外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响_何秀丽.pdf

浙江农业学报 Acta Agriculturae Zhejiangensis，2023，35(1):58 66http:/www zjnyxb cn何秀丽，王人民 外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响 J 浙江农业学报，2023，35(1):58 66DOI:10.3969/j issn 1004-1524.2023.01.07收稿日期:2021-09-06基金项目:浙江博爱教育基金作者简介:何秀丽(1994)，女，安徽合肥人，硕士，研究方向为作物种质资源创新。E-mail:21916142 zju edu cn*通信作者，王人民，E-mail:wangrm zju edu cn外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响何秀丽，王人民*(浙江大学 农业与生物技术学院，种子科学与技术中心，浙江 杭州 310058)摘要:金线兰 Anoectochilus roxburghii(Wall)Lindl 是一种珍稀的兰科开唇兰属多年生单子叶草本植物，具有重要的药用价值。褪黑素(MT)是一类胺类激素，具有调节机体昼夜规律和机体抗氧化等多种生理功能。试验分别采用 5 mol L1、500 mol L1、5 mmolL1褪黑素根灌处理，研究褪黑素对金线兰生长发育和有效成分含量的影响，结果表明，5 mol L1的褪黑素根灌技术处理能够显著增加总黄酮和总氨基酸的含量，分别增加了 27.27%和 21.79%，而 500 mol L1和 5 mmol L1褪黑素显著增加了多糖的含量，分别增加了 20.79%和 23.88%。3 种浓度褪黑素处理下，叶绿素总含量显著高于对照 41.56%55.84%。5 molL1褪黑素处理下，叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性显著增加了23.72%、180.00%和 33.65%。综上，褪黑素通过影响金线兰叶绿素含量、代谢物积累和抗氧化酶活性，从而增强金线兰的抗逆性，进而增强金线兰移栽后的生命力。关键词:金线兰;褪黑素;有效成分;抗氧化酶;活性中图分类号:S682.31文献标志码:A文章编号:1004-1524(2023)01-0058-09Effects of exogenous melatonin on active components content and antioxidase activity of Ano-ectochilus roxburghiiHE Xiuli，WANG Renmin*(Seed Science and Technology Center，College of Agriculture and Biotechnology，Zhejiang University，Hangzhou310058，China)Abstract:Anoectochilus roxburghii(Wall)Lindl is a rare perennial monocot herb in the family Orchidaceae，ofimportant medicinal value Melatonin(MT)is a class of amine hormones with various physiological functions such asregulating body day and night and antioxidant In order to investigate the role of melatonin in the process of tissueculture seedling transplanting to the substrate，melatonin with 5 molL1，500 molL1and 5 mmolL1wasused to study the effects of root irrigation on seedling growth and effective component content The results showed that5 mol L1melatonin root irrigation treatment could significantly increase the total flavonoid by 27.27%and total a-mino acids content by 21.79%，whereas 500 mol L1and 5 mmol L1melatonin significantly increased the poly-saccharide content by 20.79%and 23.88%Under the three concentrations of melatonin，the total chlorophyll con-tent was 41.56%55.84%significantly higher than that of the control Under 5 molL1melatonin treatment，the activities of SOD，POD and CAT in leaves were significantly increased by 23.72%，180.00%and 33.65%Inconclusion，melatonin could enhance the stress resistance of A roxburghii by affecting chlorophyll content，metaboliteaccumulation and antioxidant enzyme activity，thus enhancing the vitality of A roxburghii after transplantingKey words:Anoectochilus roxburghii;melatonin;active components;antioxidant enzyme;activity金 线 兰Anoectochilus roxburghii(Wall)Lindl ，俗称金线莲、鸟人参，是一种珍稀的兰科开唇兰属多年生单子叶草本植物，生长环境多为低海拔常绿阔叶林下及峡谷阴凉湿润处，全草可入药1，民间常做药膳2。金线兰具有丰富的化学成分，如黄酮、生物碱、多糖3、氨基酸、矿物质4 等，因这些物质具有抗氧化、降血压、降血糖和提高免疫力等作用，金线兰在临床上具有重要应用价值3。由于金线兰种子缺少胚乳，种胚败育，极难萌发，目前金线兰的生产主要为组织培养，具体为在培养基上生长 4 5 个月后，再转移至基质中生长，之后便可采摘5 6。但因组培苗面临生长空间有限、转移过程中容易出现黄化枯萎等问题，且栽培管理技术尚不完善，使得金线兰出现产量下降、有效成分含量低等问题。前人对金线兰的研究多集中在化学成分和药理作用方面7 8，而对组培苗转移至移栽基质过程中的生长研究较少甚至没有。褪黑素(melatonin，MT)在 1958 年首次发现于牛的松果油体中，1995 年首次在高等植物体内发现，随后越来越多的研究表明 MT 在植物体内广泛存在。褪黑素是一类胺类激素，具有调节机体昼夜规律和机体抗氧化等多种生理功能9。MT 与生长素具有相同的合成前体，被认为是一种植物生长调节剂，参与植物的生长发育。科研工作者们对不同非生物胁迫下茄子、油菜、大豆等植物施加外源褪黑素进行了研究，结果表明，适量浓度的褪黑素可以增加植物的抗逆性9。褪黑素主要通过降低叶绿素降解、提高抗氧化酶活性、直接清除活性氧、和其他激素相互作用等途径提高植物对逆境的抵抗能力10。作为胺类激素，褪黑素很容易被吸收，使用在植物上不会经过食物链富集而对人体产生不良影响，因此可以作为一种绿色的外源激素调节剂。关于褪黑素提高植物的抗逆性已在众多文章中被证实，其中包括干旱11 12、高温、强光13 14、盐碱15 18、低温19 等逆境，但褪黑素是否可以改善金线兰在组培转移至基质过程中出现的黄化枯萎等问题未见有任何报道。所以，研究褪黑素对组培后转移栽培的金线兰有效成分和产量的影响具有重要的实践意义。本研究以福建红霞为试验材料，对从组培苗转移至基质栽培的金线兰幼苗进行 3 种浓度褪黑素根灌技术处理，通过测定植株形态、有效成分含量、叶绿素含量和抗氧化酶活性等指标，探明褪黑素在金线兰组培苗转移至基质栽培这一过程中所起的作用及其内在机制，旨在为利用褪黑素提高金线兰组培苗移栽后的生长提供理论依据。1材料与方法1.1试验材料福建红霞(5 月苗龄组培苗)，由杭州创美生物科技有限公司提供。MT 购自上海阿拉丁医药有限公司。福建红霞移栽前株高 4.33 cm，茎粗3.07 mm，叶长 3.13 cm，叶宽 2.46 cm，根长 2.40cm，根粗 1.20 mm，单株鲜重 0.91 g，单株干重0.08 g，折干率 8.73%。1.2试验方法1.2.1试验设计试验开始前，挑选同一环境下组培长大的组培苗，清理根部组培基质，选取长势一致的健壮无病害植株进行移栽。栽培基质为泥炭土 树麟 细沙=2 2 1(体积比)，移栽前栽培基质用1 000倍多菌灵(1 g 多菌灵可湿性粉剂溶于1 000mL 水)进行浸透，发酵 2 3 d。幼苗移栽至 50孔穴盘，于 25 恒温培养室中生长，培养条件为14 h/10 h，光照强度为 4 500 lx，相对湿度在75%85%。在预试验的基础上，MT 共设置 3 个浓度:5mol L1(M1)，500 mol L1(M2)，5 mmol L1(M3)，对照(CK)用蒸馏水代替。每个处理重复3 次，每个重复 50 株苗。苗移栽后开始根灌不同浓度外源 MT 溶液，每个重复根灌2 000 mL，共根灌一次，生长 30 d 后取样进行各项指标测定。1.2.2指标测定生长指标:每个重复随机选取 10 株幼苗进95何秀丽，等 外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响行株高、茎粗、叶宽、叶长、根长、根粗、鲜重的测量。幼苗于 80 烘箱中烘干至恒重，进行干重的测定。叶片光合色素和根系活力:光合色素含量和根系活力测定参照王学奎等20。有效成分含量:金线兰幼苗鲜样于 60 烘箱中烘干至恒重，磨粉过 80 目筛。总黄酮、总氨基酸和多糖含量测定参照施满容等21，分别采用三氯化铝显色法、酸性茚三酮显色法和苯酚浓硫酸法;总生物碱含量测定参照王菲等22，采用酸性染料比色法。苯丙氨酸解氨酶(PAL)、H2O2和抗氧化酶:PAL 测定参照 Zhang 等23，H2O2测定参照 Su等24，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定参照龚动庭25。1.3数据处理与分析采用 Excel 2019 和 SPSS22.0 软件进行数据分析，多 重 比 较 采 用 LSD 法，显 著 性 水 平=0.05。2结果与分析2.1MT 根灌处理对金线兰幼苗生长的影响用 MT 药剂根灌处理金线兰 30 d 后如图 1所示，对金线兰植株各个指标进行测量发现，与对照相比，3 种浓度 MT 处理的福建红霞幼苗株高、茎粗和叶宽均无显著差别(表 1)。MT 药剂处理完植株后，除 M3 处理的金线兰鲜重减少外，其余处理每株金线兰的鲜重和干重也没有显著变化(表 1)。但是经 M3 处理后的植株根长显著低于对照组，根长降低 20.88%;在 M1 和 M2浓度下，金线兰根粗显著高于对照组，分别提高了 16.10%和 15.25%(表 1)。MT 药剂处理后幼苗叶长、根长和根粗出现相同的趋势，即随着MT 浓度的提高，该 3 项指标的值均逐渐降低(表 1)。对金线兰植株进行移栽前(五月苗龄组培苗)和 MT 药剂根灌处理 30 d 后的生长数据进行对比发现，与对照相比，3 种浓度 MT 处理对株高、茎粗、叶宽、鲜重、干重和折干率增长量无显著差别，但叶长、根长和根粗增长量随着 MT 浓度的增加出现递减趋势(表 2)。其中，对照组的茎粗和根粗出现负增长(表 2)，表明移栽后的金线兰在生长过程中可能出现了不适应。2.2MT 根灌处理对金线兰代谢物含量的影响MT 根灌处理对金线兰代谢物的含量影响如图 2 所示。由图 2 可知，M1 和 M3 处理的金线兰植物体内的总黄酮含量均显著提高，增幅分别为27.27%和 33.06%(图 2-A)，但金线兰体内总生图中标尺为 1 cm。The scale in the picture is 1 cm图 1MT 处理 30 d 后的金线兰植株Fig 1The Anoectochilus roxburghii plants treated with MT for 30 days06浙江农业学报第 35 卷第 1 期表 1不同浓度 MT 处理对金线兰幼苗生长和产量的影响Table 1Effects of different concentrations of MT on seedling growth and yield of A roxburghii处理株高茎粗叶长叶宽根长根粗单株鲜重单株干重折干率Treatment Plantheight/cmStemdiameter/mmLeaflength/cmLeafwidth/cmRootlength/cmRootdiameter/mmFresh weightper plant/gDry weightper plant/gDryingrate/%CK4.99 0.28 a2.99 0.20 a3.38 0.02 bc2.73 0.05 a3.40 0.35 a1.18 0.07 b1.17 0.14 a0.11 0.01 a9.59 1.50 aM15.05 0.28 a3.01 0.22 a3.48 0.04 ab2.81 0.07 a3.40 0.19 a1.37 0.02 a1.18 0.03 a0.11 0.01 a9.52 0.23 aM25.07 0.10 a3.32 0.19 a3.44 0.09 ab2.75 0.04 a2.81 0.15 ab 1.36 0.11 a1.22 0.05 a0.11 0.01 a9.36 0.59 aM35.08 0.18 a3.09 0.36 a3.29 0.04 c2.65 0.13 a2.69 0.18 b1.26 0.06 ab 1.05 0.12 b0.10 0.01 a9.46 0.55 a表中同列数据后无相同小写字母的表示差异显著(P 0.05)。下同。Values within a column followed by different lowercase letters indicated the significant difference(P 0.05)The same as below表 2金线兰生长 30 d 前后各生长指标增量Table 2The increase of each growth index in 30 days of A roxburghii处理 株高 茎粗 叶长 叶宽 根长 根粗 单株鲜重 单株干重 折干率Treatment Plantheight/cmStemdiameter/mmLeaflength/cmLeafwidth/cmRootlength/cmRootdiameter/mmFresh weightper plant/gDry weightper plant/gDryingrate/%CK0.66 0.28 a0.08 0.20a0.25 0.02 ab0.27 0.05 a1.00 0.35 a0.02 0.07b0.26 0.14 a0.03 0.01 a0.86 1.50 aM10.72 0.28 a0.06 0.22a0.35 0.04 a0.35 0.07 a1.00 0.19 a0.17 0.02 a0.27 0.03 a0.03 0.01 a0.79 0.24 aM20.74 0.10 a0.25 0.19 a0.31 0.09 a0.29 0.04 a0.40 0.15 b0.16 0.11 a0.31 0.05 a0.04 0.01 a0.63 0.59 aM30.75 0.18 a0.02 0.36 a0.16 0.04 b0.19 0.13 a0.29 0.18 b0.06 0.06ab0.14 0.12 a0.02 0.01 a0.73 0.55 a柱状图上无相同小写字母的表示各处理间差异显著(P 0.05)。下同。Different lowercase letters above the bars represented statistically significant(P 0.05)differences among treatments The same as below图 2不同浓度 MT 对金线兰代谢物积累的影响Fig 2Effects of different concentrations of MT on metabolite accumulation of A roxburghii物碱的含量并没有受到 MT 根灌处理的影响(图2-B)。总氨基酸的含量在 MT 处理后，都有显著的变化，M1 处理下，金线兰幼苗体内总氨基酸含量显著增加，增幅为 21.79%，然而，随着 MT 浓16何秀丽，等 外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响度的提高，植株体内总氨基酸含量呈现下降趋势，M3 处理的金线兰幼苗总氨基酸含量比对照组显著降低了50%(图2-C)。M2 和 M3 处理下，金线兰幼苗体内多糖含量显著增加，增幅分别为20.79%和 23.88%(图 2-D)。对金线兰植株移栽前和 MT 药剂根灌处理30 d 后的代谢物含量进行对比发现，与移栽前相比，生长 30 d 后对照组总黄酮含量、多糖含量和总生物碱含量减少，MT 处理总黄酮、多糖含量增加，且 M1 和 M3 处理总黄酮增量显著高于对照，M2 和 M3 处理多糖增量显著高于对照(表 3)。对照组和 MT 处理组总生物碱含量与移栽前相比均降低，但 MT 延缓了总生物碱含量的减少(表3)。与移栽前相比，生长30 d 后金线兰植株体内氨基酸积累，M1 处理总氨基酸增加量显著高于对照 45.39%(表 3)。苯丙氨酸解氨酶(PAL)是连接初级代谢和次级代谢的关键酶，本文对金线兰幼苗根系和叶片中 PAL 活性的测定结果表明，根系和叶片中PAL 活性与黄酮含量变化趋势一致，即在 M1 和M3 处理下，植物叶片与根系中 PAL 活性均显著提高，叶片中分别提高了 18.24%和 36.09%，根系中分别提高了 71.43%和 180.21%(图 3)。2.3MT 根灌处理对金线兰叶绿素的影响金线兰体内的叶绿素含量的多少直接与其生长状态和代谢物含量的变化相关。MT 处理对叶绿素总量、叶绿素 a、叶绿素 b 及类胡萝卜素的含量的影响如图4 所示。结果表明，金线兰幼苗叶片中叶绿素总量、叶绿素 a、叶绿素 b 及类胡萝卜素的含量较对照处理均显著提高，在3 个不同浓度的MT 处理下，叶绿素总量、叶绿素 a、叶绿素 b 及类胡萝卜素含量均有明显增加，增幅分别达 41.56%55.84%、33.82%45.59%、88.89%133.33%和25.00%30.71%(图 4)。对金线兰植株移栽前和 MT 药剂根灌处理30 d 后的叶绿素含量进行对比发现，与移栽前相比，生长 30 d 后，叶绿素 a、叶绿素 b、叶绿素总量和类胡萝卜素的增加量均显著高于对照(表 4)。其中，M1 处理叶绿素 a、叶绿素总量和类胡萝卜素的增量分别高出对照 164.29%、533.33%和38.46%;M2 处理叶绿素 a、叶绿素总量和类胡萝卜素的增量分别高出对照 221.43%、716.67%和表 3金线兰生长 30 d 前后代谢物增量Table 3The increase of metabolite content in 30 days of A roxburghii处理 总黄酮含量 多糖含量 总生物碱含量 总氨基酸含量TreatmentTotal content of flavonoid/%The content of polysaccharide/%The content of alkaloid/%Total content of amino acid/%CK0.28 0.01 b0.61 0.27 b0.29 0.08 a4.01 0.44 bM10.05 0.12 a0.40 0.08 b0.25 0.03 a5.83 0.27 aM20.35 0.16 b1.63 0.17 a0.17 0.22 a3.32 0.14 cM30.12 0.14 a2.42 0.61 a0.25 0.11 a1.96 0.02 d图 3不同浓度 MT 对金线兰 PAL 活性的影响Fig 3Effects of different concentrations of MT on theactivity of PAL in A roxburghii51.28%;M3 处理叶绿素 a、叶绿素总量和类胡萝卜素的增量分别高出对照 164.29%、533.33%和图 4不同浓度 MT 对金线兰光合色素含量的影响Fig 4Effects of different concentrations of MT on thecontent of photosynthetic pigment in A roxburghii26浙江农业学报第 35 卷第 1 期表 4金线兰生长 30 d 前后光合色素增量Table 4The increase of photosynthetic pigment content in 30 days of A roxburghiimg g1处理 叶绿素 a 叶绿素 b 叶绿素 a+b 类胡萝卜素 aTreatmentChlorophyll aChlorophyll bChlorophyll a+bCarotenoidCK0.14 0.09 b0.08 0.03 b0.06 0.11 b0.39 0.07 bM10.37 0.04 a0.01 0.04 a0.38 0.08 a0.54 0.05 aM20.45 0.08 a0.04 0.01 a0.49 0.08 a0.59 0.03 aM30.37 0.12 a0.00 0.05 a0.38 0.17 a0.53 0.08 ab35.89%。2.4MT 根灌处理对金线兰 H2O2含量和根系活力的影响H2O2在植物根系的发育建成中起着重要的信号调节作用，MT 处理对金线兰根系中 H2O2含量和根系活力的影响如图 5 所示。由图可知，MT显著促进了根系中 H2O2的积累，但对叶片中H2O2含量无显著影响(图5-A)。同时，结果也表明根系活力的变化趋势同黄酮含量变化(图 2-A)和 PAL 活性变化(图 3)趋势一致。与对照相比，M3 处理金线兰幼苗根系中 H2O2和根系活力分别显著提高 216.51%和 44.44%(图 5)。2.5MT 根灌处理对金线兰抗氧化酶活性的影响MT 处理对福建红霞 4 种抗氧化酶活性的影响如图 6 所示。结果表明，与对照相比，MT 处理组幼苗叶片和根系中抗氧化酶活性均有不同程度的显著提高。经 MT 处理后，金线兰叶片中SOD、POD、CAT 活性均显著高于对照，其中 M1处理金线兰叶片 SOD、POD 和 CAT 活性分别比对照增加23.72%、180.00%和33.65%;M2 处理金线兰叶片 SOD 和 POD 活性分别比对照增加31.18%和 115%;M3 处理金线兰叶片 SOD、POD和 CAT 活性分别比对照增加 30.69%、405.00%和 25.00%。M3 处理下金线兰根系 CAT 和 APX活性分别比对照增加126.31%和58.30%;M2 处理下金线兰根系 SOD 活性比对照增加 40.83%;3 种浓度 MT 处理金线兰根系 POD 活性分别比对照增加68.17%、33.27%和100.18%。以上结果说明，MT 处理提高了移栽金线兰叶片和根系的抗氧化酶活性，从而增强了金线兰幼苗移栽过程中的生长适应性。3讨论与结论MT 作为植物的生长调节剂，增强植物的抗逆性，因此，在植物从培养基转入基质恢复生长的过程中也发挥着作用。从结果上看，500 molL1(M2)和 5 mmolL1(M3)MT 抑制了转入基质后金线兰根部的伸长，但是促进了根部直径的变大。Yang 等 26 用100 mol L1和 1 000 mol L1MT 处理拟南芥幼苗后发现，两种浓度 MT 处理均显著抑制了拟南芥幼苗初生根的生长。在Chen 等27 28 的研究中发现，MT 可激活其下游的活性氧信号，促进 H2O2含量积累，H2O2调控植物根系形态建成，促进或抑制根系的生长。本试验中，根灌 MT 后幼苗叶片中 H2O2含量无显著改变，但根系中 H2O2含量出现了明显的随 MT图 5不同浓度 MT 对金线兰 H2O2含量和根系活力的影响Fig 5Effects of different concentrations of MT on H2O2content and root activity of A roxburghii36何秀丽，等 外源褪黑素对金线兰有效成分含量及抗氧化酶活性的影响图 6不同浓度 MT 对金线兰抗氧化酶活性的影响Fig 6Effects of different concentrations of MT on antioxidant activity of A roxburghii浓度增加而增加的趋势，推断 MT 可能影响金线兰根系中 H2O2含量进而影响金线兰幼苗的根系变化。虽然 MT 根灌处理 30 d 后，金线兰的地上部分没有显著的变化，但是其体内的总黄酮含量、总氨基酸含量和多糖含量都发生显著的增高。MT 主要是在低浓度(5 mol L1)下促进了总黄酮和总氨基酸含量，高帆等29 的研究表明，MT预处理可显著提高猕猴桃幼苗体内总黄酮含量，有效增强猕猴桃幼苗的生活力。MT 调控植物类黄酮代谢，在植物次级代谢中起着关键作用30。在植物次级代谢中，PAL 作为一种关键酶连接初级代谢与次级代谢，使植物代谢进入苯丙烷途径，经 MT 处理的金线兰幼苗 PAL 活性显著提高，推测 MT 可能通过提高 PAL 活性增强金线兰黄酮类物质代谢，促进黄酮积累。但是 MT 对多糖含量的影响主要在高浓度(5 mmolL1)时可以显著增加金线兰体内的多糖含量。MT 促进次生代谢物的积累可能和叶绿素含量有关。检测叶绿素的含量后发现，MT 在 3 个浓度下都显著增加了总叶绿素、叶绿素 a、b、类胡萝卜素的含量。杜卓等31 研究表明，干旱胁迫下，MT 可显著提高玉米幼苗叶绿素合成，提高玉米光合作用，从而提高玉米对干旱胁迫的耐受力。Tan 等32 对 MT 与叶绿素之间的关系进行了探究，发现 MT 可以降低叶绿素分解基因和叶片衰老基因的表达，减少了不利条件下叶绿素的损失。金线兰幼苗叶片叶绿素含量提高可能与MT 提高其抗逆性、延缓叶绿素降解有关。MT 作为一种自由基清除剂，能够清除多余的自由基，提高植物抗氧化能力。MT 影响根系活力、叶绿素含量和次级代谢物积累可能受抗逆能力的作用，因此试验中测定了抗氧化酶(SOD、POD、CAT、APX)的活性，发现 3 种浓度的 MT 在一定程度上都显著增加了金线兰叶片和根系中抗氧化酶活性。综上而言，MT 可通过增加叶绿素含量，促进次生代谢物积累，提高抗氧化酶活性，从而提升金线兰幼苗的抗逆性，促进植株根系直径增大，增强根系活力，有利于金线兰从培养基转移到基质后的适应性生长，且 5 mol L1为金线兰幼苗最佳根灌浓度。该结果可能对金线兰组培后进行转移栽培提供理论指导。参考文献(References):1郎楷永 中国植物志 M 北京:科学出版社，1999 2刘凯良 珍稀植物:金线兰J 生物学教学，2018，43(11):75 76，8246浙江农业学报第 35 卷第 1 期LIU K L Rare plant:Clematis roxburghii J Biology Teach-ing，2018，43(11):75 76，82(in Chinese)3肖小华，林彩霞，吴序栎，等 金线莲的化学成分及生物活性研究进展J 现代食品科技，2018，34(5):267 275XIAO X H，LIN C X，WU X L，et al Research advance onchemical constituents and biological activities of AnoectochilusroxburghiiJ Modern Food Science and Technology，2018，34(5):267 275(in Chinese with English abstract)4许梦洁，叶申怡，吴梅，等 不同种质金线莲氨基酸和矿物质元素量的比较 J 中草药，2017，48(2):368 372XU M J，YE S Y，WU M，et al Comparison on contents ofmineral elements and amino acids in different germplasms ofAnoectochilus roxburghiiJ Chinese Traditional and HerbalDrugs，2017，48(2):368 372(in Chinese with Englishabstract)5李荣峰，粟杨盛 金线莲组织培养研究进展J 安徽农业科学，2020，48(3):15 17LI R F，SU Y S Research progress of tissue culture in Anoec-tochilus roxburghii J Journal of Anhui Agricultural Sciences，2020，48(3):15 17(in Chinese with English abstract)6苏菲，黄作喜 金线莲繁殖及栽培技术研究进展J 安徽农学通报，2020，26(14):32 35SU F，HUANG Z X Research progress on propagation andcultivation techniques of Anoectochilus roxburghii J AnhuiAgricultural Science Bulletin，2020，26(14):32 35(inChinese)7俞晓玲，姜文倩，游晨，等 金线莲多糖的药理作用及其机制研究进展 J 药物评价研究，2021，44(5):1117 1121YU X L，JIANG W Q，YOU C，et al Research progress onpharmacological action and mechanism of polysaccharides fromAnoectochilus roxburghii J Drug Evaluation Research，2021，44(5):1117 1121(in Chinese with English ab-stract)8陈育青，林艺华，邹毅辉，等 金线莲生药鉴定、活性成分影响因素及药理作用研究进展J 中成药，2020，42(8):2141 2144CHEN Y Q，LIN Y H，ZOU Y H，et al Research progress onpharmacognosy identification，influencing factors of activecomponents and pharmacological effects of Anoectochilus rox-burghiiJ Chinese Traditional Patent Medicine，2020，42(8):2141 2144(in Chinese)9田雨菁，胡雅琦 外源褪黑素对非生物胁迫下植物生长发育的影响J 生物化工，2020，6(4):163 164TIAN Y J，HU Y Q Effects of exogenous melatonin on plantgrowth and development under abiotic stressJ BiologicalChemical Engineering，2020，6(4):163 164(in Chinesewith English abstract)10BOSE S K，HOWLADER P Melatonin plays multifunctionalrole in horticultural crops against environmental stresses:areviewJ Environmental and Experimental Botany，2020，176:104063 11张明聪，何松榆，秦彬，等 外源褪黑素对干旱胁迫下春大豆品种绥农26 形态、光合生理及产量的影响J 作物学报，2021，47(9):1791 1805ZHANG M C，HE S Y，QIN B，et al Effects of exogenousmelatonin on morphology，photosynthetic physiology，andyield of spring soybean variety Suinong 26 under droughtstressJ Acta Agronomica Sinica，2021，47(9):1791 1805(in Chinese with English abstract)12李冬，申洪涛，王艳芳，等 外源褪黑素对干旱胁迫下烟草幼苗光合碳同化和内源激素的影响J 草业学报，2021，30(1):130 139LI D，SHEN H T，WANG Y F，et al Effects of exogenousmelatonin on photosynthetic carbon assimilation and endoge-nous hormones in tobacco seedlings under drought stressJ Acta Prataculturae Sinica，2021，30(1):130 139(inChinese with English abstract)13吴燕，乔晓燕，葛伟强，等 高温强光下外源褪黑素对栝楼雌花生理生化特性的影响J 浙江农业学报，2020，32(3):421 429WU Y，QIAO X Y，GE W Q，et al Effects of exogenousmelatonin on physiological and biochemical characteristics infemale flowers of Trichosanthes kirilowii under high tempera-ture and strong lightJ Acta Agriculturae Zhejiangensis，2020，32(3):421 429(in Chinese with English ab-stract)14齐晓媛，王文莉，胡少卿，等 外源褪黑素对高温胁迫下菊花光合和生理特性的影响J 应用生态学报，2021，32(7):2496 2504QI X Y，WANG W L，HU S Q，et al Effects of exogenousmelatonin on photosynthesis and physiological characteristicsof Chrysanthemum se