1、微生物基础知识微生物基础知识一一 微生物微生物:(microorganism,microbe)是一切肉眼看不见或看不是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。它们都是一些个体小清的微小生物的总称。它们都是一些个体小(0.1mm)(0.1mm)、构造简单的低等生物。、构造简单的低等生物。原核类:细菌,放线菌,蓝细菌,原核类:细菌,放线菌,蓝细菌,支原体,立克次氏体,衣原体等。支原体,立克次氏体,衣原体等。真核类:真菌真核类:真菌(酵母菌,霉菌,蕈菌酵母菌,霉菌,蕈菌)非细胞类:病毒,亚病毒非细胞类:病毒,亚病毒二二 按进化地位分按进化地位分三三 微生物的特点:微生物的特点:体积小体积小,面积大面
2、积大:单位体积所占有的表面积称为比面单位体积所占有的表面积称为比面值。值。吸收多,转化快:吸收多,转化快:Escherichia coli(发酵乳糖的细菌发酵乳糖的细菌)在在1 1小时内可分解其自重小时内可分解其自重100010001000010000倍的乳糖;倍的乳糖;Candida utilis (产朊假丝酵母)合成蛋白质的能力比食用公牛强产朊假丝酵母)合成蛋白质的能力比食用公牛强1010万万倍倍 生长旺,繁殖快:(二分裂为主)生长旺,繁殖快:(二分裂为主)微生物有惊人微生物有惊人的繁殖速度,大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代的繁殖速度,大多数微生物几十分钟内就可以繁殖一代 分布广分布广
3、,种类多种类多 :自然界中到处都有,达到无孔不入自然界中到处都有,达到无孔不入的地步,只要条件合适,他们就可以的地步,只要条件合适,他们就可以“随遇而安随遇而安”,如水、,如水、空气、土壤等空气、土壤等,土壤中的数量最多。土壤中的数量最多。适应性强,易变异适应性强,易变异:是良种选育和防止菌种衰退的是良种选育和防止菌种衰退的理论依据。理论依据。菌落菌落(colony):由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长由单个菌细胞或几个同种菌细胞在培养基上长成肉眼可见的菌落,每个菌落就是成肉眼可见的菌落,每个菌落就是1CFU1CFU。四四 细菌细菌(bacteria):狭义的细菌是指一类细胞细短(直径狭
4、义的细菌是指一类细胞细短(直径0.50.5m m,长度长度0.5-50.5-5m m),结构简单、胞壁坚硬、多以二分裂),结构简单、胞壁坚硬、多以二分裂方式繁殖方式繁殖和水生性较强的原核生物;广义的细菌则是和水生性较强的原核生物;广义的细菌则是指所有原核生物。指所有原核生物。菌落菌落单单位位CFUCFU 细菌按形态分类细菌按形态分类球形球形杆状杆状弧形或螺旋形弧形或螺旋形 菌落特征:菌落特征:包括菌落大小,形状,隆起形状,边包括菌落大小,形状,隆起形状,边缘情况,表面状态,表面光泽,颜色,透明程度等。缘情况,表面状态,表面光泽,颜色,透明程度等。影响菌落特征的因素:影响菌落特征的因素:同一种微
5、生物菌落有同一种微生物菌落有着相似的菌落特征,取决于菌落的细胞结构和生长着相似的菌落特征,取决于菌落的细胞结构和生长行为。行为。细菌按结构(革兰氏染色)分类细菌按结构(革兰氏染色)分类G+G-革兰氏染色法:革兰氏染色法:初染(结晶紫初染(结晶紫1min1min)媒染媒染(碘液(碘液1min1min)脱色脱色(酒精酒精15-20s)15-20s)复染(沙黄复染(沙黄1min1min)细菌的一般结构细菌的一般结构 细菌的特殊结构:细菌的特殊结构:荚膜荚膜 鞭毛鞭毛 纤纤毛毛 芽孢芽孢五五 获得单个菌落的方法:获得单个菌落的方法:倾注平板法、涂布法、平板划线、富集培倾注平板法、涂布法、平板划线、富集
6、培养法养法六六 液体接种培养液体接种培养七七 影响微生物生长的主要因素:影响微生物生长的主要因素:温度是微生物生长的重要因素,最适温温度是微生物生长的重要因素,最适温度并不等于生长率最高的培养的温度。度并不等于生长率最高的培养的温度。氧气把微生物分成好氧菌、厌氧菌、氧气把微生物分成好氧菌、厌氧菌、兼兼性厌氧菌性厌氧菌 PHPH八八 常用灭菌消毒方法常用灭菌消毒方法 1 1、干热灭菌法、干热灭菌法火焰灼烧法、烘箱内热空气灭菌法火焰灼烧法、烘箱内热空气灭菌法(160-170)常压下常压下加压下加压下2 2、湿热灭菌法、湿热灭菌法巴氏消毒法巴氏消毒法煮沸消毒法煮沸消毒法间歇灭菌法间歇灭菌法常规加压灭
7、菌法常规加压灭菌法连续加压灭菌法连续加压灭菌法LTH LTH 法法HTSTHTST法法九九 培养基培养基 根据微生物对营养物质需要,经过人工配制适合微根据微生物对营养物质需要,经过人工配制适合微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。(为微生物生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。(为微生物生长繁殖提供必要营养物质的物质)。生长繁殖提供必要营养物质的物质)。分类:分类:按原料来源按原料来源 a.a.天然培养基天然培养基b.b.合成培养基合成培养基c.c.半合成培养基半合成培养基 根据物理性状根据物理性状 a.a.液体培养基液体培养基b.b.固体培养基固体培养基 c.c.半固体培养基半固体培养基
8、根据用途根据用途 a.a.基础培养基基础培养基 b.b.厌氧培养基厌氧培养基 c.c.加富培养基加富培养基 d.d.特殊培养基特殊培养基 e.e.鉴别培养基鉴别培养基 f.f.生化生化实验培养基实验培养基 g.g.选择培养基选择培养基 h.h.增菌培养基增菌培养基十十 涂抹和空气沉降试验方法涂抹和空气沉降试验方法涂抹涂抹采样方法采样方法 用用5cm5cm5cm5cm灭菌规格板放在被检物体表面,用浸有无灭菌规格板放在被检物体表面,用浸有无菌的生理盐水采样液的棉拭子菌的生理盐水采样液的棉拭子1 1支,在规格板内横竖往返支,在规格板内横竖往返个涂抹个涂抹5 5次,并随之转动棉试子,连续采样次,并随之
9、转动棉试子,连续采样1414个规格版面个规格版面子直接涂抹物体采样,若采样物体表面有消毒剂残留时,子直接涂抹物体采样,若采样物体表面有消毒剂残留时,采样时含相应的中和剂。采样时含相应的中和剂。采样面积:取采样面积:取100cm100cm2 2空气沉降空气沉降 通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,平皿,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,以平板培养皿中的菌落数来判断洁净环境内的微生数,以平板培养皿中的菌落数来判断洁净环境内的微生数,并以此来评定洁净室的洁净度。并以此来评定洁净室的洁净度。十一十一 食品中大肠菌群计数食品中大肠菌群计数(GB 4789.3-GB 4789.3-20102010)大肠菌群大肠菌群coliforms:在一定条件下能发酵:在一定条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。无芽孢杆菌。2.2.检验方法:检验方法:9 9管发酵法管发酵法 3.3.操作步骤:操作步骤:样品的稀释样品的稀释 初发酵实验初发酵实验 复发酵实验复发酵实验 4.4.大肠菌群最可能数大肠菌群最可能数(MPN)(MPN)的报告:的报告:检索检索MPNMPN表表谢谢谢谢!