高压蒸汽灭菌生物指示菌使用标准操作规程电子教案.doc

高压蒸汽灭菌生物指示菌使用标准操作规程

精品文档
1.目的
建立高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞菌片的使用标准操作规程，保证其正确使用，并对高压蒸汽灭菌效果进行验证。
2.范围
本规程适用于高压蒸汽灭菌生物指标菌—嗜热脂肪杆菌芽胞菌片对高压蒸汽灭菌效果进行的监测。
3.职责
生化检验员对本规程的实施负责。
4.程序
4.1采用生物灭菌指标菌来检查高压蒸汽灭菌效果是最科学、可靠的检测方法。嗜热脂肪杆菌芽胞是国际公认的生物指标菌。该菌具有以下特点：
4.1.1最适生长繁殖温度为56℃，培养24小时即可形成菌落。
4.1.2该菌为需氧芽胞杆菌，其细菌繁殖体对培养基要求低，在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上呈米黄色。
4.1.3该菌无致病性、无热原、无毒，压力蒸汽抗性稳定，在4℃冰箱下保存6个月抗力无明显下降，在常温下（20℃左右）可保存1个月。
4.1.4在121℃饱和蒸汽作用下，存活时间≥3.9min，杀灭时间≤19min，D10值 1.3～1.9min，符合国际标准和国家标准的规定。
4.2结构
本生物指示剂由菌片、恢复培养基和外管组成，菌片由嗜热脂肪杆菌芽胞制备而成，染菌量为5.0×105～5.0×106cfu/片。
4.3使用方法
4.3.1本生物指示剂适用于各型压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测。
4.3.2使用时，将生物指示剂放入标准检测包的中心或待灭菌物品包的中心，置于灭菌器的规定位置。
4.3.3按规定的灭菌温度和时间进行灭菌处理。
4.3.4灭菌完毕，即刻将生物指示剂取出，盖朝上垂直握于手中，用专门工具或一夹子夹住菌管下部，将管内安瓿挤碎，让培养液流出浸没菌片。然后将菌管放于56℃恒温培养箱内或配套的微型培养器内培养24小时观察初步结果，48小时观察最终结果。
4.4结果判定
培养后生物指示剂的培养液由紫色变为黄色即表示有菌生长，判定为灭菌不合格；仍为紫色者为无菌生长，判定为灭菌合格。
4.5注意事项
4.5.1生物指示剂管从压力蒸汽灭菌器内取出或从冰箱内取出需在室温下放10min左右，再夹碎安瓿，以免过热或过冷夹碎外管。
4.5.2恢复培养液在56℃培养时间过长（72小时以上），阳性管黄色容易消退，培养液逐渐干燥，应注意每天观察，随时记录阳性结果。
4.5.3培养温度应在56℃～60℃之间，低于56℃或高于60℃，均可影响嗜热脂肪杆菌的生长。
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