水中余氯检测方法分光光度计法.doc

水中餘氯檢測方法－分光光度計法
NIEAW408.51A
一、方法概要
水樣加入磷酸緩衝液溶和N,N-二乙基-對-苯二胺（N,N-diethy1-p-phenylenediamine，簡稱DPD）呈色劑後，水中之自由有效餘氯可將DPD氧化，使溶液轉變為紅色，立即以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處量測其吸光度。若於前述反應溶液中再加入多量碘化鉀，則水中之結合餘氯可將碘化鉀氧化而釋出碘，碘再氧化DPD，使溶液之顏色加深，再以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處量測其吸光度。以同一檢量線分別求得自由有效餘氯和總餘氯之濃度，两者之差即為結合餘氯之濃度。
二、適用範圍
水中餘氯可分為自由有效餘氯及結合餘氯，結合餘氯分氯胺（Monochloramine）、二氯胺（Dichloramine）及三氯化氮（Nitrogen trichloride；亦習稱之為三氯胺），本方法採用較簡化之步驟，並不區分結合餘氯之物種。本方法適用於檢測飲用水、自來水、河川水、家庭污水及經處理之放流水中之餘氯。飲用水及自來水之最低可偵測濃度大約相當於0.01mg/L之氯；本方法對總餘氯檢測之最高適用濃度為4mg/L，當總餘氯濃度大於4mg/L時，則水樣應予稀釋。
三、干擾
（一）錳的氧化物會影響自由有效餘氯和總餘氯之測定，此項干擾可由下列步驟校正：
1、置5mL磷酸鹽緩衝溶液和0.5mL亞砷酸鈉（Sodiumarsenite，NaAsO2）溶液於三角燒瓶中，加入100mL水樣，混合均勻。
2、續加入5mLDPD呈色劑，混合後以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處測其吸光度。
3、自由有效餘氯和總餘氯測得之吸光度應分別扣除本項干擾之吸光度。
（二）溴和碘會影響自由有效餘氯和總餘氯之測定，此項干擾可由下列步驟校正：
1、溶液Ⅰ：取5mL甘胺酸（Glycine）溶液加入100mL水樣中。
2、溶液Ⅱ：置5mL磷酸鹽緩衝溶液和5mLDPD呈色劑於三角燒瓶中，混合均勻。
3、將溶液Ⅰ加入溶液Ⅱ中，混合後以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處測其吸光度。
4、自由有效餘氯和總餘氯測得之吸光度應分別扣除本項干擾之吸光度。
（三）高濃度結合餘氯會干擾自由有效餘氯的測定；若水樣中結合餘氯濃度大於0.5mg/L時，可採用硫代乙醯胺（Thioacetamide，CH3CSNH2）修正法：在水樣與DPD試劑混和後，立即依比例（100 mL水樣中，添加 0.5 mL）加入 0.25 % 硫代乙醯胺溶液，以阻止結合餘氯繼續反應。
（四）由於微量之碘化物即能顯著增长氯胺（Chloroamines）對自由有效餘氯測定的干擾，而測定總餘氯時，需使用高濃度之碘化物，因此，玻璃器皿必須清洗乾淨以避免碘化物的污染。
（五）銅會干擾餘氯之測定，當銅濃度小於或等於10mg/L時，可於試劑中加入乙烯二胺四乙酸（Ethylenediaminetetraaceticacid，簡稱EDTA）以消除銅的干擾。同時EDTA可減緩DPD試劑因氧化而變質，因此可增強DPD的穩定性。EDTA亦可預防微量金屬的催化作用，以減少溶氧所导致的誤差。
（六）微量之濁度及色度亦會干擾測定值，可先以樣品將其吸光度歸零校正之。
（七）鉻酸鹽亦會影響自由有效餘氯和總餘氯之測定，此項干擾可依下列步驟校正：
1、溶液Ⅰ：取0.5mL硫代乙醯胺溶液於100mL水樣中，混合均勻。
2、溶液Ⅱ：置5mL磷酸鹽緩衝溶液和5mLDPD呈色劑於三角燒瓶中，混合均勻。
3、溶液Ⅰ加入溶液Ⅱ中，混合後以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處測其吸光度。水樣之自由有效餘氯吸光度應扣除本項干擾之吸光度。
4、上述測定液倒回三角燒瓶，加入碘化鉀晶體約0.1g，靜置2分鐘。
5、以分光光度計在波長515nm（或其他特定波長）處測其吸光度。水樣之總餘氯吸光度應扣除本項干擾之吸光度。
四、設備與材料
（一）分光光度計：使用波長515nm（或其他特定波長），樣品槽之光徑等於或大於1cm。
（二）分析天平：可精稱至0.1mg。
（三）三角燒瓶：50 mL、250mL。
（四）分注器
（五）餘氯計。
五、試劑
（一）試劑水：使用不含餘氯及其他干擾物質之純水。
（二）磷酸鹽緩衝溶液：溶解24g無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）及46g無水磷酸二氫鉀（KH2PO4）於試劑水中，再與含800mgEDTA二鈉鹽之100mL試劑水混合，以試劑水定容至1L。加入20mg氯化汞以預防黴菌生長和自由有效餘氯測定時因微量的碘化物所导致干擾。（注意：氯化汞有毒，應小心使用，避免攝入。註1）
（三）二苯基胺磺酸鋇（Bariumdiphenylaminesulfonate，(C6H5NHC6H4-4-SO3)2Ba）指示劑，0.1％：溶解0.1g二苯基胺磺酸鋇於試劑水中，定容至100mL。
（四）硫酸溶液（1+3)：緩緩將一份濃硫酸加至三倍體積之試劑水中。
（五）硫酸溶液（1+5）：緩緩將一份濃硫酸加至五倍體積之試劑水中。
（六）DPD呈色劑：溶解1.0gDPD草酸鹽（DPDoxalate）或1.5g含五個結晶水之DPD硫酸鹽（DPDsulfatepentahydrate）或1.1g無水DPD硫酸鹽（AnhydrousDPDsulfate）於含8mL1+3硫酸溶液及200mgEDTA二鈉鹽之試劑水中，並定容至1L。儲存於有玻璃蓋的棕色瓶中，置於暗處保存。如發現呈色後吸光度有衰退之現象，即應重新配製。市面上已有磷酸鹽緩衝劑與DPD硫酸鹽呈色劑之混合劑粉狀成品，亦可使用。（注意：DPD草酸鹽有毒，應小心使用，避免攝入）。
（七）重鉻酸鉀溶液，0.000417 M：溶解122.6mg一級標準品級（99.9％以上）之無水重鉻酸鉀於試劑水，定容至1L。
（八）硫酸亞鐵銨（Ferrousammoniumsulfate，簡稱FAS）溶液，約0.00025 M：溶解97.5mgFe(NH4)2(SO4)2‧6H2O於含1mL1+3硫酸溶液之試劑水中，以煮沸且剛冷卻之試劑水定容至1L。此溶液可保存一個月，使用前以0.000417M重鉻酸鉀溶液標定，標定方法如下述：添加10mL1+5硫酸溶液、5mL濃磷酸及2mL0.1％二苯基胺磺酸鋇指示劑於100mL之FAS溶液中，以0.000417M重鉻酸鉀溶液滴定至紫色終點（至少持續30秒）。
×6
（九）碘化鉀，粒狀結晶。
（十）亞砷酸鈉溶液：溶解5.0g亞砷酸鈉於試劑水中，定容至1L。（注意：亞砷酸鈉有毒，應小心使用，避免攝入。）
（十一）硫代乙醯胺溶液：溶解250mg硫代乙醯胺於試劑水中，定容至100mL。（注意：硫代乙醯胺也许是致癌物，應小心使用，避免皮膚接觸或攝入。）
（十二）甘胺酸溶液：溶解20g甘胺酸於試劑水中，定容至100mL，冷藏保存，若溶液混濁時，即應丟棄。
（十三）高錳酸鉀儲備溶液，891mg/L：溶解891mg高錳酸鉀於試劑水中，定容至1L。
（十四）標準溶液：可依七、（一）步驟配製標準溶液或市售標準溶液，如使用後者，其有效期限應以廠商所提供之證書為準。
六、採樣與保存
採集500mL以上之水樣，盛裝於玻璃或塑膠瓶中，於現場測定。
七、步驟
（一）檢量線製備
1、取10.0mL高錳酸鉀儲備溶液（891mg/L），以試劑水稀釋至100mL。取0.1至8mL前述稀釋液，再以試劑水稀釋至200mL；配製含一個空白和至少五種濃度的高錳酸鉀檢量線標準溶液，其範圍約為0.0446至3.56mg/L，大約相當於0.05至4mg/L之氯原子。
2、於250mL三角燒瓶中，依次加入5mL磷酸鹽緩衝溶液、5mLDPD呈色劑及七、（一）1、所配製高錳酸鉀標準溶液100mL，使均勻混合並呈色，以分光光度計在波長515nm（或其他波長）處測其吸光度。
3、將測定液倒回三角燒瓶中，立即以FAS溶液滴定至紅色消失，計算相當於氯之濃度（mg/L）。以吸光度對應相當於氯之濃度（mg/L），製備檢量線。

（二）水樣測定
1、自由有效餘氯測定：分別取 0.5 mL磷酸鹽緩衝溶液及 0.5 mL DPD呈色劑於 50 mL三角燒瓶中，加入 10 mL水樣，使均勻混合，立即以分光光度計在波長515nm處測其吸光度。
2、總餘氯測定：繼續上述步驟，將樣品槽之測定液倒回三角燒瓶中，加入碘化鉀結晶約0.1g，靜置2分鐘之後，以分光光度計在波長515nm處測其吸光度。
3、上述自由有效餘氯及總餘氯之檢驗步驟，係以10 mL水樣為基準，若樣品體積增減時，應依比例調整試劑量。當總餘氯超過4mg/L時，必須以試劑水稀釋樣品，再重複七、（二）之操作步驟。
4、若發現或懷疑有三、（一）～（七）所述之干擾現象，則依其說明之步驟校正。
（三）餘氯計測定
1、可使用檢測原理和本方法（分光光度計／DPD法）相同之餘氯計檢測餘氯；使用餘氯計檢測，每年至少一次，實驗室應以分光光度計製作檢量線，並讀取該餘氯計對不同濃度標準品之測值，兩者所得測值之誤差須在 ±15 ％ 以內，實驗室須將餘氯計之相關資料及比對結果建檔備查。
2、現場測定
（1） 水樣測定前，應再以兩種不同濃度之實驗室自行配製或市售標準溶液測試餘氯計之讀值，如測定值與標準品確認值在 ±15％以內時，可使用該儀器進行檢測，此步驟可視為檢量線查核及查核樣品分析(註2)；若確認值不在 ±15％以內時，餘氯計則須送回實驗室依步驟七（三）1比對調整合格後，才干使用。
（2） 餘氯測定：將水樣到入樣品試管中，加入DPD呈色劑，混合均勻，直接從餘氯計讀取餘氯值。其品質规定須符合九、（二）至（五）。(註2)
3、如（三）、2.所述之比對結果未落在規範之內，則應依（三）、1、之步驟重新校正該餘氯計。
八、結果處理
經分光光度計測得之吸光度藉由檢量線可求得樣品中相當於餘氯之濃度。各種餘氯之計算公式如下：
總餘氯或自由有效餘氯（mg/L）
＝由檢量線求得相當於氯之濃度（mg/L）×稀釋倍數
結合餘氯＝總餘氯－自由有效餘氯
檢測報告中應註明檢測之餘氯種類。
使用餘氯計檢測時，餘氯之計算公式如下：
自由有效餘氯（mg/L）
＝直接讀取之自由有效餘氯讀值（mg/L）×稀釋倍數
九、品質管制
（一）檢量線：每次樣品分析前應重新製作檢量線，其線性相關係數（r值）應大於或等於0.995。檢量線製作完毕應即以第二來源標準品配製接近檢量線中點濃度之標準品確認，其相對誤差值應在±15%以內。
（二）檢量線查核：每10個樣品及每批次分析結束時，執行一次檢量線查核，以檢量線中間濃度附近的標準溶液進行，其相對誤差值應在±15%以內。
（三）空白樣品分析：每批次或每10個樣品至少執行一次空白樣品分析，空白分析值應小於二倍方法偵測極限或低於法規管制值的5%。
（四）重複分析：每批次或每10個樣品至少執行一次重複樣品分析，其相對差異比例應在20%以內。
（五）查核樣品分析：每批次或每10個樣品至少執行一次查核樣品分析。回收率應在80～120%範圍內。
（六）測定自由有效餘氯與總餘氯時，玻璃器皿及樣品槽應清洗乾淨或分開使用，以避免殘留之碘化物干擾自由有效餘氯之測定。
十、精密度及準確度
（一）某一製備水樣具有0.66mg/L之總餘氯，經由二十五個檢驗室測試後，其相對標準偏差為27.6％，相對誤差為15.6％。（資料來源：同本文參考資料(二)。）
（二）單一檢驗室之單一檢驗員分析不同類別水樣中總餘氯之結果如下表所示：
樣品類別
平均濃度
(mg/L)
標準偏差
(±mg/L)
相對標準偏差
(％)
分析
次數
蒸餾水
0.39
3.61
0.01
0.11
3.1
3.2
3
3
飲用水
0.94
0.01
0.8
7
河川水
0.86
0.02
1.9
7
家庭污水
1.07
0.03
2.4
7
（資料來源：同本文參考資料（二））
（三）蒸餾水中添加餘氯標準品之查核樣品，其總餘氯之配製值為1.001mg/L，經由四十八個檢驗室測試之後，平均值為1.011mg/L，標準偏差為0.119mg/L，平均回收率為101％，95％可靠界线（Confidencelimits）為0.777至1.245mg/L，99%可靠界线為0.703至1.319mg/L。該品管查核樣品以手提式分光光度計依本方法重複四次檢驗，其檢驗值分別為1.16、1.15、1.16、1.15mg/L，平均值為1.16mg/L，標準偏差為0.01mg/L。
（四）單一檢驗室分析自來水中自由有效餘氯及總餘氯之結果如下表所示：
樣品類別
平均濃度
(mg/L)
標準偏差
(±mg/L)
相對標準偏差
(％)
分析
次數
自由有效餘氯
0.273
0.604
0.309
0.002
0.009
0.006
0.84
1.50
1.80
7
7
7
總餘氯
0.310
0.674
0.379
0.004
0.006
0.005
1.30
0.81
1.30
7
7
7
(資料來源：同本文參考資料（三）)
（五）國內單一檢驗室以本檢測方法及市售相同檢測原理之餘氯計，分析六個自來水樣品中自由有效餘氯之差異如下表所示：
自來水編號
實驗室分析值
手提式餘氯計測值
相對誤差%
1
0.79
0.71
10.7
2
0.74
0.76
2.7
3
0.74
0.71
4.1
4
0.64
0.58
9.8
5
0.64
0.57
11.6
6
0.68
0.60
12.5
單位:mg/L
十一、參考資料
（一）American Public Health Association, American Water Works Association & Water Environment Federation.Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 20th Ed., Method 4500-Cl A, F, G, pp. 4-53～4-55, 4-61～4-64, Washington, D.C., USA, 1998.
（二）USEPA,MethodsforChemicalAnalysisofWaterandWastes,Method330.5,TotalResidualChlorine,EPA/600/4-79/020March1983.
（三）李協昌、黃國禎、許元正。1993。水中有效餘氯分析方法之比較研究。中華民國實驗室認證體系八十二年度年會暨實驗室品質管理論文發表會論文集。工研院量測中心，新竹。
註1：如經常配製此緩衝溶液或確定器皿並無碘化物之污染，則不需添加。
註2：不同廠牌之餘氯計操作步驟也许略有不同，應依廠商提供之操作手冊進行檢測。
註3：本檢驗相關之廢液，依無機廢液處理。