血红蛋白电泳简易操作流程教学文稿.doc

血红蛋白电泳简易操作流程

精品资料
血红蛋白电泳简易操作流程
样本的制备：
1） 洗涤红细胞。取400μL血细胞加4mL生理盐水，上下颠倒5次或吹打混匀。
2） 用3000转速的离心机离心全血5分钟并弃去浮在表面上的悬浮液
3） 重复1）和2）步骤，尽量吸走红细胞表面多余的生理盐水。
6) 取40ml RBC于一试管中，加150ml裂解液
7) 充分混匀，放置15-20分钟。

说明：RBC及裂解液比例浓度可据标本情况调整。
注意：
1、每次洗涤需要充分混匀。
2、吸取40ml RBC时，需要枪头深入至压积红细胞内部或底部，完全吸取40ml 之后再提起枪头，避免吸到生理盐水，保证RBC的量。
3、裂解时间最少15分钟，以保证裂解充分。

电泳前准备：
1. 打开电脑以及电泳仪器右侧的主开关。
2. 试剂检查及准备：每次在开始新的电泳前，应检查如下内容：染色液是否在Min-Max标记线之间，染色液用过10次染色循环后不能再使用；脱色液及蒸馏水是否过少；点样器是否放置在准确的位置中；废液是否清空。
3. 放置海绵条：用干净的镊子把海绵条插入电泳槽的两侧电极中，轻轻压平。
注意：请勿将海绵条插入到中间的电极中。
4. 样本装载：从仪器中抽出样盘托，取开吸磁铁片，将一次性载样盘放置样盘托中，盖好铁片，然后按1-13号顺序每孔加入30ul裂解后的样本，并将其插入仪器相应位置中。
5. 胶片准备：取胶片一块用配套滤纸沿同一方向将多余的缓冲液吸走，应保证滤纸完全贴在胶片的表面，然后快速移走滤纸。将胶片装在胶片架上，装胶片时抓住胶片有条形码侧的一角，将有凝胶面向上，箭头向胶片架上方，沿上下卡口轻轻插入，然后将胶片架放回电泳仪对应位置。注：滤纸在胶片上约5s就必须要移走，防止胶片脱水。
6. 检查各项准备情况，完全准备好后切记要合上仪器盖。

电泳分析软件操作：
1. 双击电脑桌面上的电泳扫描图标（Elfolab）→ 数据库（Database）→ 打开数据库（Open Database）→ 数据库（Database）→ 工作数据库（Working Database）→ 新的工作数据库（New working Database）→ 在胶片1中选择血红蛋白→ OK。
2. 点击“运行G26仪器” → 在右侧上方的任务栏下选择对应项目→ 开始分析。若需进行下一张胶片测试，需要点击，在胶片2中选择项目。若只需进行扫描需要在“Interlab G26”软件界面右下方选择“扫描”。
3. 仪器自动完成点样、电泳、凝胶变性、染色、脱色、烘干及判读全过程。约50分钟。
4. 电泳完成后，在Elfolab数据库软件会有相应的峰值图，在每张胶片的左上方患者ID窗口录入当天的样本号，按Enter键保存并自动跳到下一号。
5. 数据编辑完成后，需要点击键，选择对应的胶片及条带输出数据到Lis系统。

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