HPLC法测定多潘立酮口崩片的含量.docx

HPLC法测定多潘立酮口崩片的含量 多潘立酮是一种较强的多巴胺受体拮抗剂，直接作用于胃肠壁，可增加食道括约肌张力。采用特殊辅料和工艺将其制成口崩片，既保留了普通片的体内行为，又有其自身的优点，方便了吞咽困难者，尤其是老人、幼儿或不能得到水的特殊环境下的患者用药。多潘立酮片现行标准1采用紫外分光光度法测定含量，而本文采用高效液相色谱法测定多潘立酮口崩片含量，方法准确、快速、简便，同时专属性提高。1仪器与试药H66025T清洗机（无锡超声电子设备厂）；MettlerM3电子天平（梅特勒公司）；岛津液相色谱仪（包括SCL-10AVP控制器，LC-10ATvp泵，SPD-10AVP检测器，SIL-10ADvp自动进样器，DGU-14A真空脱气机，CTO-10Avp柱温箱，Class-VP工作站）。多潘立酮对照品（供含量测定用）由中国药品生物制品检定所提供，批号：100304-200502。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：HypersilBDSC18柱（5m，4.6mm200mm）；流动相：甲醇-水-三乙胺（60:40:0.05）；流速：1.1ml/min；柱温：室温；检测波长：287nm；进样量：10l。在此色谱条件下，多潘立酮保留时间为9.9分钟，理论板数以多潘立酮峰计为4624。辅料空白溶液在与多潘立酮峰保留时间相同处未出现色谱峰，说明辅料无干扰，结果见图。2.2供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多潘立酮5mg），置50ml量瓶中，加甲醇约40ml，超声处理10分钟，取出，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.3对照品溶液的制备取多潘立酮对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，即得。2.4辅料空白溶液的制备按处方量制备不含多潘立酮的辅料空白溶液。2.5线性关系考察精密称取多潘立酮对照品31.83mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取1、2、3、4、5、6ml，分别置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样10l，以峰面积（A）对进样量（C）进行线性回归，得回归方程为：A=1391045.914C22136.4667，r=0.9998（n=6）。结果表明进样量在0.31831.9098g范围内，峰面积与进样量呈良好的线性关系。2.6稳定性试验取供试品溶液，分别于0、1、2、4、6、8小时测定，记录峰面积，结果RSD为0.51%，表明供试品溶液在8小时内稳定。2.7精密度试验取多潘立酮对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积，结果RSD为0.41%。2.8重复性试验取同一批样品（批号：20060428），制备3个不同浓度（80%、100%、120%）的供试品溶液各三份，记录峰面积，结果平均含量为98.55%，RSD为0.50%。2.9回收率试验按处方比例，分别精密称取不同量（80%、100%、120%）的多潘立酮对照品及辅料适量，记录峰面积，结果平均回收率为100.29%，RSD为0.68%。试验结果见表1。2.10样品测定取7批样品，照供试品溶液的制备方法制备，另取多潘立酮对照品适量，照上述色谱条件同法测定。按外标法以峰面积计算，结果见表2。图多潘立酮口崩片HPLC图谱a.供试品;b.对照品;c.辅料空白表1回收率试验测定结果表2样品含量测定结果（n=2）3讨论3.1超声提取时间的选择取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于多潘立酮5mg），共6份，分别置50ml量瓶中，加甲醇约40ml，分别超声10分钟、20分钟、30分钟（各2份），取出，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液，依法测定，结果表明，样品超声10分钟、20分钟、30分钟测得结果基本一致，因此确定超声时间为10分钟。3.2在流动相选择时，曾参考文献资料试验了不同比例的甲醇-水及甲醇-0.5%醋酸铵等流动相，结果多潘立酮峰形均不好，后在甲醇-水系统中加入少量三乙胺，发现峰形问题得以解决。通过试验，最后确定以甲醇-水-三乙胺（60:40:0.05）为流动相。参考文献1中华人民共和国卫生部药品标准WS1-（X-185）-97Z. -全文完-