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实验必须遵循的三大基本原则:
(1)设置对照原则:在实验设计中,为排除无关条件的干扰,常常要设立对照实验。通过干预或控制研究对象,以消除或减少实验误差,鉴别实验中的处理因素与非处理因素的差异。常见对照方法主要有:
① 空白对照 不给对照组任何处理因素。如:在研究甲状腺激素促进蝌蚪发育实验中,先取等量的同龄且发育状态相同的小蝌蚪60只,分为两组放入容积相同的两个玻璃缸,加入等量的自然水和蝌蚪饲料;一组加入甲状腺激素,另一组不加任何药品,就是空白对照。
② 条件对照 给对照组施以部分实验因素,但不是所要研究的实验因素。如:在上述空白对照的举例中,如果取等量的同龄且发育状态相同的小蝌蚪60只,分为三组(编号甲、乙、丙)放入容积相同的三个玻璃缸,加入等量的自然清水和蝌蚪饲料;甲组加入甲状腺激素,乙组加入甲硫咪唑(甲状腺抑制剂),是条件对照,丙组不加任何药品,是空白对照。
③相互对照 不单设对照组,而是几个实验组相互对照。例如:验证植物根对矿质离子有选择吸收的特性,可把蕃茄和水稻分别培养在成分相同的培养液中,过一段时间后,测定培养液中各种矿质元素离子浓度的变化,就会发现蕃茄吸收Ca多,吸收Si少;而水稻吸收Si多,吸收Ca少。以上就是两个实验组的相互对照。
④自身对照 对照和实验都在同一研究对象上进行。如:要研究植物根具有向重力性,茎具有背重力性,可把某一植株横放于培养基上,让其自然生长,经过一段时间后,便可观察到根向重力生长,茎背重力生长。这里,对照和实验都在同一个体上进行,属于自身对照。
(2)单一变量原则:控制其它因素不变,只改变其中一个因素,观察其对实验结果的影响。如探索温度对酶活性的影响时,只能改变反应的温度,其它如pH、酶浓度等因素就要完全相同且适宜。
(3)平行重复原则:对所做的实验在同样条件下,进行足够次数的重复,不能只进行1-2次便轻易得出结论。需要选择的实验材料的样本数(如植株的数目、种子的粒数、实验动物的个体数等)不能太少,否则实验的结果不足以反映出生物学现象的本来面目。任何一项生物学实验,要有科学性,都必须能够重复,都必须经得起重复。
此外,还应注意科学性原则(指在设计实验时,必须要有充分的科学依据,也就是要以前人的实验为基础,而不是凭空设想,主观臆造)、简便经济原则(如,装置简单、实验步骤较少、使用材料用具少、实验时间较短等),等等。
探究性实验和验证性实验的比较
探究性实验
验证性实验
实验目的
探索研究对象的未知属性、特征以及与其他因素的关系
验证研究对象的已知属性、特征以及与其他因素的关系
实验假设
假设一般采用“如果A,则B” 的形式表述,是根据现有的科学理论、事实.对所要研究的对象设想出一种或几种可能性的解释
因结论是己知的,因此不存在假设问题
实验原理
因探究内容而异
因验证内容而异
实验过程
应有的实验步骤实际上并未完成,因探究内容而异
实验步骤可以是曾经做过或尚未做过的,因验证内容而异
实验现象
未知,可以不描述
已知,应准确描述
实验结果的预测
一般需讨论“如果出现结果①会怎样,如果出现结果②或③又会怎样” 。但有时也会出现“预测最可能的结果”的问题.此种情况应根据已有知识推测最合理的结果。
实验现象是确定的,要么是,要么不是。
实验结论
可根据可能出现的结果,做出不同的推论。即,结论是不惟一的。
根据实验结果做出肯定或否定的结论。即,结论是惟一的。
探究性实验的例题:现有一植物的种子,已知它的萌发受水分、温度和氧气的影响,但不了解其萌发与光是否有关。为探究光的有无对该种子的萌发的影响,请你依据所给材料和用品设计出实验的方法步骤,预测可能的实验结果,并分别得出相应的结论。
(1)材料和用品:数量充足的铺有滤纸的培养皿、无菌水、表面消毒过的种子等。
(2)方法步骤:
① ;
② 。
(3)可能的实验结果及相应的结论:
① ;
② ;
③ 。
解析:这是在高考试题中较早出现的具有探究性的实验方案设计。探究性实验是对某个生物学问题或实验结论不知道或不清楚,需要通过一定的实验方法,对可能出现的多个预期结果进行实验探究,从而得出实验结论。主要考查考生的实验设计、分析和评价的能力。其基本内容一般包括:明确实验目的、要求、条件;确定实验原理、研究对象、实验设计思路;设计实验操作步骤,以及对实验结果的多向预测和解释等。
参考答案:(1)①向培养皿中倒入适量的水,将等量的种子分别放入两组培养皿中
②将一组置于有光照的环境中,另一组置于黑暗环境中,在培养过程中,使两组培养皿所处温度、水分、空气状况适宜且相同
(3)①有光组萌发,无光组也萌发(或发芽率差异不显著),该种植物的种子的萌发不受光的影响;②有光组萌发,无光组不萌发(或有光组发芽率高于无光组,差异显著),光是该种植物种子萌发的必要条件之一; ③有光组不萌发,无光组萌发(或无光组发芽率高于有光组,差异显著),光抑制该种植物种子的萌发。
验证性实验的例题:血液中的钙离子在血液凝固过程中起重要作用,缺乏则血液不能凝固,草酸钾溶液能与血液中的钙离子发生反应,形成草酸钙沉淀,起抗凝作用。请根据提供的实验材料和用具,简要写出第二步以后的实验步骤和实验结果,验证钙离子在血液凝固中的作用,并回答问题。
一、实验材料和用具:(1)家兔 (2)生理盐水 (3)酒精棉 (4)适宜浓度的草酸钾溶液 (5)适宜浓度的氯化钙溶液 (6)试管、注射器(针管、针头)
二、实验步骤和实验结果
第一步:在A、B试管中分别加入等量的草酸钾溶液和生理盐水(见图)
第二步:
第三步:
第四步:
问题:设置B管的目的是 。
解析:该题所要验证的是血液中的钙离子在血液凝固过程中起重要作用。
从题中第一步知道,A、B两支试管中分别加入等量的草酸钾溶液和生理盐水。草酸钾能与血液中的钙离子形成草酸钙沉淀,起抗凝作用;而生理盐水则相当于人体内的细胞外液,不影响血液中钙离子的作用。因此,如果A、B两支试管中分别加入新鲜血液后,会出现A试管中血液不凝固(血液中的钙离子与草酸钾发生了反应),B试管中血液凝固的现象。由B试管对照(第一次对照)组可说明,缺乏钙离子血液不凝固,有钙离子血液能凝固。
如何肯定是血液中的钙离子而不是其它物质在血液凝固中起作用?可由题中提供的材料再做一次对照(即第二次对照)实验。即在A试管发生沉淀之后加入一定量的氯化钙溶液,至钙离子完全与草酸钾发生反应,继续加入氯化钙就会发现A试管中血液发生了凝固。从A试管加入氯化钙前后的现象对比,便可以验证在血液凝固中起作用的是钙离子而非其它物质。
参考答案:
第二步:用酒精棉消毒(家兔耳廓缘静脉),用注射器取兔血(1~2 mL)
第三步:立即将等量的鲜血分别加入到A、B试管中,经过一段时间后,
第四步:将等量的CaCl2溶液分别加入到A、B两试管中,结果:A管:凝固,B管:仍凝固。
问题:作为A管的对照
,① 突出实验原理的理解和应用;② 熟悉实验要用到的器材的选择、作用和使用方法;③ 明确实验设计的基本思路和实验步骤的程序;④ 清楚实验数据的测量、数据的处理方法;⑤ 强化对实验现象的观察分析、实验结论的归纳总结等。
实验类型
考纲知识要点
验证性
实验
生物组织有机成分的
提取、分离和鉴定
(1)生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
(2)叶绿体中色素的提取和分离
(3)DNA的粗提取与鉴定
显微镜下的观察
(4)高倍显微镜的使用和观察叶绿体
(5)细胞质流动的观察
(6)观察植物细胞的有丝分裂
(7)观察植物细胞的质壁分离与复原
探究性
实验
酶的催化特点
(8)比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率
(9)探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用
(10)温度对酶活性的影响
设计与观察
(11)植物向性运动的实验设计和观察
(12)设计实验,观察生长素或生长素类似物对植物生长发育的影响
(13)设计并制作小生态瓶,观察生态系统的稳定性
(14)观察SO2对植物的影响
调 查
(15)调查人群中的遗传病
(16)种群密度的取样调查
(17)调查环境污染对生物的影响
使用高倍显微镜必须注意几个原则
使用显微镜观察的实验内容复习中,除了熟悉显微镜的基本结构和使用方法外,需要着重把握好以下几个原则:
① 用眼原则:左眼注视目镜,右眼睁开。这样,一可减轻左眼疲劳,二方便绘图。
② 物镜选用原则:先低倍后高倍,由低倍到高倍,可以用低倍物镜观察清楚的就勿需使用高倍物镜。
③ 准焦螺旋使用原则:先粗后细,由粗到细。
此外,目镜和物镜选用的差异、反光镜和光圈的选用、装片移动方向的确定、显微镜下视野中污物的判定,等等,都是应该引起注意的。
实验材料的选择和试剂的配制
(1)还原糖的鉴定:要选择含还原糖量较高、颜色较浅的材料,这样颜色反应才明显。通过实验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。
(2)脂肪的鉴定:要选择富含脂肪的材料,如花生、蓖麻等,提前浸泡3~4 h。如果是新花生种子,可以不必浸泡,否则切下的薄片不易成形。
(3)蛋白质的鉴定:最好的实验材料是鸡蛋清,其蛋白质含量相对高,配制的提取液透明,与双缩脲试剂反应后,颜色反应明显,但蛋清液需要稀释。
(4)在观察叶绿体时,宜选用叶绿体大、数目少的材料。如阴生植物藓类的叶、菠菜叶的下表皮(稍带叶肉)等。由于在不同的光照下,叶绿体可以运动并改变在细胞中的分布位置。所以,在不同光照下采集的材料,其叶内叶绿体的形态有所不同。
(5)在观察细胞质的流动时,要选用细胞质流动较快的植物,如黑藻的幼嫩叶片、南瓜幼苗的表皮毛、小麦的根毛、向日葵舌状花瓣的表皮或大白菜内层叶片叶脉的表皮细胞等。选取实验材料时,最好将所要取材的植物体置于温暖的阳光下照射1~2小时,以使植物细胞处于旺盛的生活状态。
(6)在植物细胞的质壁分离和复原的实验时,要选择生活的、成熟的(具有大液泡)、有颜色的(如紫色洋葱)植物细胞;没有大液泡的植物细胞则质壁分离现象不明显。死的植物细胞中的细胞膜,由于失去了选择透过性,所以不能发生质壁分离。
(7)在有关酶的催化特点的探究实验中,常选用动物新鲜肝脏做实验材料,原因是细胞内的过氧化氢酶未被破坏,从而提高实验现象的对比程度。也可选用植物的组织(如马铃薯的块茎、萝卜的肉质根等)做实验材料。因为过氧化氢酶比较广泛地存在于动植物组织细胞中。
(8)正确配制和使用斐林试剂与双缩脲试剂:配制这两种试剂时,都要用到NaOH溶液和CuSO4溶液,但配制时,溶液浓度不同,使用原理和方法也有明显区别。(见下表)
斐林试剂
双缩脲试剂
配方
甲(A)液
0.1 g/mLNaOH
0.1 g /mLNaOH
乙(B)液
0.05 g/mLCuSO4
0.01 g/mL CuSO4
使用方法
甲、乙液混合均匀,现配现用
先A液后B液,不能混用
反应原理
及注意事项
斐林试剂中起实质作用的是生成的Cu(OH)42-络离子,放置过长就会形成Cu(OH)2沉淀或CuCO3沉淀,因而无法反应。
双缩脲试剂中起作用的是碱性环境中Cu2+(与蛋白质结合形成紫色络合物),因而必须先后使用。使用CuSO4时,溶液不能过量,否则蓝色的CuSO4溶液将遮蔽显色反应中产生的紫色。
此外,在尿糖的鉴定等临床研究或检测中,常选用班氏试剂(Benedict试剂),因为班氏试剂较之斐林试剂,要稳定一些,测定的效果也要灵敏一些
仅供学习与参考
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