罗氏电化学发光项目介绍.ppt

罗氏电化学发光罗氏电化学发光部分部分项目介绍项目介绍 董元晖董元晖;Nov 07,2011领先的时代之光领先的时代之光主要内容主要内容 罗氏公司及其产品简介罗氏公司及其产品简介罗氏电化学发光罗氏电化学发光介绍介绍-传染病系列介绍传染病系列介绍-肿瘤标志物系列介绍肿瘤标志物系列介绍-其他项目简介其他项目简介罗氏集团罗氏集团-世界世界财富财富杂志评定杂志评定500强之一强之一18961896年成立于瑞士巴塞尔年成立于瑞士巴塞尔业务遍布全球五大洲业务遍布全球五大洲150150个国家个国家20092009年实现年实现491491亿亿瑞郎销售额瑞郎销售额(442(442亿美元亿美元)20102010财富财富全球五百强排名全球五百强排名第第153153位！位！20102010市值全球市值全球500500强排名强排名第第2929位位!主营业务主营业务:制药及诊断制药及诊断全球第一位的全球第一位的体外诊断体外诊断公司公司20102010年全球第三位的年全球第三位的制药制药公司公司全球领先的全球领先的肿瘤药物肿瘤药物及及移植药物移植药物的供应商的供应商全球全球病毒学病毒学领域的开拓者和领导者领域的开拓者和领导者创始人创始人1926年进入中国年进入中国南京路上的办事处南京路上的办事处江泽民参观罗氏总部江泽民参观罗氏总部罗氏集团的两大事业部门药品事业部药品事业部诊断事业部诊断事业部罗氏集团架构罗氏集团架构诊断诊断健康医护部健康医护部应用科学部应用科学部制药制药制药制药中外中外基因泰克基因泰克 专业诊断部专业诊断部分子诊断部分子诊断部组织诊断部组织诊断部罗氏诊断覆盖领域罗氏诊断覆盖领域病人参考实验室医院学院、药厂等科研用户科研用户病人病人专业用户专业用户 生命科学生命科学体外诊断体外诊断 体外诊断体外诊断ER/ICU:Emergency Room,Intensive Care Unit应用科学部应用科学部商业实验室急诊/ICU诊所分子诊断部分子诊断部组织诊断部组织诊断部专业诊断部专业诊断部健康医护部健康医护部罗氏诊断分布图罗氏诊断分布图应用科学部应用科学部总部位于潘茨堡总部位于潘茨堡健康医护部健康医护部总部位于曼海姆总部位于曼海姆分子诊断部分子诊断部总部位于普莱森总部位于普莱森专业诊断部专业诊断部总部位于洛克鲁茨总部位于洛克鲁茨组织诊断部组织诊断部总部位于图森总部位于图森区域总部区域总部新加坡新加坡东京东京印第安纳波利斯印第安纳波利斯布拉茨伯格布拉茨伯格普莱森普莱森图森图森巴塞罗那巴塞罗那洛克鲁茨洛克鲁茨巴塞尔巴塞尔曼海姆曼海姆潘茨堡潘茨堡格拉茨格拉茨布格多夫布格多夫罗氏诊断罗氏诊断全球体外诊断行业名列第一全球体外诊断行业名列第一1 Source:company reports,Industry consultants,Roche analysis based on peer sales 2008(BD,Bayer and Inverness 2007 figures)2 In vitro diagnostics market;excludes Life Science research market;*Includes Ventana20081,2 体外诊断市场占有率体外诊断市场占有率罗氏诊断罗氏诊断中国体外诊断行业名列第一中国体外诊断行业名列第一 Source:company reports,Industry consultants,Roche analysis based on peer sales 20092009 体外诊断市场占有率体外诊断市场占有率Danaher:(包含整合后的BeckmanCoulter,Olympus和RadioMeter）罗氏诊断产品群罗氏诊断产品群应用科学应用科学分子诊断分子诊断实验室诊断实验室诊断健康医护部健康医护部 组织诊断组织诊断床边诊断床边诊断RR 办事处办事处华东华东/西南西南 华南华南华北华北总部总部罗氏诊断在中国罗氏诊断在中国20061978199720092002cobas 模块化平台模块化平台30年的传承与创新 Modular模块式血清工作站模块式血清工作站D2400生化分析仪生化分析仪P800生化分析仪生化分析仪E170电化学发光免疫分析电化学发光免疫分析主要内容主要内容 罗氏公司及其产品简介罗氏公司及其产品简介罗氏电化学发光罗氏电化学发光介绍介绍-传染病系列介绍传染病系列介绍-肿瘤标志物系列介绍肿瘤标志物系列介绍-其他项目简介其他项目简介电化学发光电化学发光（Elecsys）-全自动免疫分析系统全自动免疫分析系统j稳定的标记物三联吡啶钌j独特的磁性微粒子固相载体j专利的链霉亲和素生物素包被技术j电场启动的电化学发光技术j磁性分离技术j磁珠的凸凹表面使包被面积极联式放大。j载体悬浮于反应体系中，使异相反应成类似均相反应，大大加快反应速度。j磁性微珠方便吸引分离。g超高的检测灵敏度g宽泛的检测线性g稳定的检测试剂g创新的定标概念g独到的操作系统电化学发光的发光及检测系统电化学发光的发光及检测系统目前业界公认的更先目前业界公认的更先进的免疫检测方法！进的免疫检测方法！电化学发光免疫平台检测菜单（超过电化学发光免疫平台检测菜单（超过85项）项）甲状腺功能甲状腺功能Anti-TGAnti-TPOAnti-TSHR-2009年年9月月FT3FT4T3T4T-Uptake2008年年5月月TG2008年年5月月TSH贫血贫血FerritinVitaminB12FolateRBCFolate激素激素ACTH2007年年5月月C-PeptideCortisolDHEA-SEstradiolFSHHCG+HCGstatInsulinLHProgesteroneProlactinTestoteroneSHBG2009年年12月月hGH待注册待注册孕早期唐氏筛查孕早期唐氏筛查Free-HCG2009年年12月月PAPP-A2009年年12月月唐筛软件唐筛软件SSdwLABV5.0唐筛唐筛软件软件2009年年8月月肿瘤标志物肿瘤标志物AFPCA125IICA15-3CA19-9CA72-4CEACYFRA21-1FreePSANSES-1002009年年12月月TotalPSAHE4待注册待注册其它其它IgES-1002009年年12月月(braindamage)心肌标志物心肌标志物CK-MBDigoxinDigitoxinMyoglobinNT-proBNPII2009年年2月月TroponinThsTnT2009年年12月月TroponinI待注册待注册骨标志物骨标志物-Crosslaps2008年年5月月25-(OH)Vit.D32009年年4月月IntactPTHIntactPTHSTAT2009年年7月月N-MIDOsteocalcin2008年年5月月Total-P1NP2009年年12月月Total-VitaminD待注册待注册传染性疾病传染性疾病Anti-HAVAnti-HAVIgM2010年年3月月Anti-HBcAnti-HBcIgM2010年年3月月Anti-HBeAnti-HBsHBeAgHBsAgHBsAgConfirmatoryHBsAg定定量量-2011年年10月月Anti-HCV2009年年4月月HIVAntigenHIVAgConfirmatoryHIVCombi2008年年9月月RubellaIgG2009年年11月月RubellaIgM2009年年11月月ToxoIgG2009年年4月月ToxoIgM2009年年7月月CMVIgG2011年年4月月CMVIgM2011年年4月月HSV1-IgG待注册待注册HSV2-IgG待注册待注册自身免疫自身免疫AntiCCP2009年年10月月脓毒血症脓毒血症IL62010年年10月月PCT2010年年10月月先兆子痫风险先兆子痫风险评估评估sFLT-1可溶性血管内皮生可溶性血管内皮生长因子受体长因子受体-1PIGF胎盘生长因子胎盘生长因子*更多项目在更多项目在不断研发中不断研发中TGanti-TGanti-TPOanti-TSHRFerritinB12FolateRBC FolHepcidinhCG+AFPfhCGPAPP-AuE3Inhibin AhCG STATPlGFsFLT1TSHFT4FT3T4T3T-uptakeTnThsTnTTnIMyoglobinCK-MBNT-proBNPGDF-15DigDigitCyclosp.ATacrolimusSirolimusE2TestoProgLHFSHProlactinSHBGDHEA-SCEAfPSA PSAXlapsOsteocalcinPTHbio-int.PTHVit D3Vit D2/D3 P1NPCA19-9CA125CA15-3CA72-4CYFRANSES100GF-APanti-CCPPCTIL-6IgEC-PeptideInsulinIGF-1hGHCortisolACTHHBeAganti-HBc-IgManti-HBcanti-HBsHBsAganti-HBeHBsAg quant.anti-HCVHCV combianti-HAV-IgManti-HAVHIV combiHIV-Agexisting productprio 2/not budgetedTORCHHIVHepatitisOncologyThyroidFertilityCardiacAnemiaBoneHormonesInflammationBrain DamagePregnancyISD/TDMSP-BHb/Hg stoolElecsysReagentLineExtension免疫检测菜单扩展免疫检测菜单扩展launched 2008in de-velopmentL-FABP湖北省中医院目前开展的电化学发光检测项目湖北省中医院目前开展的电化学发光检测项目-红色字体项目红色字体项目甲状腺功能甲状腺功能Anti-TGAnti-TPOAnti-TSHR-2009年年9月月FT3FT4T3T4T-Uptake2008年年5月月TG2008年年5月月TSH贫血贫血FerritinVitaminB12FolateRBCFolate激素激素ACTH2007年年5月月C-PeptideCortisolDHEA-SEstradiolFSHHCG+HCGstatInsulinLHProgesteroneProlactinTestoteroneSHBG2009年年12月月孕早期唐氏筛查孕早期唐氏筛查Free-HCG2009年年12月月PAPP-A2009年年12月月唐筛软件唐筛软件SSdwLABV5.0唐筛唐筛软件软件2009年年8月月肿瘤标志物肿瘤标志物AFPCA125IICA15-3CA19-9CA72-4CEACYFRA21-1FreePSANSES-1002009年年12月月TotalPSA其它其它IgES-1002009年年12月月(braindamage)心肌标志物心肌标志物CK-MBDigoxinDigitoxinMyoglobinNT-proBNPII2009年年2月月TroponinThsTnT2009年年12月月TroponinI待注册待注册骨标志物骨标志物-Crosslaps2008年年5月月25-(OH)Vit.D32009年年4月月IntactPTHIntactPTHSTAT2009年年7月月N-MIDOsteocalcin2008年年5月月Total-P1NP2009年年12月月传染性疾病传染性疾病Anti-HAVAnti-HAVIgM2010年年3月月Anti-HBcAnti-HBcIgM2010年年3月月Anti-HBeAnti-HBsHBeAgHBsAgHBsAgConfirmatory HBsAg定定量量-2011年年10月月Anti-HCV2009年年4月月HIVAntigenHIVAgConfirmatoryHIVCombi2008年年9月月RubellaIgG2009年年11月月RubellaIgM2009年年11月月ToxoIgG2009年年4月月ToxoIgM2009年年7月月CMVIgG待注册待注册CMVIgM待注册待注册自身免疫自身免疫AntiCCP2009年年10月月脓毒血症脓毒血症IL62010年年10月月BRAHMSPCT2010年年10月月先兆子痫风险先兆子痫风险评估评估sFLT-1可溶性血管内皮生可溶性血管内皮生长因子受体长因子受体-1 PIGF胎盘生长因子胎盘生长因子*更多项目在更多项目在不断研发中不断研发中主要内容主要内容 罗氏公司及其产品简介罗氏公司及其产品简介罗氏电化学发光罗氏电化学发光介绍介绍-传染病系列介绍传染病系列介绍-肿瘤标志物系列介绍肿瘤标志物系列介绍-其他项目简介其他项目简介传染病项目传染病项目Infectious Disease MarkerHBsAgII (qualitative assay)+confirmatory testHBsAgIIQN (quantitative assay)定量检测定量检测即将上市即将上市Anti-HBs (quantitative assay)HBeAg (qualitative assay)Anti-HBe (qualitative assay)Anti-HBc (qualitative assay)AntiHCV (qualitative assay)HIV combi (qualitative assay)HIV antigen (qualitative assay)+confirmatory testAnti-HAV (quantitative assay)HAV IgM (qualitative assay)Anti-HBc IgM(qualitative assay)ElecsysHBsAgII先进的原理、高灵敏度与高特异性的完美结合先进的原理、高灵敏度与高特异性的完美结合如何实现：使用多种不同的抗体分别进行捕获和标记如何实现：使用多种不同的抗体分别进行捕获和标记钌标记的寡聚钌标记的寡聚HBs抗体，多价结合，抗体，多价结合，可放大信号，提高灵敏度。可放大信号，提高灵敏度。生物素标记的单克隆捕捉抗体，排除生物素标记的单克隆捕捉抗体，排除了干扰，保证卓越的特异性。了干扰，保证卓越的特异性。Elecsys HBsAg鉴定各个鉴定各个亚型时，表现出优异的亚型时，表现出优异的检测灵敏度。检测灵敏度。乙型肝炎病毒亚型有乙型肝炎病毒亚型有aywlaywl、ayw2ayw2、ayw3ayw3、ayw4ayw4、adw2adw2、adw4adw4、ayrayr、adrq+adrq+及及adrqadrq九种。九种。我国绝大多数地区以我国绝大多数地区以adradr为主，为主，adwadw次之。次之。Elecsys HBsAg II 具有优越的识别各种亚型的能力具有优越的识别各种亚型的能力ElecsysHBsAgII高性能突变检测能力高性能突变检测能力具有更全面的检测重组及天然的各种突变样品的能力具有更全面的检测重组及天然的各种突变样品的能力HBsAg HBsAg 抗原决定簇发生的突变可导致试剂漏检。抗原决定簇发生的突变可导致试剂漏检。HBsAg“a”HBsAg“a”决定簇上最主要的突变：决定簇上最主要的突变：（*Weber B.Expert Rev Mol Diagn 2005,5:75-Weber B.Expert Rev Mol Diagn 2005,5:75-91.91.）氨基酸的替换氨基酸的替换 ：G145R,K141E,T131IG145R,K141E,T131I122122和和123123之间的插入之间的插入Subtype alleles:Subtype alleles:亚型等位基因亚型等位基因aa insertion:aa insertion:氨基酸插入氨基酸插入aa substitutions associated with aa substitutions associated with immune escape:immune escape:与免疫漏检相与免疫漏检相关的氨基酸替换关的氨基酸替换ElecsysHBsAgII溯源至国际标准溯源至国际标准HBsAg II WHOWHO第二次第二次HBsAgHBsAg国际标准，国际标准，adw2adw2亚型，亚型，A A基因型；基因型；IU/mLIU/mLElecsysHBsAgII定量应用定量应用 COI 和 IU/ml 在 5-6 logs 范围内均呈线性0,111010010001000010000010000000,1110100100010000100000IU/mLc.o.i2009AASLDElecsysHBsAgII的定量应用的定量应用应用方法ElecsysHBsAgII试剂试剂-定量使用的局限性定量使用的局限性HBsAgII试剂是优良的试剂是优良的初筛试剂盒初筛试剂盒。结果报告单位为结果报告单位为COI=样本光子数样本光子数/Cutoff光子数光子数COI（CutOffindex）临界值指数临界值指数部分部分HBsAg强阳性的样本，强阳性的样本，HBsAg浓度极高超过浓度极高超过1500000 IU/ml，会因为抗原过剩产生Hook效应，导致检测结果偏低或极低的现象。对于对于HBeAg阳性的样本，建议将样本阳性的样本，建议将样本稀释稀释400倍倍后再进行检测，后再进行检测，可可避免避免Hook效应效应对结果的干扰。对结果的干扰。HBsAg浓度在浓度在100000IU/mL以内的样本以内的样本COI和和IU/mL的换算关系如下：的换算关系如下：1COI约约=0.064IU/mL以以COI为单位时为单位时,1COI为有反应性，为有反应性，52000 IU/ml手工步骤手工步骤结果显示结果显示(IU/ml)(70%-80%标本在此范围标本在此范围)e601/e170(1:400)在线稀释在线稀释e601/e170(1:400)在线稀释在线稀释 HBsAg II Quant25的标的标本本52000IU/mlHBsAg定量检测流程定量检测流程通过乘以稀释倍数换通过乘以稀释倍数换算出浓度算出浓度(IU/ml)ElecsysHBsAgIIQuant主要性能指标主要性能指标仪器自动稀释仪器自动稀释(默认默认1：400倍，倍，25%强阳性样本，强阳性样本，需要手工稀释）需要手工稀释）宽检测范围（宽检测范围（Roche:25-52000IU/mL）极佳的亚型检测能力和突变检测能力极佳的亚型检测能力和突变检测能力极佳的临床灵敏度极佳的临床灵敏度为什么需要为什么需要 HBsAg定量检测定量检测?HBsAg是监控慢性乙型肝炎治疗的指标对于对于HBeAg阳性和阳性和HBeAg阴性的患者阴性的患者,理想的治疗终点是理想的治疗终点是实现实现HBsAg的消失的消失(伴随伴随或者不伴随或者不伴随Anti-HBs的出现的出现)。EASL Clinical Practice Guidelines:Management of chronic hepatitis B,Journal of Hepatology 50(2009)HBVDNA=病毒学标志病毒学标志HBsAg=免疫学应答标志免疫学应答标志eAgCHBeAg CHBHBeAg转换DNA下降下降HBsAg消失消失CHB（慢性乙型肝炎）（慢性乙型肝炎）HBsAg定量能够对定量能够对CHB干扰素和核苷类似物的治疗进行监控干扰素和核苷类似物的治疗进行监控PegasysPegasys and NUCsNUCs干扰素（干扰素（INF）和核苷类似物（）和核苷类似物（NUCs）是目前治疗慢性乙型肝炎的主要两类药物是目前治疗慢性乙型肝炎的主要两类药物定量定量定量定量定量定量中国慢性乙型肝炎防治指南中国慢性乙型肝炎防治指南(2010年版年版)TreatmentDNALogcopies/mL治疗中治疗中随访随访SVRs(N=12)NRs(N=18)复发复发(N=18)Moucari R et al.Hepatology 2009012345678BLW12W24W48W72W96SVRs=持续的病毒学应答持续的病毒学应答(在治疗之后在治疗之后1年内年内HBV DNA 处于不可测范围处于不可测范围)SVRs(N=12)NRs(N=18)复发复发(N=18)0.511.522.533.54治疗中治疗中随访随访BLW12W24W48W72W960LogHBsAgIU/mlMoucari R et al.Hepatology 2009SVRs=持续的病毒学应答持续的病毒学应答(在治疗之后在治疗之后1年内年内HBVDNA处于不可测范围处于不可测范围)NRs=非应答者非应答者在治疗早期在治疗早期HBsAgQuant比比HBVDNA具有更好的疗效监控价值具有更好的疗效监控价值NRs=非应答者非应答者HBsAg定量值提示不同治疗转归定量值提示不同治疗转归HBsAg 的浓度和HBeAg 的血清转换呈相关Piratvisuth T.,Lau GKK.,Marcellin P.,Brunetto MR.(2010).20th conference of the APASL,Beijing,China治疗治疗12周或者周或者24周周治疗治疗6个月后个月后HBeAg的转归率的转归率HBsAg定量应用新动向定量应用新动向-作为乙肝治疗的停药指标作为乙肝治疗的停药指标2011年年10月月11日日香港中文大学香港中文大学肝病护理中心肝病护理中心156例患者，例患者，随访三年随访三年。HBsAg定量结果定量结果=100IU/mL作为作为停药指标停药指标；并；并定期随访定期随访检测检测HBsAg定量值。定量值。HBsAg100IU/mL，95%患者患者停药后停药后复发复发。ElecsysAnti-HBs定量检测、精密度高定量检测、精密度高从低浓度高浓度均具有极高的精密度从低浓度高浓度均具有极高的精密度提供准确可靠的提供准确可靠的疫苗接种前和接种后疫苗接种前和接种后的保护性抗体的保护性抗体量化指标量化指标Anti-HBs浓度指示免疫应答浓度指示免疫应答AntiAntiHBS(IU/LHBS(IU/L）接种的要求接种的要求 101000010000 7 7年后年后v国际标准国际标准阳性阳性10IU/l；通常认为通常认为100IU/L才具备保护能力。才具备保护能力。v 表面抗原存在不同的表面抗原存在不同的亚型亚型，所以所以抗体具备多样性抗体具备多样性。使用不同的厂家的。使用不同的厂家的 试剂检测试剂检测Anti-HBsAnti-HBs的结果会有一定的差异。的结果会有一定的差异。v 各家试剂中采用的表面抗原的材料（来源于血浆或者基因工程），抗原各家试剂中采用的表面抗原的材料（来源于血浆或者基因工程），抗原 的的亚型以及处理程序亚型以及处理程序等都很大程度的影响着等都很大程度的影响着Anti-HBsAnti-HBs的结果的结果v 血清中抗体的复杂性：血清中抗体的复杂性：感染的患者的体内会存在着抗感染的患者的体内会存在着抗a,d or ya,d or y等抗原等抗原 决定簇的特异抗体，决定簇的特异抗体，接种的个体产生的抗体的构成依赖于疫苗的成份接种的个体产生的抗体的构成依赖于疫苗的成份v 罗氏罗氏Anti-HBsAnti-HBs试剂中使用的试剂中使用的HBsAgHBsAg是来源于人类血清的纯化的是来源于人类血清的纯化的含有各种含有各种 亚型的亚型的HBsAgHBsAgElecsys Anti-HBs试剂盒特点试剂盒特点第一第一,第二第二,第三次接种后第三次接种后Elecsys Anti-HBsElecsys Anti-HBs与其他与其他Anti-HBsAnti-HBs试剂检测后的结果试剂检测后的结果Elecsys Anti-HBsElecsys Anti-HBs用于监测免疫应答的疗效用于监测免疫应答的疗效分析灵敏度分析灵敏度 方法学比较方法学比较 (用参考物质用参考物质82-100 PEI U/mL)Elecsys HBeAg 优异的分析灵敏度优异的分析灵敏度(对参考物质对参考物质)00.20.40.60.81.01.21.40123456HBeAg concentration PEI U/mLs/co ratioElecsys HBeAgAssay Acut-off0.11101001000100001000000.11101001,00010,000log HBeAg PEI U/mLlog COIrecombinant HBeAg(5g/mL)1864.8 PEI-U/mLElecsys HBeAg 定量评估定量评估线性范围宽线性范围宽Elecsys HBeAg COI 在在 1.5400 之间时，之间时，COI 结果和结果和 PEI U/ml 结果之间有良结果之间有良好的线性关系好的线性关系 （PEI U/ml:0.3100 PEI U/ml)。ElecsysHBeAg标本结果定量单位（标本结果定量单位（PEI U/ml）HBeAg HBeAg 浓度浓度（PEI U/mLPEI U/mL）=(COI=(COI 标本标本 COI COI 阴性质控阴性质控)x F)x F常数常数 F=0.227F=0.227，不随试剂批号而改变，不随试剂批号而改变举例：举例：0.2270.227ElecsysHBeAg定值溯源性至定值溯源性至 PEI 标准品标准品 82，结果具有可比性，结果具有可比性PEI是是Paul-Ehrlich-Institute的简称，它是德国的一个机构，隶属于德国卫生部。的简称，它是德国的一个机构，隶属于德国卫生部。该机构成立已经该机构成立已经100多年，主要的研究方向是疫苗、抗体、基因治疗、变态反应原研究多年，主要的研究方向是疫苗、抗体、基因治疗、变态反应原研究等。它有很多职能，包括德国以及欧盟的医学产品法规的制定；等。它有很多职能，包括德国以及欧盟的医学产品法规的制定；PEI是的合作组织，只要职能是体外血液产品的质量确认。是的合作组织，只要职能是体外血液产品的质量确认。PEI还提供以下标志物的参考品和国际标准品：还提供以下标志物的参考品和国际标准品：HIV1/2,HBV,HCV,HAV,RubellavirusandHCMV由于由于HBeAg没有没有WHO标准品，所以目前标准品，所以目前PEI标准品是最高级的国际标准品标准品是最高级的国际标准品。ElecsysHBV定量检测定量检测-注意事项注意事项现阶段，使用现阶段，使用HBsAgII初筛试剂盒检测初筛试剂盒检测HBsAg，将检测结果，将检测结果COI换算换算成成IU/mL，因此结果，因此结果0.064IU/mL则判为阳性。则判为阳性。针对针对HBeAg阳性阳性的样本，如果的样本，如果HBsAg定量结果偏低定量结果偏低，则可能是因为，则可能是因为Hook效应效应影响了检测结果，如需进行影响了检测结果，如需进行HBsAg定量，请在定量，请在检验申请时检验申请时注明相关信息注明相关信息。HBsAg全定量试剂盒上市后，全定量试剂盒上市后，HBsAg和和HBsAgQN项目将同时存在，项目将同时存在，针对针对乙肝疗效监控的样本乙肝疗效监控的样本和和筛查样本筛查样本需在申请单注明相关信息。需在申请单注明相关信息。HBeAg阳性的样本，疗效的监控可以以阳性的样本，疗效的监控可以以HBeAg的定量为主，的定量为主，HBsAg定量为辅。定量为辅。HBeAg转阴的样本建议以转阴的样本建议以HBsAg监控为主。监控为主。乙肝体检筛查使用乙肝体检筛查使用HBsAgII试剂盒试剂盒乙肝治疗疗效监控使用乙肝治疗疗效监控使用HBsAgQN试剂盒试剂盒感染感染复制复制疾病活动期疾病活动期血清标志物血清标志物HBsAganti-HBcanti-HBsHBeAgAnti-HBeHBVDNA ALT1 12 23 3血清标志物与乙型肝炎病毒感染血清标志物与乙型肝炎病毒感染项目项目溯源性溯源性溯源溯源单位单位单单位位换算换算线性区间线性区间HOOKHOOK效应效应结果判断结果判断HBsAgIIHBsAgIIWHOWHO第二次第二次HBsAgHBsAg国际国际标准，标准，adw2adw2亚型，亚型，A A基基因型；因型；IU/MlIU/MlIU/mLIU/mL COICOI1COI1COI约约=0.064IU/mL=0.064IU/mL100000 1500000 IU/ml1500000 IU/ml1 COI 1 COI 有反应性有反应性 0.9 COI 150000IU/ml150000IU/ml10IU/mL 10IU/mL 有反应有反应性性 10IU/mL 1800PEIU/mL1800PEIU/mL1COI 1COI 有反应性有反应性 0.9COI 1COI 1COI 无反应性无反应性 0.9COI 1COI 1COI 无反应性无反应性 0.9COI 0.9COI 有反应性有反应性HBVHBV检测相关参数列表检测相关参数列表v病人处于病人处于HBVHBV感染的恢复期感染的恢复期，病，病 人体内存在人体内存在HBsAg-Anti-HBsHBsAg-Anti-HBs的的免免疫复合物疫复合物v两种两种HBVHBV亚型感染亚型感染，一种亚型已，一种亚型已经产生抗体，另外一种还没有经产生抗体，另外一种还没有（HBsAg Ad/Anti-HBs Ay)HBsAg Ad/Anti-HBs Ay)v存在存在HBVHBV的突变的突变,常见于：常见于：1 1、新生儿母婴感染新生儿母婴感染2 2、肝移植的患者肝移植的患者 vIFNIFN治疗出现治疗出现 HBsAb HBsAb 血清转血清转换换,因因 S S 基因变异基因变异,而未能清除而未能清除 HBsAgHBsAg；v疫苗接种，有正常的疫苗接种，有正常的 HBsAb HBsAb 应答应答,感染感染 决定族变异的免疫决定族变异的免疫逃逸变异株逃逸变异株HBsAg/Anti-HBs同时出现的探讨同时出现的探讨 HBsAg/Anti-HBs HBsAg/Anti-HBs 同时出现的发生几率和意义探讨同时出现的发生几率和意义探讨 Clinical infectious disease 2007;44;1161-9 Clinical infectious disease 2007;44;1161-9（ChinaChina）Concurrence:5%Concurrence:5%主要结论：主要结论：v 分析了分析了411411例慢性肝炎患者例慢性肝炎患者，发现发现2020例同时阳性例同时阳性的结果（该状态的结果（该状态稳定稳定1212月以上月以上）；）；v 411 411例患者发现了例患者发现了1313例发生了基因变异例发生了基因变异；v 对于是否同时存在对于是否同时存在Anti-HBsAnti-HBs的两组，对于突变没有明显差异的两组，对于突变没有明显差异v 标本中纯化的标本中纯化的anti-HBsanti-HBs可以和可以和HBsAgHBsAg有反应，但是相比较于自然产生的抗体，其有反应，但是相比较于自然产生的抗体，其活性很弱活性很弱v 由于由于亚型不同亚型不同，并不能中和体内同时存在的抗原并不能中和体内同时存在的抗原v 没有发现免疫复合物没有发现免疫复合物HBsAg/Anti-HBs同时出现的探讨同时出现的探讨 一般是处于一般是处于HBeAgHBeAg和和AntiHBeAntiHBe转换时期，转换时期，e e抗原和抗原和e e抗体抗体以抗原抗以抗原抗体复合物的状态共存体复合物的状态共存。Anti-HBeAnti-HBe试剂检测时，血样中的试剂检测时，血样中的抗原抗体复合物抗原抗体复合物也参与到反应，也参与到反应，起到了起到了竞争效果竞争效果。因而血样中存在。因而血样中存在游离游离eAgeAg和和抗原抗体复合物抗原抗体复合物时，可以检为时，可以检为HBeAgHBeAg、Anti-HBeAnti-HBe同时阳性。同时阳性。HBeAg/Anti-HBe同时出现的探讨同时出现的探讨 Anti-HBc阳性率偏高问题阳性率偏高问题乙型肝炎核心抗体分为乙型肝炎核心抗体分为Anti-HBc-IgG和和Anti-HBc-IgM在在急性期急性期几乎在所有感染个例都可检出几乎在所有感染个例都可检出Anti-HBc有时是唯一的血清标记物有时是唯一的血清标记物。无论肝病是否存在或病毒是否已清除，无论肝病是否存在或病毒是否已清除，Anti-HBc可持续存在数十年可持续存在数十年。HBcAg较较HBsAg有更强的免疫原性，因而有更强的免疫原性，因而Anti-HBc较较Anti-HBs产生早得多产生早得多、有有高得多高得多的血清水平、的血清水平、长久得多长久得多的时间。的时间。国外一些地区以国外一些地区以Anti-HBc筛检筛检HBV感染供血感染供血，认为是最灵敏的血清学试验。研，认为是最灵敏的血清学试验。研究表明究表明HBV感染者抗感染者抗-HBc阳性率在阳性率在95%以上以上。AntiHBc低低浓度浓度时作为时作为既往感染的指标既往感染的指标，用于乙型肝炎流行病学的调查，用于乙型肝炎流行病学的调查。AntiHBc高高浓浓度度时作为时作为乙型肝炎病毒感染乙型肝炎病毒感染的指标的指标。Anti-HBc-IgM出现于新感染早期，是乙型肝炎早期诊断的指标，同时也是乙型出现于新感染早期，是乙型肝炎早期诊断的指标，同时也是乙型肝炎肝炎急性感染和复制活跃的指标急性感染和复制活跃的指标。ELISAELISA检测时，样本进行检测时，样本进行检测时，样本进行检测时，样本进行1 1：3030稀释稀释稀释稀释后再检测后再检测后再检测后再检测HBcAbHBcAb，阳性率约为阳性率约为阳性率约为阳性率约为20%20%，人为，人为，人为，人为造成部分低浓度血清核心抗体出现假阴性。使用高敏发光法检测，使用使用高敏发光法检测，使用使用高敏发光法检测，使用使用高敏发光法检测，使用DTTDTT（二硫苏糖醇）去除潜在的干扰；（二硫苏糖醇）去除潜在的干扰；（二硫苏糖醇）去除潜在的干扰；（二硫苏糖醇）去除潜在的干扰；HBcAbHBcAb阳性阳性阳性阳性率率率率可达到可达到可达到可达到60-70%60-70%。Anti-HBcAnti-HBc检测采用检测采用检测采用检测采用竞争法竞争法竞争法竞争法，COI1COI400ng/ml病毒性肝炎、肝硬化绝大部分AFP400ng/ml消化道肿瘤、肺癌、生殖系统肿瘤伴肝转移者AFP可升高，但升高水平不及原发性肝癌患者非精原胚胎细胞肿瘤晚期患者的AFP水平显著增高孕妇血清AFP升高提示胎儿脊柱断裂、无脑症或多胎，AFP水平较低（结合孕妇年龄）提示未出生的婴儿有Downs综合症的危险性癌胚抗原癌胚抗原-CEA结直肠癌首选肿瘤标志物CEA 是一种单体糖蛋白，CEA主要来源于胎儿的胃肠和血液，正常成人的血液中很难检测出CEA。临床意义：CEA作用广谱，消化道肿瘤、肺癌、乳腺癌、生殖系统肿瘤、泌尿系肿瘤有不同程度的升高，主要应用于结直肠癌治疗的监测和随访结直肠癌治疗的监测和随访与肿瘤的分期相关，分期越晚CEA水平越高肿瘤的体积越大，CEA水平越高发生远处转移的患者，CEA水平越高腺癌最敏感，其次是鳞癌和低分化癌正常人吸烟者CEA升高肝硬化、肝炎、肺气肿、肠道憩室、直肠息肉、结肠炎等良性病CEA可升高癌症病人的胸、腹水、消化液、分泌物中的CEA常升高CEA的优势与局限性结直肠癌首选的肿瘤标志物优势：CEA是对结直肠癌的预后评估、术后监测和疗效评估的首选指标，配合隐血检查，可对50岁以上无临床症状高危人群进行筛查局限性：只在肿瘤的中晚期才有较显著的升高，也不只局限于某一类肿瘤，因此CEA对多数肿瘤的早期发现与鉴别诊断并无帮助 CEA组织特异性不高CA19-9胰腺癌首选肿瘤标志物是分子量10，000道尔顿的糖脂，胎儿的胰腺、胆囊、肝脏、肠等组织表达，成年人肺、肝脏、胰腺等组织也有低浓度的表达检测患者血清CA19-9可作为胰腺癌、胆囊癌等恶性肿瘤的辅助诊断指标，监测