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浅论抗乙型肝炎病毒非核苷类药物的研究进展

　　【关键词】 抗乙型肝炎病毒非核苷类药物
乙型病毒性肝炎是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引起的一种常见的世界性传染疾病。HBV一直严重危害人类健康，至今仍是世界性的医学难题。全世界大约有20亿乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染者，每年由于HBV感染而死亡的人数达100万［1］。目前，临床上应用的干扰素和核苷类抗HBV药物虽然在治疗乙肝病毒的过程中取得了一定的疗效，但免疫调节剂的低应答率和核苷类似药物耐药性病毒株的出现以及停药反弹等因素使其应用受到了限制。非核苷类化合物种类繁多，结构不一［2］，抗HBV的作用机制不同于核苷类药物，且有许多具有较好的抗HBV活性。因此近年来，非核苷类抗HBV药物的研究已引起广泛关注，本文对它们的最新研究进展作一简单综述。
1 焦磷酸类似物
膦甲酸钠是最常用的焦磷酸类似物。它是特异性DNA聚合酶的非竞争性抑制剂，对人类巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、EB病毒等均有抑制作用。膦甲酸钠能直接作用于核酸聚合酶的焦磷酸结合部位，抑制病毒特异DNA多聚酶和逆转录酶。有研究者给21例乙肝患者注射国产膦甲酸钠，每天 g，分两次(每次间隔6 h)静滴，注射前后同步检测HBV复制指标。治疗结束后HBeAg和HBV-DNA转阴率分别为％和％［3］。
2 γ-联苯双酯
γ-联苯双酯(γ-DDB，4,4’-二甲氧基-5,6,5’,6’-双亚甲二氧基-2,2’-二羧酸甲酯联苯)为我国首创治疗慢性肝炎的药物。尽管该化合物有口服吸收率低的缺点，但活性很好。γ-联苯双酯具有肝脏保护作用，能使肝脏免受四氯化碳，D-半乳糖氨引起的肝损伤，降低血清GPT(谷氨酸丙酮酸转氨酶)和GOT(谷氨酸草酰乙酸转氨酶)，增强肝脏解毒功能。初步试验表明［4］，单酯化合物较双酯化合物活性更强。
3 苯丙氨衍生物
文献报道苯丙氨衍生物(E)-N-(1-溴-1-(2-甲氧苯基)-3-氧代-3-(哌啶-1-基)丙-1-烯-2-基)-4-硝基。
苯甲酰胺(EC50= μmol·L-1)对原生型和耐拉米夫定的HBV变种有较好的抑制作用。推断其通过抑制带有病毒壳体蛋白信息的RNA合成而发挥抗HBV作用［5］。
4 2,5-吡啶羧酸衍生物
Lee［6］等在非核苷类HIV逆转录酶抑制剂的研究基础上开发了一类新型HBV逆转录酶抑制剂，其中2,5-吡啶羧酸衍生物N-(1-羟基-2-甲基丙基-2-基)-6-(4-(3-(异丁基氨基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧基)烟酰胺、肝细胞核因子3(HNF-3)和胎蛋白因子，抑制HBV启动子的活性及HBV阳性细胞中HNF-4及HNF-3的表达，但对阴性细胞无作用。因此，其是通过下调逆转录因子抑制HBV复制，从而降低HBV启动子活性和阻止病毒基因的表达和复制。该作用机制很独特，有别于其他抗乙肝病毒的化合物。
　青蒿素酯
Romero等[15]用细胞株对大量高纯度中药单一有效成分进行了抗HBV活性评价，发现：青蒿素酯(CC50=20 μmol·L-1，HBsAgIC50= μmol·L-1，HBV-DNAIC50= μmol·L-1，TI=40)与拉米夫定(CC50100 μmol·L-1，HBsAgIC50= μmol·L-1，HBV-DNAIC50= μmol·L-1，TI500)相比抗HBV活性较弱，但两者联合使用时，呈现协同作用，同时没有发现引起新的毒性，而且青蒿素酯可在不影响宿主细胞增殖的情况下强烈抑制HBV。
　苦参素
苦参素为豆科植物苦参根提取的有效成份，98%为氧化苦参碱。苦参素有抑制胶原纤维增生的抗纤维化作用，能保护肝细胞，降低ALT、LN、HA水平。临床应用苦参碱注射液治疗慢性乙型肝炎。结果显示，两个月后患者体征、肝功能明显改善，HBeAg阴转率可达51%，且复发率较低[16]。
　　　4-甲基-7-羟基香豆素衍生物
Chen等[17]在筛选抗HIV药物时，以4-甲基-7-羟基香豆素为先导物合成了12个4-甲基-7-硫基香豆素类似物，并以HBV感染的细胞株对它们的抗HBV活性和毒性进行评价。其中，10个化合物表现出良好的抗HBV活性，而化合物4-甲基-7-(3-甲基丁基-2-烯硫基)-2H-香豆素-2-酮(IC50= μmol·L-1)和7-(6-氯-1-N-氧吡啶基-2-硫基)-4-甲基--2H-香豆素-2-酮(IC50= μmol·L-1)是拉米夫定的16 倍。目前此类化合物的作用机制尚在进一步研究中。
　泽泻醇A衍生物
　　Zhang等[18]合成一系列泽泻醇A衍生物，并对其抗HBV的活性进行了体外评价。研究表明，对泽泻醇A的母核结构进行简单修饰即可得到一些对乙肝病毒有潜在抑制作用的重要衍生物。其中将泽泻醇A11,23,24位的羟基乙酯化、13,17位双键环氧化、25位羟基脱水后得到的化合物活性最突出(HBsAgIC50= mM，HBeAgIC50= mM，HBsAgSI108，HBeAgSI93)远远优于拉米夫定(HBsAgIC50=12 mM，HBeAgIC50=26 mM)，可作为一种新型乙肝病毒抑制剂对其作进一步研究。构效关系分析发现：(a)11，23，24位羟基酰化可降低此类化合物的毒性；(b)在C-13(17)的环氧基对化合物的毒性有重要影响，使毒性相对降低；(c)进一步结构优化位置在泽泻醇A的C-25羟基；(d)C-3位羰基对化合物的生物活性影响不大。
　丹参中原儿茶醛[19]
　　原儿茶醛(Protocatechuic aldehyde，PA)是从中草药丹参中得到的一种成分。其不仅可抑制HBV-DNA(IC50=± ) μg·mL-1的复制，还能抑制HBV抗原〔HBsAgEC50=(±)μg·mL-1 HBeAgEC50=(±)μg·mL-1〕的表达。因此，PA至少有两个作用靶点，其具体的作用机制还有待进一步确证。
　黄酮类化合物汉黄芩素
　　汉黄芩素(Wogonin)是从中国传统中药黄芩根中分离出的一种成分。最初的药理研究主要集中在汉黄芩素的抗炎、抗肿瘤活性上。Guo[20]等重点研究了汉黄芩素在体外和体内的抗HBV活性，发现其显着抑制鸭乙型肝炎病毒(DHBV)DNA聚合酶(IC50= μg·mL-1)的活性。经细胞株检测，汉黄芩素能有效抑制HBV抗原的分泌(HBsAgIC50=4 μg·mL-1，HBeAgIC50=4 μg·mL-1)及HBV-DNA(ED50=5 mg·kg-1)的复制。
12 结 语
免疫调节剂的副作用和核苷类似物耐药性病毒株的出现，使慢性乙型肝炎的临床治疗急需作用机制新颖的抗HBV药物。抗HBV非核苷类药物的研究开辟了抗乙型肝炎药物研究的新领域、新思路，拓宽了联合用药的选择范围，为征服慢性乙型肝炎带来了新的希望。
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