2022年高三生物(人教版)一轮复习-基础课时案42-生物技术在其他方面的应用-基础回顾.docx

基础课时案42　生物技术在其他方面的应用
2022备考·最新考纲
1．血红蛋白的提取与分别。2.从生物组织中提取某些特定成分。3.试验：DNA的粗提取与鉴定。

一、DNA的粗提取与鉴定
1．基本原理

2．操作过程
材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织

裂开细胞(以鸡血为例)：鸡血细胞，加蒸馏水，用玻璃棒搅
拌，用纱布过滤，收集滤液

去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过把握NaCl溶液的浓度去除杂质

DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液

DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂，
沸水中加热5 min，溶液变成蓝色
易错警示！　(1)本试验不能用哺乳动物成熟红细胞作试验材料，缘由是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。
(2)试验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，其次次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。
(3)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。
深度思考
下图为“DNA粗提取和鉴定”试验的相关操作，请认真观看并分析①～④操作的目的分别是什么？

①________________　②________________
③________________　④________________
提示　①是使鸡血细胞吸水涨破释放出核物质；②是析出DNA，去除溶于酒精的杂质；③是使DNA溶解在2 mol/L NaCl溶液中；④是稀释NaCl溶液使其浓度接近0.14 mol·L－1，去除溶于低浓度NaCI溶液的杂质。

二、PCR技术的基本操作和应用
1．PCR原理
DNA热变性原理，即：

2．PCR反应过程
(1)变性：当温度上升到90_℃以上时，双链DNA解旋为单链。
(2)复性：温度下降到55_℃左右时，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
(3)延长：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下，依据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
三、血红蛋白的提取和分别
1．方法及原理
方法
原理
凝胶色谱法
依据相对分子质量的大小分别蛋白质
电泳法
各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、外形的不同
2.血红蛋白的提取和分别过程

深度思考
1．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为①～④中的哪一种？

提示　②，分子质量较大者先洗脱出来，分子质量较小者后洗脱出来。
2．如图所示装置可用于血红蛋白提取、分别的哪种过程？其原理是什么？烧杯内a溶液是蒸馏水吗？

提示　该装置为透析装置，由于透析袋是用硝酸纤维素制成的小分子可自由进出，而大分子保留在袋内，故可用于除去小分子杂质，烧杯中的a溶液应为20 mmol·L－1的磷酸缓冲液，不行使用蒸馏水。
四、植物有效成分的提取
1．植物芳香油的提取
(1)提取玫瑰精油试验
①方法：水蒸气蒸馏法。
②试验流程

(2)提取橘皮精油的试验
①方法：一般用压榨法。
②试验流程
石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤

橘皮油←再次过滤←静置
2．胡萝卜素的提取
(1)胡萝卜素的性质：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。
(2)试验设计
①方法：萃取法，石油醚最适宜作萃取剂。
②试验流程
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取

胡萝卜素←浓缩←过滤
(3)鉴定方法：纸层析法。