聚合物在生物大分子分离中的应用.pptx

聚合物在生物大分子分离中的应用1、分离过程及原理分离过程及原理定义定义:将一定样品中相关得化学物质拆解成纯得物质称为分离。将一定样品中相关得化学物质拆解成纯得物质称为分离。方法方法:萃取、过滤、离心、色谱、电泳等。萃取、过滤、离心、色谱、电泳等。实质实质:混合得逆过程。混合就是自发得混合得逆过程。混合就是自发得,分离就是被动得分离就是被动得,需要能量或外力得推动。需要能量或外力得推动。原理原理:差速运动过程差速运动过程,即利用速度差别进行物质得分离与纯化即利用速度差别进行物质得分离与纯化,电泳电泳:带电粒子在电场作用下于一定介质带电粒子在电场作用下于一定介质(溶剂溶剂)中所发生得运动。中所发生得运动。电泳分离及其条件选择得依据电泳分离及其条件选择得依据:离子所带电荷越多、解离度越大、体积越小、离子所带电荷越多、解离度越大、体积越小、溶液得黏度越小溶液得黏度越小,电泳速度越快。电泳速度越快。电渗电渗:毛细管中得溶剂因轴向直流电场作用而发生得定向流动毛细管中得溶剂因轴向直流电场作用而发生得定向流动,起因于定域电起因于定域电荷。荷。定域电荷定域电荷:牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移得离子或带电基团。牢固结合在管壁上、在电场作用下不能迁移得离子或带电基团。电渗得方向电渗得方向:与固体表面电荷所具有得电泳方向相反与固体表面电荷所具有得电泳方向相反;电渗得强度电渗得强度:与定域离子得数量或固液界面成正比与定域离子得数量或固液界面成正比;与流路通道孔径有关。与流路通道孔径有关。熔融硅毛细管中得电渗熔融硅毛细管中得电渗定域电荷定域电荷产生指向负极得电渗产生指向负极得电渗CE工作原理工作原理例例:当把样品从正极端注入到石英毛细管中时当把样品从正极端注入到石英毛细管中时,不同符号得离子将按表中得速度向不同符号得离子将按表中得速度向负极迁移。负极迁移。组分分合淌度合淌度合速度合速度正离子正离子中性分子中性分子负离子离子电渗率:电迁移率:2、聚合物在、聚合物在DNA分离中得应用分离中得应用 人类基因组计划人类基因组计划(Human Genome ProjectHGP)1986年,著名生物学家、诺贝尔奖获得者H、Dulbecco提出人类基因组计划。1990年正式启动,其主要目标有:识别人类DNA中所有基因(超过10万个);测定组成人类DNA得30亿碱基对得序列;将这些信息储存到数据库中;开发出有关数据分析工具;致力于解决该计划可能引发得伦理、法律和社会问题。遗传学遗传学核酸核酸(DNA和和RNA)得功能得功能:储存和传递信息储存和传递信息,指导和控制蛋白质得合成。指导和控制蛋白质得合成。DNA:主要得遗传物质主要得遗传物质,通过复制而将信息由亲代传给子代。通过复制而将信息由亲代传给子代。RNA:与遗传信息在子代得表达有关。与遗传信息在子代得表达有关。大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点刑侦学刑侦学腺嘌呤腺嘌呤(A)鸟嘌呤鸟嘌呤(G)胸腺嘧啶胸腺嘧啶(T)胞嘧啶胞嘧啶(C)DNA得组成得组成DNA得结构得结构毛细管电泳分离毛细管电泳分离DNA得过程得过程 电渗就是电渗就是CE得基本现象之一得基本现象之一,她可以控制组分得迁移速度和方向她可以控制组分得迁移速度和方向,进进而影响而影响CE得分离效率和重现性、得分离效率和重现性、DNA得分离理论得分离理论310型全自动遗传分析仪型全自动遗传分析仪ABIPrism3100遗传分析仪遗传分析仪DNA分析仪分析仪ABI 310-DNA中得染料中得染料如何控制电渗流？如何控制电渗流？理论理论:能影响电渗得因素都有可能用于电渗得控制能影响电渗得因素都有可能用于电渗得控制实际实际:能理想地调节电渗而又不影响分离过程得控制方法目前能理想地调节电渗而又不影响分离过程得控制方法目前不多见、对于不多见、对于DNADNA分离及测序来说分离及测序来说,pH-8pH-8、3 3,常用管壁涂层常用管壁涂层(涂覆涂覆)技术技术、用于用于DNA分离得聚合物分离得聚合物交联聚合物交联聚合物非交联聚合物非交联聚合物筛分介质筛分介质:凝胶和非凝胶凝胶和非凝胶(非交联得聚合物溶液非交联得聚合物溶液)。要求:低黏度、高得筛分能力和自涂覆功能。非凝胶非凝胶:均聚物、共聚物均聚物、共聚物(包括无规、嵌段、接枝等包括无规、嵌段、接枝等)、共混物等。、共混物等。均聚物均聚物线形聚丙烯酰胺线形聚丙烯酰胺聚聚N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺聚氧化乙烯聚氧化乙烯羟乙基纤维素羟乙基纤维素聚乙烯基吡咯烷酮聚乙烯基吡咯烷酮存在得问题存在得问题:共聚物共聚物a、无规共聚物无规共聚物poly(DEA-co-DMA)聚聚(N,N-二乙基丙烯酰胺二乙基丙烯酰胺-co-N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺)poly(AM-co-DMA)聚聚(丙烯酰胺丙烯酰胺-co-N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺)poly(AA-co-AG)聚聚(丙烯酰胺丙烯酰胺-co-吡喃型葡萄糖吡喃型葡萄糖)poly(AM-co-AAG)聚聚(丙烯酰胺丙烯酰胺-co-葡糖酰丙胺葡糖酰丙胺)poly(NEEA-co-NMEA)聚聚(乙氧基乙基丙烯酰胺乙氧基乙基丙烯酰胺-co-乙氧基甲基丙烯酰胺乙氧基甲基丙烯酰胺)等等b、嵌段共聚物嵌段共聚物PEG-(CnF2n+1)2末端带有碳氟化合物得聚乙二醇末端带有碳氟化合物得聚乙二醇PEO-PPO-PEO低分子量得聚环氧乙烷和聚环氧丙烷得三嵌段共聚物低分子量得聚环氧乙烷和聚环氧丙烷得三嵌段共聚物BEB/EBE聚环氧乙烷和聚环氧丁烷得三嵌段共聚物等聚环氧乙烷和聚环氧丁烷得三嵌段共聚物等C、接枝共聚物接枝共聚物PAM-g-PNIPAM(聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺-g-聚聚N-异丙基丙烯酰胺异丙基丙烯酰胺)PNIPAM-g-PEO(聚聚N-异丙基丙烯酰胺异丙基丙烯酰胺-g-聚环氧乙烷聚环氧乙烷)PAM-g-PDMA(聚丙烯酰胺聚丙烯酰胺-g-聚聚N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺)PDMA-g-PMMA(聚聚N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺-g-聚甲基丙烯酸甲酯聚甲基丙烯酸甲酯)等等存在得问题:共混聚合物共混聚合物不同分子量得不同分子量得PEO分离分离ds 和和ss DNA HEC,LPA等不同分子量得混合物也都能成功地对等不同分子量得混合物也都能成功地对DNA分离或排序分离或排序存在得问题存在得问题:线形聚丙烯酰胺线形聚丙烯酰胺(LPA,高分子量高分子量):优点优点:测序功能优异测序功能优异,如如DNA读取长度读取长度缺点缺点:高黏度、无自涂覆能力高黏度、无自涂覆能力聚聚N,N-二甲基丙烯酰胺二甲基丙烯酰胺(PDMA):优点优点:优异得自涂覆功能、低黏度优异得自涂覆功能、低黏度缺点缺点:测序功能不如测序功能不如LPA很少有均聚物能同时满足以上要求。很少有均聚物能同时满足以上要求。准互穿网络聚合物准互穿网络聚合物(quasi-IPN)(1)PVP和和PDMA组成得组成得quasi-IPN分离双链分离双链DNA(ds-DNA)4%PVP均聚物均聚物+4%PDMA均聚物均聚物Quasi-IPN(4%PVP+4%PDMA)PVP、PDMA、她们得共混物、她们得共混物、quasi-IPN形成网络得原理形成网络得原理Quasi-IPN重现性得研究重现性得研究Electrophoresis 2002,23,1460-1466(2)PAM和和PDMA组成得组成得quasi-IPN在在DNA测序中得应用测序中得应用反相微乳液聚合合成反相微乳液聚合合成PAMElectrophoresis 2005,26,126-136PAM/PDMA组成得组成得quasi-IPN用于用于DNA测序测序不足之处:quasi-IPN GNPs quasi-IPN/GNPsDMA initiator quasi-IPN LPA(3)quasi-IPN/GNPs 复合介质复合介质TEM images of(A)GNPs20(20 nm),(B)GNPs40(40 nm),and(C)GNPs60(60 nm)in water,and(D)GNPs40(40 nm)in quasi-IPN3 polymer solution、The partial four-color(base C,T,A,G)electropherograms of standard DNA sample using 2、5%w/v quasi-IPN3/GNPs40-1 by CE at 50、Electrophoresis,2007,28,1072-1080、Electrophoresis,2007,28,2998-3007中国发明专利中国发明专利:ZL2、3、(4)quasi-IPN/官能化金纳米粒子复合介质官能化金纳米粒子复合介质 The schematic representation of reaction routes for(A)GNP-PDMA and(B)quasi-IPN/GNP-PDMA、(A1)GNPs(18 nm);(A2)GNP-PDMA;(B1)fresh GNP solution;(B2)GNP solution after 2 months,(B3)GNP-PDMA solution after 10 months、Electrophoresis,2008,29,4637-4645(5)quasi-IPN/官能化得多壁碳纳米管双网络复合介质官能化得多壁碳纳米管双网络复合介质小结小结 将将GNPsGNPs加加入入到到由由较较低低分分子子量量得得LPALPA和和PDMAPDMA组组成成得得quasi-IPNquasi-IPN中中,形形成成了了quasi-IPN/GNPsquasi-IPN/GNPs。quasi-IPN/GNPsquasi-IPN/GNPs得得测测序序时时间间不不仅仅小小于于quasi-IPNquasi-IPN,而而且且分分离离度度也也高高于于quasi-IPNquasi-IPN,接接近近甚甚至至高高于于含含较高分子量较高分子量LPALPA但不含但不含GNPsGNPs得得quasi-IPNquasi-IPN。将将GNP-PDMAGNP-PDMA加加入入到到由由较较低低分分子子量量LPALPA和和PDMAPDMA所所组组成成得得quasi-IPNquasi-IPN中中得得到到quasi-IPN/GNP-PDMAquasi-IPN/GNP-PDMA、。GNP-PDMAGNP-PDMA得得存存在在可可以以改改善善GNPsGNPs与与整整个个测测序序体体系系得得相相容容性性、增增大大网网络络得得缠缠结结程程度度并并增增加加GNPsGNPs在在体体系系中中得得含含量量,从从而而导导致致整整个个筛筛分分网网络络更更加加受受限限和和稳稳固固、介介质质得得表表观观分分子子量量更更高高并并且且孔孔径径更更小小,因因此与之前得此与之前得quasi-IPN/GNPsquasi-IPN/GNPs相比相比,quasi-IPN/GNP-PDMAquasi-IPN/GNP-PDMA可以进一步增强可以进一步增强ssDNAssDNA得测序性能。得测序性能。通通过过原原子子转转移移自自由由基基聚聚合合法法(ATRPATRP)制制备备了了PDMAPDMA官官能能化化得得多多壁壁碳碳纳纳米米管管(MWNT-PDMAMWNT-PDMA)添添加加剂剂,并并加加入入到到由由LPALPA(3 3、3 3 MDaMDa)和和PDMAPDMA所所组组成成得得quasi-IPNquasi-IPN中中而而得得到到了了聚聚合合物物/纳纳米米管管双双网网络络复复合合筛筛分分介介质质(quasi-IPN/MWNT-PDMAquasi-IPN/MWNT-PDMA)。柔柔性性得得quasi-IPNquasi-IPN聚聚合合物物网网络络和和刚刚性性得得MWNTsMWNTs(具具有有独独特特得得管管状状结结构构)网网络络相相互互作作用用,从从而而避避免免聚聚合合物物之之间间彼彼此此滑滑移移、稳稳固固和和制制约约总总得得筛筛分分网网络络、增增加加介介质质得得表表观观分分子子量量并并减减小小介介质质得得孔孔径径。因因此此,quasi-IPN/MWNT-PDMAquasi-IPN/MWNT-PDMA介介质质中中得得这这种种更更受受限限、更更稳稳固固且且孔孔径径更更小得纳米结构使得测序性能更优良。小得纳米结构使得测序性能更优良。、聚合物在蛋白质分离中得应用聚合物在蛋白质分离中得应用 后基因组时代后基因组时代(Post-Genome Era)科学得发展以及技术上得突破科学得发展以及技术上得突破,使人类基因组计划一使人类基因组计划一再提前再提前,生命科学已经进入了后基因组时代生命科学已经进入了后基因组时代,科学家们得研科学家们得研究重心已从揭示基因组究重心已从揭示基因组DNA得序列转移到在整体水平上对得序列转移到在整体水平上对基因组功能得研究。后基因组时代得一个重要标志就就是基因组功能得研究。后基因组时代得一个重要标志就就是蛋白质组学蛋白质组学(Proteomics)得建立。在蛋白质组学中得建立。在蛋白质组学中,蛋白蛋白质分离分析得重要性及意义也日见突出。质分离分析得重要性及意义也日见突出。2001,人类蛋白质组计划人类蛋白质组计划(Human Proteome Project,HPP)蛋白质就是由氨基酸通过酰胺键连接而成得高分子蛋白质就是由氨基酸通过酰胺键连接而成得高分子,两性两性,存在等电点存在等电点,因其空因其空间结构得复杂性间结构得复杂性,有亲水或疏水之分。蛋白质就是基因表达得最终产物有亲水或疏水之分。蛋白质就是基因表达得最终产物,就是细胞结就是细胞结构得组成成分构得组成成分,生命现象中绝大多数生物功能就是通过蛋白质来实现得生命现象中绝大多数生物功能就是通过蛋白质来实现得 。蝴蝶从卵变虫变蛹再变蝶蝴蝶从卵变虫变蛹再变蝶,就是个绝对神奇得过程。就是个绝对神奇得过程。基因只就是遗传信息得载体基因只就是遗传信息得载体,要研究生命现象要研究生命现象,诠释生命活动得规律诠释生命活动得规律,只了解基因组得结构就是远远不够得只了解基因组得结构就是远远不够得,必须对基因得编码产物必须对基因得编码产物-蛋白质蛋白质进行系统深入得研究。进行系统深入得研究。HumanBrainProject蛋白质和疾病蛋白质和疾病阿尔茨海默病阿尔茨海默病(Alzheimerdisease,AD)与与tau蛋白蛋白:在AD患者脑内,发病机制很多,其中一种观点认为因Tau蛋白异常过度磷酸化,并聚集成双螺旋丝形式,与微管蛋白得结合力降低,失去了促进微管形成和维持微管稳定得作用。异常磷酸化Tau蛋白得病理性沉积,导致了神经原纤维缠结(NFTs)得形成。蛋白质在低于等电点时会带上正电荷蛋白质在低于等电点时会带上正电荷,在高于等电点时带负电荷、在高于等电点时带负电荷、若缓冲溶液得若缓冲溶液得pH值低于蛋白质等电点值低于蛋白质等电点,蛋白质则吸附蛋白质则吸附H 而带正电荷而带正电荷,由于由于静电相互作用静电相互作用,蛋白质与管壁发生吸附。蛋白质与管壁发生吸附。碱性蛋白质碱性蛋白质(pI8)所带电荷量随所带电荷量随pH得变化曲线得变化曲线;在在pH4时时,碱性蛋白质碱性蛋白质(pI8)与与毛细管壁发生吸附毛细管壁发生吸附P/ACE MDQ(Beckman Coulter Instruments)proteinacidprotein(pI7)SioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSioSio+pH3,SiOHSiO _。蛋白质吸附蛋白质吸附Dolnik,V、,Hutterer,K、M、,Electrophoresis 2001,22,4163-4178、Towns,J、K、,Regnier,F、E、,Analytical Chemistry 1992,64,2473-2478、Hjerten,S、,Kubo,K、,Electrophoresis 1993,14,390-395、极端极端pH值法值法pHpH高于蛋白质得高于蛋白质得pIpI时时,毛细管内壁对蛋白质产生静电排斥抑制吸附毛细管内壁对蛋白质产生静电排斥抑制吸附,但就是但就是,蛋白蛋白质存在得自然状态为质存在得自然状态为pH4pH41010,高高pHpH如如1111、0 0时时,容易使蛋白质变性或者水解。容易使蛋白质变性或者水解。pHpH小于小于1 1、5 5(熔融硅或石英得等电点熔融硅或石英得等电点)时时,蛋白质得质子化导致其质荷比差别较小蛋白质得质子化导致其质荷比差别较小,分辨率难以提高。分辨率难以提高。对等电点相近得蛋白质不易实现分离。对等电点相近得蛋白质不易实现分离。一般认为一般认为,使蛋白质混合物分离得首选使蛋白质混合物分离得首选pHpH值应和蛋白质混合物得值应和蛋白质混合物得pKapKa值基本一致。值基本一致。McManigill D、Anal Chem,1986,58:166170、添加小分子添加剂添加小分子添加剂表面活性剂表面活性剂:季铵盐和氟化得阳离子表面活性剂。季铵盐和氟化得阳离子表面活性剂。中性盐中性盐:如磷酸盐如磷酸盐,硫酸钾等。硫酸钾等。胺类胺类:三乙醇胺、三乙胺、三乙醇胺、三乙胺、N-乙基二乙醇胺乙基二乙醇胺,N,N,N,N-四甲基四甲基-1,3-丁二丁二胺胺(TMBD)等。等。有机溶剂有机溶剂:醇类、乙腈、丙酮、四氢呋喃、二甲亚砜等醇类、乙腈、丙酮、四氢呋喃、二甲亚砜等,其中最常用得就是甲醇和其中最常用得就是甲醇和乙腈。乙腈。选用极端选用极端pH值或添加小分子添加剂得方法虽然能从一定程度上降低蛋白质值或添加小分子添加剂得方法虽然能从一定程度上降低蛋白质吸附吸附,但就是容易导致蛋白质聚集和变性。目前最常用得方法就是用聚合物对毛但就是容易导致蛋白质聚集和变性。目前最常用得方法就是用聚合物对毛细管内壁进行改性处理。细管内壁进行改性处理。何金兰等何金兰等、高效毛细管电泳高效毛细管电泳、北京北京:科学出版社科学出版社,1996,7275、Verzola B,Gelfi C,Righetti P G、J Chromatogr A,2000,868:8599、Corradini D,Cannarsa G,Fabbri E,et al、J Chromatogr A,1995,709:127134、Corradini D,Cannarsa G、Electrophoresis,1995,16:630635、1、形成涂层得聚合物必须具备抗蛋白质吸附得功能形成涂层得聚合物必须具备抗蛋白质吸附得功能。(1)一般具有亲水性一般具有亲水性;(2)含有氢键受体含有氢键受体;(3)非氢键供体非氢键供体;(4)电中性等四个特点电中性等四个特点;2、聚合物涂层要很稳定聚合物涂层要很稳定。(1)形成涂层得聚合物本身要很稳定形成涂层得聚合物本身要很稳定;(2)涂层在使用时对周围环境不敏感涂层在使用时对周围环境不敏感;3、涂层制备简单且使用寿命长。涂层制备简单且使用寿命长。PEG类材料得抗蛋白质吸附原理类材料得抗蛋白质吸附原理 SioSioSioSioSioSiosiooosiooopolymercoatingSioSioSioSioSioSiosiooosiooosilanereagentsioooSioSioSioSioSiomonomerinitiator共价键涂层共价键涂层Sio Lucy,C、A、,MacDonald,A、M、,Gulcev,M、D、,Journal of Chromatography A 2008,1184,81-105、抑制熔硅毛细管表面抑制熔硅毛细管表面SiOH解离解离,修饰表面修饰表面Zeta电势、电势、聚合物或硅烷化试剂得取代基覆盖已离解得聚合物或硅烷化试剂得取代基覆盖已离解得SiOH、增加了内壁表面层附近溶液得黏度增加了内壁表面层附近溶液得黏度,涂层得厚度和密度都将影响到表面层附近溶液得黏度涂层得厚度和密度都将影响到表面层附近溶液得黏度,从而影响涂层得涂覆效果。从而影响涂层得涂覆效果。涂层寿命长涂层寿命长,稳定性好稳定性好,分离效率高。分离效率高。共价键合得过程中涉及毛细管硅烷化和引发单体聚合两步反应,一方面受两步反应得转化率影响,SiOH很难被完全屏蔽;另一方面,毛细管内得聚合反应很难控制,容易造成涂层得不均一性、不规整性,甚至阻塞毛细管。价格昂贵。3000 元/米SioSioSioSioSioSioSioSioSioSiopolymersolutionSioSio氢键、离子键、疏水相互作用等非共价键涂层非共价键涂层 涂层制备过程简单易操作涂层制备过程简单易操作,涂覆过程可一步完成涂覆过程可一步完成,涂层可再生。这种涂层可以就是中性得、带正电荷得、也可以就是吸附在带正电得聚合物涂层可再生。这种涂层可以就是中性得、带正电荷得、也可以就是吸附在带正电得聚合物涂层涂层 表面转而带负电荷得。表面转而带负电荷得。非共价键涂层稳定性不及共价键合涂层、非共价键涂层稳定性不及共价键合涂层、(1)毛细管非共价键涂层得制备毛细管非共价键涂层得制备(I)阳离子聚合物涂层得制备阳离子聚合物涂层得制备优点:低粘度、商用产品,广泛用于物理涂层 存在得问题:容易被冲出毛细管。解决方案:cat-HEC1、溶菌酶;2、细胞色素 c;3、核糖核酸酶 A、Yang,R、M、,Shi,R、H、,Peng,S、H、,Zhou,D、,Liu,H、,Wang,Y、M、,Electrophoresis 2008,29,1460-1466、cat-HEC-g-PPEGMASynthesis and characterization of cat-HEC-g-PPEGMA Stabilization of EOF Milkpowdersamples Eggwhitesamples1、-lactalbumin;2、-lactoglobulin B;3、-lactoglobulin A、1、lysozyme;2、ConA3、OVA(a and b:glycoisoforms)Dan Zhou,Lina Xiang,Rongju Zeng,Fuhu Cao,Xiaoxi Zhu,Yanmei Wang*,Journal of separation science 2011,34,3441-3450、A:Bare capillaryB:Coated capillaryHEC-g-P4VPYang,R、,Liu,Y、,Wang,Y、,Electrophoresis 2009,30,2321-2327、HEC-g-PDMAEMAFuhu Cao,Zhaofeng Luo,Dan Zhou,Rongju Zeng,Yanmei Wang*,Electrophoresis 2011,32,1148-1155、SuppressionofEOFSeparationofproteinmixture1、cytochrome c;2、lysozyme;3、myoglobin;4、ribonuclease A;5、a-chymotrypsinogen A;6、trypsin inhibitor、Hang Liu,Ronghua Shi,Wenming Wan,Runmiao Yang,Yanmei Wang*Electrophoresis 2008,29,2812-2819samplesMn 1H NMRa)(10-4)Mn,GPCb)(10-4)Mw/Mn(GPC)PEO113-b-P4VP450、971、41、21PEO113-b-P4VP901、442、01、29PEO113-b-P4VP1131、692、41、26PEO113-b-P4VP2943、595、21、35PEO-b-P4VPQPDMAEMA-PEO-QPDMAEMAFuhu Cao,Xiaoxi Zhu,Zhaofeng Luo,Jinxing Xing,Xiaohua Shi,Yanmei Wang,Herv Cheradame,Electrophoresis 2011,32,2874-2883、HEC-g-PDMA1、溶菌酶;2、细胞色素 c;3、核糖核酸酶 A、Peng,S、H、,Shi,R、H、,Yang,R、M、,Zhou,D、,Wang,Y、M、,Electrophoresis 2008,29,4351-4354、(II)中性聚合物涂层得制备中性聚合物涂层得制备PDMA-b-PEO-b-PDMAJing Xu,Lianyun Yang,Zhaofeng Luo,Yanmei Wang*,Electrophoresis,2010,31,1713-1720、1、细胞色素c;2、溶菌酶;3、肌红蛋白;4、核糖核酸酶 A;5、白蛋白6、胰蛋白酶抑制剂、PEGMA-DMA 1,lysozyme;2,cytochrome c;3,ribonuclease A;and 4,-chymotrypsinogen A、Journal of separation science 2011,34,1738-1745杂臂杂臂”星形聚合物及其形成得涂层星形聚合物及其形成得涂层 星形聚合物星形聚合物PEG3-PDMA Science,2007,318,426-430研究背景polydopamine coatingpolydopamine coatingNH2PEGNH2PEGNH2PEGNH2PEGNH2PEG+(2)毛细管仿生涂层毛细管仿生涂层Polydopamine-g-PEG涂层涂层Cr+O2Glass slideGlass slideTris-HCl solutionpH=8.525 C,5 hPolydopamine adlayer25 mg/mL PEG-NH2Tris-HCl solutionpH=8.550 C,10 hGlass slideProteinsProteinsAuFused-silica capillaryFused-silica capillaryFused-silica capillaryPolydopamine adlayerTris-HCl solutionpH=8.525 mg/mL PEG-NH2Tris-HCl solutionpH=8.5ProteinsProteins30 C,24 h50 C,24 h+O2Fused-silica capillaryXPS spectra of raw material(a),(b)bare raw material under different magnification(c),(d)polydopamine-graft-PEG coated raw material under different magnification pH 3、05 pH 5、38 重复性得研究重复性得研究 商用商用:3000元元/米米1,cytochrome c;2,lysozyme;3,ribonuclease A、和商用涂层管得比较和商用涂层管得比较实际样品中蛋白质得分离实际样品中蛋白质得分离奶粉中蛋白质得分奶粉中蛋白质得分离离鸡蛋清中蛋白质得分离鸡蛋清中蛋白质得分离花生蛋白质得分离花生蛋白质得分离奶粉中乳清蛋白得定量分析分离奶粉中乳清蛋白得定量分析分离Rongju Zeng,Zhaofeng Luo,Dan Zhou,Fuhu Cao,Yanmei Wang*,Electrophoresis,2010,31,3334-3341、王延梅王延梅,曾容菊曾容菊,中国发明专利中国发明专利,申请号申请号:2、X、。Polydopamine-g-刷状刷状PEG涂层涂层polydopamine-graft-poly(2-methyl-2-oxazoline)Li-Na Xiang,Li-Juan Chen,Lin Tan,Chong Zhang,Fu-Hu Cao,Songtao Liu,Yan-Mei Wang*,Chinese Chemical Letter,2013,24,597-600、