半仿生技术简介.pptx

主要内容概概 述述半仿生中药筛选系统半仿生中药筛选系统半仿生技术的操作流程半仿生技术的操作流程在中药提取中的应用实例在中药提取中的应用实例现状、缺点和展望现状、缺点和展望12345第一节概述SBE法提出的背景：法提出的背景：中药复方成分提取研究比较复杂，涉及中药复方成分提取研究比较复杂，涉及到许多相关学科。多年来，中药复方提取工到许多相关学科。多年来，中药复方提取工艺研究在传统思维方式的影响下艺研究在传统思维方式的影响下进展缓慢进展缓慢。张兆旺等基于中药复方成分的提取中存在的张兆旺等基于中药复方成分的提取中存在的主要问题提出了制备中药口服制剂的新工艺主要问题提出了制备中药口服制剂的新工艺半仿生提取法半仿生提取法。一、半仿生技术的概念一、半仿生技术的概念半仿生提取法半仿生提取法(Semi-bionicExtractionmethod(Semi-bionicExtractionmethod，SBESBE法法)是从生物药剂学的角度将是从生物药剂学的角度将整体整体药物研究法与药物研究法与分子分子药物研究法相结合，药物研究法相结合，模仿模仿口服药物在胃肠道口服药物在胃肠道的转运过程，采用选定的转运过程，采用选定pHpH值的酸性水和碱性水，值的酸性水和碱性水，依次连续提取得到含指标成分高的活性混合物的中药和方剂的药效物依次连续提取得到含指标成分高的活性混合物的中药和方剂的药效物质提取新技术。质提取新技术。二、半仿生技术的特点二、半仿生技术的特点分析思维与系统思维的统一分析思维与系统思维的统一单体成分与活性混合成分的统一单体成分与活性混合成分的统一中医治病特点与口服给药特点的统一中医治病特点与口服给药特点的统一以某种化学成分为指标，而是考虑到综合成分的作用。以某种化学成分为指标，而是考虑到综合成分的作用。既可以充分发挥混合物成分的综合作用特点，又有利于用单体成分控制既可以充分发挥混合物成分的综合作用特点，又有利于用单体成分控制制剂质量制剂质量从生物药剂学角度模拟口服给药及药物经胃肠道的原理，为从生物药剂学角度模拟口服给药及药物经胃肠道的原理，为经消化道给经消化道给药药的中药制剂设计的一种新的提取工艺。的中药制剂设计的一种新的提取工艺。第三节半仿生中药筛选系统传统细胞培养传统细胞培养细胞生物反应器细胞生物反应器方瓶和多孔板、方瓶和多孔板、人为干预人为干预与体内环境差与体内环境差异较大异较大接近细胞实际接近细胞实际生长环境生长环境先进设备、无先进设备、无人操作人操作优选提取条件优选提取条件 优选药材组合方式优选药材组合方式优选醇沉浓度优选醇沉浓度第二节半仿生技术的操作流程1231优选提取条件优选提取条件 以单体有效成分或指标成分，总浸出物及不同极性部分等以单体有效成分或指标成分，总浸出物及不同极性部分等作指标或主要药效、毒理作作指标或主要药效、毒理作指标指标，在药材密度、煎提温度、煎，在药材密度、煎提温度、煎提加水量、滤过、浓缩等条件相同的提加水量、滤过、浓缩等条件相同的前提前提下，用均匀设计法或下，用均匀设计法或正交设计、比例分割设计等方法，主要优选正交设计、比例分割设计等方法，主要优选SBE法提取各煎用法提取各煎用水的水的pH值值和和煎提时间煎提时间。将各组指标所得数据，经处理后，优。将各组指标所得数据，经处理后，优选得到选得到SBE法的工艺参数。法的工艺参数。优选药材组合方式优选药材组合方式2 为选择方剂有效成分提取时药材较佳组合方式，用一项下所选出的为选择方剂有效成分提取时药材较佳组合方式，用一项下所选出的SBE法条件提取，作指标成分的含量测定，同时将各组合提取液分别制成不同极法条件提取，作指标成分的含量测定，同时将各组合提取液分别制成不同极性部分的提取液，采用正相性部分的提取液，采用正相TLC及反相及反相HPLC分离分析，在获得所有分析数分离分析，在获得所有分析数据后，据后，比较比较不同组合提取液的成分异同；分离不同极性下增减的斑点，鉴定不同组合提取液的成分异同；分离不同极性下增减的斑点，鉴定其结构，进一步探讨该其结构，进一步探讨该成分与药效的关系成分与药效的关系，最后进行分析和处理，以综合反，最后进行分析和处理，以综合反映不同组合提取液中化学成分的变化及其相关性，评判确定该方剂提取时药映不同组合提取液中化学成分的变化及其相关性，评判确定该方剂提取时药材较佳组合方式。材较佳组合方式。优选醇沉浓度优选醇沉浓度3首先测定方剂首先测定方剂SBE提取液的提取液的pH值，确定醇沉浓度范围，值，确定醇沉浓度范围，然后采用比例分割法或正交实验法等方法，按一项下方法，测然后采用比例分割法或正交实验法等方法，按一项下方法，测得各指标成分的含量，经处理后，综合优选出该方剂得各指标成分的含量，经处理后，综合优选出该方剂SBE法提法提取液的醇沉较佳浓度。取液的醇沉较佳浓度。第四节在中药提取中的应用实例文献：文献：半仿生煎药法对清上蠲痛汤止痛作用的影响半仿生煎药法对清上蠲痛汤止痛作用的影响样品制备：样品制备：常规煎药法（常规煎药法（CD法）法）样品制备：按处方称取药材样品制备：按处方称取药材,加加10倍量水，煮沸二次，每次倍量水，煮沸二次，每次40 min，过滤，合并滤液，过滤，合并滤液CPH为为6.2，浓缩至含生药，浓缩至含生药100%和和150%，供实验用。，供实验用。半仿生煎药法（半仿生煎药法（SBD法）法）样品制备：按处方称取药材，样品制备：按处方称取药材，第一次加第一次加10倍量倍量pH为为12.2(用用NaOH调调PH)的水煮沸的水煮沸40min，过滤，第二次加，过滤，第二次加10倍量倍量pH为为2.0(用用Hcl调调PH)的水煮沸的水煮沸40min，过滤，合并滤液，浓缩至含生药，过滤，合并滤液，浓缩至含生药100%和和150%，供实验用。，供实验用。实验动物：实验动物：小鼠，小鼠，均有，体重均有，体重1822g1.热板法热板法:将合格小鼠将合格小鼠60只分为只分为6组，每组组，每组10只，与样品分组相对应为实只，与样品分组相对应为实验组验组，组，去痛片阳性对照组、生理盐水阴性对照组。组，去痛片阳性对照组、生理盐水阴性对照组。每只小鼠给药量为每只小鼠给药量为10ml/kg，给药前测定基础痛阈值，给药前测定基础痛阈值，1h后给后给药，给药药，给药30min后测其痛阈值（后测其痛阈值（60s无反应者取出以免烫伤无反应者取出以免烫伤,其其痛阈以痛阈以60s计算）。计算每组痛阈值（计算）。计算每组痛阈值（xs），用下列公式），用下列公式计算痛阈提高率，结果见表计算痛阈提高率，结果见表1。方法和结果方法和结果2.扭体法：扭体法：取筛选合格小鼠取筛选合格小鼠60只，只，各半，分组及给药量与热板法各半，分组及给药量与热板法相同。各鼠给药相同。各鼠给药30m in后，均腹腔注射后，均腹腔注射0.5%醋酸醋酸0.2m l只，只，观察观察10m in内出现扭体反应（腹部内凹、伸展后肢、臀部内出现扭体反应（腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高）的次数，以下列公式计算镇痛百分率，结果见表抬高）的次数，以下列公式计算镇痛百分率，结果见表1。实验结果证明实验结果证明,清上蠲痛汤具有较好的止痛作用清上蠲痛汤具有较好的止痛作用,用半用半仿生煎药法制备的汤剂比用常规煎药法制备的汤剂的仿生煎药法制备的汤剂比用常规煎药法制备的汤剂的止痛作用更好。止痛作用更好。第五节在中药研究中的现状、问题和展望现状现状缺点缺点展望展望现在还处在理论阶段，至于是否可行，现在还处在理论阶段，至于是否可行，还需要实践证明还需要实践证明利用各种条件来模仿人体环境提取的中药，这种方法需利用各种条件来模仿人体环境提取的中药，这种方法需要要长期的时间长期的时间来证明。来证明。少了传统煎剂中很少了传统煎剂中很多成分多成分之间发生的可能存在的各种化之间发生的可能存在的各种化学变化学变化不适合现代化大生产，其提取过程中不适合现代化大生产，其提取过程中pH变化范围非常大，变化范围非常大，一般的仪器很难承受，容易腐蚀，即使解决仪器问题一般的仪器很难承受，容易腐蚀，即使解决仪器问题成本成本问题也会大幅度增高。问题也会大幅度增高。出膏率问题：由于其提取条件较为剧烈，其提取的杂质出膏率问题：由于其提取条件较为剧烈，其提取的杂质也很多。所以也很多。所以出膏率出膏率不好控制。不好控制。SBE法有可能法有可能替代替代WE（水提取）法（水提取）法酶催化酶催化既符合中医药理论，又能体现既符合中医药理论，又能体现现代科学技术水平现代科学技术水平提取方提取方法的先河法的先河谢谢