1、第二章 造血细胞检验第一节 骨髓细胞形态检查 血细胞从原始血细胞从原始细胞逐渐发育为成熟细细胞逐渐发育为成熟细胞,具有一定的规律性。胞,具有一定的规律性。细胞体积细胞体积 细胞核细胞核 细胞质细胞质 核质比核质比 一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (一)细胞体积(一)细胞体积 原始细胞随着细胞的逐步成熟,其体积逐渐变小。原始细胞随着细胞的逐步成熟,其体积逐渐变小。但巨核细胞系例外,细胞由小变大;粒细胞中,早幼但巨核细胞系例外,细胞由小变大;粒细胞中,早幼粒细胞比原始粒细胞略大。粒细胞比原始粒细胞略大。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (二)细胞核
2、(二)细胞核 1.1.大小大小 细胞核一般由大变小,但巨核细胞由细胞核一般由大变小,但巨核细胞由小变大。小变大。2.2.核形核形 由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷,甚至甚至分叶(粒细胞、巨核细胞),但淋巴细胞和浆细分叶(粒细胞、巨核细胞),但淋巴细胞和浆细胞变化不明显,成熟红细胞核消失。胞变化不明显,成熟红细胞核消失。3.3.核质比例核质比例 一般由大逐渐变小。一般由大逐渐变小。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 4.4.核染色质及核仁核染色质及核仁 是衡量血细胞是否处于是衡量血细胞是否处于原始和幼稚阶段的重要指标之一。原始和幼稚阶段的重要
3、指标之一。5.5.核染色质核染色质 由疏松、细致到粗糙、紧密,由疏松、细致到粗糙、紧密,并浓缩成块,甚至脱核(红系)并浓缩成块,甚至脱核(红系)6.6.核膜核膜 一般由不清楚到清楚。一般由不清楚到清楚。7.7.核仁核仁 由清晰到模糊,最后消失。由清晰到模糊,最后消失。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (三)细胞质(三)细胞质 1.1.胞质量胞质量 由少逐渐增多,但淋巴细胞系例由少逐渐增多,但淋巴细胞系例外。外。2.2.胞质颜色胞质颜色 从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡红色(粉红色),淋巴细胞仍保持淡蓝色(嗜红色(粉红色),淋巴细胞仍保持淡蓝色
4、(嗜碱性)。碱性)。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律 3.3.胞质颗粒胞质颗粒 从无到有,由少到多。粒细胞从无到有,由少到多。粒细胞系的颗粒由非特异性到特异性,可分为嗜酸性、系的颗粒由非特异性到特异性,可分为嗜酸性、嗜碱性、中性三种颗粒。红细胞无颗粒。嗜碱性、中性三种颗粒。红细胞无颗粒。(四)核质比(四)核质比 一般由大变小。一般由大变小。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验骨髓中血细胞共骨髓中血细胞共分六个系统分六个系统粒细胞系粒细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段早幼早幼中幼中幼晚幼晚幼成熟阶段成熟阶段红细胞系红细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶
5、段幼稚阶段早幼早幼中幼中幼晚幼晚幼成熟阶段成熟阶段巨核细胞系巨核细胞系淋巴细胞系淋巴细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段单核细胞系单核细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段浆细胞系浆细胞系原始阶段原始阶段幼稚阶段幼稚阶段成熟阶段成熟阶段一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验血血细胞胞发育演育演变规律律图二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原始粒细胞原始粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞中性分叶核粒细胞中性中幼粒中性中幼粒中性晚幼粒中性晚幼粒中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞
6、形态特征原红细胞原红细胞中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞早幼红细胞早幼红细胞成熟红细胞成熟红细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原淋巴细胞原淋巴细胞幼淋巴细胞幼淋巴细胞 淋巴细胞淋巴细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原巨核细胞原巨核细胞幼巨核细胞幼巨核细胞颗粒巨核细胞颗粒巨核细胞产血小板巨核细胞产血小板巨核细胞血小板血小板二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原单核细胞原单核细胞幼单核细胞幼单核细胞单核细胞单核细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原浆细胞原浆细胞幼浆细胞幼浆细胞浆细胞浆细胞第二章 造血细胞检验 三、骨髓
7、中类似细胞的鉴别 骨髓中有许多相似的细胞,分类时存在着一定骨髓中有许多相似的细胞,分类时存在着一定困难,在熟练掌握各种细胞形态的基础上,重点困难,在熟练掌握各种细胞形态的基础上,重点把握它们的区别要点,才能正确划分其归属。把握它们的区别要点,才能正确划分其归属。第二章 造血细胞检验原始粒原始粒细胞胞原始原始红细胞胞胞体胞体1018微米1520微米,可见瘤状突起胞胞浆透明,天蓝色不透名,深蓝色,有油画感,核周有淡染区染色染色质细砂粒状,均匀平坦如薄纱粗颗粒状,不均匀核膜核膜不清楚清楚核仁核仁25个,较小,清晰12个,较大,界限不清(一)原始粒细胞与原始红细胞的鉴别(一)原始粒细胞与原始红细胞的鉴
8、别 三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验原始红原始红 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(二)原始粒细胞、原始淋巴细胞、原始单核细胞的鉴别原始粒细胞原始粒细胞原始淋巴细胞原始淋巴细胞原始单核细胞原始单核细胞胞体胞体1018微米,圆形较规则1018微米,圆形规则1520微米,圆形或不规则形,有伪足样突起胞浆胞浆天蓝色,透明天蓝色,透明,有核周淡染区灰蓝色,不透明核型核型圆形或椭圆形圆形或椭圆形圆形或不规则形,有折叠纤细网状染色质染色质细致的砂粒状,平坦,如薄纱颗粒状,稍粗纤细网状核膜核膜不清楚核膜浓厚,界限不清不清楚核仁核仁25个,较小,清晰12个,小而
9、明显13个,大而清晰 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验原始淋巴细胞原始淋巴细胞第二章 造血细胞检验(三)单核细胞与中性中幼粒细胞的鉴别单核核细胞胞中性中幼粒中性中幼粒细胞胞胞体胞体圆形或不规则形,可见伪足圆形,规则胞胞浆灰蓝,半透明,含无数散在粉尘样嗜天青颗粒,有时可见空泡淡红或淡蓝,透明,含中等量、大小较一致的特异性中性颗粒胞核胞核不规则,可呈肾形、马蹄形、S形或分叶形,有明显的扭曲、折叠椭圆或一侧开始扁平,可出现凹陷染色染色质粗网状,疏松聚集成索块 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类
10、似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(四)中幼红细胞、浆细胞、淋巴细胞鉴别中幼红细胞中幼红细胞浆细胞浆细胞淋巴细胞淋巴细胞胞体胞体圆形椭圆形圆形胞浆胞浆嗜多色性,不透明,无颗粒蓝色,不透明有泡沫感,有时可见红色镶边,边缘不规则,近核处有淡染区,常有空泡,可见颗粒天蓝色,透明,有核周淡染区,可见颗粒胞核胞核圆形,居中圆形或椭圆形,常偏位圆形,常偏一侧,有切迹染色质染色质粗密成块,如打碎的墨砚,中间有明显空隙,无色泽极粗密,凝成大块,似车轮状,中间有明显空隙,有色
11、泽呈大块状,块与块之间无明显界限,有均匀光滑感 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验中幼红细胞中幼红细胞淋巴细胞淋巴细胞 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(五五)形态上不典型细胞的划分形态上不典型细胞的划分 造血细胞的发育是连续不断的过程,其阶段造血细胞的发育是连续不断的过程,其阶段划分是人为的,可见到介于两个阶段之间的划分是人为的,可见到介于两个阶段之间的“过过渡型渡型”细胞。细胞。通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步的,但通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步的,但有时也可能速度不同,称为有时也可能速度不同,称为“核浆发育不平衡
12、核浆发育不平衡”。三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验一般认为无论胞核或胞质,凡出现下一阶一般认为无论胞核或胞质,凡出现下一阶段特征的细胞,应归为较成熟阶段的细胞。段特征的细胞,应归为较成熟阶段的细胞。极难鉴别介于两个系统之间的细胞,在正极难鉴别介于两个系统之间的细胞,在正常情况下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细常情况下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细胞,可划分为红细胞系;介于淋巴细胞与幼稚胞,可划分为红细胞系;介于淋巴细胞与幼稚红细胞之间的细胞,在骨髓中归为红细胞系,红细胞之间的细胞,在骨髓中归为红细胞系,在外周血则归为淋巴细胞。在外周血则归为淋巴细胞。三、骨
13、髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验对于实在难以确定类型的细胞,可列入对于实在难以确定类型的细胞,可列入“分分类不明细胞类不明细胞”,出现较多时,可通过电镜、细胞,出现较多时,可通过电镜、细胞化学染色、免疫学等方法鉴别。化学染色、免疫学等方法鉴别。血细胞的形态受涂片制备和染色的影响血细胞的形态受涂片制备和染色的影响较大,在识别细胞时须与同一张涂片上的其他细较大,在识别细胞时须与同一张涂片上的其他细胞比较,切不可把单个细胞孤立起来,或机械地胞比较,切不可把单个细胞孤立起来,或机械地与图谱上典型的细胞进行比较,应根据细胞各方与图谱上典型的细胞进行比较,应根据细胞各方面的特
14、征全面综合分析,不可单凭个别特征下结面的特征全面综合分析,不可单凭个别特征下结论论。三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验第二节 骨髓细胞形态学检查概述概述标本采标本采集集骨髓涂骨髓涂片染色片染色骨髓细骨髓细胞检查胞检查正常骨正常骨髓象髓象骨髓象骨髓象分析分析骨髓象骨髓象检查检查一、概述一、概述(一)适应证和禁忌证(一)适应证和禁忌证 .适应证适应证 包括贫血、出血、白血病;包括贫血、出血、白血病;全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚细胞、考虑血液全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚细胞、考虑血液寄生虫病(如黑热病、疟疾等)、骨髓转移瘤和异常蛋白寄生虫病(如黑热病、疟疾等
15、)、骨髓转移瘤和异常蛋白血症等;血症等;不明原因的发热,肝、脾、淋巴结肿大,胸骨压痛、恶不明原因的发热,肝、脾、淋巴结肿大,胸骨压痛、恶病质。病质。凡遇上述情况之一,都可进行骨髓穿刺,以前三种最为常见。凡遇上述情况之一,都可进行骨髓穿刺,以前三种最为常见。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述.禁忌证禁忌证 严重出血的血友病患者,禁忌作骨髓穿刺;严重出血的血友病患者,禁忌作骨髓穿刺;晚期孕妇慎做;晚期孕妇慎做;小儿及不合作者不宜作胸骨穿刺。小儿及不合作者不宜作胸骨穿刺。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述临床应用临床应用明确性诊断明确性诊断 符合性诊断符合性诊断 提示性诊断提示性诊断 排除性诊断
16、排除性诊断 第二章 造血细胞检验二、标本采集(一)骨髓取材的部位(一)骨髓取材的部位 首选髂骨,其次是胸骨、棘突首选髂骨,其次是胸骨、棘突 。由于胸骨穿。由于胸骨穿刺有一定的危险性,故首选髂前或髂后上棘。刺有一定的危险性,故首选髂前或髂后上棘。2 2岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。必必要要时时应应多多部部位位取取材材,以以便便全全面面了了解解骨骨髓髓的的造血情况。造血情况。二、标本采集(二)(二)常见骨髓穿刺部位的特点常见骨髓穿刺部位的特点 穿刺部位特 点髂后上棘此部位骨质薄,进针容易,骨髓液丰富,被血液稀释的可能性小,故髂后上棘为临床上首选的穿刺部位髂前上棘此部位
17、骨质硬、骨髓腔小,易导致穿刺失败,所以髂前上棘常用于翻身困难、需多部位穿刺等患者胸骨胸骨是人体骨髓造血功能最旺盛的部位,但胸骨后有重要脏器,故临床上不常用。当其他常规部位穿刺取材不佳时,可考虑胸骨穿刺,但必须由操作经验丰富的人员来做其他部位小于2岁患者还可选择胫骨头内侧。其他还包括腰椎棘突穿刺、定位穿刺。定位穿刺临床上常用于骨髓转移癌、浆细胞瘤等第二章 造血细胞检验例:骼后上棘穿刺术例:骼后上棘穿刺术 患患者者侧侧卧卧,其其上上面面的的腿腿向向胸胸部部弯弯曲曲,下下面面的的腿腿伸伸直直,使使腰腰骸骸部部向向后后突突出出,髂髂后后上上棘棘明明显显突突出出于于臀臀部部之之上上。也也可可在在相相当当
18、于于第第5 5腰腰椎椎水水平平,向向上上约约3 3cmcm,用用手手触触摸摸其其钝钝圆圆形形突突起处。此处骨密质薄,骨髓腔大,容易刺入。起处。此处骨密质薄,骨髓腔大,容易刺入。用用碘碘酒酒、酒酒精精消消毒毒局局部部,戴戴消消毒毒手手套套,将将孔孔布布的的孔孔口对准并盖于已消毒的穿刺部位。口对准并盖于已消毒的穿刺部位。注注射射2%2%的的普普鲁鲁卡卡因因1 12 2m1m1,麻麻醉醉局局部部皮皮肤肤、皮皮下下组组织并深至骨膜,揉摩注射处,使药液扩大麻醉范围。织并深至骨膜,揉摩注射处,使药液扩大麻醉范围。二、标本采集 以以左左手手拇拇指指和和食食指指将将穿穿刺刺部部位位的的皮皮肤肤压压紧紧固固定定
19、,右右手手持持穿穿刺刺针针与与骨骨棘棘面面垂垂直直,旋旋转转刺刺入入髂髂后后上上棘棘,达达骨骨髓髓腔腔时有空松感,深度约为针头达骨膜后再刺入时有空松感,深度约为针头达骨膜后再刺入l cml cm左右。左右。拔拔出出针针芯芯,接接l0 l0 mlml干干燥燥注注射射器器,轻轻轻轻负负压压抽抽取取,抽抽取骨髓液不超过取骨髓液不超过0.20.2mlml,立即置载玻片上,并涂片。立即置载玻片上,并涂片。必必要要时时再再取取骨骨髓髓液液0.50.52 2m1m1,置置肝肝素素抗抗凝凝管管内内,作作有核细胞计数等项检查。有核细胞计数等项检查。拔出穿刺针,压迫伤口,敷以消毒纱布。拔出穿刺针,压迫伤口,敷以消
20、毒纱布。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 骨髓取材满意的指标:骨髓取材满意的指标:(1)(1)抽吸骨髓时,病人有特殊的酸痛感。抽吸骨髓时,病人有特殊的酸痛感。(2)(2)骨髓液抽取应在骨髓液抽取应在0.20.2mlml以内,否则易于稀释。以内,否则易于稀释。(3)(3)骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。(4)(4)显显微微镜镜检检查查,可可见见骨骨髓髓的的特特有有细细胞胞,如如巨巨核核细细胞胞、浆浆细细胞胞、组组织织细细胞胞、组组织织嗜嗜碱碱细细胞胞、成成骨骨细细胞、破骨细胞等。胞、破骨细胞等。(5)(5)髓髓细细胞胞分分类类,中中性性杆杆状状核核粒粒细细胞胞与
21、与分分叶叶核核粒粒细胞之比大于血涂片。细胞之比大于血涂片。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 取材失败取材失败 部部分分稀稀释释:骨骨髓髓有有核核细细胞胞减减少少,成成熟熟细细胞胞比例增加。比例增加。完全稀释:无骨髓成分,与血片一样。完全稀释:无骨髓成分,与血片一样。二、标本采集 第二章 造血细胞检验骨髓穿刺一般由临床医生操作,其注意事项如下:骨髓穿刺一般由临床医生操作,其注意事项如下:.严严格格无无菌菌,预预防防感感染染。初初诊诊患患者者于于治治疗疗前前作作骨骨髓髓穿穿刺刺以以明明确确诊诊断断。死死亡亡病病例例需需检检查查时时,应应在在死死亡亡半半小小时时内内进进行。行。.抽抽吸吸骨骨髓髓液
22、液时时动动作作要要缓缓慢慢,吸吸取取量量以以0.10.10.20.2m1m1为为宜宜,抽抽吸吸骨骨髓髓液液用用力力过过大大、过过快快,易易使使骨骨髓髓抽抽吸吸量量过过多多(0.20.2m1m1)造造成成稀稀释释。需需做做有有核核细细胞胞计计数数、细细菌菌培培养养、造造血血细细胞胞培培养养、红红斑斑狼狼疮疮细细胞胞检检查查时时,再再抽抽吸吸0.50.52.0 2.0 m1m1骨髓液肝素抗凝送检。骨髓液肝素抗凝送检。(三)(三)标本采集的质量保证标本采集的质量保证二、标本采集 第二章 造血细胞检验 .多多部部位位穿穿刺刺可可提提高高某某些些疾疾病病的的诊诊断断率率。如如慢慢性性再再障障、恶恶性性组
23、组织织细细胞胞病病等等,多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤、转转移移癌癌等等宜宜在在X X线线检检查查发发现现有有病病变变或或有有骨骨压压痛痛的的部部位位穿穿刺刺,可提高阳性率。可提高阳性率。二、标本采集 第二章 造血细胞检验干抽(干抽(dry tapdry tap)是指非技术操作或穿刺不是指非技术操作或穿刺不当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于:当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于:.原发性和继发性骨髓纤维化症。原发性和继发性骨髓纤维化症。.骨骨髓髓极极度度增增生生,细细胞胞过过于于紧紧密密结结实实,如如白白血病、真性红细胞增多症等。血病、真性红细胞增多症等。.骨髓增生减低,如再生障碍性贫血。
24、骨髓增生减低,如再生障碍性贫血。.肿肿瘤瘤骨骨髓髓浸浸润润,包包括括恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤、多多发发性性骨髓瘤、骨髓转移癌。骨髓瘤、骨髓转移癌。(四)干抽(四)干抽二、标本采集 第二章 造血细胞检验当发生干抽时,有时在针头中可有少量骨髓当发生干抽时,有时在针头中可有少量骨髓组织,如用针心将其推出,可制作一张涂片供检组织,如用针心将其推出,可制作一张涂片供检查。一般可更换部位再行穿刺,部分病例(如骨查。一般可更换部位再行穿刺,部分病例(如骨髓纤维化)必须作骨髓活检。髓纤维化)必须作骨髓活检。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 三、骨髓涂片、染色及其质量保证 骨髓涂片及染色方法,与血涂片基本相同,骨
25、髓涂片及染色方法,与血涂片基本相同,但含有骨髓小粒和脂肪,有核细胞数量多,较血但含有骨髓小粒和脂肪,有核细胞数量多,较血液浓稠,推片时角度要略小,速度要慢,涂片过液浓稠,推片时角度要略小,速度要慢,涂片过厚可影响细胞形态观察。厚可影响细胞形态观察。第二章 造血细胞检验 骨髓涂片和染色的注意事项:骨髓涂片和染色的注意事项:1.1.载玻片要洁净。载玻片要洁净。2.2.推玻片与载玻片之间成推玻片与载玻片之间成3030角为宜,角度越小,推片速角为宜,角度越小,推片速度越慢,骨髓涂片越薄。度越慢,骨髓涂片越薄。3.3.抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含骨髓小粒多抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含
26、骨髓小粒多的标本作涂片效果更佳。的标本作涂片效果更佳。4.4.涂片一般不用抗凝剂。涂片一般不用抗凝剂。5.5.体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。6.6.涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,不能用火烤。涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,不能用火烤。三、骨髓涂片、染色及其质量保证 第二章 造血细胞检验7.7.骨髓中有核细胞较多,涂片固定和染色时间骨髓中有核细胞较多,涂片固定和染色时间较血涂片稍长,以保证幼稚细胞着色均匀,结构清较血涂片稍长,以保证幼稚细胞着色均匀,结构清晰。染色时间的长短与气温、染料的性质有关。晰。染色时间的长短与气温、染料的性质有关。8.8
27、.若染色太浅,可于涂片干燥后重染;染色过深若染色太浅,可于涂片干燥后重染;染色过深或有沉淀物,可滴加甲醇数滴,稍停后冲洗。或有沉淀物,可滴加甲醇数滴,稍停后冲洗。9.9.制备的骨髓涂片宜全部送检,供染色选择、血制备的骨髓涂片宜全部送检,供染色选择、血细胞化学染色或会诊用,送骨髓涂片的同时最好送细胞化学染色或会诊用,送骨髓涂片的同时最好送血涂片。血涂片。三、骨髓涂片、染色及其质量保证 第二章 造血细胞检验四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查骨髓细胞检查骨髓细胞检查骨髓涂片检查骨髓涂片检查血涂片检查血涂片检查填报告单填报告单标本保存与资料标本保存与资料存档存档第二章 造血细胞检验(一)(一
28、)骨髓涂片检查骨髓涂片检查 1.1.低倍镜观察低倍镜观察 (1)(1)观察取材、涂片、染色情况是否满意。观察取材、涂片、染色情况是否满意。(2)(2)判判断断有有核核细细胞胞的的增增生生程程度度。低低倍倍镜镜下下选选择择细细胞胞分分布布均均匀匀处处,根根据据骨骨髓髓片片中中有有核核细细胞胞的的密密度度或或有有核核细细胞胞与与成成熟熟红红细细胞胞的的比比例例估估计计骨骨髓髓有有核核细胞的增生程度。细胞的增生程度。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验增生极度活跃:增生极度活跃:1 1:1 1 500500个有核细胞个有核细胞 各种白血病各种白血病 增生明显活跃:增生明显
29、活跃:1 1:10 20010 200500 500 白血病白血病 、增生性贫血、增生性贫血 增生活跃:增生活跃:1 1:20 2020 20200 200 正常骨髓象、某些贫血正常骨髓象、某些贫血 增生低下:增生低下:1 1:50 350 320 20 造血功能低下造血功能低下 增生极度低下:增生极度低下:1 1:200 200 3 3 再生障碍性贫血再生障碍性贫血 骨髓有核细胞增生程度五级分类法骨髓有核细胞增生程度五级分类法有核细胞有核细胞增生程度增生程度 有核细胞有核细胞/成熟红细胞成熟红细胞 平均低倍视野平均低倍视野有核细胞数有核细胞数常见病例常见病例四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞
30、形态学检查第二章 造血细胞检验增生极度低下增生极度低下增生低下增生低下增生极度活跃增生极度活跃增生明显活跃增生明显活跃增生活跃增生活跃第二章 造血细胞检验 (3)(3)巨核细胞的计数及分类:巨核细胞的计数及分类:低倍镜下观察并计数全片巨核细胞总数,如低倍镜下观察并计数全片巨核细胞总数,如将骨髓膜标准化为将骨髓膜标准化为1.5cm3.0c1.5cm3.0c,则巨核细胞参则巨核细胞参考值为考值为7 73535个。个。血小板减少性紫癜或其他原因引起血小板减少血小板减少性紫癜或其他原因引起血小板减少时,应进行巨核细胞分类,以油镜确定巨核细胞时,应进行巨核细胞分类,以油镜确定巨核细胞的阶段,分类至少观察
31、的阶段,分类至少观察2525个巨核细胞,求出巨核个巨核细胞,求出巨核细胞各阶段百分率。细胞各阶段百分率。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 (4)(4)观察骨髓涂片边缘和尾部,注意寻找有观察骨髓涂片边缘和尾部,注意寻找有无体积较大散在或成堆出现的特殊病理细胞无体积较大散在或成堆出现的特殊病理细胞:如如转移癌细胞、恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼转移癌细胞、恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼曼-匹克细胞、但需油镜观察加以确证。这些细匹克细胞、但需油镜观察加以确证。这些细胞的发现,对有关疾病的诊断具有肯定意义。胞的发现,对有关疾病的诊断具有肯定意义。四、骨髓细胞形态学检查四、
32、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 2.2.油镜观察油镜观察 (1)(1)骨骨髓髓细细胞胞分分类类先先浏浏览览一一下下各各类类细细胞胞的的形形态态特点,再进行细胞分类。特点,再进行细胞分类。白白血血病病细细胞胞形形态态学学不不容容易易识识别别时时,可可先先染染组组织织化化学学协协助助诊诊断断,然然后后再再进进行行细细胞胞分分类类。如如有有的的标标本本形形态态学学不不典典型型时时,先先分分类类,再再结结合合临临床床综综合合分分析析,描述骨髓形态学特点。描述骨髓形态学特点。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 (2)(2)骨髓细胞分类先浏览该涂片上各类细胞的形态骨髓
33、细胞分类先浏览该涂片上各类细胞的形态特点,看是否容易识别;然后分类,要求计数特点,看是否容易识别;然后分类,要求计数200200或或500500个有核细胞个有核细胞;巨核细胞、破碎细胞、分裂相细胞巨核细胞、破碎细胞、分裂相细胞不计数在有核细胞百分比内,对巨核细胞单独进行不计数在有核细胞百分比内,对巨核细胞单独进行计数和分类计数和分类 ;按各细胞的种类、发育阶段分别记录,;按各细胞的种类、发育阶段分别记录,并计算出百分比值。并计算出百分比值。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 (3)(3)各细胞系形态学观察各细胞系形态学观察 仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常,
34、例如:仔细观察各系、各阶段细胞的形态是否正常,例如:1 1)粒细胞系统:)粒细胞系统:粒细胞的增生情况,各阶段细胞所占的比例,各期粒细胞的粒细胞的增生情况,各阶段细胞所占的比例,各期粒细胞的大小形态、核形、有无双核粒细胞、核浆发育不平衡现象、大小形态、核形、有无双核粒细胞、核浆发育不平衡现象、成熟粒细胞有无分叶过多或过少。成熟粒细胞有无分叶过多或过少。细胞核染色质结构;核仁大小、数量;胞质量的多少,颜色细胞核染色质结构;核仁大小、数量;胞质量的多少,颜色深浅;颗粒的多少,有无中毒性颗粒及空泡变化。深浅;颗粒的多少,有无中毒性颗粒及空泡变化。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造
35、血细胞检验2)红细胞系统:红细胞系统:各期幼红细胞的增生情况,各阶段幼红细胞所占的比例,各期幼红细胞的增生情况,各阶段幼红细胞所占的比例,幼红细胞的大小形态,有无巨幼红细胞、核形异常(双核、幼红细胞的大小形态,有无巨幼红细胞、核形异常(双核、多核、畸形核、核碎裂、核固缩、核浆发育不平衡)。多核、畸形核、核碎裂、核固缩、核浆发育不平衡)。细胞核染色质结构,有无核仁及数量。细胞核染色质结构,有无核仁及数量。胞质量、颜色、有无包涵物(豪胞质量、颜色、有无包涵物(豪-焦氏小体、嗜碱性点彩)焦氏小体、嗜碱性点彩)。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 成熟红细胞的大小形态,有
36、无异常红细胞,成熟红细胞的大小形态,有无异常红细胞,如球形、椭圆形、镰刀形、靶形、盔形、三角形、如球形、椭圆形、镰刀形、靶形、盔形、三角形、棘形、泪滴样、大红细胞、多色性红细胞、嗜碱棘形、泪滴样、大红细胞、多色性红细胞、嗜碱性点彩红细胞、卡波环等。性点彩红细胞、卡波环等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验3)巨核细胞系统:)巨核细胞系统:全片巨核细胞的数量,各阶段细胞的比例,有无成全片巨核细胞的数量,各阶段细胞的比例,有无成熟障碍现象,有无病理性改变,如微小巨核细胞、小巨核熟障碍现象,有无病理性改变,如微小巨核细胞、小巨核细胞、单圆核巨核细胞、多核巨核细胞。细胞、
37、单圆核巨核细胞、多核巨核细胞。同时观察血小板的数量、大小形态,是成簇还是散在,同时观察血小板的数量、大小形态,是成簇还是散在,有无巨大血小板,畸形血小板。有无巨大血小板,畸形血小板。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验4)其他细胞系:其他细胞系:如单核细胞、淋巴细胞、浆细胞系统及其他如单核细胞、淋巴细胞、浆细胞系统及其他细胞:该类细胞占有核细胞的比例,细胞形态有细胞:该类细胞占有核细胞的比例,细胞形态有无异常,有无原、幼阶段的细胞。如疾病与这类无异常,有无原、幼阶段的细胞。如疾病与这类细胞无相关性,可作简要描述,如有相关性要作细胞无相关性,可作简要描述,如有相关性要
38、作为重点进行描述。为重点进行描述。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 5 5)有无特殊细胞、特殊病理细胞:如恶)有无特殊细胞、特殊病理细胞:如恶性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼性组织细胞、戈谢氏细胞、尼曼-匹克细胞、匹克细胞、转移性肿瘤细胞、恶性淋巴瘤细胞。转移性肿瘤细胞、恶性淋巴瘤细胞。6 6)有无寄生虫。)有无寄生虫。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查(二)血涂片检查二)血涂片检查 1 1血涂片染色血涂片染色 2 2血涂片分类血涂片分类 在染色良好的血涂片体尾交界处在染色良好的血涂片体尾交界处分类至少分类至少100100个白细胞,同时注意观察各种细胞个白
39、细胞,同时注意观察各种细胞(包括红细胞和血小板)的形态,还要观察血涂(包括红细胞和血小板)的形态,还要观察血涂片的其他部位片的其他部位 3.3.计算计算 计算各类各阶段细胞的相对含量计算各类各阶段细胞的相对含量 4.4.血涂片特征描述血涂片特征描述 一般要描述血涂片中各类细一般要描述血涂片中各类细胞的数量、大小、形态、染色及结构有无异常,胞的数量、大小、形态、染色及结构有无异常,血小板的分布,有无寄生虫及其他异常细胞等。血小板的分布,有无寄生虫及其他异常细胞等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查 5.5.血涂片观察的内容血涂片观察的内容 (1)(1)粒细胞:观察中性杆状核粒细胞、分叶
40、核粒细胞:观察中性杆状核粒细胞、分叶核粒细胞,嗜酸性和嗜碱性粒细胞的数量及形态粒细胞,嗜酸性和嗜碱性粒细胞的数量及形态(包括胞体、胞核及胞质),注意有无原始粒细(包括胞体、胞核及胞质),注意有无原始粒细胞、幼稚粒细胞,粒细胞分叶过多或过少、双核、胞、幼稚粒细胞,粒细胞分叶过多或过少、双核、巨幼样变,粒细胞毒性改变及棒状小体等。巨幼样变,粒细胞毒性改变及棒状小体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查 5.5.血涂片观察的内容血涂片观察的内容 (2)(2)红细胞:观察红细胞的大小、形态、染色红细胞:观察红细胞的大小、形态、染色和结构变化,如有无大红细胞、小红细胞、球形和结构变化,如有无大
41、红细胞、小红细胞、球形红细胞、靶形红细胞、嗜多色性红细胞、有核红红细胞、靶形红细胞、嗜多色性红细胞、有核红细胞、嗜碱性点彩红细胞、卡博环和豪周小体等。细胞、嗜碱性点彩红细胞、卡博环和豪周小体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查 (3)3)淋巴细胞淋巴细胞:观察淋巴细胞数量及形态,有无观察淋巴细胞数量及形态,有无原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞及异型淋巴细胞等。原始淋巴细胞、幼稚淋巴细胞及异型淋巴细胞等。(4)(4)单核细胞单核细胞:观察单核细胞数量及形态,注意观察单核细胞数量及形态,注意有无原始、幼稚单核细胞和棒状小体等。有无原始、幼稚单核细胞和棒状小体等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓
42、细胞形态学检查 (5)(5)血小板血小板:观察血小板数量、大小、形状、染观察血小板数量、大小、形状、染色和分布等,尤其注意有无大血小板、巨大血小色和分布等,尤其注意有无大血小板、巨大血小板、畸形血小板和巨核细胞等。板、畸形血小板和巨核细胞等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查 (6)(6)浆细胞浆细胞:观察浆细胞数量及形态,注意有无观察浆细胞数量及形态,注意有无原始、幼稚浆细胞等。原始、幼稚浆细胞等。(7)(7)其他其他:有无寄生虫及其他明显异常细胞,例有无寄生虫及其他明显异常细胞,例如疟原虫、恶性组织细胞、恶性淋巴瘤细胞、吞如疟原虫、恶性组织细胞、恶性淋巴瘤细胞、吞噬细胞等。噬细胞
43、等。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查血象和骨髓血象和骨髓血象和骨髓血象和骨髓象的关系象的关系象的关系象的关系骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象相似而血象有区别骨髓象变化不显著而血象有显骨髓象变化不显著而血象有显骨髓象变化不显著而血象有显骨髓象变化不显著而血象有显著异常著异常著异常著异常 骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似骨髓象有区别而血象相似 骨髓象有显著异常而血象变化骨髓象有显著异常而血象变化骨髓象有显著异常而血象变化骨髓象有显著异常而血象变化不显著不显著不显著不显著血象中细胞较骨髓中的细胞成血象中细胞较骨髓中
44、的细胞成血象中细胞较骨髓中的细胞成血象中细胞较骨髓中的细胞成熟熟熟熟四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验(三)骨髓细(三)骨髓细胞学检查报告胞学检查报告单的填写单的填写填写的主填写的主填写的主填写的主要内容要内容要内容要内容患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨患者基本信息及本次骨髓涂片号、骨髓穿刺部位、穿刺时间和临床诊断等髓穿刺部位、穿刺时间和临床诊断等髓穿刺部位、穿刺时间和临床诊断等髓穿刺部位、穿刺时间和临床诊断等填写骨髓涂片取材、制备和染色情况填写骨髓涂片取材、制备和染色情况填写骨髓涂片取材、制备和染色
45、情况填写骨髓涂片取材、制备和染色情况填写骨髓增生程度、粒红比值及各阶填写骨髓增生程度、粒红比值及各阶填写骨髓增生程度、粒红比值及各阶填写骨髓增生程度、粒红比值及各阶段细胞百分比等段细胞百分比等段细胞百分比等段细胞百分比等文字描述:包括骨髓涂片、血涂片及文字描述:包括骨髓涂片、血涂片及文字描述:包括骨髓涂片、血涂片及文字描述:包括骨髓涂片、血涂片及细胞化学染色三部分内容细胞化学染色三部分内容细胞化学染色三部分内容细胞化学染色三部分内容填写诊断意见及建议填写诊断意见及建议填写诊断意见及建议填写诊断意见及建议填写报告日期并签名填写报告日期并签名填写报告日期并签名填写报告日期并签名四、骨髓细胞形态学检
46、查四、骨髓细胞形态学检查骨骨髓髓细细胞胞检检查查申申请请书书 123456 200915410张 三2009-12-31 14:001212123654儿科李 四652401王 五第二章 造血细胞检验(四)骨髓标本的保存和资料存档 骨髓标本的保存和存档是一项非常重要的工作,骨髓标本的保存和存档是一项非常重要的工作,必须认真做好。必须认真做好。(1)(1)骨髓涂片后,首先要登记编号,可以按年度连续编骨髓涂片后,首先要登记编号,可以按年度连续编号。登记项目必须完整,除编号外,还应有病人姓名、性号。登记项目必须完整,除编号外,还应有病人姓名、性别、年龄、病历号、床号、骨髓采集部位及时间、次数、别、年
47、龄、病历号、床号、骨髓采集部位及时间、次数、临床诊断及形态学诊断意见。可以将图文记录输入计算机,临床诊断及形态学诊断意见。可以将图文记录输入计算机,以长期保存及随时调用。以长期保存及随时调用。(2)(2)涂片后要立即固定染色,最晚不能超过涂片后要立即固定染色,最晚不能超过24h24h,以防,以防细胞皱缩、变性,脱落。细胞皱缩、变性,脱落。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 (3)(3)填写细胞形态学报告单应一式两份,填写细胞形态学报告单应一式两份,其中一份附申请单后,按年度编号输入电脑存档。其中一份附申请单后,按年度编号输入电脑存档。(4)(4)如外借标本,用后应
48、及时追回。如外借标本,用后应及时追回。(5)(5)需投寄会诊时,应妥为包装防止损坏。需投寄会诊时,应妥为包装防止损坏。(6)(6)加镜油后的标本,务必用二甲苯将镜油洗脱加镜油后的标本,务必用二甲苯将镜油洗脱干净,不得遗留油迹,否则易于褪色或弄脏。干净,不得遗留油迹,否则易于褪色或弄脏。(7)(7)编号归档时,玻片之间应有一定间隙,最好编号归档时,玻片之间应有一定间隙,最好以薄纸袋装好玻片。以薄纸袋装好玻片。四、骨髓细胞形态学检查四、骨髓细胞形态学检查第二章 造血细胞检验 五、正常骨髓象五、正常骨髓象 (一)正常骨髓象应具备四个条件(一)正常骨髓象应具备四个条件 1.1.有核细胞增生活跃。有核细
49、胞增生活跃。2.2.各系、各阶段细胞占有核细胞的比例大致各系、各阶段细胞占有核细胞的比例大致在正常参考范围内。在正常参考范围内。3.3.各系、各阶段细胞形态无明显异常。各系、各阶段细胞形态无明显异常。4.4.无特殊病理细胞及血液寄生虫。无特殊病理细胞及血液寄生虫。第二章 造血细胞检验(二)正常成人骨髓象的特征(二)正常成人骨髓象的特征 1.1.骨髓增生活跃,粒红比值为骨髓增生活跃,粒红比值为2 24:14:1。2.2.粒粒细细胞胞系系 在在骨骨髓髓全全部部有有核核细细胞胞中中占占最最大大比比例例,约约1/21/2左左右右(40%40%60%60%),原原粒粒2%2%,早早粒粒5%5%,以以下下
50、各各阶阶段段细细胞胞依依次次增增多多,但但分分叶叶核核少少于于杆杆状状核核。嗜嗜酸酸性性粒粒细细胞胞一一般般小小于于5%5%,嗜嗜碱碱性性粒粒细胞细胞1 1。各阶段细胞形态无异常。各阶段细胞形态无异常。五、正常骨髓象五、正常骨髓象第二章 造血细胞检验3.3.红红细细胞胞系系 幼幼红红细细胞胞占占全全部部有有核核细细胞胞的的1/51/5左左右右(20%20%25%25%),原原红红1%1%,早早红红3%3%,中中红红、晚红约各占晚红约各占10%10%。幼稚和成熟红细胞形态无异常。幼稚和成熟红细胞形态无异常。4.4.巨巨核核细细胞胞系系 通通常常在在一一张张1.5cm3cm1.5cm3cm骨骨髓髓