1、生物试验专题第1页生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质判定一、还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。一、还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。葡萄糖、葡萄糖、果糖等果糖等0.05g/mLNaOH+0.05g/mL CuSO4第2页1.配置斐林试剂配置斐林试剂2.加入组织样液加入组织样液3.水浴煮沸水浴煮沸2min第3页判定脂肪将染色花生切片置于显微镜下观将染色花生切片置于显微镜下观察：察：苏丹苏丹：橘黄色：橘黄色苏丹苏丹：红色：红色第4页判定蛋白质蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应。组织样液组织样液+0.1g/mLNaOH+0.01g/mLCuSO4提供碱性环境提供
2、碱性环境反应物反应物第5页显微镜结构显微镜结构第6页显微镜使用显微镜使用1.用低倍镜观察。用低倍镜观察。（1）对光：调整反光镜和光圈。）对光：调整反光镜和光圈。（2）调焦：先用粗准焦螺旋，再用细）调焦：先用粗准焦螺旋，再用细准焦螺旋准焦螺旋（3）观察，并将要深入观察材料移到）观察，并将要深入观察材料移到视野中央视野中央2.用高倍镜观察。主动镜头转换器将用高倍镜观察。主动镜头转换器将高倍镜对准通光孔。高倍镜对准通光孔。第7页思索：思索：1.显微镜放大倍数为：显微镜放大倍数为：目镜放大倍数目镜放大倍数物镜放大倍数物镜放大倍数2.物镜镜筒长度与放大倍数物镜镜筒长度与放大倍数关系：关系：放大倍数越大，
3、镜筒越长（目镜放大倍数越大，镜筒越长（目镜则相反）。镜头与玻片之间距则相反）。镜头与玻片之间距离就越短。离就越短。第8页3.要把视野左下方材料移到要把视野左下方材料移到视野中央，应该怎样操作？视野中央，应该怎样操作？向左下方移动向左下方移动4.将低倍镜换用高倍镜后，视野将低倍镜换用高倍镜后，视野细胞数目和亮度怎样改变？细胞数目和亮度怎样改变？细胞数目降低，亮度变暗。细胞数目降低，亮度变暗。第9页观察细胞质流动观察细胞质流动1.制作装片：在载玻片上滴制作装片：在载玻片上滴一滴清水，将材料放在清一滴清水，将材料放在清水中央，盖上盖玻片。水中央，盖上盖玻片。2.观察观察第10页观察植物细胞有丝分裂1
4、.解离 在10时至14时剪下洋葱根尖23mm，置于15%盐酸和95%酒精混合液中解离23min（至酥软）。（使组织中细胞相互分离开来）2.漂洗 将根尖取出，用清水漂洗10min。第11页3.染色染色 将根尖放在培养皿中，将根尖放在培养皿中，用龙胆紫染色用龙胆紫染色35min。4.制片：制片：用镊子将根尖弄碎，用镊子将根尖弄碎，盖上盖玻片，在其上再加一盖上盖玻片，在其上再加一片载玻片，用拇指压片。片载玻片，用拇指压片。第12页5.低倍镜观察低倍镜观察:寻找分生区寻找分生区 6.高倍镜观察高倍镜观察思索思索:在显微镜在显微镜下观察到哪下观察到哪一个时期细一个时期细胞最多胞最多?第13页比较过氧化氢
5、酶和铁离子催化效率新鲜肝新鲜肝脏研磨脏研磨液液FeCl3+H2O2+H2O2酶较多酶较多堵住试管口堵住试管口堵住试管口堵住试管口插入点燃插入点燃卫生香卫生香插入点燃插入点燃卫生香卫生香产生大量气泡产生大量气泡产生少许气泡产生少许气泡卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈卫生香燃烧猛烈第14页结论结论:酶含有高效性酶含有高效性第15页探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解作用作用非还原性糖非还原性糖水解水解葡萄糖葡萄糖+果糖果糖蔗糖蔗糖还原性糖还原性糖水解水解麦芽糖麦芽糖水解水解葡萄糖葡萄糖原理原理:淀粉淀粉第16页+2mL淀淀粉酶粉酶2mL淀淀粉溶液粉溶液2mL蔗蔗糖溶液糖溶
6、液60度水浴度水浴5min斐林试剂斐林试剂+水浴煮沸水浴煮沸1min 产生砖红色沉淀产生砖红色沉淀第17页叶绿体中色素提取和分离原理原理:1.光合色素能溶解在丙酮中，所以能光合色素能溶解在丙酮中，所以能够用丙酮提取色素。够用丙酮提取色素。2.不一样色素在层析液中溶解度不一样，不一样色素在层析液中溶解度不一样，溶解度大就在滤纸中扩散得快，溶解度大就在滤纸中扩散得快，溶解度小就扩散得慢溶解度小就扩散得慢.第18页操作操作:1.将叶片剪碎将叶片剪碎,放在研钵中，加入放在研钵中，加入少许少许SiO2和和CaCO3研磨研磨.帮助研磨帮助研磨 保护色素保护色素2.过滤过滤,注意预防挥发注意预防挥发.3.制
7、作滤纸条制作滤纸条,画滤液细线画滤液细线.4.将层析液倒入烧杯，将层析液倒入烧杯，将滤纸条朝下一端插入层析液，将滤纸条朝下一端插入层析液，不能让层析液触及滤液细线不能让层析液触及滤液细线.第19页结果结果:橙黄色橙黄色胡萝卜素胡萝卜素黄色黄色叶黄素叶黄素蓝绿色蓝绿色叶绿素叶绿素a黄绿色黄绿色叶绿素叶绿素b第20页观察植物细胞质壁分离与复原原理原理:细胞液浓度细胞液浓度外界溶液浓度外界溶液浓度细胞失水细胞失水质壁分离质壁分离细胞吸水细胞吸水质壁分离质壁分离复原复原第21页操作:1.取洋葱表皮制作暂时装片取洋葱表皮制作暂时装片.2.用显微镜观察。用显微镜观察。3.在盖玻片一侧滴加在盖玻片一侧滴加0
8、.3g/mL蔗糖溶蔗糖溶液，用吸水纸引流液，用吸水纸引流.重复几次重复几次.4.高倍镜观察质壁分离高倍镜观察质壁分离.5.在盖玻片一侧滴加清水在盖玻片一侧滴加清水,用吸水纸引流用吸水纸引流.重复几次重复几次.6.高倍镜观察质壁分离复原高倍镜观察质壁分离复原.第22页DNA粗提取和判定原理:1.DNA在不一样浓度NaCl中溶解度不一样，在0.14mol/LNaCl中溶解度最小_轻易析出.2.DNA不溶于酒精,不过细胞中一些物质能够溶于酒精。_提取杂质较少DNA 3.DNA遇二苯胺变蓝_判定DNA.第23页操作：操作：1.提取鸡血细胞细胞核物质提取鸡血细胞细胞核物质 将制备好鸡血细胞液将制备好鸡血
9、细胞液510mL，注，注入到烧杯中，向烧杯中加入入到烧杯中，向烧杯中加入20mL蒸蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，使血细胞加速破裂。用纱布过滤，取使血细胞加速破裂。用纱布过滤，取滤液。滤液。2.溶解细胞核内溶解细胞核内DNA 将将5mol/L氯化钠氯化钠40mL加入到滤加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min。第24页3.析出含析出含DNA粘稠物粘稠物 沿烧杯壁迟缓加入蒸馏水，同沿烧杯壁迟缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向搅拌，加时用玻璃棒沿一个方向搅拌，加蒸馏水至粘稠物不再增加。蒸馏水至粘稠物不再增加。4.滤取含滤取
10、含DNA粘稠物粘稠物 用放有多层纱布漏斗过滤，取用放有多层纱布漏斗过滤，取纱布上粘稠物。纱布上粘稠物。第25页5.用用2mol/L氯化钠将氯化钠将DNA粘稠物粘稠物再溶解。再溶解。6.过滤含有过滤含有DNA氯化钠溶液，取滤液。氯化钠溶液，取滤液。7.提取含杂质较少提取含杂质较少DNA 在滤液中加入冷却、体积分数为在滤液中加入冷却、体积分数为95%酒精，并用玻璃棒沿一个方向酒精，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，把出现丝状物卷起。搅拌，把出现丝状物卷起。第26页8.DNA判定判定取两支试管，各加入浓度为取两支试管，各加入浓度为0.015mol/L氯化钠溶液，将氯化钠溶液，将丝状物溶解，然后，向两支试丝状物溶解，然后，向两支试管各加入管各加入4mL二苯胺试剂。水二苯胺试剂。水浴煮沸浴煮沸5min.第27页
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