微生物学消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全.pptx

第一节第一节 消毒灭菌常用术语消毒灭菌常用术语灭菌灭菌灭菌灭菌（sterilizationsterilization）：杀灭物体上所有微生物杀灭物体上所有微生物杀灭物体上所有微生物杀灭物体上所有微生物 的方法。的方法。的方法。的方法。消毒消毒消毒消毒（disinfectiondisinfection）：杀死物体上或环境中的杀死物体上或环境中的杀死物体上或环境中的杀死物体上或环境中的 病原微生物的方法。病原微生物的方法。病原微生物的方法。病原微生物的方法。防腐（防腐（防腐（防腐（antisepsisantisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌防止或抑制皮肤表面细菌防止或抑制皮肤表面细菌防止或抑制皮肤表面细菌 生长繁殖的方法。生长繁殖的方法。生长繁殖的方法。生长繁殖的方法。清洁（清洁（清洁（清洁（cleaningcleaning）：是指通过除去尘埃和一切污是指通过除去尘埃和一切污是指通过除去尘埃和一切污是指通过除去尘埃和一切污 秽以减少微生物数量的过程。秽以减少微生物数量的过程。秽以减少微生物数量的过程。秽以减少微生物数量的过程。无菌（无菌（无菌（无菌（asepsisasepsis）和和和和无菌操作无菌操作无菌操作无菌操作：无菌是无菌是无菌是无菌是无无无无活菌的活菌的活菌的活菌的 意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体 或其它物品的操作技术，称为无菌操作。或其它物品的操作技术，称为无菌操作。或其它物品的操作技术，称为无菌操作。或其它物品的操作技术，称为无菌操作。第二节第二节 消毒灭菌的方法消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法一、物理消毒灭菌法 （一）热力灭菌法（一）热力灭菌法 1 1 1 1.干热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法干热灭菌法 焚烧；烧灼；干烤；红外线焚烧；烧灼；干烤；红外线焚烧；烧灼；干烤；红外线焚烧；烧灼；干烤；红外线 2 2 2 2.湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法湿热灭菌法 巴氏消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法(pasteurizationpasteurization)；煮沸；煮沸；煮沸；煮沸 法；流动蒸汽消毒法；间歇蒸汽灭菌法；流动蒸汽消毒法；间歇蒸汽灭菌法；流动蒸汽消毒法；间歇蒸汽灭菌法；流动蒸汽消毒法；间歇蒸汽灭菌 法法法法(fractionalfractional sterilizationsterilization)；高高高高 压压压压蒸蒸蒸蒸 汽灭菌法汽灭菌法汽灭菌法汽灭菌法(autoclavingautoclaving)高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器121.3 C C 1520min.（二）辐射杀菌法（二）辐射杀菌法 1 1 1 1.紫外线紫外线紫外线紫外线：265265265265266nm266nm266nm266nm最强最强最强最强 可使可使可使可使DNADNADNADNA链上两个相邻的链上两个相邻的链上两个相邻的链上两个相邻的胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶共价结共价结共价结共价结合，形成二聚体，干扰合，形成二聚体，干扰合，形成二聚体，干扰合，形成二聚体，干扰DNADNADNADNA复制与转录。复制与转录。复制与转录。复制与转录。2 2 2 2.电离辐射电离辐射电离辐射电离辐射 3 3 3 3.微波（微波（微波（微波（microwavemicrowave）（三）滤过除菌法（三）滤过除菌法 1.1.1.1.滤菌器滤菌器滤菌器滤菌器(filterfilter）液体除菌液体除菌液体除菌液体除菌 2.2.2.2.空气除菌采用生物洁净技术空气除菌采用生物洁净技术空气除菌采用生物洁净技术空气除菌采用生物洁净技术 （四）干燥与低温抑菌法（四）干燥与低温抑菌法滤器和层流室滤器和层流室二、化学消毒灭菌法二、化学消毒灭菌法（一）（一）高效消毒剂高效消毒剂 （high-leveldisinfectants）1 1 1 1.含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂含氯消毒剂；2 2 2 2.过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂；3 3 3 3.醛类消毒剂醛类消毒剂醛类消毒剂醛类消毒剂；4 4 4 4.环氧乙烷环氧乙烷环氧乙烷环氧乙烷（二）（二）中效消毒剂中效消毒剂 （intermediate-leveldisinfectants）1 1 1 1.含碘消毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂含碘消毒剂；2 2 2 2.醇类消毒剂醇类消毒剂醇类消毒剂醇类消毒剂（三）（三）低效消毒剂低效消毒剂 （low-leveldisinfectants）1 1 1 1.季铵盐类季铵盐类季铵盐类季铵盐类；2 2 2 2.氯己定；氯己定；氯己定；氯己定；3 3 3 3.高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾高锰酸钾 固体二氧化氯消毒剂固体二氧化氯消毒剂第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用（一）（一）高危器械物品高危器械物品 用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织用时需进入无菌组织 的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些物品都应该灭菌。的物品。所有这些物品都应该灭菌。（二）（二）中危器械物品中危器械物品 用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织用时不进入无菌组织 但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。但接触黏膜的器械。采用消毒即可。（三）（三）低危器械物品低危器械物品 只接触未损伤皮肤只接触未损伤皮肤只接触未损伤皮肤只接触未损伤皮肤但但但但 不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。一般用后清洗、消毒即可。一般用后清洗、消毒即可。一般用后清洗、消毒即可。（四）（四）快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械 一一、医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌 二二、室内空气消毒灭菌室内空气消毒灭菌 1 1 1 1.物物物物理理理理消消消消毒毒毒毒法法法法 紫紫紫紫外外外外线线线线照照照照射射射射（1.51.5WW/m/m3 3，1h1h）最最最最常常常常用用用用；滤滤滤滤过过过过除除除除菌菌菌菌：空空空空气气气气通通通通过过过过孔孔孔孔径径径径小小小小于于于于0.20.2 mm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。2 2 2 2化化化化学学学学消消消消毒毒毒毒法法法法 包包包包括括括括化化化化学学学学消消消消毒毒毒毒剂剂剂剂喷喷喷喷雾雾雾雾和和和和熏熏熏熏蒸蒸蒸蒸：过过过过氧氧氧氧乙乙乙乙酸酸酸酸喷喷喷喷雾雾雾雾、熏熏熏熏蒸蒸蒸蒸；过过过过氧氧氧氧化化化化氢氢氢氢喷喷喷喷雾雾雾雾；二二二二氧化氯溶液氧化氯溶液氧化氯溶液氧化氯溶液喷洒；喷洒；喷洒；喷洒；中草药点燃烟熏。中草药点燃烟熏。中草药点燃烟熏。中草药点燃烟熏。三三、手和皮肤的消毒手和皮肤的消毒 用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。四四、黏膜、黏膜的消毒的消毒 五五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 六六、病人污染物品的消毒病人污染物品的消毒 七七、饮水的消毒饮水的消毒 八八、环境的消毒环境的消毒 第四节第四节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素一一、微生物的种类微生物的种类 二二、微生物的物理状态微生物的物理状态 三三、微生物的数量微生物的数量 四四、消毒剂性质、浓度与作用时间消毒剂性质、浓度与作用时间 五五、温度温度 六六、酸碱度酸碱度 七七、有机物有机物第四节第四节 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全 生生物物安安全全（biosafety）是是生生物物技技术术安安全全（safetyofbiotechnology）的简称。的简称。狭狭义义：指指现现代代生生物物技技术术的的研研究究、开开发发、应应用用及及转转基基因因生生物物可可能能对对生生物物多多样样性性、生生态态环环境境和和人人类类健健康康产产生生潜潜在的危害。在的危害。广广义义：指指与与生生物物有有关关的的各各种种因因素素对对社社会会、经经济济、人人类类健健康康及及生生态态环环境境所产生的危害或潜在风险。所产生的危害或潜在风险。病病原原微微生生物物所所致致的的安安全全问问题题，如如病病原原微微生生物物实实验验室室的的安安全全隐隐患患、生生物物武武器器、生生物物恐恐怖怖、重重大大传传染染病病的的暴暴发发流流行行等等，也也是是人人类类社社会所面临的最现实的生物安全问题。会所面临的最现实的生物安全问题。病病原原微微生生物物实实验验室室生生物物安安全全的的核核心心是是防防扩散扩散和和防感染防感染。关关于于病病原原微微生生物物实实验验室室生生物物安安全全，我我国国法法令令包包括括对对病病原原微微生生物物的的分分类类管管理理，对对实实验验室室的的分分级级管管理理，实实验验室室感感染染的的控控制制以以及及监监督督和法律责任等。和法律责任等。一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类 根根根根据据据据传传传传染染染染性性性性、感感感感染染染染后后后后对对对对个个个个体体体体或或或或者者者者群群群群体体体体的的的的危危危危害程度，病原微生物分为四类：害程度，病原微生物分为四类：害程度，病原微生物分为四类：害程度，病原微生物分为四类：第第第第一一一一类类类类是是是是指指指指能能能能够够够够引引引引起起起起人人人人类类类类或或或或者者者者动动动动物物物物非非非非常常常常严严严严重重重重疾疾疾疾病病病病的的的的微微微微生生生生物物物物，以以以以及及及及我我我我国国国国尚尚尚尚未未未未发发发发现现现现或或或或者者者者已已已已经经经经宣宣宣宣布布布布消灭的微生物消灭的微生物消灭的微生物消灭的微生物（29292929种）种）种）种）。第第第第二二二二类类类类是是是是指指指指能能能能够够够够引引引引起起起起人人人人类类类类或或或或者者者者动动动动物物物物严严严严重重重重疾疾疾疾病病病病，比比比比较较较较容容容容易易易易直直直直接接接接或或或或者者者者间间间间接接接接在在在在人人人人与与与与人人人人、动动动动物物物物与与与与人人人人、动物与动物间传播的微生物动物与动物间传播的微生物动物与动物间传播的微生物动物与动物间传播的微生物（70707070种）种）种）种）。一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类第第第第三三三三类类类类是是是是指指指指能能能能够够够够引引引引起起起起人人人人或或或或动动动动物物物物疾疾疾疾病病病病，但但但但一一一一般般般般情情情情况况况况下下下下对对对对人人人人、动动动动物物物物或或或或环环环环境境境境不不不不构构构构成成成成严严严严重重重重危危危危害害害害，传传传传播播播播风风风风险险险险有有有有限限限限，实实实实验验验验室室室室感感感感染染染染后后后后很很很很少少少少引引引引起起起起严严严严重重重重疾疾疾疾病病病病，并并并并且且且且具具具具备有效治疗和预防措施的微生物备有效治疗和预防措施的微生物备有效治疗和预防措施的微生物备有效治疗和预防措施的微生物（275275275275种）种）种）种）。第第第第四四四四类类类类是是是是指指指指在在在在通通通通常常常常情情情情况况况况下下下下不不不不会会会会引引引引起起起起人人人人或或或或动动动动物物物物疾疾疾疾病病病病的微生物。如小鼠白血病病毒等。的微生物。如小鼠白血病病毒等。的微生物。如小鼠白血病病毒等。的微生物。如小鼠白血病病毒等。第一类、第二类统称为第一类、第二类统称为第一类、第二类统称为第一类、第二类统称为高致病性病原微生物高致病性病原微生物高致病性病原微生物高致病性病原微生物。二、病原微生物实验室的分级二、病原微生物实验室的分级级别级别处理对象处理对象一级一级对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人、动植物致病的致病因子物致病的致病因子。二级二级对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害，具具有有有效的预防和治疗措施有效的预防和治疗措施。三级三级对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使对人体、动植物或环境具有高度危险性，主要通过气溶胶使人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具人类传染上严重的甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施有高度危害的致病因子。通常有预防治疗措施。四级四级 对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传对人体、动植物或环境具有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗播或传播途径不明或未知的危险的致病因子。没有预防治疗措施措施。一一一一、二二二二级级级级实实实实验验验验室室室室不不不不得得得得从从从从事事事事高高高高致致致致病病病病性性性性病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物实实实实验验验验活活活活动动动动。三三三三级级级级、四四四四级级级级实实实实验验验验室从事高致病性病原微生物实验活动。室从事高致病性病原微生物实验活动。室从事高致病性病原微生物实验活动。室从事高致病性病原微生物实验活动。从从从从事事事事高高高高致致致致病病病病性性性性病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物相相相相关关关关实实实实验验验验活活活活动动动动应应应应当当当当有有有有名名名名以以以以上上上上的的的的工工工工作作作作人人人人员员员员共共共共同同同同进进进进行行行行。在在在在同同同同一一一一个个个个实实实实验验验验室室室室的的的的同同同同一一一一个个个个独独独独立立立立安安安安全全全全区区区区域域域域内内内内，只只只只能能能能同同同同时时时时从从从从事事事事一一一一种种种种高高高高致致致致病病病病性性性性病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物的的的的相相相相关关关关实实实实验验验验活活活活动动动动。应应应应有有有有健健健健全全全全安安安安全保卫制度全保卫制度全保卫制度全保卫制度 。实实实实验验验验室室室室工工工工作作作作人人人人员员员员应应应应掌掌掌掌握握握握实实实实验验验验室室室室技技技技术术术术规规规规范范范范、操操操操作作作作规规规规程程程程、生生生生物物物物安安安安全全全全防防防防护护护护知知知知识识识识和和和和实实实实际际际际操操操操作作作作技技技技能能能能。应应应应有有有有符符符符合合合合要要要要求求求求的的的的防防防防护护护护用用用用品品品品，应应应应建建建建立立立立健健健健康康康康档案；进行预防接种。档案；进行预防接种。档案；进行预防接种。档案；进行预防接种。实实实实验验验验室室室室应应应应有有有有科科科科学学学学、严严严严格格格格的的的的管管管管理理理理制制制制度度度度，定定定定期期期期对对对对实实实实验验验验室室室室设设设设施施施施设设设设备备备备、材材材材料料料料等等等等进进进进行行行行检检检检查查查查、维维维维护护护护和和和和更更更更新新新新，应应应应对对对对废废废废水水水水、废废废废气气气气以以以以及及及及其其其其他他他他废废废废物物物物进进进进行合理处置，防止环境污染。行合理处置，防止环境污染。行合理处置，防止环境污染。行合理处置，防止环境污染。生物安全生物安全三、实验室感染的控制以及三、实验室感染的控制以及监督和法律责任监督和法律责任 实实实实验验验验室室室室感感感感染染染染控控控控制制制制工工工工作作作作包包包包括括括括定定定定期期期期检检检检查查查查实实实实验验验验室室室室的的的的生生生生物物物物安安安安全全全全防防防防护护护护、病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物菌菌菌菌（毒毒毒毒）种种种种和和和和样样样样本本本本保保保保存存存存与与与与使使使使用用用用、安安安安全全全全操操操操作作作作、实实实实验验验验室室室室排排排排放放放放的的的的废废废废水水水水和和和和废废废废气气气气以及其他废物处置等实施情况。以及其他废物处置等实施情况。以及其他废物处置等实施情况。以及其他废物处置等实施情况。实实实实验验验验室室室室发发发发生生生生高高高高致致致致病病病病性性性性病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物泄泄泄泄漏漏漏漏时时时时，预预预预防防防防、控控控控制制制制措措措措施施施施包包包包括括括括：封封封封闭闭闭闭被被被被病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物污污污污染染染染的的的的实实实实验验验验室室室室或或或或可可可可能能能能造造造造成成成成病病病病原原原原微微微微生生生生物物物物扩扩扩扩散散散散的的的的场场场场所所所所；开开开开展展展展流流流流行行行行病病病病学学学学调调调调查查查查；对对对对病病病病人人人人进进进进行行行行隔隔隔隔离离离离治治治治疗疗疗疗，对对对对相相相相关关关关人人人人员员员员进进进进行行行行医医医医学学学学检检检检查查查查；对对对对密密密密切切切切接接接接触触触触者者者者进进进进行行行行医医医医学学学学观观观观察察察察；进进进进行行行行现现现现场场场场消消消消毒毒毒毒；对对对对染染染染疫疫疫疫或或或或者者者者疑疑疑疑似似似似染染染染疫的动物采取隔离、扑杀等措施。疫的动物采取隔离、扑杀等措施。疫的动物采取隔离、扑杀等措施。疫的动物采取隔离、扑杀等措施。监监督督的的主主要要内内容容是是监监督督病病原原微微生生物物实实验验室室执执行行国国家家有有关关法法律律、行行政政法法规规、国国家家标标准准和和要要求求的的记记录录、档案及报告的情况。档案及报告的情况。法法律律责责任任的的核核心心是是承承担担造造成成传传染染病病传传播播、流流行行或或者者其其他他严严重重后后果果的法律责任。的法律责任。思考题思考题n n 常用的消毒剂有哪些种类常用的消毒剂有哪些种类?n n 简述化学消毒剂的杀菌机制。简述化学消毒剂的杀菌机制。n n 湿热灭菌有哪些方法湿热灭菌有哪些方法?各有何用途各有何用途?n n 筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。n n 在温度和时间相同的情况下，为什么湿热在温度和时间相同的情况下，为什么湿热灭菌法的效果比干热法好灭菌法的效果比干热法好?n n 当从事病原生物学安全实验室工作时，应当从事病原生物学安全实验室工作时，应考虑哪些与生物安全相关的问题？考虑哪些与生物安全相关的问题？巴氏消毒法巴氏消毒法n n用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微用较低温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法。被破坏的消毒方法。n n61.161.162.8 62.8 C 30C 30分钟分钟分钟分钟n n71.7 71.7 C 15 C 15 秒秒秒秒返回返回