前列消片药学研究资料综述.doc

前列消片药学研究资料综述
中药注册分类8 申报资料7
药学研究资料综述
（前列消片）
课题名称 前列消片
研究单位 xxxx制药有限公司
申报单位 xxxx制药有限公司
联 系 人 xxxx
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药学研究资料综述
一、工艺研究的试验资料及文献资料
(一) 药材的分拣去杂质及质量验收
处方各中药材，经分拣去杂质，按中国药典20xx年版一部检验；其余辅料按中国药典20xx年版二部检验；符合规定者备用。
(二) 配料与掺混
符合规定的药材根据生产批量大小，按处方称量配伍，将提取与粉碎药材分别掺混，分开放置。
(三) 粉碎
根据生产工艺需要，将需粉碎药材用中药粉碎机粉碎，过80目筛，备用。经对三批中试产品粉碎工艺考查，结果表明常规粉碎方法即可符合本品生产需要。
(四) 提取工艺选择试验
提取药材为金樱子、白术、大黄、虎杖、土茯苓、苦参、泽泻、川木通 、薏苡仁。根据各药味所含成分的理化性质，适宜采用水提取，故采取正交试验优化水提取工艺条件。
取提取药材适当破碎，按原处方量配伍，制备工艺正交试验用样品。每正交试验样品药材重1430g，其中金樱子150g、白术30g、大黄150g、虎杖150g、土茯苓300g、苦参150g、泽泻200g、川木通150g、薏苡仁150g。
表1、因素水平表 L9（34）正交表头
水平
因 素
A提取时间（小时） B加水量（倍） C煎煮次数（次）
1
2
3
1 6 1
2 8 2
3 10 3
表2、正交试验设计表
试验号
因 素
A（小时） B（倍） C（次）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1 6 1
1 8 2
1 10 3
2 6 2
2 8 3
2 10 1
3 6 3
3 8 1
3 10 2
取每正交试验样品1430g，依上表设计加水量，煎煮时间，次数，分别煎煮，放冷，合并煎液，滤过，浓缩，减压干燥至恒重；并以干膏中大黄素的总量作为评价指标。
表3、正交试验结果分析
试验号
因 素
评价指标
A(小时) B(倍) C(次)
干膏量(g)
大黄素含量（mg/g）
大黄素总量（mg）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1 6 1
1 8 2
1 10 3
2 6 2
2 8 3
2 10 1
3 6 3
3 8 1
3 10 2
131.40
162.28
186.48
166.08
210.40
160.52
201.64
155.60
213.06
0.95
0.90
0.93
0.87
0.93
0.95
0.89
0.93
0.84
127.46
146.05
173.43
144.84
195.67
152.49
179.46
144.71
178.97
K1
K2
K3
446.94 451.76 424.66
493.00 486.43 469.86
503.14 504.89 548.56

R
56.20 53.13 123.90
由极差分析结果可得出，其中因素C (次数)为显著因素，其次为A（回流时间），而B（加水量）影响最小，即C> A > B。最优条件为A3B3C3；考虑到时间因素及实际生产因素，确定提取工艺为10倍加水量，提取3次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时。
正交结果确证实验
取两份样品分别按处方量配伍，制得确证样品药材每正交试验样品重1430g，其中金樱子150g、白术30g、大黄150g、虎杖150g、土茯苓300g、苦参150g、泽泻200g、川木通150g、薏苡仁150g。
两份确证样品分别置20xx0ml烧瓶中，加水14300ml，第一次回流3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，浓缩，减压干燥至恒重，以干膏中大黄素的总量作为评价指标。
结果：验证实验结果重复性及稳定性均好，与正交表中最优者相当。说明正交选定的工艺可以在生产中采用。
（五）浸膏干燥方法的选择
干燥方法一般为常压干燥和减压干燥，由于减压干燥除能加速干燥、降低温度外，还能使干燥产品疏松和易于粉碎。并且由于抽去空气减少了空气影响，故对保证药剂质量有一定的意义，对中药稠膏的干燥较其它方法合理。稠膏选用真空干燥工艺，真空度为-0.05MPa，干燥温度为80℃的条件下。
（六）成型工艺条件的选定
1. 制粒工艺选择
分别用5%PVP、10%淀粉浆作粘合剂；水、50%乙醇作润湿剂，制粒，由于本品粘性较大，结果用50%乙醇作润湿剂，14目筛网制粒，12目筛网整粒能获得适宜的颗粒。
2. 压片 由于本品的颗粒流动性较差，外加0.5%硬脂酸镁作助流剂，混匀，选用直径为9mm的深凹冲头，理论片重定为0.30g，压片，结果：成型性好，硬度适中，脆碎度0.2%，符合包衣条件。
3. 包衣
与糖衣片相比，薄膜衣片有明显的优势：成膜性好、衣层坚硬稳定、色泽亮丽、光洁细腻、防潮防湿、崩解时限短、增重少、生产成本低、操作时间短、劳动效率高，无粉尘飞扬，有利于劳动保护等优点，特别是薄膜衣片不含糖，糖尿病患者也可使用。故前列消片片定为薄膜衣片。
高效包衣操作方法及技术参数：①包衣液配制②筛去素片中的细粉及残片③将素片置高效包衣机内，开启主电机，转速控制在1-3转/分，开启热风，片芯预热至40-45摄氏度。④开启喷液系统，调整好喷枪高度，包衣液流量，雾化压力，在喷雾过程中片床的温度保持在35℃～40℃(此时锅速为3～5转/分)。⑤待片面包匀一层衣后，调节锅转速为6～9转/分，继续操作，直至将包衣液喷完、吹干。⑥包衣结束后，将包好的薄膜衣片置凉片室干燥。
包衣材料采用安徽山河药用辅料有限公司生产的胃溶型薄膜包衣粉（批准文号为皖药准字F20030005），按常规高效包衣工艺操作，可以得到理想的成品。
由以上试验可总结本品制法为：
以上十一味，鹿茸、蜈蚣分别粉碎成细粉，备用；其余白术等九味加10倍量水煎煮三次，第一次煎煮3小时，第二次煎煮2小时，第三次煎煮1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.25～1.35(80℃)的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，过筛，与上述鹿茸、蜈蚣细粉混匀，制粒，干燥，压片，包薄膜衣，即得。
(七)经三批中试生产考核工艺稳定性
取处方十倍量药材，在中试设备上试验，考核工艺稳定性，三批数据表明，工艺稳定，具可重复性和再现性。根据中试制成品量，确定本品每处方量制成1000片。
二、质量研究试验资料及文献资料
　前列消胶囊收载于国家药品监督管理局《国家中成药标准汇编》（中成药地方标准上升国家标准部分 外科 妇科分册）, 前列消片是根据前列消胶囊改变剂型的中药8类新药（减免临床研究），为了实施前列消片的质量标准研究，将成型工艺中制备的样品（批号：xx0112）用于质量标准研究。
【处方】与原剂型标准一致。
【制法】除制粒压片外，其余与原剂型标准一致，工艺无质的改变。
【性状】按三批中试产品实际性状描述。
【鉴别】(1)为原剂型标准收载的苦参的薄层鉴别，经与苦参碱对照品、缺苦参阴性对照样品对照，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本条件显色清晰，专属性强，新标准中仍予以采用。
（2）为处方中白术的薄层鉴别，经与白术对照药材、缺白术阴性对照样品对照，紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本条件显色清晰，专属性强。予以采用。
（3）原标准中收载了处方中大黄、虎杖中大黄酸的高效液相色谱鉴别，经试验，不同大黄、虎杖中大黄酸的含量不稳定，且大黄酸的含量较小，并且样品色谱中大黄酸色谱峰与杂质峰分离不好，新标准中不设定大黄酸的高效液相色谱鉴别。
(4)还进行了川木通的薄层鉴别，参考文献 取本品20g，加乙醇50ml，盐酸5ml，加热回流1小时，滤过，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供品溶液。另取齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环已烷-丙酮(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对品色谱相应的位置上，应显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，应显相同的荧光斑点。经试验，样品中没有显示与对照品色谱相应的斑点。暂未找到合适的色谱鉴别方法。
(5) 还进行了鹿茸的薄层鉴别，参考文献 取本品3g，加70%乙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液浓缩至约5ml，作为供试品溶液。另取鹿茸对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(3:1:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%茚三酮丙酮溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，应显相同颜色的主斑点。经试验，样品在与对照药材色谱相应的位置上没有显相同颜色的斑点，暂不设定本品中鹿茸的薄层鉴别。
【检查】 应符合片剂项下有关的各项规定(中国药典20xx年版一部附录I D)。
重金属 取供试品2.0g，精密称定，置己炽灼至恒重的坩锅中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml使恰湿润，用低温加热至硫酸蒸气除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在590℃炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液1ml，再用水稀释成25ml，上述两管中各加硫代乙酰胺试液各2ml,摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管中显示出的颜色与标准铅溶液管比较，不得更深。三批中试产品重金属均低于百万分之五，暂不设定重金属检查项。
砷盐检查 取供试品2.0g，精密称定，置己炽灼至恒重的坩锅中，缓缓炽灼至完全炭化，在590℃炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸3ml与适量水使成30ml，分取溶液10ml，依《中国药典》20xx年版一部(附录Ⅸ F第二法)检查,三批中试产品砷盐均低于百万分之二，暂不设定砷盐检查项。
【微生物检查】依《中国药典》20xx年版一部附录（ⅩⅢ C）的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。
【含量测定】原剂型标准收载的大黄、虎杖中大黄酸的含量测定，经试验，不同大黄、虎杖中大黄酸的含量不稳定，且大黄酸的含量较小，参考药典及相关文献，都采用大黄素作为大黄、虎杖的质量评价指标。故新标准【含量测定】测定大黄素含量。
大黄素对照品 中国药品生物制品检定所 756-xx
样品 自制 批号：xx0112
仪器与试剂
高效液相色谱仪 xx 型高压恒流泵
LabAlliance紫外可见波长检测器
xx色谱数据工作站
色谱柱 xxkromasil C18 5um 4.6×xxmm
柱号 91182045
色谱甲醇 天津四友生物医学技术有限公司
标准曲线
对照品溶液的制备：取经105℃干燥至恒重的大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含510μg 的溶液。
以510μg/ml的溶液为母液分别配制成255μg/ml、127.5μg/ml、63.75μg/ml、51μg/ml、25.5μg/ml的溶液作为对照品溶液。
精密吸取上述对照品溶液各20μl ，注入液相色谱仪中，测定。
回归曲线为Y(峰面积)=46.6649X (浓度)-30.8066 r=0.9996
线性范围为25.5～255μg/ml,标准曲线近似过圆点,采用外标一点法定量。
供试品溶液制备方法的选择：
1. 取重量差异项下的本品，研细，取粉末1.5g，精密称定，置具塞锥形中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8%盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2. 取重量差异项下的本品，研细，取粉末1.5g，精密称定，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置80℃水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
取上述供试品分别进样测定，结果相近，经比较第二种方法制备供试品溶液，方法简单，峰形分离度亦好，阴性无干扰。
精密度 同一样品连续进样测定5次，相对标准偏差为1.18%，小于3.0%。
稳定性 同一样品，制备后在30分钟、1小时、3小时、5小时、8小时后分别测定，相对标准偏差为1.97%，小于5.0%，表明样品溶液稳定性好。
重现性 同一样品，取5份，各约1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置80℃水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密吸取上述供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定。相对标准偏差为2.75%，小于5.0%。
加样回收率 取已知含量的样品5份(约1.5g)，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入每1ml含大黄素0.51mg的对照品溶液各3.0ml，蒸干，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置80℃水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；精密吸取上述溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定。平均加样回收率为98.7%。
样品测定 对三批中试产品采用高效液相色谱法进行测定。
【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典20xx年版一部附录VI D)测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.1%磷酸溶液（80:20）为流动相;检测波长为254nm。理论板数按大黄素峰计算，应不低于3000。
对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制成每1ml含大黄素0.05mg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备取 取重量差异项下的本品，研细，取粉末1.5g，精密称定，精密加入三氯甲烷25ml和2.5mol/L硫酸溶液20ml，称定重量，置80℃水浴上加热回流2小时，冷却至室温，再称定重量，用三氯甲烷补足减失重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10ml，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法 精密吸取上述两种溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
S样×C对×25×W平
【含量】＝────────────
S对×1000×W样
S样：样品峰面积（mv.sec）
S对：对照品峰面积（mv.sec）
C对：对照品浓度(µg/ml)
W平：样品平均片重（g）
W样：称样量（g）
表4、三批中试样品含量测定数据表
批 号
含量（mg/片）
xx0224
xx0225
xx0226
0.35
0.33
0.36
由三批中试确定本品每片含大黄、虎杖以大黄素(C15H10O5)计，应不低于0.3mg。
【功能主治】 清热利湿。用于前列腺炎属下焦湿热证者，症见：尿频，尿急，尿涩痛，小便淋漓不尽，腰膝酸软等。与原剂型标准一致。
【用法用量】 口服，一次5片，一日3次；或遵医嘱。
原剂型标准前列消胶囊用法用量为口服，一次5粒，一日3次；本品每片相当于原生药材1.51g，与原剂型标准中每粒相当于原生药材1.51g相同；因此本品的用法用量与原剂型标准一致。
【注意事项】 脾虚者慎用。与原剂型标准一致。
【规 格】 基片每片重0.3g
【贮 藏】 密封。与原剂型标准一致。
【有 效 期】 暂定24个月。
三、稳定性试验研究
依据《中药新药质量稳定性研究的技术要求》，将拟上市铝塑泡罩包装的前列消片用前列消片质量标准（草案）、《中华人民共和国药典》20xx及《中华人民共和国药典》xx5年版一部对三批中试产品进行试验。经对拟上市铝塑泡罩包装的前列消片置常温下放置考查24个月；又经对拟上市铝塑泡罩包装的前列消片置温度40±2℃，相对湿度75%±5%的条件下放置6个月(相当于常温下二年)，按稳定性重点考察项目（性状、鉴别、重量差异、崩解时限、含量测定、微生物限度检查等）检测。实验结果都表明该品种放置过程中质量稳定，包装材料对质量无影响。详见申报资料17。
主要参考文献
《中国药典》20xx年版一部 国家药典委员会
《中国药典》20xx年版二部 国家药典委员会
《中国药典》20xx年版一部 国家药典委员会
《中国药典》20xx年版二部 国家药典委员会
《中药新制剂开发与应用》 人民卫生出版社第二版
《现代实用中药鉴别技术》 人民卫生出版社
《中成药中的药材薄层色谱鉴别》人民卫生出版社