Waters色谱教程04.pdf

Empower System Suitability快速参考指南快速参考指南34 Maple StreetMilford,MA 01757715050316MD，版本 A声明本文档中的信息如有更改，恕不另行通知，不应认为是 Waters Corporation 的义务。Waters Corporation 对本文档中可能出现的任何错误不负任何责任。本文档在出版时被认为是完整并且准确的。任何情况下，对与使用本文档有关或因使用本文档而导致的偶发或继发的损害，Waters Corporation 不负任何责任。2002 WATERS CORPORATION.在美国印刷。保留所有权利。未经出版商的书面允许，不得以任何形式转载本文档或其中的任何部分。Millennium 和 Waters 是 Waters Corporation 的注册商标，Empower 是 Waters Corporation 的商标。所有其它商标或注册商标均为其各自所有者的专有资产。目录iii前言前言.v第第 1 章章 Empower System Suitability 软件概述软件概述.11.1 System Suitability 与 Empower 软件.11.2 什么是系统适应性测试？.21.3 使用 System Suitability.51.4 故障排除.6第第 2 章章 安装安装 System Suitability.72.1 安装 System Suitability 软件.82.2 还原 System Suitability 样品项目.11第第 3 章章 System Suitability 公式公式.133.1 System Suitability 结果.133.2 在计算峰高百分比处的宽度.153.3 计算切线处峰宽.173.4 样品板数量公式.193.5 拖尾或对称因子公式.233.6 分辨率公式.273.7 容量因子(k)公式.303.8 选择性()公式.313.9 基线噪音和漂移的测量.323.10 统计量公式.33索引索引.35目录目录iv目录v前言Empower 软件 System Suitability 快速参考指南 概述 Empower System Suitability 软件、故障排除信息、安装过程以及该软件用来确定系统适应性的公式。您应了解色谱原理，并熟悉使用 Empower 软件采集、处理和报告数据的方法。结构结构本指南包含以下内容：第 1 章 介绍 System Suitability 软件及其在 HPLC 系统中的地位。第 2 章 介绍如何安装 System Suitability 软件，以及如何装入包含在 System Suitability 磁盘中的项目内容。第 3 章 介绍 Empower 软件用来确定系统适应性的公式。相关文档相关文档Waters 许可、担保和支持：许可、担保和支持：提供软件许可和担保信息、介绍培训和扩展支持、解释 Waters 公司如何处理运输、损坏、索赔和退货事宜。在线文档在线文档Empower 帮助：帮助：介绍基本软件以及软件选项的所有 Empower 窗口、菜单、菜单选项和对话框。还包括使用 Empower 软件所需执行的所有任务的参考信息和过程。它们是 Empower 软件的组成部分。Empower 自述文件：自述文件：介绍产品功能与改进、帮助性提示、安装和/或配置注意事项以及自前一版本后的更改。Empower LIMS 帮助：帮助：介绍如何使用“Empower LIMS 界面”导出结果和导入工作列表。viEmpower Toolkit 专业版帮助：专业版帮助：介绍如何使用公共对象模型、基于信息的协议，以便使用 Empower 软件与来自第三方的应用程序进行通信。基本产品的印刷文档基本产品的印刷文档Empower 软件入门指南：软件入门指南：介绍 Empower 软件的入门知识。介绍使用 Empower软件采集数据、开发处理方法、查看结果和打印报告的基本方法。还介绍有关管理项目和配置系统的基本信息。Empower 软件数据采集和处理原理指南：软件数据采集和处理原理指南：介绍与数据采集、峰检测和积分以及样品组份定量有关的理论。Empower 系统安装和配置指南：系统安装和配置指南：介绍 Empower 软件的安装，包括 Personal 独立工作站、Workgroup 配置和 Enterprise 客户机/服务器系统的安装。讨论如何将计算机和色谱仪器配置为“Empower 系统”的组成部分。此外，还介绍采集服务器的安装、配置及使用，如：LAC/E32 模块、busLAC/E 卡以及用于与串行仪器通信的接口卡。Empower 系统升级和配置指南：系统升级和配置指南：介绍如何添加硬件以及使用导入-导出升级方法对 Empower 软件进行升级。Empower 软件系统管理员指南：软件系统管理员指南：介绍如何对 Empower Enterprise 客户机/服务器系统和 Workgroup 配置进行管理。Empower 软件版本注释：软件版本注释：包含产品的最新信息。此外，还提供具体 Empower 软件版本的相关补充信息。软件选项的印刷文档软件选项的印刷文档Empower System Suitability 快速参考指南：快速参考指南：介绍 Empower System Suitability 选项的基本功能及其使用的公式。Empower PDA 软件入门指南：软件入门指南：介绍使用 Empower PDA 选项开发 PDA 处理方法和查看 PDA 结果的基本方法。viiEmpower GC 软件入门指南：软件入门指南：介绍如何使用 Empower GC 选项开发 GC 处理方法和查看 GC 结果。Empower GPC 软件入门指南：软件入门指南：介绍如何使用 Empower GPC 选项开发 GPC 处理方法和查看 GPC 结果。Empower GPCV 软件入门指南：软件入门指南：介绍如何使用 Empower GPCV 选项开发 GPCV 处理方法和查看 GPCV 结果。Empower Light Scattering 软件入门指南：软件入门指南：介绍如何使用 Empower Light Scattering 选项开发光散射处理方法和查看光散射结果。Empower ZQ 质谱检测器软件入门指南：质谱检测器软件入门指南：介绍 ZQ 质谱检测器的安装、配置、校正和调整方法以及如何使用 Empower 软件对其进行操作。Empower Chromatographic Pattern Matching 软件入门指南：软件入门指南：介绍如何使用 Chromatographic Pattern Matching 选项开发色谱匹配处理方法并查看色谱匹配结果。Empower Dissolution System 软件速成指南：软件速成指南：介绍如何使用 Empower 软件运行 Alliance Dissolution System。Empower Toolkit 程序员参考指南：程序员参考指南：介绍如何使用公共对象模型、基于信息的协议，以便使用 Empower 软件与来自第三方的应用程序进行通信。Waters Integrity System 入门指南：入门指南：介绍 Waters Integrity System 的功能，并提供步进式的指南，指导用户学会 Empower Mass Spectrometry(MS)选项。Empower AutoArchive 软件安装和配置指南：软件安装和配置指南：介绍如何安装和配置 Empower AutoArchive 选项。Web 文档文档可在“环球网”上找到相关产品信息及文档。网址为 http:/。viii文档约定文档约定本指南中使用以下约定：注注“注”介绍对操作员有帮助的信息。例如：注：注：在进行下一步之前，先记录您的结果。注意注意“注意”提供有关防止对系统或设备造成损害的信息。例如：约定使用情况约定使用情况粗体粗体粗体代表用户操作，如：要按的键、菜单选项以及命令。例如，“单击下一步下一步转到下一页。”斜体斜体表示需要您提供的信息，如变量。它也表示强调和文档标题。例如，“以实际文件名替换 file_name。”CourierCourier 表示源代码和系统输出示例。例如，“SVRMGR 提示出现。”Courier 粗体粗体在源代码示例中，Courier 粗体表示输入的字符或所按的键。例如，“在 LSNRCTL提示符处，输入 set password oracle以访问 Oracle。”键键 指小键盘或键盘上的计算机键。屏幕键 指置于屏幕正下方仪器上的键。例如，“2414 检测器上的 A/B 屏幕键显示选定的通道。”三个句点指示可以任意跟随多个同类项目。例如，“可以在每个文件夹中存放文件名 1、文件名 2.。”菜单选项之间的右箭头表示应该顺次选择每个选项。例如，“选择文件文件 退出退出”是指应先在菜单条中选择文件文件，然后从“文件”菜单中选择退出退出。?注意：注意：为了避免损坏检测器的流动池，不要触摸流动池窗口。ix小心小心“小心”提供保证操作员安全所需的重要信息。例如：小心：小心：为避免被灼伤，在拆下灯泡进行更换或调整前，请至少提前 30 分钟关闭灯泡。小心：小心：为避免电击事故和人身伤害，请务必在执行维护工作前关闭检测器并拔下电源线。小心：小心：为避免化学或电气危险，在操作系统时，请务必遵守实验室的安全规定。xSystem Suitability 与 Empower 软件1第 1 章Empower System Suitability 软件概述本章简要介绍 Empower System Suitability 软件。System Suitability 软件用于质量控制、方法确认及跟踪和绘制趋势，尤其适用于那些遵循 GMP/GLP 或其它规章协议的实验室。1.1 System Suitability 与 Empower 软件System Suitability 完全集成在 Empower 软件中，并提供了各种测试功能，以确保色谱系统在可接受的限制范围内工作。依据美国药典(USP)指南所述，适应性测试这一概念认定电子学、设备、样本及分析操作构成单一的分析系统，该系统需要系统功能的综合测试。Empower System Suitability 软件选项为 LC、GC、IC、CIA、CE、GPC、PDA 及 MS色谱应用程序提供系统测试和方法验证。System Suitability 对结果进行统计运算，以图形和表格形式汇总信息。2Empower System Suitability 软件概述使用 System Suitability 可以生成报告，该报告可显示色谱系统数据的统计准确度和再现性。报告中还可以包括控制图，用以监视色谱中各组份的由用户指定的错误和警告参数限制。Empower 软件以标准实验室计算为基础进行系统适应性测试，这些实验室计算包括美国药典1、欧洲药典2及日本药典3指南和计算结果。1.2 什么是系统适应性测试？“系统适应性”测试提供了一种检查整个色谱系统是否在容限内工作的方法。Empower System Suitability 软件自动监视色谱系统，并根据在 Empower 软件内设置的参数和限制提供系统性能的图形化摘要。如果所有参数均在指定的相对标准差(RSD)标准内，则系统适合运行未知样。Empower 软件可生成报告，用于显示色谱系统数据的统计准确度和再现性。System Suitability 可测试以下项目：方法验证系统性能再现性跟踪和绘制趋势处理和报告可以为系统适应性测试所涉及的每一组份定义“系统适应性”限制，作为各自的容限值。所设“系统适应性”限制用于确定在摘要图中显示为最小和最大值、在摘要表和打印报告中显示为超出范围值的出错限制。您可以确定组份，并为“组份”表和“适应性限制”表中的相应字段设置限制（使用“查看”的“处理方法”窗口中的“组份”选项卡和“限制”选项卡）。1.美国药典，第 25 版，Rockville：United States Pharmacopeial Convention Inc.,2002。2.欧洲药典，第 3 版，European Pharmacopeia Convention Inc.，1997。3.日本药典，第 13 版，Japanese Pharmacopeia Convention Inc.，1996。什么是系统适应性测试？3方法验证方法验证方法验证是确定方法的精度、准确度、检测限制、定量限制、选择性、范围、线性度及稳定性的过程。通常，应为每种方法执行一次方法验证。使用 Empower SystemSuitability 软件可以计算以下项目：精度%RSD准确度%背离检测限制定量限制 由噪音和漂移测量得出选择性 由软件直接计算再现性 一系列运行中组份的%RSD范围或线性度 来自校正曲线稳定性 方法条件变化时的%RSD系统性能系统性能System Suitability 软件可用来监视 HPLC 系统中的仪器操作和校正。可使用 SystemSuitability 来确定仪器各项功能是否正常（例如，流量、UV 波长、进样准确度、A/D 准确度或软件积分例程）以及应在何时替换某一 HPLC 组份（例如，色谱柱、流动相、检测器灯）。System Suitability 软件通过使用以下参数分析系统分离组份的能力来测定性能：样品板计数(N)拖尾因子或对称因子分辨率(Rs)相对分辨率选择性()容量因子(k)4Empower System Suitability 软件概述再现性再现性Empower 软件可使用 System Suitability 用以下峰参数（一部分）分析各进样之间彼此分离的一致性来测定系统的再现性：面积高度含量保留时间跟踪和绘制趋势跟踪和绘制趋势Empower 软件使用 System Suitability 可在色谱系统运行过程中跟踪和绘制趋势。例如，要检测色谱柱老化情况，可跟踪和绘制样品板计数值的趋势，这些值来自在整个时间段内采集的样品组结果。处理和报告处理和报告作为 Empower 软件的完全集成部分，System Suitability 可处理和报告包含在以下项目中的参数：处理方法处理方法 System Suitability 的参数和限制是处理方法的一部分。这些参数在开发方法期间使用 Empower“查看”窗口设置。有关详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“使用 System Suitability”主题。报告方法报告方法 System Suitability 的报告组和字段是报告方法的一部分。可在“报告出版”窗口中创建 System Suitability 报告方法，或使用包括在 System Suitability 缺省项目中的某一报告方法。有关详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“解释报告中的系统适应性数据图”。创建 System Suitability 处理和报告方法后，可执行以下操作：在数据采集期间，针对某样品组运行并报告“系统适应性”分析。采集数据后，对多个样品组的处理和报告进行合并。使用 System Suitability51.3 使用 System Suitability使用 Empower System Suitability 软件，可通过测试以下项目，来确定系统是否适合报告未知样的结果：分离标准再现性标准首先，应设置系统适应性处理参数（定义要使用的计算和允许的峰值范围）并报告参数（定义用于监视结果的报告），然后将相关方法保存到方法组中。有关详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“定义系统适应性处理方法参数”主题。设置了处理参数、限制以及报告系统适应性数据的标准后，即可开始使用 SystemSuitability 软件来测试系统。验证系统适应性验证系统适应性要验证系统是否适合采集和处理样品，请执行 Empower 帮助“查找”选项卡的以下主题中所述的操作：“采集样品组”“查看结果”“从项目窗口打印报告”如果结果不符合规范，请在 Empower 帮助“索引”选项卡中输入 System Suitability，故障排除，故障排除，以访问“使用 System Suitability 对色谱系统进行故障排除”主题。验证方法验证方法要验证方法，首先在“项目”窗口创建仪器方法。有关详细信息，请参阅 Empower帮助“查找”选项卡中的“创建新的仪器方法”主题。然后，按照 Empower 帮助中的指导来验证方法。有关详细信息，请参阅 Empower帮助“查找”选项卡中的“执行方法验证”主题。System Suitability 软件可帮助您验证色谱方法。在方法验证中需测定八个因子：精度准确度6Empower System Suitability 软件概述检测限制定量限制选择性再现性范围或线性度稳定性1.4 故障排除System Suitability 允许通过查看以下峰数据对色谱系统执行故障排除过程：保留时间分辨率(Rs)容量因子(k)选择性()色谱柱效率（样品板计数，N）拖尾因子或对称因子基线噪音及漂移要迅速确定系统的运行是否正常，请为样品组创建报告，其中包括选定字段的全局百分比 RSD。如果样品组中复制的系统适应性进样的变化高于给定值（如 2%），您可以检查来自每个进样的数据，直至找到问题所在。有关详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的以下主题：“设置 System Suitability 限制”“定义 System Suitability 报告组属性”“创建报告方法”或者，可在 Empower 帮助“索引”选项卡中输入 System Suitability，故障排除，故障排除，以访问“使用 System Suitability 对色谱系统进行故障排除”主题。7第 2 章安装 System Suitability本章介绍 Empower System Suitability 软件的安装指导。应从密钥盘（3.5 英寸软盘）将 System Suitability 软件安装到 Empower 软件所在的工作站或服务器。一张只读光盘（Empower System Suitability 选项）中包含 System Suitability 的样品项目文件，安装完 System Suitability 软件后，需还原这些文件。第 2.2 节，还原 System Suitability样品项目，总结了 System Suitability 样品项目的内容。要使用 Empower System Suitability 应用程序，必须安装 Empower System Suitability 软件。可在 Personal 独立工作站、Enterprise 客户机/服务器系统或 Workgroup 系统中安装System Suitability。依据许可协议，在 Personal 独立配置中，System Suitability 只能安装在一个工作站中。如将 System Suitability 从某一独立工作站移除，才可将其安装到另一个工作站上。在 Enterprise 客户机/服务器或 Workgroup 环境中，System Suitability 选项被锁定在安装软件的数据库节点而不是客户机上。不能将用于 Enterprise 客户机/服务器或 Workgroup 节点的 System Suitability 安装在Personal 独立工作站上，也不能将用于 Personal 独立工作站的 System Suitability 安装在 Enterprise 客户机/服务器或 Workgroup 节点上。按本节所述过程安装 System Suitability 后，System Suitability 软件即对所有项目启用。可对特定项目禁用 System Suitability。有关对特定项目禁用某选项的详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“使用配置管理器”和“项目属性”主题。8安装 System Suitability2.1 安装 System Suitability 软件要在系统中安装 Empower System Suitability 软件：1.如果尚未安装 Empower 软件和数据库，请先安装该软件（请参阅 Empower 系统安装和配置指南）。注：注：要在工作站或网络服务器上安装 System Suitability 软件，Empower 软件必须安装在同一工作站或数据库节点。为确保安装成功，Waters 强烈建议安装在过程中不要运行 Empower 软件。2.将 Empower System Suitability 密钥盘（3.5 英寸软盘）插入软盘驱动器。3.单击开始开始，然后单击运行运行。出现“运行”对话框（图 2-1）。图 2-1 运行对话框4.键入 A:Setup.exe（或键入 System Suitability 密钥盘所插入的磁盘驱动器的相应盘符，后跟:Setup.exe）。5.单击确定确定。出现“Empower 选项安装”对话框（图 2-2）。注：注：由于要将密钥盘读入工作站硬盘或服务器节点，因此可能要在几分钟后“Empower选项安装”对话框才会显示在屏幕上。安装 System Suitability 软件9图 2-2 Empower 选项安装对话框如图 2-2 所示，将出现插入驱动器的磁盘中的 Empower 选项名称。继续操作前，请确定显示的名称为 System Suitability。6.单击确定确定，安装 System Suitability 软件（或单击取消取消，取消操作）。系统将显示以下信息之一：如果工作站或网络服务器中以前未安装 System Suitability 选项，则会出现以下信息框（图 2-3）。单击确定确定关闭此信息框。图 2-3 选项已成功添加信息框10安装 System Suitability如果工作站或网络中已安装了 System Suitability 选项，则会出现以下询问框（图 2-4）。单击确定确定以移除该选项，或单击取消取消以关闭询问框而不移除该选项。图 2-4 选项已安装询问框如果已使用此 System Suitability 密钥盘在另一独立工作站上安装 SystemSuitability，则出现以下信息框（图 2-5）。单击确定确定，关闭信息框。必须先从一个工作站中将 System Suitability 卸载，才能在另一个工作站上使用（请参阅下文，“卸载 System Suitability 选项”）。图 2-5 选项已安装在另一工作站中信息框卸载卸载 System Suitability 选项选项要在另一个独立工作站安装 System Suitability 选项，必须先将其从当前位置卸载。要卸载 System Suitability：1.将 Empower System Suitability 密钥盘插入磁盘驱动器。2.单击开始开始，然后单击运行运行。出现“运行”对话框（图 2-1）。还原 System Suitability 样品项目113.键入 A:Setup.exe（或键入 System Suitability 盘所插入的磁盘驱动器的相应盘符，后跟:Setup.exe）。4.单击确定确定。出现“Empower 选项安装”对话框（图 2-2）。5.单击确定确定。出现“选项已安装”信息框（请参阅图 2-4）。6.单击确定确定。出现以下信息框（图 2-6）。图 2-6 选项已成功移除信息框7.单击确定确定关闭信息框。从某工作站卸载 System Suitability 后，即可取出 System Suitability 密钥盘，然后在另一工作站上安装软件。2.2 还原 System Suitability 样品项目从密钥盘安装了 System Suitability 软件后，可从 System Suitability 只读光盘还原System Suitability 样品项目。System Suitability 样品项目可用作测试色谱系统的模板。项目名称为 SysSuit_Default。有关登录 Empower 软件的详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“手动登录”或“自动登录”主题。有关还原项目的详细信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“使用向导还原项目”主题。12安装 System SuitabilitySystem Suitability 样品项目的内容样品项目的内容System Suitability 样品项目包括：四个样品组，每个样品组包含六个原始数据文件四个结果组，每个结果组包含六个结果文件一个启用了 System Suitability 且带有典型参数设置的处理方法报告方法System Suitability 结果13第 3 章System Suitability 公式本章介绍 Empower System Suitability 软件用于以下测试参数的公式：样品板计数(N)拖尾或对称分辨率(Rs)容量因子(k)选择性()基线噪音及漂移统计量3.1 System Suitability 结果表 3-1 使用欧洲药典、日本药典及美国药典的术语，总结出所有的 Empower SystemSuitability 结果。在“处理方法”窗口的“适应性”选项卡中，选择 EP、JP、USP或全部全部，以获得表 3-1 中所列的结果。请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“定义 System Suitability 处理方法参数”主题。表 3-1 基于药典的 System Suitability 结果选项欧洲药典选项欧洲药典(EP)日本药典日本药典(JP)美国药典美国药典(USP)全部结果全部结果K PrimeK PrimeK PrimeK Prime选择性选择性选择性选择性分辨率分辨率分辨率USP 分辨率USP 分辨率14System Suitability 公式USP 分辨率(HH)USP 分辨率(HH)不对称 4.4不对称 (4.4)2 不对称 10不对称 (10)2不对称USP 拖尾USP 拖尾对称因子对称因子对称因子USP 样品板数USP 样品板数EP 样品板数量EP 样品板数量JP 样品板数量JP 样品板数量2-Sigma3-Sigma4-Sigma5-Sigma相对分辨率1相对分辨率相对分辨率2相对分辨率3峰宽 基线峰宽 切线峰宽 切线峰宽 4.4%峰宽 5%峰宽 5%峰宽 5%峰宽 5%峰宽 10%峰宽 13.4%峰宽 32.4%表 3-1 基于药典的 System Suitability 结果（续）选项欧洲药典选项欧洲药典(EP)日本药典日本药典(JP)美国药典美国药典(USP)全部结果全部结果在计算峰高百分比处的宽度153.2 在计算峰高百分比处的宽度Empower System Suitability 软件使用图 3-1 中的公式计算峰高某百分比处的峰宽，本节所提及的几个 System Suitability 公式都用到了这一参数。如果不能计算出峰高某百分比处的峰宽，System Suitability 就不会执行任何需要峰宽的计算。峰宽 50%峰宽 50%峰宽 50%峰宽 50%峰宽 60.7%f 5%f 5%f 5%f 5%1.“EP 相对分辨率”和“JP 相对分辨率”用“分辨率”公式计算。2.“USP 相对分辨率”用“USP 分辨率(HH)”公式计算。3.EP、JP 及 USP（全部）相对分辨率用“USP 分辨率”公式计算。表 3-1 基于药典的 System Suitability 结果（续）选项欧洲药典选项欧洲药典(EP)日本药典日本药典(JP)美国药典美国药典(USP)全部结果全部结果16System Suitability 公式图 3-1 峰高某百分比处的峰宽计算峰高某百分比处的峰宽计算适用于基线分离峰(BB)，而不适用于切削峰（例如 GB或 BG）。根据其开始点和结束点的高度，该公式有时也适用于非基线分离峰（BS、SB、BR 和 RB）。注：注：“峰”表（在“查看-主窗口”和“结果”窗口中）会显示 2 个字符的标签，说明对峰的积分方法。有关列表的信息，请参阅 Empower 帮助“查找”选项卡中的“峰表中的积分类型标签”主题。开始结束(xrtyrt)(x1y1)(x2y2)(xs ys)(xe ye)某百分比处的峰宽某百分比处的峰宽x2x1()y2%100-yrtye()ye+=y1%100-yrtys()ys+=其中：x1=色谱上的内插点 在 xs 与 xrt 之间，其中 y=y1x2=色谱上在 xrt 与 xe 之间的内插点，其中 y=y2计算切线处峰宽17峰可标识为以下几类：BB=基线到基线BV=基线到峰谷VB=峰谷到基线VV=峰谷到峰谷EE=指数到指数TT=切线到切线如果手动绘制或调整基线，或移动垂线，则手动积分会在“积分类型”字段中用小写字母（如果手动绘制或调整基线，或移动垂线，则手动积分会在“积分类型”字段中用小写字母（b、v、t 和和 e）标记。例如：）标记。例如：bV=手动基线到峰谷vV=手动峰谷到峰谷bb=手动基线到手动基线如果如果 BV（或（或 bv）：）：如果峰结束时的 y 值大于峰开始处百分比高度的 y 值，则不计算峰宽。如果如果 VB（或（或 vb）：）：如果峰开始时的 y 值大于峰结束处百分比高度的 y 值，则不计算峰宽。如果如果 VV（或（或 vv）：）：如果峰开始或结束处的 y 值大于峰保留时间处的百分比高度，即 pct/100*（顶部 y 底部 y），其中顶部 y=保留时间处的 y 值，底部 y=保留时间处基线的 y 值，则不计算峰宽。3.3 计算切线处峰宽Empower System Suitability 软件可计算切线处峰宽，以在使用切线方法计算样品板数量时确定宽度(W)（图 3-2）。只有能计算切线百分比+5 和 5 处的峰宽时，才能计算切线处峰宽。要完成切线处峰宽的计算，System Suitability 软件需要确定切线与基线的交点。18System Suitability 公式图 3-2 切线处峰宽的计算BhiBloFhiFlo%(%+5)(%5)(%5)(%+5)xFxB基线与在点 Bhi 和 Blo 之间绘制的直线的交点的 x 值基线与在点 Fhi 和 Flo 之间绘制的直线的交点的 x 值 位于峰后沿(%+5)峰高处的插值点 位于峰后沿(%5)峰高处的插值点 位于峰前沿(%+5)峰高处的插值点 位于峰前沿(%5)峰高处的插值点 计算切线处的百分比其中：xB=xF=Bhi=Blo=Fhi=Flo=%=W=xB xF （例如，50 或 61%）样品板数量公式193.4 样品板数量公式样品板数量计算可以确定色谱柱效率。本节提供了说明用于以下样品板计数方法公式的图表：EP 样品板数量（图 3-3）1JP 样品板数量（图 3-4）USP 样品板数量（图 3-5）5-sigma（图 3-6）4-sigma（图 3-7）3-sigma（图 3-8）2-sigma（图 3-9）基于不对称（图 3-10）1 高度为以前版本的一半图 3-3 EP（欧洲）样品板数量公式N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=50%峰高处的峰宽RETENTION TIMEWIDTH 50%峰宽 50%11.57保留时间峰宽 50%N5.54RtW-2=20System Suitability 公式图 3-4 JP（日本）样品板数量公式图 3-5 USP 样品板数量公式N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=50%峰高处的峰宽N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=由绘制在峰高某百分比处的切线所确定的基线处峰宽%=如果将“药典”选项选择为 USP，则为61%；或者，如果将“药典”选项选择为“全部”，则使用用户输入的“切线百分比”RETENTION TIMEWIDTH 50%峰宽 50%11.57保留时间峰宽 50%N5.55RtW-2=TANGENT WIDTHRETENTION TIME峰宽 切线 20.24保留时间切线峰宽N16RtW-2=样品板数量公式21图 3-6 5-Sigma 公式图 3-7 4-Sigma 公式N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=4.4%峰高处的峰宽N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=13.4%峰高处的峰宽RETENTION TIMEWIDTH 4.4%峰宽 4.4%24.37保留时间峰宽 4.4%N25RtW-2=RETENTION TIMEWIDTH 13.4%峰宽 13.4%19.66保留时间峰宽 13.4%N16RtW-2=22System Suitability 公式图 3-8 3-Sigma 公式图 3-9 2-Sigma（拐点）公式N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=32.4%峰高处的峰宽N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=60.7%峰高处的峰宽RETENTION TIMEWIDTH 32.4%峰宽 32.4%14.83保留时间峰宽 32.4%N9RtW-2=WIDTH 60.7%RETENTION TIME峰宽 60.7%峰宽 60.7%8.89保留时间保留时间峰宽 60.7%N4RtW-2=拖尾或对称因子公式23图 3-10 基于不对称的方法公式13.5 拖尾或对称因子公式本节分提供了说明用于计算峰不对称性公式的图表。这些图表以图解形式说明以下拖尾公式：USP 拖尾因子（图 3-11）不对称2(10%)拖尾（图 3-12）不对称(10%)拖尾（图 3-13）不对称 2(4.4%)拖尾（图 3-14）不对称(4.4%)拖尾（图 3-15）注：注：在“欧洲药典”和“日本药典”中，将 USP 拖尾因子称为对称因子。N=样品板数量（色谱柱内的理论样品板数量）Rt=保留时间W=10%峰高处的峰宽A=从 Rt 到 10%峰高处峰宽结束点的时间B=从 10%峰高处峰宽开始点到 Rt 的时间1.Foley and Dorsey，Anal.Chem.，第 55 卷(1983)，第 730 页。BARETENTION TIMEWIDTH 10%峰宽 10%20.98BA保留时间峰宽10%N41.7RtW-2AB-1.25+-=24System Suitability 公式图 3-11 USP 拖尾因子（EP 及 JP 对称因子）公式T=拖尾因子W=5%峰高处的峰宽Rt=保留时间F=从 5%峰高处峰宽开始点到 Rt 的时间拖尾因子可确定峰的最大容许不对称性。出于药用目的，拖尾因子(T)定义为峰宽的前沿与后沿之间 5%峰高处的距离，除以峰顶点与峰前沿 5%峰高处之间距离(F)的二倍。对于对称峰，拖尾因子 T 为 1.0，随着拖尾渐趋明显，T 值不断增大。注：注：F 值在 f 5%字段中报告。FRETENTION TIMEWIDTH 5%峰宽 5%23.90保留时间F峰宽 5%TW2F-=拖尾或对称因子公式25图 3-12 不对称2(10%)拖尾公式图 3-13 不对称(10%)拖尾公式As10=不对称(10%)Rt=保留时间A=从 Rt 到 10%峰高处峰宽结束点的时间B=从 10%峰高处峰宽开始点到 Rt 的时间As10=不对称(10%)Rt=保留时间A=从 Rt 到 10%峰高处峰宽结束点的时间B=从 10%峰高处峰宽开始点到 Rt 的时间BARETENTION TIMEWIDTH 10%BA峰宽 10%20.90保留时间峰宽 10%As10()2AB-2=BARETENTION TIMEWIDTH 10%BA峰