即给分）
（4）分离纯化能分解苯酚的菌株
（5）培养皿2 ； 培养皿1和3（写全给分）； 实验目的是研究抗生素（P）对链球菌的杀菌效果，故培养皿2为实验项。 培养皿1与培养皿2对照，用于排除除抗生素外的其他因素对实验的影响； 培养皿3与培养皿2对照，用于排除滤纸圆片对实验的影响。（2分，合理即给分）
（6）将圆片高温灭菌处理，浸在无菌水中，不添加任何抗生素。
【解析】
试题分析：（1）步骤②使用了LB培养基目的是能使菌种成倍扩增（使微生物大量繁殖）。
（2）与步骤②中培养基的成分相比，步骤③培养基成分的最大区别是以苯酚作为唯一的碳源。
（3）在接种过程中需要严格保证无菌操作，如每次划线前灼烧接种环；接种过程在酒精灯火焰附近进行。
（4）分析图示可知，实验中步骤④的目的是分离纯化能分解苯酚的菌株；要培养目的菌株，经过步骤⑤培养后，应从残余苯酚浓度最低的培养瓶中再分离；可采用甘油管藏的方法对获得的菌种长期保存。
（5）根据单一变量的原则，在三个培养皿中，实验组是培养皿2，对照组是培养皿1和3，因为本实验目的是研究抗生素（P）对链球菌的杀菌效果，故培养皿2为实验组。培养皿1与培养皿2对照，用于排除除抗生素外的其他因素对实验的影响；培养皿3与培养皿2对照，用于排除滤纸圆片对实验的影响。
（6）培养皿3中的小圆片在放置前需做高温灭菌处理将圆片浸在无菌水中，不添加任何抗生素。
考点：本题考查微生物的培养、分离和纯化的相关知识。意在考查学生能理解所学知识的要点，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论，能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。
7．(12分)【生物——生物技术实践】在工业污水处理中常用到含脲酶细菌，其中脲酶可将尿素分解为氨。请回答：
(1)培养含脲酶细菌的培养基应以_________为唯一氮源，并加入______指示剂加以鉴别。在接种前应采用_________对培养基进行灭菌。
(2)右图示该菌纯化培养结果，其采用的接种方法是________，图中____(填编号)区域出现了较多的单个菌落。通过该接种方法______(填“能”或“不能”)获得含脲酶细菌在土壤中的数量。

(3)用凝胶色谱法分离脲酶时，相对分子质量_______的物质会较快从层析柱中洗脱出来。
(4)为比较游离含脲酶细菌和固定化含脲酶细菌的污水处理效率，研究人员用1g游离含脲酶细菌和lg固定化含脲酶细菌，分别加入到30mL含有浓度l％尿素的pH为7.5缓冲液中，37℃保温30分钟，通过检测溶液中_______________含量大小达到该目的。
【答案】(1)尿素 酚红（2分） 高压蒸汽灭菌法（2分） (2)平板划线法（2分） 2 不能 (3)较大 (4)氨（或尿素）（2分）
【解析】
试题分析：(1)要选择培养含脲酶细菌的培养基应以尿素为唯一氮源，并加入酚红为指示剂加以鉴别。对培养基进行灭菌应采用高压蒸汽灭菌法。(2)根据图示纯化培养结果，其采用的接种方法是平板划线法。图中2区域出现了较多的单个菌落。通过该接种方法不能获得含脲酶细菌在土壤中的数量。(3)根据密度越大的分子从层析柱中洗脱出来越快的原理可知，分子质量较大的应先脱出。(4)要检测脲酶的处理效率，应在相同时间内检测溶液中脲酶催化产生的产物含量多少来判断，即产生氨的多少。
考点：本题考查微生物的培养、固化酶效率检测等相关知识，意在考查学生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件。
8．无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题：
（1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理 。
①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿
⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部
（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整 ，接种前要进行 ，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。
（3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用 法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：

① 每次划线前要 ；
② 冷却后从上一区划线末端开始划；
③ 首尾区 。
（4）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被
污染。对固体培养基应采用的检测方法是 ，观察培养基上是否有菌落产生。
（5）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是 。
【答案】（1）A
（2）pH(1分） 高压蒸汽灭菌
（3）平板划线 ①灼烧接种环 ③不连接（不重叠）
（4）将未接种（接种等量无菌水）的培养基在适宜的温度下放置适当时间
（5）青霉素杀死了乳酸菌
【解析】
试题分析：（1）①②③⑧⑨应采用消毒，④⑤⑥⑦⑩应采用灭菌，故选A。
（2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，培养基接种前要进行高压蒸汽灭菌，在进行倒平板。
（3）微生物实验室培养的关键在于防止杂菌污染，本题是采用平板划线法接种，需要注意的是连续划线时，每次划线前要灼烧接种环，同时划线结束首尾不能相连。
（4）检测培养基是否被污染．对固体培养基应采用的检测方法是将未接种（接种等量无菌水）的培养基在适宜的温度下放置适当时间，观察培养基上是否有菌落产生。
（5）制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素结果发酵失败，原因可能是青霉素杀死了乳酸菌。
考点：本题主要考查微生物的实验室分离的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。
9．【生物—选修1：生物技术实践】（15分）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问题：
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）染料时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落并加以鉴定，某同学设计了甲、乙两种培养基：

酵母膏
无机盐
淀粉
纤维素粉
琼脂
CR溶液
水
培养基甲
+
+
+
+
-
+
+
培养基乙
+
+
+
-
+
+
+
（注：“+”表示“有”，“-”表示“无”）
据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于鉴定纤维素分解菌，原因是 。[来源:学#科#网]
【答案】（15分，除特别说明外，每空2分）
（1）纤维二糖 葡萄糖
（2）红 透明圈（1分）
（3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素（不能形成CR-纤维素红色复合物）
【解析】
试题分析：（1）纤维素酶中的葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）染料时，CR可与纤维素形成红色络合物，而其它的不可以，所以用含有CR的培养基进行培养时，会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
（3）根据表格中的相关信息甲不能做为分离纤维素分解菌，因为其中没有琼脂，液体培养基是不能分离单菌落的。培养基乙不能用于分离纤维素分解菌，因为培养基中没有纤维素，无法形成红色复合物，无法筛选。
考点：本题考查纤维素的分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。
10．（16分）生物冶金是利用含微生物的浸取液与矿石进行作用而获取有价金属的过程。这些靠“吃矿石”为生的微生物大多为嗜酸细菌。铁氧化细菌LJ-1是其中的一种，它不能利用现成有机物中的化学能，只能通过氧化Fe2+→Fe3+获取生长所需的能量。
（1）铁氧化细菌LJ-1的新陈代谢类型是__________________。
（2）如果要采集菌株LJ-1，应在________土壤取样，配置的选择培养基中以_________为唯一碳源。
（3）研究人员从云南某地硫磺泉附近分离鉴定了一株能够还原Fe3+的杆菌Teng-A。为了研究Teng-A对菌株LJ-1氧化Fe2+能力的影响，做了如下实验，结果如图，请完成以下步骤：

a)配置液体培养基，调节适宜的pH；
b)在____ ___（填有氧或无氧）条件下将__________________ ___________，以__________________ ____为对照，
c)检测________________ ____为指标。
d)分析与讨论：
培养初期的结果显示：混合培养对Fe2+的氧化速率比单独培养时低，请推测原因可能是______ __________________ ______。
【答案】每空2分
（1）自养需氧型 （2）酸性 二氧化碳
（3）有氧 将菌株Teng-A与菌株LJ-1混合培养
单独培养菌株LJ-1
（4）检测溶液中Fe2+的浓度 一部分被氧化的Fe2+被Teng-A还原了
【解析】
试题分析：（1）铁氧化细菌LJ-1它不能利用现成有机物中的化学能，只能通过氧化Fe2+→Fe3+获取生长所需的能量，所以其应是自养需氧型的。
（2）如果要想获得某种细菌，应在其生存的环境中来寻找，因为为嗜酸细菌，故应在酸性土壤中取样，配置的选择培养基中以无机碳二氧化碳为唯一碳源。
（3）因为该类细菌是需氧型细菌，所以应在有氧条件下培养。目的是研究Teng-A对菌株LJ-1氧化Fe2+能力的影响，所以实验组应将菌株Teng-A与菌株LJ-1混合培养，而对照组应是以单独培养菌株LJ-1。因变量是纵坐标溶液中Fe2+的浓度，所以应检测溶液中Fe2+的浓度为指标。由图可知混合培养对Fe2+的氧化速率比单独培养时低，有可能是一部分被氧化的Fe2+被Teng-A还原了。
考点：本题考查细菌的培养相关知识，意在考察考生对知识点的理解掌握和应用能力。
11．（12分）如图所示表示酵母菌细胞的构造模式。请据图回答：

（1）从细胞核的构造看，酵母菌属于 生物。
（2）写出1、3的结构名称：1 ，3 。
（3）2的主要化学成分为 ，其完成图示功能的结构基础是 。
（4）酵母菌的菌落一般会散发出一股悦人的酒香味，相关的反应式是 。
（5）用酵母制啤酒时，为保证发酵罐中有较多的酵母菌，必须先 ，达到一定数量后，则应该 ，以获得大量的 。
（6）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是pH的大小，pH越小取样越后。右侧生长曲线图中FG下降的主要原因是 。欲收获酵母菌或其代谢产物，应选择曲线中的 段。
（7）自然环境中的酵母菌属于生态系统中的成分是 。
【答案】28．（12分，每空1分）
（1）真核 （2）细胞壁 线粒体
（3）磷脂和蛋白质 细胞膜具一定的流动性
（4）
（5）通入空气 密闭发酵罐 酒精
（6）发酵罐中营养物质供应不足 EF （7）分解者
【解析】
试题分析：
（1）酵母菌有细胞核，属于真核生物。
（2）图中1为细胞壁， 3为线粒体。
（3）图中2为细胞膜，主要化学成分是磷脂和蛋白质；图中5是酵母菌进行出芽生殖时产生的芽体，因此完成图示功能的结构基础是细胞膜具一定的流动性。
（4）酵母菌的菌落一般会散发出一股悦人的酒香味，是由于酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的缘故，相关的反应式见答案。
（5）用酵母制啤酒时，为保证发酵罐中有较多的酵母菌，必须先通入空气让酵母菌进行有氧呼吸，以快速繁殖。达到一定数量后，则应该密闭发酵罐，让酵母菌进行无氧呼吸，以获得大量的酒精。
（6）当达到最大数量后，随着培养时间的延长，酵母菌数量的增加，发酵罐中的营养物质不断被消耗，代谢废物逐渐积累，生存环境不断恶化，生存斗争加剧等，使酵母菌死亡的个体数多于新生的个体数，细胞数量下降。在诸多因素中，发酵罐中营养物质供应不足，是生长曲线图中FG下降的主要原因。欲收获酵母菌或其代谢产物，应以酵母菌种群数量最多时为佳，对应于曲线中的EF段。
（7）自然环境中的酵母菌以无机环境中现成的有机物为生，所以属于生态系统中的分解者。
考点：本题考查果酒的制作的相关知识，意在考查学生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
12．（10分）制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂溶化，补充水至200mL。用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2～3天，观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题：
第1套
开盖，在空气中暴露10s
第2套
用手指接触培养基约10s
第3套
用硬币接触培养基约10s
第4套
用滤纸擦一下课桌，再接触培养基约10s
第5套
对照（不打开盖）
（1）该培养基中，含有的营养物质有_______________________。
（2）从培养基的物理性质