超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析磺胺类抗生素残留量检测方法.docx

超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱分析磺胺类抗生素残留量的检测方法
李建中，宋越

三重串联四极杆质谱是复杂基质中痕量组分定量分析的重要手段，通过多重反应监控模式（MRM）能够提供高选择性和高灵敏度的检测。建立在亚二微米粒径填料基础上的超高效快速液相色谱（RRLC）已得到广泛的应用，和QQQ联用能够提供高通量和高灵敏度的分离分析。本文运用UHPLC-QQQ对动物源性食品中的22种磺胺类抗生素进行定量分析，通过对重复性、线形关系等方法学参数进行考察，所建立的方法能在7.0分钟内对22种目标化合物完成快速、高灵敏度的检测分析。本方法采用Agilent 6460QQQ系统，利用Jet Stream鞘流气技术大大提高了去溶剂效果，同时减少了喷雾造成的离子扩散损失，显著的提高了离子化效率，从而大大提高了灵敏度。本方法完全满足了国内外对磺胺类抗生素药物日益严格的残留限量监测要求。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂
美国安捷伦公司6460 QQQ质谱仪；美国安捷伦公司1260 UHPLC。

1.2 液相和质谱条件
液相色谱柱为安捷伦Zobax Eclipse Plus C18（3.0 x 50mm, 1.8 µm）；流动相A为水（含0.1%体积比的甲酸），B为乙腈（含0.1%体积比的甲酸），梯度（B%/min）：10/0，30/3.0，70/4.5，70/5.0，10/5.5，10/7.0；柱温45oC；进样量5µL，流速为0.4 mL/min。
QQQ质谱参数（ESI+模式）：干燥气温度（Gas Temp）325 oC，干燥气流量（Gas Flow）6mL/min，雾化器压力（Nebulizer）50psi，鞘流气温度（Sheath Gas Temp）350 oC，鞘流气流量（Sheath Gas Flow）12mL/min，毛细管电压（Capillary）3000V，MRM参数见表1，安捷伦MassHunter软件用于定性（Qualitative）和定量（Quantitative）分析。

2 结果与讨论
图1为22种磺胺类抗生素的MRM叠加谱图。本文对MS和LC条件进行优化，对线形关系（R2）、检测限（LOQ）、峰面积重复性（RSD）等方法学进行了考察（见表2）。所建立的RRLC-QQQ能够对22种磺胺类抗生素进行高灵敏度和高通量的定量分析。

表1. 22种磺胺类抗生素MRM参数
Compound
Name
Precursor
Ion
Product
Ion
Fragmentor
Collision
Energy
Sulfaguanidine
215
156
70
10

215
108
70
20
Sulfisomidine
279
186
100
15

279
124
100
20
Sulfacetamide
215
156
70
6

215
108
70
21
Sulfadiazine
251
156
100
11

251
108
100
21
Sulfathiazole
256
156
100
11

256
108
100
21
Trimethoprim
291
261
120
23

291
230
120
20
Sulfapyridine
250
184
110
14

250
156
110
12
Sulfamerazine
265
172
110
12

265
156
110
14
Sulfamoxole
268
156
110
13

268
113
110
16
Sulfamethizole
271
156
90
9

271
108
90
21
Sulfadimidine
279
186
120
15

279
156
120
16
Sulfamethoxypyridazine
281
156
110
15

281
108
110
26
Sulfameter
281
156
110
14

281
108
110
26
Sulfamonomethoxine
281
156
110
15

281
108
110
28
Sulfachloropyridazine
285
156
100
11

285
108
100
21
Sulfadoxine
311
156
120
15

311
108
120
26
Sulfamethoxazole
254
156
100
11

254
108
100
25
Sulfafurazole
268
156
100
9

268
113
100
11
Sulfabenzamide
277
156
80
7

277
108
80
21
Sulfaquinoxaline
301
156
110
13

301
108
110
27
Sulfadimethoxine
311
156
130
20

311
108
130
28
Sulfaphenazole
315
222
130
16

315
156
130
20

图1. 22种磺胺类抗生素的MRM谱图

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