艾滋病抗体检测技术.pptx

主要内容一、艾滋病及其病原简介二、艾滋病检测实验室设置与职能三、艾滋病抗体检测技术四、抗体检测流程五、质量控制六、生物安全防护 第一部分第一部分 艾滋病及其病原简介艾滋病及其病原简介29-829-8月月-24-243 3定义 艾滋病全名为获得性免疫缺陷综合症（Aquired Immunodeficiency Sydrome,AIDS）,该病由人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus,HIV）感染而引起，导致被感染者免疫功能的部分或完全丧失，继而发生机会性感染、肿瘤等。29-829-8月月-24-244 4HIV发现 1981年美国首次报告病例（回顾87年）1983年法国的巴斯德研究所首次在男同性恋者分离出淋巴腺病综合征相关病毒（Lymphadenopathy-associated 简称LAV）。1984年美国Gallo等分离出HTLV-（嗜人类T淋巴细胞型病毒）1986年国际微生物学会和病毒分类学会将HTLV-和LAV统称为人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus 简称HIV)1986年分出HIV-2型Structure of HIV Virion Particle Organization of the HIV-1 Virion（有（有（有（有A A A AE E E E多个亚型）多个亚型）多个亚型）多个亚型）与一种感染与一种感染与一种感染与一种感染灰身白脸猴灰身白脸猴灰身白脸猴灰身白脸猴的猴免疫缺陷病毒（的猴免疫缺陷病毒（的猴免疫缺陷病毒（的猴免疫缺陷病毒（SIVSIV）相似。）相似。）相似。）相似。HIV-1HIV-1HIV-1HIV-1HIV-2HIV-2HIV-2HIV-2Human immunodeficiency virus HIV（有（有（有（有A A A AJ J J J，OO1 1 1 1OO4 4 4 4 多个亚型）多个亚型）多个亚型）多个亚型）与一种感染黑猩猩的猴免疫缺陷病毒（与一种感染黑猩猩的猴免疫缺陷病毒（与一种感染黑猩猩的猴免疫缺陷病毒（与一种感染黑猩猩的猴免疫缺陷病毒（SIVSIV）相似。）相似。）相似。）相似。HIV-1 MHIV-1 M组组组组HIV-1 OHIV-1 O组组组组HIV-2HIV-2非洲中部和东部非洲中部和东部美国、欧洲、南美洲、非洲和亚洲美国、欧洲、南美洲、非洲和亚洲南美洲、印度、赞比亚、南美洲、印度、赞比亚、中国中国非洲中部和东部非洲中部和东部泰国、中非、印度泰国、中非、印度巴西、罗马尼亚、喀麦隆巴西、罗马尼亚、喀麦隆加蓬、苏联、尼日利亚、乌干达、塞内加尔、赞比亚加蓬、苏联、尼日利亚、乌干达、塞内加尔、赞比亚喀麦隆、扎伊尔、中非喀麦隆、扎伊尔、中非塞浦路斯塞浦路斯扎伊尔扎伊尔喀麦隆、加蓬喀麦隆、加蓬喀麦隆、加蓬喀麦隆、加蓬HIVHIVHIVHIV型别和亚型的型别和亚型的型别和亚型的型别和亚型的分类进化与地区分布：分类进化与地区分布：分类进化与地区分布：分类进化与地区分布：西非、印度西非、印度HIVHIVABCDEFGHIJO1O2O3O4ABCDE艾滋病病毒感染后，可严重破坏人体的免疫系统，使人体丧艾滋病病毒感染后，可严重破坏人体的免疫系统，使人体丧失抵御各种疾病的能力，有利于各种病原体的侵入，从而导失抵御各种疾病的能力，有利于各种病原体的侵入，从而导致各种严重的、难以治愈的机会性感染或肿瘤，最终导致死致各种严重的、难以治愈的机会性感染或肿瘤，最终导致死亡，病死率可达亡，病死率可达100。艾滋病从感染到发病的一般过程艾滋病从感染到发病的一般过程感染分期感染分期感染分期感染分期维持时间维持时间维持时间维持时间感染标志物感染标志物传染性传染性原发感染潜伏期原发感染潜伏期2-4周周 抗体阴性抗体阴性 （窗口期）（窗口期）传染危险性高传染危险性高原发感染症状期原发感染症状期1-2周周 传染危险性高传染危险性高慢性感染潜伏期慢性感染潜伏期215年年(平均平均 8-10 年年)抗体阳性抗体阳性有传染性有传染性临床发病期临床发病期03年年(平均平均 1-2 年年)抗体阳性抗体阳性抗原阳性抗原阳性传染性高传染性高急性期急性期潜伏期潜伏期窗口期窗口期HIV感染以后的血清学动态感染以后的血清学动态Anti-P24Anti-gp41/120(anti-gp36)HIV RNAAnti-Ag感染感染 1周周 2周周 3周周 4周周.1年年 2年年 3年年.10年年.艾滋病期艾滋病期Anti-Ab浓浓度度 窗口期:从机体感染HIV到产生相应抗体的这段时间叫窗口期，一般平均为13个月，95%以上HIV-1感染者产生抗体的时间是在感染后3个月以内，个别情况到6个月可检测。第二部分艾滋病检测实验室分级设置和职能要求29-829-8月月-24-241313艾滋病检测实验室分三类：1、艾滋病参比实验室2、艾滋病检测确证实验室:包括艾滋病确证中心实验室和艾滋病确证实验室 3、艾滋病检测筛查实验室:包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点 艾滋病参比实验室设在中国疾病预防控制中心。其职能包括：1、承担全国艾滋病检测实验室网络建设的业务技术指导和评价工作。2、建立全国艾滋病检测质量保证及质量控制体系，组织国家级实验室能力验证和艾滋病诊断试剂临床质量评估。3、承担艾滋病检测疑难样品的分析和确证，对有争议的检测结果进行仲裁，出具最终检测报告。4、开展应用性研究，承担与艾滋病防治相关的病原学鉴定、现场综合防治、调研、监测、临床治疗等工作中的相关检测任务。5、建立国家艾滋病病毒毒种库、样品库、质控品库、基因库和细胞库。6、为艾滋病确证中心实验室开展省级实验室质量管理、省级艾滋病诊断试剂临床质量评估和自愿咨询检测等工作提供技术支持和指导。7、组织全国艾滋病检测相关业务培训，组织制定和修改与艾滋病检测工作有关的技术规范和指南。艾滋病确证中心实验室职能（1）负责职责范围内艾滋病检测实验室网络建设的业务技术指导和评价，组织艾滋病检测实验室人员技术培训。（2）建立艾滋病检测实验室质量控制体系，组织省级实验室能力验证和艾滋病诊断试剂的临床质量评估。（3）承担省级卫生行政部门指定区域内的艾滋病病毒抗体确证、抗体筛查和其他艾滋病检测工作。（4）开展应用性研究，承担与艾滋病防治相关的病原学鉴定、现场综合防治、调研、监测、临床治疗等工作中相关的检测任务。（5）建立职责范围内的艾滋病检测样品库和质控品库。（6）收集、整理和分析艾滋病检测数据及相关资料，建立艾滋病检测实验室基本资料库和艾滋病检测资料数据库。定期向省级卫生行政部门和中国疾病预防控制中心报告艾滋病检测数据及相关资料，并配合其做好个案调查、登记等随访工作。（7）负责对开展自愿咨询检测工作的艾滋病检测实验室的技术支持和指导。艾滋病确证实验室职能（1）承担当地卫生行政部门指定的艾滋病病毒抗体确证、抗体筛查和其他艾滋病检测工作。（2）及时向艾滋病确证中心实验室报告经确证的阳性结果，并配合其做好个案调查、登记等随访工作。（3）承担当地卫生行政部门指定的艾滋病检测筛查实验室的业务技术指导、培训和评价任务。（4）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病确证中心实验室和同级卫生行政部门。（5）协助艾滋病检测实验室开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。艾滋病筛查实验室职能(1)开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。(2)负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。(3)定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。(4)对自愿咨询检测工作提供技术支持。艾滋病检测点职能（1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。（2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。（3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。（4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。艾滋病检测筛查实验室的申请与验收设立艾滋病检测实验室的机构或单位应向省级卫生行政部门提交申请书。省级卫生行政部门组织专家组对申请材料进行审查，对符合规定、材料齐全的申请者，由省级（或市地级）艾滋病检测实验室验收专家组进行现场验收。省级卫生行政部门对通过验收者发出合格通知，同时抄送省级疾病预防控制中心，未通过验收者整改后可重新提出申请。省级卫生行政部门在组织对采供血机构执业验收时，应选派艾滋病检测实验室验收专家组专家参加对采供血机构实验室的验收。采供血机构取得执业许可后，抄送省级疾病预防控制中心备案。迁移艾滋病检测实验室或变更艾滋病检测实验室的类别，按本办法上述规定重新申请验收。艾滋病筛查实验室基本标准1、人员条件至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。2、建筑条件实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。3、仪器设备条件配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。29-829-8月月-24-242121艾滋病检测点基本标准1、人员条件 至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。2、建筑条件 需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。3、设备条件 需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。第三部分艾滋病实验室检测技术章节对比20042004版版20092009版版1 1样品的采集和处理样品的采集和处理样品的采集和处理样品的采集和处理2 2HIVHIV抗体检测抗体检测HIVHIV抗体检测抗体检测3 3HIVHIV核酸定性检测核酸定性检测HIV-1HIV-1抗原检测抗原检测4 4HIVRNAHIVRNA定量检测定量检测HIVHIV核酸检测核酸检测5 5CD4CD4和和CD8TCD8T淋巴细胞检测淋巴细胞检测HIV-1HIV-1耐药检测耐药检测6 6HIVHIV抗原检测抗原检测CD4CD4和和CD8TCD8T淋巴细胞检测淋巴细胞检测7 7艾滋病实验室安全防护和职业暴露艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防预防HIV-1HIV-1的分离培养的分离培养8 8艾滋病实验室质量管理艾滋病实验室质量管理实验室生物安全实验室生物安全9 9艾滋病实验室质量考评办法艾滋病实验室质量考评办法艾滋病检测实验室质量管理艾滋病检测实验室质量管理1010HIVHIV诊断试剂临床质量评估方案诊断试剂临床质量评估方案修改、增补和完善的内容1.在样品的采集和处理中，增加了滤纸片干血斑样品、用于CD4/CD8 T淋巴细胞测定样品、尿液和唾液样品的采集和处理。2.在HIV抗体检测中，增加了免疫荧光法和化学发光法，进一步明确了不同情况下的检测策略。3.在HIV核酸检测中，增加了HIV感染产妇所生婴儿HIV感染早期诊断检测流程和适用于窗口期的集合核酸检测法。修改、增补和完善的内容4.根据临床治疗需求，增加了HIV-1耐药检测。5.进一步完善了艾滋病检测实验室安全防护和艾滋病检测实验室的质量管理，使其更加符合目前艾滋病防治工作的需求，更加具有可操作性。6.增加了HIV-1新近感染检测和HIV-1的分离培养技术。艾滋病实验抗体诊断方法（一）化学发光法化学发光法第三代第三代(国产国产)：双抗原夹心法：双抗原夹心法免疫层析试验（硒标法）免疫层析试验（硒标法）确证试验确证试验第二代：夹心法（只检测第二代：夹心法（只检测IgGIgG）检测多种特异抗体检测多种特异抗体第四代：增加检测第四代：增加检测P24P24抗原抗原第三代第三代(进口进口)：双抗原夹心法：双抗原夹心法 增加检测增加检测O O亚型亚型明胶颗粒凝集试验（明胶颗粒凝集试验（PAPA）免疫渗滤试验（金标法等）免疫渗滤试验（金标法等）蛋白印迹法蛋白印迹法(WB)(WB)检验目的检验目的检验方法检验方法检验标志物检验标志物快速诊断试验快速诊断试验筛查试验筛查试验酶联免疫试验酶联免疫试验（ELISAELISA）HIV(1+2)HIV(1+2)抗体抗体艾滋病实验诊断方法（二）CD3CD3、CD4CD4、CD8+TCD8+T淋巴细胞淋巴细胞流式细胞仪法流式细胞仪法治疗相关治疗相关CD4CD4定量定量RT-PCRRT-PCR、bDNAbDNA、NASBANASBA普通普通RT-PCRRT-PCR检测检测P24P24抗原抗原定量定量(病毒载量病毒载量)病毒核酸病毒核酸定性检测定性检测分子研究分子研究检验目的检验目的检验方法检验方法检验标志物检验标志物酶联免疫试验酶联免疫试验早期诊断早期诊断病毒抗原病毒抗原免疫渗滤试验免疫渗滤试验（金标法）（金标法）HIV抗体筛查试验抗体筛查试验一、快速诊断试验：一、快速诊断试验：写病人编号写病人编号写病人编号写病人编号测试品种测试品种测试品种测试品种测试号码测试号码测试号码测试号码质控结果条带质控结果条带质控结果条带质控结果条带病人结果条带病人结果条带病人结果条带病人结果条带加样处加样处加样处加样处滴滴滴滴50ul50ul血清或血浆血清或血浆血清或血浆血清或血浆滴滴滴滴50ul50ul全血全血全血全血滴滴滴滴1 1滴缓冲液滴缓冲液滴缓冲液滴缓冲液 阳性阳性阳性阳性 阴性阴性阴性阴性 无效无效无效无效 无效无效无效无效3-153-15分钟分钟免疫层析试验（硒标法）免疫层析试验（硒标法）免疫层析试验（硒标法）免疫层析试验（硒标法）明胶颗粒凝集试验（明胶颗粒凝集试验（明胶颗粒凝集试验（明胶颗粒凝集试验（PAPAPAPA）：）：）：）：PAPAPAPA的操作和结果判断的操作和结果判断的操作和结果判断的操作和结果判断5 5 450/630nm下测定OD值混匀，加盖，37温育 洗板3 3 加入底物第二次特异性结合第二次特异性结合4 4 加入终止液1 1 加入样品 洗板2 2 加入酶标记物 加盖，37温育 加盖，37温育第一次特异性结合第一次特异性结合二、酶联免疫分析（二、酶联免疫分析（ELISAELISA）（第三代、双抗原夹心、两步法）可检测多种抗体可检测多种抗体化学发光法待测抗体待测抗体酶标记的抗原酶标记的抗原发光底物发光底物包被抗原包被抗原1.缩短窗口期：3-4天2.灰区结果减少。3.国际主要HIV检测试剂评估：无论是第四代（Abbott），还是第3代试剂（bio-rad），化学发光试剂都排第一，国产科美。时间分辨免疫荧光法第四代：可同时检测抗原及抗体第四代：可同时检测抗原及抗体区分区分ELISAELISA真阳性与假阳性，确诊出阳性样本真阳性与假阳性，确诊出阳性样本针对各种病毒蛋白的特异抗体针对各种病毒蛋白的特异抗体检测检测HIV-1HIV-1和和HIV-2HIV-2HIV抗体确证试验抗体确证试验Western Blot Western Blot 免疫印迹法免疫印迹法免疫印迹法免疫印迹法全自动免疫印迹仪全自动免疫印迹仪各种诊断试剂特点（对缩短窗口期的效能）新发感染（包括婴儿早新发感染（包括婴儿早期诊断）、耐药性研究期诊断）、耐药性研究血液筛查、复核血液筛查、复核血液筛查、复核血液筛查、复核常规筛查常规筛查应急（职业暴露）、应急（职业暴露）、急诊、急诊、VCTVCT等等推荐用途推荐用途特异性较好特异性较好敏感性不足敏感性不足3535天天5 5周周明胶颗粒凝集试验明胶颗粒凝集试验(PA)(PA)1010天天1515天天2121天天2525天天3535天天不用于常规诊断不用于常规诊断1 1周多周多核酸检测核酸检测结果较难判断结果较难判断假阳性率偏高假阳性率偏高2 2周多周多ELISAELISA（进口第四代）（进口第四代）较为成熟较为成熟稳定性好稳定性好3 3周周ELISAELISA（进口第三代）（进口第三代）特异性好特异性好(与与WBWB一致一致)敏感性不足敏感性不足5 5周周金标法、硒标法金标法、硒标法窗口期窗口期特点特点诊断试剂诊断试剂普及普及批间稳定性欠佳批间稳定性欠佳3 3周多周多ELISAELISA（国产第三代）（国产第三代）快速试剂偏远地区偏远地区用于急诊手术用于急诊手术用于高危行为的门诊病人用于高危行为的门诊病人即将分娩的孕妇即将分娩的孕妇HIV职业暴露者职业暴露者快速试验前滞现象：快速试验前滞现象：指反应中抗体含量过多，影响抗原抗体的理指反应中抗体含量过多，影响抗原抗体的理想结合，大量抗体结合于抗原阻碍了交叉联结符想结合，大量抗体结合于抗原阻碍了交叉联结符合体的形成，使肉眼观察不到凝集现象。造成假阴合体的形成，使肉眼观察不到凝集现象。造成假阴性。性。解决办法解决办法：稀释样品：稀释样品抗体筛查试验的局限性阴性结果不能排除HIV感染：在感染早期，血清阳转前存在“窗口期”，在感染晚期，某些抗体可能检测不到（如p24抗体）。反应中抗体过量，抗原抗体比例不合适而不能形成特定结购，出现凝集抑制。不能诊断3个月12个月则按抗体检测流程，若抗体为阳性，不能凭此判断阳性，应尽快在不同时间采集2份血进行核酸检测第六部分质量控制抗体检测的室内质量控制试剂盒内部对照：用于判断每次实验的有效性室内质控品：监控检测的重复性而设置，可以是商品或自行配制绘制质控图质控图的分析及失控处理快速试剂质控内对照有效外部对照：可采用商品或自制的，不能使用ELISA的外部质控品，可用本室保留阳性样本。下列情况需做质控：更换批号、更换检测人员、更换包装、更换厂家。可能隐患：运输包装、内盒或试剂盒损伤、单包装内存在混杂物质，标签错误缺失模糊，泄露，不适宜的存放条件等等。开展条件：确认实验室-中国CDC能力验证，筛查实验室或筛查点-省级或市级能力验证。质量保证人员培训：详细了上岗培训的内容至少应包括艾滋病相关基础知识，艾滋病相关检测技术及管理要求，实验操作，质量保证和控制，生物安全明确了培训类别：上岗培训和在岗培训明确了培训的频度：复训，确证实验室每年至少一次，筛查实验室人员至少2年一次。增加了CD4和HIV病毒载量检测的质量管理质量保证标准操作程序(SOP)各级艾滋病实验室要建立覆盖主要工作内容的SOP文件应包括：1、样品的接收、登记、处理、保存和运输2、检测方法和步骤3、试剂使用和保存4、仪器的使用维护和校准5、质量控制要求及程序质量保证标准操作程序(SOP)6、结果解释与报告7、保密程序8、实验室数据、相关文件记录与保存9、不确定样品追踪和处理10、实验室安全防护及实验室的清理和消毒SOP应有标题和编号、编写和修订日期和人员姓名以及各类相关的表格等信息。质量保证实验原始记录表应按实验要求，设计实验操作原始记录表，标明空白对照、阳性对照、阴性对照、外部对照以及待检样品的位置，便于指导实验人员加样。同时应注明试剂厂家、测定方法、批号、效期、实验室环境温湿度、操作人员和复核人员姓名及检测日期。质量评价内部质量评价外部质量评价内部质量评价本实验室组织的质量评价，应定期组织，应包括样品接受、检测、包存至发出报告的各个环节。确证中心实验室应通过实验室认证认可，鼓励确证实验室或筛查实验室通过认可，或按照认可的有关条款建立质量评价机制外部质量评价职能工作考核职能工作考核：评价实验室质量保证明确了现场抽查的百分比510%列出了问卷调查的内容：省级考核至少应包括人员培训及能力，环境条件，仪器设备使用及校准，管理型文件及试验记录，检测报告，试剂使用情况，样品接受及保存情况，质量保证和质量控制。能力验证能力验证：评价实验室质量控制工作，检验实验室对未知样品获得正确结果的能力HIV诊断试剂临床质量评估通过对国内销售的国产和进口HIV诊断试剂的敏感性、特异性、批间差异和适用性进行综合质量评估，及时发现和解决试剂质量问题，为中央和地方卫生行政部门提供有关的决策依据，并作为艾滋病实验室选择试剂的依据，未参加评估的试剂一般不推荐使用。评估结果在中国CDC性病艾滋病预防控制中心网页上公布。http:/ 1 个人防护个人防护1.1 1.1 艾滋病实验室应配备艾滋病实验室应配备一次性手套、一次性口一次性手套、一次性口罩、安全防护眼镜及冲洗眼睛的装置。罩、安全防护眼镜及冲洗眼睛的装置。1.2 1.2 艾滋病实验室应配备实验室专用的艾滋病实验室应配备实验室专用的工作鞋工作鞋，鞋面覆盖足背，鞋底防滑。鞋面覆盖足背，鞋底防滑。1.3 1.3 个人保健个人保健1.3.1.3.1 高高标标准准的的个个人人保保健健对对于于减减少少感感染染的的危危险险性性很很重重要要。皮皮肤肤受受损损、患患病病都都会会增增加加感感染染的的危危险险。皮肤的任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。皮肤的任何伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。1 1 个人防护个人防护1.3.2.3.2 进进实实验验室室前前要要摘摘除除首首饰饰，修修剪剪长长的的带带刺刺的的指甲，以免刺破手套。指甲，以免刺破手套。1.3.3.3.3 进进入入实实验验室室应应穿穿隔隔离离衣衣，戴戴手手套套。如如果果接接触触物物传传染染危危险险性性大大，则则应应戴戴双双层层手手套套和和防防护护眼眼镜。镜。1.3.4 .3.4 离开实验室前必须脱去隔离衣，并洗手。离开实验室前必须脱去隔离衣，并洗手。1.3.5.3.5 严严禁禁在在艾艾滋滋病病实实验验室室内内进进食食、饮饮水水、吸吸烟烟和化妆。和化妆。2 2 实验室的安全操作实验室的安全操作2.1 2.1 在在安安排排工工作作人人员员的的实实验验室室区区域域时时，要要根根据据其其工工作作的的种种类类和和所所涉涉及及的的生生物物试试剂剂，对对实实验验室室环环境做好安全检查。境做好安全检查。2.2 2.2 进进入入实实验验室室应应穿穿隔隔离离衣衣、戴戴手手套套，必必要要时时（如如对对初初筛筛阳阳性性标标本本进进行行复复测测或或确确认认时时，或或直直接接对对HIVHIV毒毒种种进进行行操操作作时时）戴戴防防护护眼眼镜镜，以以防防污污染染暴暴露露的的皮皮肤肤和和衣衣物物。不不用用戴戴手手套套的的手手触触摸摸暴暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。2 2 实验室的安全操作实验室的安全操作2.3 2.3 如如接接触触物物传传染染性性危危险险大大，可可戴戴双双层层（两两付付）手手套套以以增增加加保保护护。操操作作时时手手套套破破损损，应应立立即即丢丢弃、洗手并戴上新手套。弃、洗手并戴上新手套。2.4 2.4 禁禁止止采采用用口口腔腔吸吸液液管管，必必须须使使用用移移液液器器来来操操作实验室的所有液体。作实验室的所有液体。2.5 2.5 操操作作中中有有标标本本、检检测测试试剂剂外外溅溅时时应应及及时时消消毒毒。对对大大量量溅溅出出的的浓浓度度高高的的传传染染物物在在清清洁洁之之前前应应先先用用1%1%次氯酸钠溶液浸泡，然后戴上手套擦净。次氯酸钠溶液浸泡，然后戴上手套擦净。2 2 实验室的安全操作实验室的安全操作2.6 2.6 工工作作完完毕毕，要要对对工工作作台台面面消消毒毒。工工作作台台面面应应当当用用0.1%0.1%0.2%0.2%次次氯氯酸酸溶溶液液消消毒毒；用用消消毒毒液液清清洗洗后要干燥后要干燥20min20min以上；以上；2.7 2.7 工工作作完完毕毕，脱脱去去手手套套后后洗洗手手，再再脱脱去去工工作作衣衣，用肥皂和流动水洗手。用肥皂和流动水洗手。2.8 2.8 血清及其它体液样品均应严格按要求妥善保血清及其它体液样品均应严格按要求妥善保存，存，HIVHIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。抗体阳性样品应做好标记单独保存。3 3 避免利器的使用避免利器的使用3.1 3.1 尽尽量量避避免免在在实实验验室室使使用用针针头头、刀刀片片、玻玻璃璃器器皿皿等等利利器器，以以防防刺刺伤伤。如如果果必必须须使使用用，在在处处理理或或清清洗洗时时应应采采取取措措施施防防止止刺刺伤伤或或划划伤伤，并并应应对对用用过过的的物物品品进进行行消消毒处理。毒处理。3.2 3.2 尽尽量量使使用用安安全全针针具具采采血血，如如蝶蝶形形真真空空针针，自自毁毁性性针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。针具等，以降低直接接触血液和刺伤的危险性。3.3 3.3 应应将将用用过过的的锐锐器器直直接接放放入入耐耐刺刺、防防渗渗漏漏的的利利器器盒盒，针针头头直直接接放放入入坚坚固固的的容容器器内内，消消毒毒后后废废弃弃。禁禁止止将将使使用用后后的的一一次次性性针针头头重重新新套套上上针针头头套套。禁禁止止用用手手直直接接接接触使用后的针头、刀片等锐器。触使用后的针头、刀片等锐器。实验室安全措施健康监护工作人员从事工作前必须进行HIV抗体（乙型肝炎丙型肝炎等肝炎病毒标记物）的检测每半年做一次HIV抗体复测，并保留血样一年以上污染物处理和意外事故处理应按实验室生物安全通用要求(GB19489-2008)和消毒技术规范（2002年版）处置。应置于专用的密封防漏容器中，经高压消毒后进行处理或废弃。一些常用的消毒方法：物理消毒、化学消毒等。意外事故处理有八项，详见规范。-职业暴露的处理局部紧急处理局部压，挤，冲，洗，消局部消毒：75%酒精，0.2%次氯酸钠，0.5%碘伏，0.2-0.5%过氧乙酸眼睛，粘膜：冲洗紧急报告向所在单位有关领导及早报告，作好处理咨询与宣传稳定情绪了解全过程后分析感染可能性提供相关知识防止传播向有关领导宣传，做好保密，妥善处理暴露者风险评估紧急处理的质量决定服药方案明确感染和措施效果谢谢您的聆听