大肠埃希菌的临床微生物检验分析.pdf

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 收稿日期：2023 年 12 月 21 日 作者简介：张平（1980），女，汉族，河北石家庄人，本科，主管检验师，研究方向为微生物检验。-16-大肠埃希菌的临床微生物检验分析 张 平 石家庄市藁城中西医结合医院，河北 石家庄 052160 摘要：摘要：目的 分析大肠埃希菌临床微生物检验。方法 选取医院微生物检验 100 例样本为对象，进行大肠埃希菌检验，并分析结果。结果 经检验得出，本次检验样本中共检查出 41 例大肠埃希菌，检出率 41.0%。结论 在临床上大肠埃希菌是导致病人肠道内外不同程度感染的主要致病细菌，大肠埃希菌可导致病人肠道内外不同程度的炎症反应，经常会造成泌尿系统感染、腹泻等疾病，在临床中，应该将有关检验工作进行严格落实，这样才能为临床医师对疾病的诊治提供一定的参考。关键词：关键词：大肠埃希菌；微生物检验；结果分析 中图分类号：中图分类号：R44 如今，由于外界环境持续变化，微生物数量越来越多，并且由于各种原因，这些微生物繁衍速度越来越快且越来越强大。在这样的情况下，各种疾病的发病率会逐渐增高，并给患者带来一定的痛苦。因为细菌性的感染，会极大影响患者的治疗与恢复，使患者的恢复时间延长，甚至有可能危及患者的生命。这时候可以通过抗生素来对症治疗，不过有的药物长期服用，会导致某些细菌产生耐药性，这样就会影响到用药的效果，还会影响患者的治疗。比如大肠埃希菌，作为比较常见的一种微生物，在临床中也被叫作是大肠杆菌，主要隶属在肠杆菌科埃希这一个属别，作为人体与动物肠道菌群主要组成。大肠埃希菌在自然环境中普遍存在，土壤、水体和食品中都存在着一定数量的大肠埃希菌，故在卫生监测中常被作为指标细菌使用，但在我国目前尚无有效的检测方法。大肠埃希菌已经逐渐成为临床中比较常见的病原菌微生物，在防治上缺乏具体有效措施。按其在人类肠道中的功能，将其分为两类：一类是有毒力的，另一类是无毒力的。其中，大肠杆菌的血清分群是按 0:K:H 进行表示。到目前为止，菌体抗原（O 抗原）据统计已经拥有 171种，作为血清分型群的一个重要基础，其次是膜抗原（K 抗原），据统计已经拥有 99 种，最后是鞭毛抗原（H抗原），据统计已经有 60 种。一些血清型对大肠埃希菌具有较强的抑制作用，另外一些则会导致腹泻和肠外感染。肠道致病性大肠杆菌、产肠毒素型大肠杆菌和出血性大肠杆菌是该病的主要病原菌。大肠埃希菌可以导致多种肠道感染，也可以导致泌尿系统感染和腹泻，随着身体抵抗力的降低，大肠埃希菌生存环境也会发生改变，从而导致二次感染或者是机会感染，在临床上多见于败血症、伤口感染、肠道感染等疾病。因此，对于大肠埃希菌临床加强微生物检验有着极其重要的作用。基于此，下文主要分析大肠埃希菌临床微生物检验结果。1 资料与方法 1.1 基础资料 本次研究主要从 2022 年 1 月至 2023 年 1 月医院检验科送检的标本中随机挑选 100 例样本作为对象，其中送检样本中由男性患者采集获得的样本有 48 例，由女性患者采集获得的样本有 52 例，采集患者年龄范围最小 12 岁，最大 60 岁，平均年龄（40.362.36）岁。1.2 方法（1）肠道外感染大肠埃希菌检验检定 根据病人的病情特点，采取对应采集样本方法。在收集血样的时候，按照无菌要求，从病人静脉中抽出 5ml 血液。在收集痰样时，在病人经过口腔清洗后，取出深层咳嗽的痰样。在收集脓液、分泌物等有关样本时，采用无菌棉球直接收集。检验方法：第一步：标本直接检查，除了血液标本，通过其他方式制作而成的标本，可以采取涂片染色方式检查，采集受检验者中段尿标本，严格按照 3000r/min 转速给予离心处理，时间 10 分钟，然后对其进行沉淀物涂片，同时可以对脓液、唾液和分泌物进行涂片，在革兰染色后对中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-17-其进行检测，可以看到革兰氏阳性的短杆菌属。第二步：分离培养与鉴定。首先是对血样进行分级培养，然后对血样进行微生物培养，待细菌慢慢长大以后，再将血样移植到血平板上，然后像其它样本那样，进行简单的处理，也可以进行离心收集沉淀，然后将其接种在血平板和肠道弱选择板上，置于 35的温度下，进行 18-24 小时的温育。在血板上，大肠埃希菌呈球形、突起、灰白或平滑的菌落。EMB 上的菌落会出现一种带着金属光泽的紫色。在 MAC 和 SS 培养基上，细菌的形态呈淡粉色和淡红色。最后进行鉴定，在进行常规生物化学反应时，对疑似菌落涂片进行染色显微镜检查。（2）肠道内感染大肠埃希菌的鉴定 标本的采集：针对腹泻或者是食物中毒患者，直接采集患者粪便或者是残留食物。检验方法：分离培养方法：需要选择 MAC/EMB 培养基当作本次接种肠道，并需要控制环境温度在 35，孵育时间大约是18-24h。鉴定方法：对于腹泻发生原因，主要可能是和大肠埃希菌自身生化反应以及肠外感染大肠埃希菌有关，所以在鉴定时，需要严格根据肠道外标本对应方法，明确各个品种后，按照血清学试验与毒素检测方式，完成准确鉴定。具体如下：ETEC 鉴定：充分借助生物学。免疫学原理，给予LT 质粒与 ST 质粒进行检测，由于这类检测方法实际工作比较复杂，所以在检验室中一般难以取得理想效果，无法顺利开展。EPEC 鉴定：通常采用 EPEC 分型的方式，对 O 抗体和 H 抗体分别进行测定，可以对其进行准确的分类，也可以采用 ELISA、细胞培养等方式来进行检查和鉴别。EIEC 鉴定：方法以血清学及毒性试验为主。EIEC在生物学特征上与志贺菌类似，但在动力阴性、无发酵、无发酵等方面与大肠杆菌存在较大差异，因此本项目拟采用醋酸钠试验、葡萄糖铵试验和酸性酸水解试验等方法，对 EIEC 与志贺菌进行精确鉴别，其中 EIEC 可呈阳性，而病菌检测为阴性 1.3 统计学分析 SPSS23.0处理分析，X2、t检验，并用（n/%）（）表示，P0.05，则数据有差异。2 结果 2.1 检验结果 本次样本中检测出病原菌分布情况见表 1。表 1 研究标本检验结果 病原菌 例数 比例（%）大肠埃希菌 41 41.00 铜绿假单细胞 18 18.00 肺炎克雷伯菌 11 11.00 屎肠球菌 7 7.00 金黄色葡萄球菌 5 5.00 肺炎链球菌 5 5.00 奇异变形杆菌 4 4.00 溶血葡萄球菌 4 4.00 阴沟肠杆菌 3 3.00 人葡萄球菌 2 2.00 3 讨论 由于抗菌素在临床上的大量使用，导致一些疾病的病原菌发生一些变化，并且出现一些耐药现象。当医生在给病人治病时，感染的细菌会在某种程度上增加医生对病人的诊治难度。伴随抗菌药物应用越加频繁，虽然抗菌药物种类逐渐增多，但是如果使用剂量和规范用量明显超出，不合理用药情况出现后，最终容易形成耐药性。此外，大部分患者都会自己去药房购买抗生素等药物，但在使用药物时并没有严格遵循有关规定，导致药物使用不合理，也是导致很多病菌对药物产生抗药性的重要原因。耐药菌主要分为两种，一种是自然耐药，另一种是获得性耐药。临床研究显示，部分病原菌对特定抗生素具有天然抗性，且与病原菌自身的染色体基因有很大关系，常通过遗传特征体现出来。例如，链球菌对氨基糖类抗生素有天然的抗性。大肠埃希菌是呼吸道和尿路上常见的致病菌，如果不能得到有效的控制，很可能会引发一种超广谱-内酰胺酶形成，引发院内爆发性感染。在临床中，微生物检验是一种较为常见的大肠埃希菌检验方法，这种检验方法具有很高的精确度，因此，临床医生能够与微生物检验的对应结果进行有针对性的药物使用，从而可以避免由于抗生素滥用而导致的疾病治疗效果不佳的情形。在临床中对微生物细菌耐药性进行检测，能够让医院清楚知道病原菌的类型，以及哪些抗生素的应用不够好，进而对医院各个科室、手术部门的应用进行全面的了解，以便能够针对细菌的耐药状况，采取有效的控制和改善措施。具体而言，就是要强化医院各中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-18-个科室的监管，尤其是使用抗生素的患者，要严格遵守操作规程，防止出现耐药现象。以各科室、病房的标本采集、保存、送检为依据，对每一个步骤的正确性和科学性进行严格的监督，这对提升化验的准确性有很大帮助，对医院内部细细菌抗药性的具体情况也有帮助。同时，对所测得的耐药进行了详尽的记录，记录了细菌的耐药状况，并提出了相应的处理措施，并向医院相关部门报告。临床上应加强对抗生素的科学、规范使用，及时掌握病原菌的动态，根据病原菌的具体情况，及时采取有效的预防和治疗方法。对细菌耐药性的监控，要严格遵守法律法规和操作流程，向各个部门报告耐药结果、菌株性质等常规信息，同时要对耐药菌株的相关信息进行严格的规范，并对其进行及时的登记。大肠埃希菌主要属于一种革兰氏阴性杆菌，多数有鞭毛，少数几个菌株具有菌毛，而引起肠外感染的是大肠杆菌埃希菌，它的表面有一层微小的薄膜。大肠埃希菌在一般的营养培养基上能获得良好的增殖。在肠道中，可以通过筛选出能够使乳糖产生酸度的介质，而生成的菌落，其色泽也会随着介质指标的变化而变化。通过液体培养基培养观察，大肠埃希菌抗原结构局域复杂性，菌体一般可以分成 O、H、K 三种，也就是抗原、鞭毛、抗原及表面。其中 O 抗原是血清分型的基础，H 抗原不耐热，K 抗原根据耐热性分为 L型、A 型和 B 型。对于某一种病毒，通常只有一种类型的 K 抗原，而有些病毒则没有。大肠埃希菌是一种对物理、化学因子具有较强耐受性的细菌，对常见的化学消毒剂具有很强的耐受性。大肠埃希菌菌毛是大肠杆菌在肠道上皮细胞上粘附的重要物质，是大肠杆菌定植的有利条件。K 抗原是一种抗巨噬细胞吞噬、对抗补体和单克隆抗体的免疫细胞。大肠埃希菌与其它革兰阴性杆菌一样，都会产生类似的内毒素，具有类似的病理生理功能，比如：导热发热、弥漫性血管内凝血等。大肠杆菌埃希菌能分泌出两种不同的外毒素，一种是不耐高温的，在 65摄氏度的高温下，30 分钟就会分解。第二种是耐热肠毒素，在摄氏 100 度的高温下，能维持 10-20 分钟而不分解。这两种情况都会导致细胞内 CAMP 或者 CGMP相应水平的增加，导致肠液的大量分泌，从而导致腹泻。当前临床中因大肠埃希菌感染而诱发的疾病较多，比如：（1）非肠道内感染：肠道外的大肠埃希菌以条件性感染为主，而大肠埃希菌又是医院内最多的一类，它能导致各种类型的疾病，特别是泌尿系统和化脓系统。而大肠埃希菌是目前临床上最常见的一种病原菌微生物，可引起多种感染，尤其是尿路感染和化脓性感染的发病率较高，但其机制尚不明确。如果是婴幼儿，老年人，或者是免疫功能较差的人，都会引起脓毒症。（2）肠道内感染：某些大肠埃希菌菌株可以引起轻度的腹泻，甚至出现类似于霍乱的重度腹泻，也可以引起溶血性尿毒综合症。患者临床症状和症状因其血清型和菌株的毒性而有很大的差异。在具体大肠埃希菌致病类型中，有以下几种：（1）肠毒素性大肠埃希菌：会引起儿童和旅游者腹泻，病人会有恶心，腹部疼痛，低热，并且会有大量、像轻微霍乱一样的腹泻。这类型导致腹泻患者病情症状较为严重，在某些病例中，大肠埃希菌引起的腹泻是比较严重，但是死亡的病例并不多。（2）肠致病性大肠埃希菌：主要导致婴幼儿出现腹泻，主要表现为发热、呕吐、大量水样腹泻，大便中无血无痰，主要表现为腹泻。（3）肠侵入性大肠埃希菌：主要引起肠道炎症，类似于菌痢，主要表现为发热、腹泻，有时还会有脓血便。（4）肠出血性大肠埃希菌：0157:H7 是临床上最常用的一种，主要表现为腹痛、水样腹泻及血便，通常不会出现发热症状，主要发生在婴幼儿身上。溶血性尿毒素综合征是一种严重危害人类健康的疾病，主要表现为肠出血性大肠埃希菌（EHEC）所致的急性腹泻，患者可表现为溶血性贫血、急性肾衰竭及血小板减少性紫厥等。（5）肠凝血性大肠埃希菌：这种细菌有很大的几率引起儿童的肠道感染，主要表现为水样腹泻、呕吐、脱水、腹痛、血便等。与普通细菌中的大肠埃希菌比较，肠凝血性大肠杆菌无论是在培养特性还是在生物化学方面都有一些类似的地方，经过分组培养之后，无论是血清分型还是毒性测试，都能够精确地进行鉴别。我们从 100 份样本中，检出 41 份大肠杆菌，占41.00%。由此可见，大肠埃希菌是一种较为普遍的细菌，能引起各种传染病，如尿路感染、肺炎、菌血症、新生儿脑炎等。因此，在临床大肠埃希菌是一种十分重要微生物，因此需要做好大肠埃希菌的微生物检测工作，从而达到防止由大肠埃希菌引起的各种疾病的目的，并为病人的病情进行相应的处理，从而保证患中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生-19-者能够获得更好的疗效。参考文献 1李振起.临床微生物检验中细菌耐药性监测的应用分析J.系统医学,2022,7(04):67-94.2姚伟.微生物检验在感染性疾病患者预防和诊断治疗中的临床价值J.中外医疗,2022,41(05):195-198.3韩晓云.临床微生物检验和细菌耐药性监测的应用价值研究J.中国医药指南,2021,19(19):104-105.4温静,郑天驰,马琳等.北京市大兴区2018-2020年腹泻病人致泻大肠埃希氏菌检测结果分析J.食品安全质量检测学报,2021,12(08):3418-3422.5曹依秀,鲍强,王光璞等.老年 2 型糖尿病合并大肠埃希氏菌血流感染菌株耐药趋势和预后分析J.安徽医药,2021,25(04):764-768.6刘佳奇,都海渤,陈怡文,等.大肠埃希氏菌(Escherichia coli)用于食品检验培养基质量控制的研究J.食品与发酵工业,2021,47(10):79-86.7杨晓芬,田英霞,王晖.临床合理用药中细菌耐药与临床微生物检验的应用分析J.中国药物与临床,2020,20(21):3668-3670.8李娜,梁文龙,樊鹏鹏.113 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