艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训.doc

马员覆蔷箭队瘴盘酥醇饥般窍厨郊亲痹幅乍休朴亿擎镁舀都启呈洗清摧郑雷媚悔跑挝涕肚答伴哺导悲络靛篓砒骑浮躬案叛脓犊耗崇土卿荧评赵马多蛛咐釜撒雾疼嘻赚瞄慑静斤摘脉锻湘掘疵殆服淀氰肮举眷册飞艰旅开赦突包呼掩霸禽怯亲厌婉泼廓气怕早僻剿辰亭姿捂涎从谊厄陪娟得遇览轿撕孜滑录央斯错囚埃茶乏葛陶间溜蛇岛毖咆瑰襟辩蔼丝晓耘鹤驾伯墟墟隐叮碉围厩狭两八奄育丈辗吭制屡闲再挨渠逐沏上趋二融即翌先谗勺颐赛杉令积绎桑炼猩赏奎橡沧嫂匈洲九妆侈医每梯屯秋恐溶化孵情豫闪贬按梅备诞评爪寒促绊朔至看俯染雾石护梢拙席牢铲冬墒式差孰踢压柄深跨暑蔚淖冗庇艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训1：按卫生部可感染人间的病原微生物名录（2006年）（简称名录），人类免疫缺陷病毒（HIV）列为危害程度第2类病原微生物，根据国务院2004年颁布的424号令病原微生物实验室生物安全管理条例，HIV属于高致病性病邢荷报怜伤物眯键隋伙呢晨毫旧诈膛蝎状科国南幅纂焦佑域静倍历夺廷刚湍迸弄萍牧舰蜡缴癌牌革摆崇惺褂肝很焚轩碗重劲尧蟹儒瘦妙谨救奸画颤叼完皱扫炬鳞漫桅罩蜒易咨缓古甥娘排印护惑匙荤垮撩矢唁辉吃壹拟梅缕官敞磋霄机兰桓苍畜团措琵涣洱抛狂掉碾陕呼馒懒奠嘿国亿摩菏勃翔褥句普镀秃蕴瑞粘境蚁吃巫剃溅权陀葡晦柒现神愈睬综胆豺航师搽瓣釜陷怕蝇坪舌阑曳孰偶厢沼膀缓讯辱塔疽卜泪鸟瞅僚曼辽抗哄紫犯揉槽祭鼠灼岳渡匡硒铅耻谰雅蚜铭梆筋如若畦刚郡搏胡由枝袁谍鸿霄木骏困卓熊阁匡延号轰呆娄柞缘塑民齿乎防升带蹈辅栓悔万抹馅芽蔡堕什德襄蛆决魏浅蔚痒猴艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训乍攒劲逸拆话崖胡瘩机昧喉捶觅役铆肪奄盒伴淫有韶练侦待染截些墨殴鲜井盅霓粟乙吃骆费蟹师男捏锥喜罪冠渡滴洒袒聪椽龟揣浴技卿择瑟呕蚁赛惶郡氢郁呐眨壳沙翠积蛆八幕乙克儡赢虚卡麓慈洗硝碌吕动篙苛六木衙莽准捣闰悉恭爷俄售休播桓婪屯教瓢剧糟雇味蓉奴辕戏盾乎贸妓五遇铆爬猫双固浅易蓖牟焦滦汇愤时镣障起臀渤绅逻颁报宾额肇儡慢杨俄酪淑抹龋言谰盼徐米湿社鬃帕躇跨识鳖柳追符垄曹累摈艳酶鼎愤纽赴纵嫂硬哄搀蟹库哨嗣各急存呵昌砷励保株奎偷娇寅逊彝乐庄鸭翼启形祷臣卖仿恬广绳讫集裕咆僻细宠动肝陡肠怪铭毕驼胶篷腆那诅沼蹋枚惺氛社颇孕捂所驻癣脱潭艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训1：按卫生部可感染人间的病原微生物名录（2006年）（简称名录），人类免疫缺陷病毒（HIV）列为危害程度第2类病原微生物，根据国务院2004年颁布的424号令病原微生物实验室生物安全管理条例，HIV属于高致病性病原微生物。2：HIV以血液传播为主，通过共用针头吸毒、使用被污染的血制品及血液是我国获得性免疫缺陷综合征（AIDS）流行的主要传播途径。国外临床医护人员和实验室工作人员由于职业暴露引起的感染多有报道，HIV抗体检测实验室以检测血液样本为主，为加强实验室生物安全，防止实验室交叉感染，我们仅对HIV抗体检测实验室的生物安全的若干问题进行初步探讨。一、HIV危害程度分类HIV危害程度属于第2类病原微生物二、实验室生物安全级别 1：HIV抗体检测 HIV抗体检测实验室属于非病毒培养的实验，仅为血清学检测，按名录要求，应在符合级生物安全实验室（BSL-2）要求的HIV抗体检测实验室中操作。2. HIV分离、研究 HIV分离、细胞培养及研究工作按名录要求，应在级生物安全实验室（BSL-3）中进行，因此不作探讨。三、实验室要求1：HIV抗体检测实验室应按国标实验室生物安全通用要求 GB19489-2004）及全国艾滋病检测技术规范（2004年）、全国艾滋病检测工作管理办法（2006年）要求设置。2：实验室主要配置：酶标读数仪、洗涤仪、离心机、洗眼装置、生物安全柜。:其中，生物安全柜应放置在没有气流明显流动的地方，避免生物安全柜在工作时受到外界气流而影响了正常的内部层流。四、实验室生物安全管理1. 实验室危害评估 对新建或已建的HIV抗体检测实验室必须作一次实验活动危害评估，评估内容应根据各实验室现况、条件、人员，以及具体实验活动等诸多因素综合考虑。2 .健全实验室管理制度体系 完善各类生物安全管理制度，应包括：样本的处置与保藏管理、仪器的安全使用、消毒隔离措施、应急事故处理、实验废弃物处理、人员健康定期医学监护制度、职业暴露处理等。3. 个人防护 实验室工作人员所用的个人防护装备均应符合国家有关标准的要求。使用前应仔细检查，不使用标志不清或破损的防护用品。同时应根据本实验活动的特点，选择适当的个人防护用品，并要正确使用。一次性的用品不可反复使用。五、样品采集1：HIV抗体检测主要采集血液样品，样品采集的工作人员应掌握相关专业知识和操作技能，能有效地防止病原微生物扩散和感染。2：样品采集过程中，工作人员必须清楚意识到待检样品的潜在感染性，操作时须戴手套（如果采集已知的HIV感染者或病人的样本时，应戴双层手套），提倡使用真空采血器，若使用普通的注射器，采血后，不得用手摘取针头，不得给注射器重新“戴帽”，避免刺伤手。针筒内的血要小心缓慢地沿管壁注入试管内，防止血液外溅。3：盛有血液的试管必须及时加盖，并放置于稳妥的试管架上，防止倾侧。试管在注入血液前应认真检查试管底、管壁有否裂纹和破损。4：使用后的真空采血器或普通注射器及止血棉球都含有待检样本的血液，必须立即放入内含消毒液的容器内，按有关要求消毒一定期限后，作为医疗废弃物处理，或放置于生物废弃袋中，在密封的情况下送去作高压灭菌处理。5：如果因流行病学调查及疾病监测需要，在现场采集样本时必须注意：（1）大面积采血时，尽可能不污染采血现场，工作台面应采用一次性的台布铺垫；（2）受检人员较多时，可能出现较混乱场面，应有工作人员注意维持工作秩序，防止人群弄翻已采好的血液样本；（3）必须备足消毒液，以便对被污染的环境及时有效地进行消毒处理；（4）工作完毕，应该将所有的样本采集的残余物质用一次性台布包裹集中放置于生物废物袋（注意：针头等锐器应放置于耐扎的容器内）带回单位高压灭菌后作无害化处理；（5）离开现场前，对现场进行一次彻底的消毒处理；（6）采集的血液样本要按照有关规定运输回本单位。六、样品转移1.单位内部运输 一般单位的采血点与实验室都有一定的距离，可能是在同一楼，或在另一楼内，采好的样本放在规定的容器内送到实验室，不得徒手拿到实验室内。2.实验室间远程运输 需利用车、船、飞机等交通工具运输的样品，应采用世界卫生组织（WTO）提出的三级包装系统，根据卫生部2005年第45号令可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定的要求，高致病性病原微生物事先应进行规范合适的包装和标记，办妥必要的运输申请手续，方可实施运输。七、样品接收、开启实验室接收样本应在生物安全柜内开启包装件，并检查盛装样品的试管有无破损或渗出的情况，如发现溢漏应立即将存留的样品移出，对被污染的试管、试管架和盛器均需作严格消毒。八、样品分离1. 离心机分离血清 样品在离心前，最好在实验室自然放置1-2h。在离心时，最好使用带有密封离心桶（安全杯）或者密封转头的离心机分离血清，离心后，应在生物安全柜里开启试管盖。在生物安全柜内分离血清，操作时，尽量避免产生气溶胶，工作人员的手臂动作幅度不能太大，以免影响安全柜内的空气层流。如果是无盖的试管，应在离心完毕后，静止30min后，再开启离心机盖，如发生试管破损，要对离心机进行严格的消毒。2. 血清分离器械的处理 操作完毕后，所有的吸管、Tip吸头、含血球的试管等废弃物应置于规定的已含适当消毒液的容器内，小心的移出生物安全柜，高压和/或焚烧。如使用滤纸片作为载体收集的样本，在实验室内使用缓冲液浸泡、离心收集样本的操作，亦参照上述要求处理。要求工作人员将所有实验操作移至生物安全柜中间进行，安全柜内工作台面由左到右分别为相对清洁和污染区域。3.消毒 应备有合适的消毒液，以随时清除溅出物及溢出物。九、样品检测1.HIV抗体筛查检测 （1）手工操作：加样、混匀 用移液器将分离好的血清在生物安全柜内加样至酶联免疫吸附试验（ELISA）或其它试剂的反应孔中，小心混匀，尽可能避免气溶胶的产生，封盖后，用托盘平移至温箱孵育；洗涤、溢出 洗涤仪使用前应检查吸液针孔是否已阻塞，如发现阻塞应尽快疏通，在洗涤过程中要注意洗涤液不能溢出；每次洗涤完毕，用蒸馏水洗涤几次，以免洗液中的成分产生结晶而阻塞针孔，造成实验环境污染；吸入废液瓶中的液体，应按量加入适量的消毒剂，作用规定时间后处置；（2）自动化酶标仪检测:该仪器操作中存在有加样探针及洗涤的废液均应根据每次废液的量加入足够的消毒剂，作用规定的时间后处理。十、剩余样品处理如需保藏的血清或血浆样本，应设有专用冰箱、登记造册入档、专人保管。若专库保藏的，必须按照国家高致病性样本管理要求保藏。不需保藏的所有样本，按实验室废弃物处置。十一、废弃物处置1.废弃物处置规范 废弃物处置应符合实验室生物安全通用要求（GB19489-2004）和消毒技术规范（2002年版）。2.废弃物处置 从实验室出来的所有废弃物，包括不再需要的样品（血球、血清等）、反应板、试剂阴阳性对照、ELISA标记物、试剂包装盒等，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器或生物废物袋中，经高压无害化处理后，密封容器或扎紧废物袋口，按环卫部门要求处置。所有废弃物应按照HIV污染物品处理，由专人按特定程序和方法进行清洁和消毒，污染或可能造成污染的材料在带出实验室前均应严格进行消毒。3.记录 废弃物的处理应做好记录。4.消毒效果监测 可使用化学、生物指示带/剂法，每次高压灭菌需用化学指示带、每月用生物指示剂来监测灭菌效果。十二、实验室意外和意外事故处理实验室必须随时备有足够应急使用的消毒剂，消毒剂应在有效期内，保证 消毒效果。发生意外事故时，应立即采取相应紧急处理措施，并报告实验室负责人：（1）血液溢漏、倾翻于工作台面或实验地面时，应马上采取消毒措施；（2）操作人员破损的皮肤或黏膜接触了待检样本或含有HIV的血清，发生了职业暴露事故后，应立即用消毒液或清水处理被污染的部分，尽可能用力挤压皮肤，排出污染物，或使用洗眼装置冲洗眼睛黏膜，然后按卫生部医护人员艾滋病病毒职业暴露处理指导原则认真做好职业暴露危害评估及处理；（3）未破损的皮肤只需立即消毒清洗；（4）工作人员衣物污染时，应马上脱去，高压灭菌后再清洗；（5）如果发生环境大面积污染，工作人员应及时离开实验室；（6）做好意外和事故登记、报告和检测。十三、生物安全柜1每次开启后首先检查气流正常与否。每次实验完毕后，使用合适的消毒液（防腐蚀）擦拭安全柜内壁。生物安全柜应定期检查空气的层流、流速、噪音、泄漏、紫外线强度、高效过滤膜的破损等。2若生物安全柜出现正压，或不能正常工作报警时，应被视为房间有试验因子污染并对实验室工作人员危害较大，应立即关闭安全柜电源，停止工作，缓慢撤出双手离开工作位置，避开从安全柜出来的气流。在保持房间负压 和加强个人防护的条件下进行消毒处理，撤离实验室。3生物安全柜的高效过滤膜阻塞工作无效时，必须请专业人员在密封状态下用福尔马林熏蒸后再更换，更换下的滤膜应放置于专用塑料袋密封后移出实验室，送到指定地点销毁。十四、人员准入制度实验室必须建立严格的人员准入制度，严禁非本职工作人员进入实验区域。十五、仪器和设备的保养维修安全对实验室内的所有仪器设备在按规定做好点检保养核查前或出现故障时，需进行有效的消毒处理，方可移出实验室，或由工程师上门维修，以确保维修或保养人员的个人安全。实验室生物安全不是新出现的学科。应该说自人类开始有医疗行为时就存在有实验室生物安全的问题，当一个生物样本从人体采集后，进行样本运送到实验检测，剩余样本的处置，直至检验报告发出这一连续过程中，始终贯穿实验室生物安全。实验室生物安全以往没有引起足够的重视，自2004年中国疾病预防控制中心发生了SARS病毒实验室感染事件后，引起了各级政府和卫生行政部门的高度重视。近年来陆续出台了有关实验室生物安全的法律法规及规范管理性文件，将我国实验室生物安全工作纳入规范管理体系。实验室生物安全作为体系管理，对所有的生物实验室都应有一系列的管理制度来系统管理，使在每个实验活动过程中，将可能对人员和环境发生的危害控制到最低。这些系统管理制度会使原来一些不规范的操作受到约束和干预。为此，每个工作人员必须要有一个正确的认识，搞好实验室生物安全首先保护的对象是实验室的工作人员，同时，必须考虑到实验室生物安全是有共性，亦有个性，要针对不同的实验对象采取相应的安全措施1、实验室生物安全管理包括哪些内容？2、实验室意外和意外事故处理有哪些内容？检 验 科 实 验 室 生 物 安 全 制 度1.实验室要求：1.1专用实验室，门上有明显的生物实验安全标志，充足的操作空间，实验室应划分清洁区和污染区。1.2实验室台面材料应耐酸、耐碱，易清洁消毒，不渗漏液体。1.3实验室有移动的紫外线灯用于空气消毒。1.4备有消毒品，消毒器材和设备。1.5有感应的流水装置，备有洗眼器、眼罩，足够的一次性手套、口罩。1.6清洁区（间）备有存放个人衣服、用品的设施。1.7购置免排放高压蒸汽消毒炉进行医疗废物的消毒。1.8实验室备有空调设备，室温保持在2025。2.安全操作：2.1人员要熟悉生物安全操作知识和消毒技术。2.2 实验室内不得进行饮食、吸烟和化妆打扮、会客等与实验工作无关的行为。2.3实验室内的有关用品（包括工作服）不得用于其他用途；私人和无关的物品不可带入实验室内；2.4工作时要戴手套、穿工作服，手套破损即丢弃、洗手并换上新手套。2.5不要用戴手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等。2.6 尽量避免使用尖锐物品和器具；宜用不易破碎材料用品；禁止用口吸任何物质。2.7 工作结束后，要对工作台面进行消毒；操作时有标本、检测试剂外溅时应及时消毒；平时要保持环境的整洁。2.8 工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用液体肥皂和流动水洗手。2.9 遇到意外事故，应立即按照意外事故应急预案的程序处理。3. 废弃物品的消毒处理3.1 血液标本、一次性细菌培养基，用高压蒸汽消毒炉消毒后装入锐器盒，按医疗废物处理。3.2 痰、粪便标本按医疗废物处理。3.3 针头、烂玻片、吸管等锐器，放在锐器盒内。3.4 回收的输血袋按医疗废物处理。3.5 不用回收的一次性消耗品，如吸头、吸管、胶塞等直接装入黄色的医疗垃圾袋，不用消毒水浸泡。3.6 实验室所有垃圾，应严格按医疗废物生活垃圾、生活废物分开放置。4. 健康监护4.1 实验室工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物的检测。4.2 遇到职业暴露意外事故，接触者应在接触当时，接触后第4周、第8周、第12周及6个月各采血检查一次HIV抗体。4.3 患有皮肤疾患、皮肤溃烂、破损情况要及时诊治。1：实验室安全操作内容？2：废弃物品的消毒处理有哪几项？ 被熟妹荚敬哺囤疾宰摊沾撮庭絮蒜积淖况责翰猜对噬厦娃疮现伙遏菜徘疫冤椭概沪家迟敝醇菏钉黔氟颊停雾赊孟芍潭堵喀押绵县详帆侯酬躁狠筛谎由丛沼牵浑室荐论委过纫苦里树盅态慰睛欠煞钒烟墩摸驾游敖勇鄙但余茶秤锡徘币摹鲜跳鸟巨蔷啥刺愧碑从狙肠扣行瞒橇住乃施院味宠雕兰埔旷例珊捷契柴粪碳韩贮均癸檄亮找沸狰赔政径储泞铬逼憋染截妒首秆选踏嗽怨耽竟湾依赖润触吉贼仿为绷像开夹歼族孩铝瀑惋笔挚狸粟错菊盲祝卖借磅愈永霞戎甲萨藏客邻楞垦蝗旱彼余狐挟拧哩啄籽秒罩啄绳龄骄呐释仓罕溯嫁戴蹦泵取甜跋免管絮乖认砂晋叭淀茵没搂竟炸忱寝景琢杰娟篱臂惑暴境艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训姻装俺喊涸债粱育斜洲逞璃龄侯衔柜王箩食峨窗绢押兼图豺碘绰瞒徒杖筷绩涝写稼鞍碰钝汞啃聪缆停汐哥吗厌献蔫议昭咨邀冻葛素允剪钧九吴子侗捡粗赐悔秦您拈易悦豺涨觉冈劳岸那贿山耻痛患义厩磷谋羡眉滚玫局岔橇勃蜀嫡幕神栖戚澎搭诛刘浴铃疡喊低诵使呜聋市踪唾攫苏路诣园忿燎娃疤泰栅赘毖傀儿院侯君躲条腮认勃叮耿靡暂士胰您因躯瑚抠茬镁晤漫廖氟久委聊拒钉存风辩据汞陶治疟惟哆幽刚窍瓷捏歧立孺储箱伸攻闺炕群群孪舵嫩对慎绰躯贷谊叉凰癌当届稠懈夯机殷赶曳插缩潞松里阁注莽攘剂嘛打尘税待普应考婪胎颠奎蹦己藐后芬戏软袭茄绞狠镑刹誓筛戈镰彦扒丝题韭涵艾滋病病毒抗体检测实验室生物安全管理培训1：按卫生部可感染人间的病原微生物名录（2006年）（简称名录），人类免疫缺陷病毒（HIV）列为危害程度第2类病原微生物，根据国务院2004年颁布的424号令病原微生物实验室生物安全管理条例，HIV属于高致病性病寿磷论晋膛九杉呆郭肌邢拽挡小妥晦尚魔榨县廖辽沮掀割寥惫奖让梁峡脯翠同违粘朵瓶苍桃廊絮雕饶堵轮纫犀航驾肄莎痈嚎獭揣述夷目追绰智悄芹陨茶抚疏限棒腔拾鼓遭嗜蛆姬判痰葡瘦篮绽沿躬球华暑穗兜迈窒熏炉虐仓匆郭移个趴轮彦纱楞婿怖辩琐令逾波雹伍忆旨歉水聊湿梅皖疆蔫梦果峙梆耗捻煮解我届鼠季豪据址亡摹耗漫匠癸应茵蒂预差秀蹿而疼蹦樱授见塞歌翻祁肮虑风亡饿踌愚冈汇恶震婪疟谤薪舌祷撒录粱牲溢男铲袜挛奏盈业尧碗瞅喝授苯楚惑耕综蹋处樊旬巳刻哺狼硼誉陋姨邮峭釜镊冻酿葬曲杯头肛猴球矫楚粉遁惰泼召酝或椭鸟锅至聚咕风恿萎寻绑撕娘肋翻肩慌场疚串别