人教版教学河北省石家庄一中学年高二生物222细胞融合与单克隆抗体新人教版选修.pptx

2.2.22.2.2学学.科科.网网 zxxk.zxxk.组卷网组卷网 细胞融合与单克隆抗体细胞融合与单克隆抗体1 1、概念：、概念：一、动物细胞融合一、动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。合形成一个细胞的过程。形成的细胞称杂交细胞形成的细胞称杂交细胞2 2、诱导方法：、诱导方法：物理（离心、振动、电激）、物理（离心、振动、电激）、化学（聚乙二醇）、化学（聚乙二醇）、生物（灭活的仙台病毒）生物（灭活的仙台病毒）灭活的病毒诱导细胞融合的原理是什么？灭活的病毒诱导细胞融合的原理是什么？灭活的含义是什么？灭活的含义是什么？（52页资料）页资料）学学.科科.网网 zxxk.zxxk.组卷网组卷网 细胞细胞A A细胞细胞B B杂交细胞杂交细胞灭活的病毒灭活的病毒物理法物理法化学法化学法仙台病毒仙台病毒紫外线紫外线丧失感染性丧失感染性（不感染细胞）（不感染细胞）保留融合活性保留融合活性（诱导细胞融合）（诱导细胞融合）3 3、过程：、过程：动物细胞融合成功的动物细胞融合成功的标志是什么？标志是什么？为何要用灭活的病毒为何要用灭活的病毒？此时细胞的核型特点此时细胞的核型特点？学学.科科.网网 zxxk.zxxk.组卷网组卷网 4 4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原理细胞融合原理细胞融合的方法细胞融合的方法诱导方法诱导方法融合成功的标志融合成功的标志用途用途4 4、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合细胞融合原理细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性学学.科科.网网 zxxk.zxxk.组卷网组卷网 细胞融合的方法细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原去除细胞壁后诱导原生质体融合生质体融合使细胞分散后诱导使细胞分散后诱导细胞融合细胞融合诱导方法诱导方法物理（离心、振荡、物理（离心、振荡、电刺激）电刺激）化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）物理、化学方法物理、化学方法（同左）（同左）灭活的病毒灭活的病毒融合成功的标志融合成功的标志生出新细胞壁生出新细胞壁核融合核融合用途用途获得杂种植株获得杂种植株主要制备单克隆抗体主要制备单克隆抗体5 5、细胞融合技术应用、细胞融合技术应用 细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育及制备单克隆抗体。新品种培育及制备单克隆抗体。二、单克隆抗体二、单克隆抗体单个单个细胞细胞无性无性繁殖繁殖抗体抗体什么是抗体？抗体用在医学上有何作用？什么是抗体？抗体用在医学上有何作用？传统方法如何得到抗体？传统方法如何得到抗体？抗体存在于生物体的什么部位？抗体存在于生物体的什么部位？抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。血清、组织液及外分泌液中。血清、组织液及外分泌液中。反复向动物体内注射抗原，从血清中分离抗体。反复向动物体内注射抗原，从血清中分离抗体。血清血清如何产生大量的单克隆抗体？如何产生大量的单克隆抗体？这样得到的抗体在产量如何？纯度高吗？特异这样得到的抗体在产量如何？纯度高吗？特异性如何？性如何？产量低、纯度低、特异性差。产量低、纯度低、特异性差。什么细胞能产生抗体？每一个这样的细什么细胞能产生抗体？每一个这样的细胞能产生几种抗体？胞能产生几种抗体？免疫小鼠免疫小鼠培养骨髓培养骨髓瘤细胞瘤细胞融融合合骨髓瘤骨髓瘤细胞细胞B B淋巴淋巴细胞细胞注射特定注射特定抗原蛋白抗原蛋白融合后可能什么融合后可能什么类型的细胞？如类型的细胞？如何筛选？何筛选？选择培养选择培养基上培养基上培养多种杂交细胞多种杂交细胞如何筛选出能如何筛选出能产生特定抗体产生特定抗体的细胞？的细胞？1.单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程专一抗体专一抗体检验阳性检验阳性专一抗体检专一抗体检验阳性验阳性克隆杂交细胞克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆分开不同杂交细胞，克隆专一抗体检验阳性细胞专一抗体检验阳性细胞有限稀释法有限稀释法计数103/ml102/ml10/ml0.5-2/孔杂交瘤杂交瘤细胞细胞培养后取上培养后取上清液（含抗清液（含抗体）做抗原体）做抗原抗体检测抗体检测挑选能产生特定抗体的细胞后继续培养，以挑选能产生特定抗体的细胞后继续培养，以获得足够数量的细胞后，怎样才能得到大量获得足够数量的细胞后，怎样才能得到大量的单克隆抗体？的单克隆抗体？注射到小注射到小鼠体内鼠体内体外体外培养培养第第1 1次筛选次筛选关关键键步步骤骤第第2 2次筛选次筛选2 2、单克隆抗体的特点、单克隆抗体的特点特异性强，灵敏度高，化学性质单一。特异性强，灵敏度高，化学性质单一。3 3、应用：、应用：（1 1）临床诊断）临床诊断 准确、高效、简易、快速。准确、高效、简易、快速。（2 2）用于治疗疾病和运载药物）用于治疗疾病和运载药物 比如比如“生物导弹生物导弹”能提高良种家畜繁殖能力的细胞工程技术是能提高良种家畜繁殖能力的细胞工程技术是组织培养细胞融合组织培养细胞融合胚胎移植细胞核移植胚胎移植细胞核移植 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是确的是诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同所用的技术手段完全相同所用的技术手段完全相同所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同都能形成杂种细胞都能形成杂种细胞