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生理科学实验设计

精品资料
（19班6组）
呋塞米对清醒家兔的利尿作用和对尿中离子浓度的影响

一、 实验目的：观察呋塞米的利尿作用和和排钾、钠、氯离子作用。
二、 立题依据： 呋塞米属于高效类利尿药，主要作用于肾脏的髓袢升支粗段，特异性抑制分布在髓袢升支管腔膜侧的Na+-K+-2Cl-转运子，因而抑制NaCl的重吸收，降低肾的稀释与浓缩功能，排出大量接近于等渗的尿液。同时，由于钾重吸收减少，也降低了由于钾的再循环导致的管腔正电位，减少了钙镁重吸收的驱动力，使它们重吸收减少，排泄增加。输送到远曲小管和集合管的增加又促使钠钾交换增加，从而使钾的排泄进一步增加。临床上用于治疗心性水肿、肾性水肿、肝硬化腹水、机能障碍或血管障碍所引起的周围性水肿，并可促进上部尿道结石的排出。其利尿作用迅速、强大，多用于其它利尿药无效的严重病例。由于水、电解质丢失明显等原因，不宜常规使用。静脉给药可治疗肺水肿和脑水肿。药物中毒时可用以加速毒物的排泄。
三、 主要参考文献： [1] 吴铁，冯冰虹．药理学[M]．
四、 实验对象：家兔（2.5-3.0kg）
五、 实验药品与器材：5%葡萄糖生理盐水，1%呋塞米，15%盐酸普鲁卡因，钠、钾、氯离子混合标准液，1%四苯硼钠溶液，0.5%焦锑酸钾溶液，单一显色剂，无水乙醇，30%乙醇；兔手术台，急性兔手术器械，输尿管插管 ，50mL烧杯，10mL量筒，注射器，吸管，滴定管，分光光度仪。
六、 实验方法与步骤：
（1）取家兔15只，随机分为3组。
（2）将清醒家兔固定在兔手术台上，先用15%普鲁卡因局麻下腹部然后进行输尿管插管。并在家兔耳缘静脉用头皮针静脉滴注生理盐水以保证家兔的水负荷。
（3）给药前，每5min收集尿液一次，连续三次，求平均值作为药前尿液量水平。
（4）待尿液流速稳定后分别向各组家兔自耳缘静脉注入下列药物：
1）第一组注射生理盐水2ml/kg体重
2）第二组注射50%葡萄糖溶液2ml/kg体重
3）第三组注射0.1%呋塞米溶液2ml/kg体重
50%葡萄糖只产生利尿作用而对尿中的离子浓度不造成影响用以做对照。
（5）分别记录各组0-5min尿量6-10min尿量和10-15min尿量，取各药物作用的中段尿进行离子测定。
（6）3组按照表1、表2、表3的操作步骤进行尿中钠、钾、氯离子的测定。

表1 氯离子测定
给生理盐水后 给50%葡萄糖后 给呋塞米后 标准管
样品尿
标准品溶液
单一显色剂

表2 钠离子测定
给生理盐水后 给50%葡萄糖后 给呋塞米后 标准管
样品尿
标准品溶液
蒸馏水
混匀后每管去4ml，只保留1ml
0.5%焦锑酸钾
无水乙醇
30%乙醇

表3 钾离子测定
给生理盐水后 给50%葡萄糖后 给呋塞米后 标准管
样品尿
标准品溶液
1%四苯硼钠溶液
蒸馏水

混匀后选波长560nm,以蒸馏水调零，在分光光度计上测定各管钾离子的光密度值（OD）；以波长460nm，测定各管钠离子和氯离子的光密度值。按照下列公式计算离子浓度。

样品中钠或氯离子浓度=150mmol/L×（样品尿OD/标准品OD）
样品中的钾离子浓度=5mmol/L×（样品尿OD/标准品OD）
各时间段内各种离子总排出量=样品中离子浓度×各时间段内尿量

（6）实验结果见表4

表4 结果表（X±S）
0-5min 尿量 5-10min尿量10-15min尿量 钠离子浓度 钾离子浓度 氯离子浓度
（ ml ） (m mol) (m mol) (m mol)
生理盐水组
50%葡萄糖溶液组
0.1%呋塞米组

七、 结果预测：呋塞米可以使尿中钠、钾、氯离子排出增加，而且具有很强的利尿作用。
八、 创新点：所需时间短、工作量小、较易反应出药物的利尿作用。临床效果比较一致，且选用的动物来源广泛，价格便宜，实验所需药品较普遍。
手术器材和设备均为实验室常用，手术方法也相对熟练。

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