微生物的营养与培养基.pptx

第五章第五章 微生物的营养微生物的营养 营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是营养物质是微生物生存的物质基础，而营养是微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。微生物维持和延续其生命形式的一种生理过程。营养物质营养物质:能够满足机体生长、繁殖和完成各种能够满足机体生长、繁殖和完成各种生理活动所需要的物质生理活动所需要的物质.营养营养:微生物获得和利用营养物质的过程。微生物获得和利用营养物质的过程。第一节微生物的营养六要素第一节微生物的营养六要素一、微生物的化学组成一、微生物的化学组成有机物：有机物：蛋白质、糖类、脂类、核酸蛋白质、糖类、脂类、核酸无机物无机物:无机盐和各种离子无机盐和各种离子大量元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙等碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙等微量元素：锌、锰、钼、硒、钴、铜等锌、锰、钼、硒、钴、铜等占细菌细胞干重的占细菌细胞干重的97%二、微生物的营养要素二、微生物的营养要素六要素六要素：碳源碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐和水、氮源、能源、生长因子、无机盐和水 营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可以将它们区营养物质按照它们在机体中的生理作用不同，可以将它们区分成六大类。分成六大类。1.碳源碳源在微生物生长过程中能为其提供碳素来源的物质在微生物生长过程中能为其提供碳素来源的物质异养微生物碳源谱碳源谱有机碳无机碳自养微生物目前在微生物工业发酵中所利用的碳源物质主要是单目前在微生物工业发酵中所利用的碳源物质主要是单糖、淀粉、麸皮、米糠等。糖、淀粉、麸皮、米糠等。对于为数众多的化能异养微生物来说，碳源是兼有对于为数众多的化能异养微生物来说，碳源是兼有能源功能的营养物。能源功能的营养物。微生物利用的碳源物质主要有糖类、有机酸、醇、脂微生物利用的碳源物质主要有糖类、有机酸、醇、脂类、烃、类、烃、CO2等。等。微生物对碳源物质的利用具有选择性微生物对碳源物质的利用具有选择性:如在以葡萄糖和半乳糖为碳源的培养基中，如在以葡萄糖和半乳糖为碳源的培养基中，E.coli首首先利用先利用葡萄糖葡萄糖，然后利用，然后利用半乳糖半乳糖，前者称为大肠杆，前者称为大肠杆菌的菌的速效碳源速效碳源，后者称为，后者称为迟效碳源迟效碳源。微生物对碳源利用能力有差异微生物对碳源利用能力有差异:如如Pseudomonas中的某些种可以利用多达中的某些种可以利用多达90种种以上以上的碳源物质，而一些的碳源物质，而一些产甲烷菌产甲烷菌仅能利用仅能利用CO2和少数和少数1C或或2C化合物。化合物。凡是能被用来构成菌体物质中或代谢产物中氮素来源凡是能被用来构成菌体物质中或代谢产物中氮素来源的营养物质称为氮源。的营养物质称为氮源。2.氮源氮源氮源谱氮源谱有机氮无机氮NH3铵盐硝酸盐N2蛋白质核酸氨基酸尿素 实验室常用的无机氮源有实验室常用的无机氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。等。生产上常用的氮源有生产上常用的氮源有硝酸盐、铵盐、尿素、氨硝酸盐、铵盐、尿素、氨以以及蛋白含量较高的及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼粉、玉米浆粉、玉米浆等。等。蛋白氮必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸蛋白氮必须通过水解之后降解成胨、肽、氨基酸等才能被机体利用，这种氮源叫等才能被机体利用，这种氮源叫迟效氮源迟效氮源。无机氮或蛋白质降解物中有机氮源可以直接被菌无机氮或蛋白质降解物中有机氮源可以直接被菌体吸收利用，这种氮源叫做体吸收利用，这种氮源叫做速效氮源速效氮源。速效氮源，通常有利于机体的生长，迟效氮源有速效氮源，通常有利于机体的生长，迟效氮源有利于代谢产物的形成。利于代谢产物的形成。3.能源能源能源：能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营能源：能为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能养物或辐射能能源谱能源谱化学物质辐射能化能异养微生物的能源有机物无机物化能自养微生物的能源光能自养和光能异养微生物的能源光辐射能是光辐射能是单功能营养物单功能营养物（能源）；还原态的（能源）；还原态的NH4+是是双功能双功能营养物营养物（能源和氮源）；而氨基酸是（能源和氮源）；而氨基酸是三功能营养物三功能营养物（碳源、（碳源、能源和氮源）。能源和氮源）。4.生长因子生长因子(growth factor)生长因子：是一类调节微生物正常代谢所必需，但不生长因子：是一类调节微生物正常代谢所必需，但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。微微 生生 物物 生长因子生长因子 需要量需要量(ml-1)III型肺炎链球菌（型肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）胆碱胆碱 6ug金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）硫胺素硫胺素 0.5ng白喉棒杆菌（白喉棒杆菌（Cornebacterium diphtherriae）B-丙氨酸丙氨酸 1.5ug破伤风梭状芽孢杆菌（破伤风梭状芽孢杆菌（Clostridium tetani）尿嘧啶尿嘧啶 0-4ug肠膜状串珠菌（肠膜状串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）吡哆醛吡哆醛 0.025ug富含物质：富含物质：酵母膏、玉米浆、肝浸液、麦芽汁等酵母膏、玉米浆、肝浸液、麦芽汁等5.矿质元素矿质元素作用作用参与微生物中氨基酸和酶的组成；参与微生物中氨基酸和酶的组成；调节微生物的原生质胶体状态，维持调节微生物的原生质胶体状态，维持细胞的渗透与平衡细胞的渗透与平衡酶的激活剂。酶的激活剂。大量元素大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe（微生物（微生物生长所需浓度在生长所需浓度在10-310-4mol/L）（K2HPO4和和MgSO4）微量元素微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co（微生物生长（微生物生长所需浓度在所需浓度在10-610-8mol/L）一般不需要添加一般不需要添加6.水水生理功能主要有生理功能主要有起到溶剂与运输介质的作用；起到溶剂与运输介质的作用；参与细胞内一系列化学反应；参与细胞内一系列化学反应；维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；热的良好导体；热的良好导体；水在细胞中有两种存在形式：水在细胞中有两种存在形式：结合水和游离水结合水和游离水.营养体孢子芽孢营养体孢子芽孢微生物对水的需要程度常用环境（或基质）中的微生物对水的需要程度常用环境（或基质）中的水活度值水活度值（water activity,w）表示表示定义：水活度为在一定的温度条件下，溶液的蒸汽压（材定义：水活度为在一定的温度条件下，溶液的蒸汽压（材料上部蒸气相中水浓度）与纯水的蒸汽压（即纯水上部蒸气料上部蒸气相中水浓度）与纯水的蒸汽压（即纯水上部蒸气相中水浓度）之比，相中水浓度）之比，即：即：w=/o 表示溶液的蒸汽压表示溶液的蒸汽压 o表示纯水的蒸汽压表示纯水的蒸汽压几类微生物生长最适几类微生物生长最适 w 微生物微生物 w一般细菌一般细菌 0.91酵母菌酵母菌 0.88霉菌霉菌 0.80噬盐细菌噬盐细菌 0.70噬盐真菌噬盐真菌 0.65嗜高渗酵母嗜高渗酵母 0.60第二节微生物的营养类型第二节微生物的营养类型营养类型：根据微生物生长所需要的主要营养要素不同，而营养类型：根据微生物生长所需要的主要营养要素不同，而划分的微生物类型。划分的微生物类型。根据碳源、能源及电子供体性质的不同根据碳源、能源及电子供体性质的不同，可将微生物分为：可将微生物分为：光能无机自养型光能无机自养型(photolithoautotrphy)光能有机异养型光能有机异养型(photoorganoheterotrphy)化能无机自养型化能无机自养型(chemolithoautotrphy)化能有机自养型化能有机自养型(chemoorganoheterotrophy)1 1光能无机自养型（光能自养型）光能无机自养型（光能自养型）碳源：碳源：CO2为主要唯一或主要的为主要唯一或主要的能量：能量：光能光能供氢体或电子供体：供氢体或电子供体：以无机物如以无机物如H2、H2S、S等等藻类及蓝细菌以水为电子供体（供氢体），藻类及蓝细菌以水为电子供体（供氢体），红硫细菌，以红硫细菌，以H2S为电子供体，为电子供体，CO2+2H2S光能光能光合色素光合色素 CH2O+2S+2S+H2O2 2光能有机异养型（光能异养型）光能有机异养型（光能异养型）不能以不能以CO2为主要或唯一的碳源；为主要或唯一的碳源；以有机物作为供氢体，利用光能将以有机物作为供氢体，利用光能将CO2还原为细胞物质；还原为细胞物质；在生长时大多数需要外源的生长因子；在生长时大多数需要外源的生长因子；例如，红螺菌属中的一些细菌能利用异丙醇作为供氢体，将例如，红螺菌属中的一些细菌能利用异丙醇作为供氢体，将CO2还原成细胞物质，同时积累丙酮。还原成细胞物质，同时积累丙酮。CHOH+CHOH+CO2H H3 3C CH H3 3C C2光能光能光合色素光合色素2 2 CHCH3 3C0CHC0CH3 3+CH2O+H2O3 3化能无机自养型（化能自养型）化能无机自养型（化能自养型）能量：能量：无机物氧化放出的化学能无机物氧化放出的化学能碳源：碳源：CO2电子供体：电子供体：H2、H2S、Fe2+、NH3或或NONO2 2-等等化能无机自养型只存在于微生物中化能无机自养型只存在于微生物中,如如氢细菌、硫杆菌氢细菌、硫杆菌，可，可在完全无机及无光的环境中生长。在完全无机及无光的环境中生长。4 4化能有机异养型（化能异养型）化能有机异养型（化能异养型）能量：能量：有机物氧化放出的化学能有机物氧化放出的化学能碳源：碳源：有机化合物有机化合物氢供体：氢供体：有机物代谢过程中产生有机物代谢过程中产生有机物通常既是碳源也是能源；有机物通常既是碳源也是能源；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；大多数细菌、真菌、原生动物都是化能有机异养型微生物；所有致病微生物均为化能有机异养型微生物；所有致病微生物均为化能有机异养型微生物；不同营养类型之间的界限并非绝对不同营养类型之间的界限并非绝对异养型微生物并非绝对不能利用异养型微生物并非绝对不能利用CO2；自养型微生物也并非不能利用有机物进行生长；自养型微生物也并非不能利用有机物进行生长；有些微生物在不同生长条件下生长时有些微生物在不同生长条件下生长时,其营养类型也会发生改变；其营养类型也会发生改变；例如紫色非硫细菌例如紫色非硫细菌(purple nonsulphur bacteria)：没有有机物时，同化没有有机物时，同化CO2，为为自养型微生物；自养型微生物；有机物存在时，利用有机物进行生长，为有机物存在时，利用有机物进行生长，为异养型微生物异养型微生物；光照和厌氧条件下，利用光能生长，为光照和厌氧条件下，利用光能生长，为光能营养型微生物；光能营养型微生物；黑暗与好氧条件下，依靠有机物氧化产生的化学能生长，为黑暗与好氧条件下，依靠有机物氧化产生的化学能生长，为化能营养型化能营养型微生物微生物微生物营养类型的可变性无疑有利于提高其对环境条件变化的适应能力微生物营养类型的可变性无疑有利于提高其对环境条件变化的适应能力第三节营养物质进入细胞的方式第三节营养物质进入细胞的方式营养物质能否进入细胞取决于三个方面的因素：营养物质能否进入细胞取决于三个方面的因素：营养物质本身的性质（相对分子量、质量、溶解性、营养物质本身的性质（相对分子量、质量、溶解性、电负性等电负性等微生物所处的环境（温度、微生物所处的环境（温度、PHPH等）；等）；微生物细胞的透过屏障（原生质膜、细胞壁、荚微生物细胞的透过屏障（原生质膜、细胞壁、荚膜等）。膜等）。根据物质运输过程的特点根据物质运输过程的特点，可将物质的运输方式分为可将物质的运输方式分为自由扩散自由扩散促进扩散促进扩散主动运输主动运输基团转移基团转移1 1自由扩散自由扩散原生质膜是一种半透性膜，营养物质通过原生质原生质膜是一种半透性膜，营养物质通过原生质膜上的小孔，由高浓度的胞外环境向低浓度的胞内进膜上的小孔，由高浓度的胞外环境向低浓度的胞内进行扩散。行扩散。特点特点物质在扩散过程中没有发生任何反应；物质在扩散过程中没有发生任何反应；不消耗能量；不能逆浓度运输；不消耗能量；不能逆浓度运输；运输速率与膜内外物质的浓度差成正比运输速率与膜内外物质的浓度差成正比水是唯一可以通过扩散自由通过原生质膜的分子，脂水是唯一可以通过扩散自由通过原生质膜的分子，脂肪酸、乙醇、甘油、一些气体（肪酸、乙醇、甘油、一些气体（O O2 2、COCO2 2）及某些氨基及某些氨基酸在一定程度上也可通过自由扩散进出细胞。酸在一定程度上也可通过自由扩散进出细胞。2 2协助扩散协助扩散特特点点不消耗能量不消耗能量参与运输的物质本身的分子结构不发生变化参与运输的物质本身的分子结构不发生变化不能进行逆浓度运输不能进行逆浓度运输运输速率与膜内外物质的浓度差成正比运输速率与膜内外物质的浓度差成正比需要载体参与需要载体参与 通过促进扩散进入细胞的营养物质主要有氨基酸、通过促进扩散进入细胞的营养物质主要有氨基酸、单糖、维生素及无机盐等。单糖、维生素及无机盐等。3 3主动运输主动运输它的一个重要特点是物质运输过程中需要消耗能量和它的一个重要特点是物质运输过程中需要消耗能量和载体，而且可以进行逆浓度运输载体，而且可以进行逆浓度运输。主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物主动运输是广泛存在于微生物中的一种主要的物质运输方式。质运输方式。基团移位又称为磷酸烯醇式丙酮酸基团移位又称为磷酸烯醇式丙酮酸-磷酸糖转移酶运输磷酸糖转移酶运输系统（系统（PTS），），PTS 通常由五种蛋白质组成，包括酶通常由五种蛋白质组成，包括酶I、酶酶II（包括包括a、b、c三三种亚基）和一种低相对分子量的热稳定蛋种亚基）和一种低相对分子量的热稳定蛋白质（白质（HPr）。）。4 4基团移位基团移位基团移位是另一种类型的主动运输，它与主动运输方式的基团移位是另一种类型的主动运输，它与主动运输方式的不同之处在于它有一个复杂的运输系统来完成物质的运输，而不同之处在于它有一个复杂的运输系统来完成物质的运输，而物质在运输过程中发生化学变化。物质在运输过程中发生化学变化。PEP-P+HPr HPr-p+丙酮酸丙酮酸 P-HPr+糖糖糖糖-P+HPr四种运送营养方式的比较四种运送营养方式的比较第四节培养基第四节培养基培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。谢产物的营养基质。任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：任何培养基都应该具备微生物生长所需要六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理常规高压蒸汽灭菌：常规高压蒸汽灭菌：1.05kg/cm2,121.315-30分钟；分钟；0.56kg/cm2,112.615-30分钟分钟用途：用途：促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生物制品保藏；制备微生物制品培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础培养基几乎是一切对微生物进行研究和利用工作的基础一、选用和设计培养基的原则和方法一、选用和设计培养基的原则和方法目的明确目的明确营养协调营养协调理化条件适宜理化条件适宜经济节约经济节约（一）配制培养基的原则（一）配制培养基的原则1.目的明确目的明确根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基。根据不同的微生物的营养要求配制针对强的培养基。培养化能自养型的氧化硫杆菌的培养基组成为：培养化能自养型的氧化硫杆菌的培养基组成为：S 10g MgSOS 10g MgSO4 4.7H.7H2 2O 0.5g NHO 0.5g NH4 4)2 2SOSO4 4 0.4g FeSO 0.4g FeSO4 4 0.01g H0.01g H2 2POPO4 4 4g CaCl 4g CaCl2 2 0.25g H 0.25g H2 2O 1000mlO 1000ml培养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：培养化能异养的大肠杆菌一种培养基是由下列化学成分组成：葡萄糖葡萄糖 5 5g NHg NH4 4H H2 2POPO4 4 1g NaCl 5g MgSO 1g NaCl 5g MgSO4 4.7H2O .7H2O 0.2g K0.2g K2 2HPOHPO4 4 1g H 1g H2 2O 1000mlO 1000ml常见的培养四大类微生物的培养基常见的培养四大类微生物的培养基细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）放线菌（高氏放线菌（高氏1 1号）号）酵母菌酵母菌(麦芽汁培养基麦芽汁培养基)霉菌（查氏合成培养基）霉菌（查氏合成培养基）2.营养协调营养协调碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培养基碳氮比为养基碳氮比为4/1时，菌体量繁殖，谷氨酸积累少；时，菌体量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。酸产量则大量增加。3.理化条件适宜理化条件适宜pH水活度水活度氧化还原电位氧化还原电位a.pH培养基的培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。微生物的生长繁殖或产生代谢产物。通常培养条件：通常培养条件：细菌与放线菌：细菌与放线菌：pH78.0酵母菌和霉菌：酵母菌和霉菌：pH4.06范围内生长范围内生长内源调节内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。盐；调节培养基的碳氮比。外源调节外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液b.氧化还原电位氧化还原电位各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求：各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求：好氧微生物好氧微生物：+0.3+0.4V,(在在0.1V以上的环境中均能生以上的环境中均能生长长).厌氧微生物厌氧微生物：只能在：只能在+0.1V以下生长以下生长兼性厌氧微生物兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、以上呼吸、+0.1V以下发酵以下发酵对微生物影响最大的是：对微生物影响最大的是：分子氧和分子氢的浓度分子氧和分子氢的浓度培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。4.经济节约经济节约以粗代精以粗代精以野代家以野代家以废代好以废代好以国代进以国代进以简代繁以简代繁以氮代朊以氮代朊以烃代粮以烃代粮以纤代糖以纤代糖1.生态模拟生态模拟 调查所培养菌的生态条件，查看调查所培养菌的生态条件，查看“嗜好嗜好”，对对“症症”下料下料初级天然培养基初级天然培养基.2.查阅文献查阅文献 查阅、分析文献，调查前人的工作资料，查阅、分析文献，调查前人的工作资料，借鉴人家的经验，以便从中得到启发设计有自己借鉴人家的经验，以便从中得到启发设计有自己特色的培养基配方特色的培养基配方.3.精心设计精心设计 借助优选法或借助优选法或正交试验设计正交试验设计法等方法法等方法.（二）设计培养基的方法（二）设计培养基的方法4、实验比、实验比 较较：不同培养基配方的选择比较不同培养基配方的选择比较 单种成分来源和数量的比较单种成分来源和数量的比较 几种成分浓度比例调配的比较几种成分浓度比例调配的比较 小型试验放大到大型生产条件的比较小型试验放大到大型生产条件的比较 pH和温度试验和温度试验附附1：配置培养基时应注意的几个问题及解决方法：配置培养基时应注意的几个问题及解决方法：1、沉淀、沉淀2、胶体强度的破坏、胶体强度的破坏3、褐色物质的形成、褐色物质的形成4、pH发生变化发生变化二、培养基的类型及应用二、培养基的类型及应用培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用培养基种类繁多，根据其成分、物理状态和用途可将培养分成多种类型。途可将培养分成多种类型。按按成成分分不不同同划划分分天然培养基天然培养基合成培养基合成培养基含用化学成分还不清楚或化含用化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物学成分不恒定的天然有机物牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基汁培养基化学成分完全了解的物质配化学成分完全了解的物质配制而成的培养基制而成的培养基高氏高氏1 1号培养基、查氏培养号培养基、查氏培养基基半合成培养基半合成培养基在合成培养基的基础上添加在合成培养基的基础上添加些天然成份，以更有效地满些天然成份，以更有效地满足微生物对营养物的需要足微生物对营养物的需要.如马铃薯蔗糖培养基如马铃薯蔗糖培养基按按物物理理状状态态不不同同划划分分固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基在液体培养基中加入一定量凝固在液体培养基中加入一定量凝固剂，使其成为固体状态，琼脂含剂，使其成为固体状态，琼脂含量一般为量一般为1.5%-2.0%1.5%-2.0%琼脂含量一般为琼脂含量一般为0.2%-0.7%不加任何不加任何凝固剂凝固剂半固体培养基半固体培养基固体培养基常用来进行微生物的分固体培养基常用来进行微生物的分离、鉴定、活菌计数及菌种保藏离、鉴定、活菌计数及菌种保藏 观察微生物的运动特征、分类鉴观察微生物的运动特征、分类鉴定及噬菌体效价滴定定及噬菌体效价滴定 大规模工业生产及在实验室进行大规模工业生产及在实验室进行微生物的基础理论和应用方面的微生物的基础理论和应用方面的研究研究 按按用用途途不不同同划划分分基础培养基基础培养基鉴别培养基鉴别培养基含有一般微生物生长繁殖所含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基需的基本营养物质的培养基用来将某种或某类微生物从混杂的用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基微生物群体中分离出来的培养基用于鉴别不同类型微生物的培养基用于鉴别不同类型微生物的培养基选择培养基选择培养基在基础培养基中加入某些特殊营养在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基物质制成的一类营养丰富的培养基微生物产生某种代谢产物，与培养微生物产生某种代谢产物，与培养基中的特殊化学物质发生特定的化基中的特殊化学物质发生特定的化学反应，产生明显的特征变化学反应，产生明显的特征变化牛肉膏蛋白胨培养基是最常牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基用的基础培养基加富培养基加富培养基特殊营养物质包括血液、血清、酵特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等母浸膏、动植物组织液等在培养基中加入相应的特殊营养物质在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长生长，有利于所需微生物的生长EMB(Eosin Methylene Blue)Figure 14.Left:Escherichia coli cells.Right:E.coli colonies on EMB Agar.复习思考题复习思考题1.什么叫营养？什么是营养物？营养物有哪些生理功能？什么叫营养？什么是营养物？营养物有哪些生理功能？2.营养物质包括哪些？各有何功能？营养物质包括哪些？各有何功能？3.根据碳源、能源及电子供体的不同可将微生物划分为几种类根据碳源、能源及电子供体的不同可将微生物划分为几种类型？举例说明。型？举例说明。4.营养物质进入细胞的方式有几种？各有何特点？营养物质进入细胞的方式有几种？各有何特点？5.什么是培养基？配制培养基时应遵循什么原则？什么是培养基？配制培养基时应遵循什么原则？6.培养基按化学成分、物理状态、用途来划分可分为哪几种类培养基按化学成分、物理状态、用途来划分可分为哪几种类型？型？7.采用什么方法能分离到能分解并利用苯作为碳源和能源物质采用什么方法能分离到能分解并利用苯作为碳源和能源物质的细菌纯培养？的细菌纯培养？8.某同学利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌，在酪某同学利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌，在酪素培养基平板上发现有几株菌的菌落周围有蛋白水解圈，是素培养基平板上发现有几株菌的菌落周围有蛋白水解圈，是否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大，就能断定该菌株产胞否能仅凭蛋白水解圈与菌落直径比大，就能断定该菌株产胞外蛋白酶的能力就大，而将其选择为高产蛋白酶的菌种，为外蛋白酶的能力就大，而将其选择为高产蛋白酶的菌种，为什么？什么？9.试分析以下培养基的选择原理以及所选择培养的微生物属试分析以下培养基的选择原理以及所选择培养的微生物属于哪一类型？于哪一类型？培养基组成：葡萄糖培养基组成：葡萄糖5%，尿素，尿素0.5%，（，（NH4）SO4 0.1%,KH2PO4 0.25%,MgSO47H2O 0.1%,FeSO47H2O 0.01%,酵母膏酵母膏0.05%，孟加拉红，孟加拉红1/30000，丙氨酸钠，丙氨酸钠0.05%,PH=4.5