脑脊液常规操作规程.ppt

脑脊液常规脑脊液常规(chnggu)操作操作规程规程河大一附院检验科河大一附院检验科第一页，共十四页。常规检测(jin c)内容n包括：一般性状的检查(jinch)、潘迪氏试验、白细胞计数与分类、革兰氏染色、抗酸染色、墨汁负染色。第二页，共十四页。一般性状(xngzhung)检查n主要观察颜色（无色、白色(bis)、红色、黄色、绿色、黑色等），透明度（透明、微浑、浑浊、脓样等），凝块（无、有或薄膜形成、胶冻状）。第三页，共十四页。n1 1、红色：、红色：如标本为均匀红色血性脑脊液，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应：(1)将血性脑脊液试管离心5 min(1500rmin)，如上层液体呈淡红色或黄色，隐血(ynxu)试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，呈黄色说明出血的时间已超过4 h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤所致的新鲜出血。(2)红细胞在渗透压较血浆高的脑脊液中5 min后，即可出现皱缩现象，因此红细胞皱缩现象不能用以鉴别陈旧性或新鲜出血。常见(chn jin)颜色变化及临床意义 第四页，共十四页。n2、黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。n3、脓样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎，应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌。n4、绿色：可见于绿脓杆菌(l nn n jn)、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。n5、褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。第五页，共十四页。蛋白定性蛋白定性(dng xng)试验试验(潘迪氏法潘迪氏法)n实验原理：实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。n所需试剂：所需试剂：5%的苯酚溶液(rngy)：取纯苯酚25 ml，加蒸馏水至500 ml，用力振摇，置37温箱内12天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。第六页，共十四页。n试验方法试验方法：取潘（迪）氏试剂23ml于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液12滴，衬以黑背景，立即观察(gunch)结果。n结果判断结果判断：阴性：清晰透明，不显雾状；极弱阳性（）：微呈白雾状，在黑色背景下才能 看到；弱阳性（+）：灰白色云雾状；阳性（2+）：白色浑浊；强阳性（3+）：白色浓絮状沉淀；最强阳性（4+）：白色凝块。第七页，共十四页。白细胞总数(zngsh)n非血性标本：于小试管内滴入1%冰醋酸1-2滴，转动试管，使壁内沾有冰醋酸后倾去，滴入标本3-4滴，数分钟后充入计数池计数，计数10个大方格内的白细胞数。白细胞数/L=10个大方格内的白细胞数106。如白细胞(xbo)较多，可计数一大格内的细胞(xbo)10 106。n血性标本用1%的冰醋酸稀释后计数，并用以下公式校正：每升中白细胞数=每升中白细胞末校正数-每升中红细胞数每升血液中白细胞数/每升血液中红细胞数。（EDTA-K2抗凝？）（上机？）第八页，共十四页。n成人(chng rn)脑脊液内无红细胞，白细胞极少，其参考范围：成人(chng rn)：(0-8)106/L；儿童为（0-15）106/L，新生儿为（0-30）106/L。n如白细胞达（10-50）106/L为轻度增加，（50-100）106/L为中度增加，200106/L以上显著增加。如超过300106/L时外观可变为浑浊。第九页，共十四页。白细胞分类白细胞分类(fn li)n1、直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。n2、染色(rns)分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。第十页，共十四页。n正常脑脊液中白细胞(xbo)主要为单个核细胞(xbo)，多为淋巴细胞(xbo)及大单核细胞(xbo)，两者之比约为7：3，偶见内皮细胞(xbo)：软脑膜和蛛网膜细胞(xbo)、室管膜细胞(xbo)、脉络膜细胞(xbo)等。n 正常脑脊液正常脑脊液 单个核细胞：约单个核细胞：约95%95%，多型核细胞：约多型核细胞：约5%5%。第十一页，共十四页。红细胞总数红细胞总数(zngsh)n1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红细胞数，其总和即为每l的细胞数。n2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取(xq)混匀的脑脊液20l，加入含红细胞稀释液0.38m1的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每l脑脊液的细胞总数。第十二页，共十四页。第十三页，共十四页。内容(nirng)总结脑脊液常规操作规程(cozuguchng)。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤所致的新鲜出血。3、脓样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎，应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌。实验原理：脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。红细胞总数第十四页，共十四页。