广中医微生物免疫实验一.pptx

第一次实验n一、观察细菌的基本形态（示教）n二、观察细菌的特殊结构（示教）n三、细菌涂片、革兰染色（操作）n四、细菌的分布（操作）实验室规则n1.非实验用品，不准带进实验室n2.进入实验室必须穿工作衣，按规定就座n3.上实验课要严格遵守课堂纪律，不得高声谈笑及乱动物品，严禁吸烟和进食n4.实验时听从老师指导，牢固树立无菌操作意识，若发生菌液污染、物品损坏，立刻报告老师实验室规则n5.实验中的染菌器材，应及时放入含有消毒液的容器，不得放在桌上，也不可在水槽内冲洗n6.爱护公物，节约使用实验材料；注意安全使用水、电、煤气n7.实验完毕，按要求整理物品，打扫卫生。脱下工作衣，消毒洗手后，离开实验室一、一、观察细菌的基本形态观察细菌的基本形态n基本形态：球菌、杆菌、弧菌基本形态：球菌、杆菌、弧菌球菌球菌(coccus)(coccus)一、葡萄球菌一、葡萄球菌链球菌链球菌nG G+球形或卵园形球形或卵园形,呈链状排列呈链状排列(in(in chain)chain)营养要求高营养要求高n（含血培养基）（含血培养基）链球菌链球菌(streptococcus)球菌(coccus)杆菌(bacillusbacillus)不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。炭疽芽胞杆菌 3-10 m大大中中大肠埃希菌 2-3 m小小布鲁菌 0.6-1.5 m志贺菌属志贺菌属(痢疾杆菌痢疾杆菌)引起引起细菌性痢疾细菌性痢疾，通称通称痢疾杆菌痢疾杆菌；本菌为细菌性痢疾的病原菌，革兰氏染色阴性。螺形菌螺菌螺菌弯曲菌弯曲菌弧菌弧菌 霍乱弧菌霍乱弧菌二、二、观察细菌的特殊结构观察细菌的特殊结构n特殊结构：芽胞、荚膜、鞭毛特殊结构：芽胞、荚膜、鞭毛（示教）（示教）破伤风杆菌芽胞破伤风杆菌芽胞本菌细长，本菌细长，可引起破伤可引起破伤风病，末端风病，末端有一圆形的有一圆形的芽胞为其形芽胞为其形态特点态特点。本菌细长，可本菌细长，可引起破伤风病，引起破伤风病，末端有一圆形末端有一圆形的芽胞为其形的芽胞为其形态特点态特点。破伤风杆菌芽胞，鼓槌状，G+芽孢菌体特殊结构特殊结构荚膜荚膜 (capsule)(capsule)荚膜：荚膜：某些细菌细胞壁外包绕一层黏液性物质，某些细菌细胞壁外包绕一层黏液性物质，成分为成分为多糖或多肽多糖或多肽，营养丰富时形成。，营养丰富时形成。肺炎链球菌荚膜肺炎链球菌荚膜荚膜荚膜肺炎球菌的荚膜肺炎球菌的荚膜菌体荚膜伤寒杆菌的鞭毛 图片由微生物学教研室提供伤寒杆菌的周鞭毛伤寒杆菌的周鞭毛菌体鞭毛本菌为本菌为伤寒病伤寒病的病原的病原菌，用菌，用特殊染特殊染色法可色法可见菌体见菌体周身有周身有鞭毛。鞭毛。革兰染色革兰染色n步骤：步骤：n标本制作：标本制作：涂片涂片干燥干燥固定固定n革兰染色：革兰染色：结晶紫结晶紫(作用作用1min后水洗后水洗)碘液碘液(作用作用1min后水洗后水洗)95%乙醇乙醇(30s后水洗后水洗)稀释复红液稀释复红液(30s后后水洗水洗)n显微镜观察：显微镜观察：印干印干滴油滴油镜检镜检二、细菌涂片标本的制作二、细菌涂片标本的制作n材料：混合菌液、玻片、接种环、材料：混合菌液、玻片、接种环、油笔、酒精灯油笔、酒精灯n步骤：涂片步骤：涂片干燥干燥固定固定n1、玻片背部用油性笔画一直径约、玻片背部用油性笔画一直径约1cm的圆的圆圈圈n2、用接种环取、用接种环取1环细菌涂在玻片正面环细菌涂在玻片正面n3、自然室温下晾干、自然室温下晾干n4、将玻片在酒精灯火焰上空穿梭、将玻片在酒精灯火焰上空穿梭3次以固定。次以固定。n初染：初染：结晶紫（滴结晶紫（滴2 23 3滴）滴）(作用作用1 1minmin后水洗后水洗)n媒染：媒染：碘液碘液(作用作用1 1minmin后水洗后水洗)n脱色：脱色：95%95%乙醇乙醇(作用作用3030s s后水洗）后水洗）n复染：复染：稀释复红液稀释复红液(30(30s s后水洗后水洗)革兰染色法：革兰染色法：显微镜（操作方法）显微镜（操作方法）n革兰阳性菌革兰阳性菌(G(G)：革兰阴性菌革兰阴性菌(G(G)：革兰染色结果：革兰染色结果：革兰阳性革兰阳性 革兰阴性革兰阴性四、细菌的分布四、细菌的分布