平板涂布玻璃珠.doc

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平板涂布玻璃珠
品名
单位
货号
规格
平板涂布专用玻璃珠
瓶
北京华越洋生物
WX0122
50g 
平板涂布专用玻璃珠
瓶
北京华越洋生物
WX0123
100g 
平板涂布玻璃珠
涂布玻璃珠（Ø4mm）提供一个有效且容易的方法来实现琼脂平板的最佳涂板。玻璃珠来回轻轻滚动，使得大肠杆菌溶液（或任何细菌、真菌溶液）涂布在平板的任何角落。可以堆叠多个还有玻璃珠的平板，同事晃动来涂板。玻璃珠可以重复使用，即使用过后用70%乙醇洗涤，然后高压灭菌与烘箱干燥。

平板涂布玻璃珠特色:
· 提高转化效率
· 快速同步涂板
· 经济性1瓶可用于100-150个平板
· 灭菌后可重复使用
平板涂布玻璃珠使用：
HIT感受态细胞涂板：当吸入50-100μL转化细胞至每个90mm平板上时，快速加入10-20个玻璃珠，晃动平板来回滚动珠子，然后改变方向再晃动几次，以确保菌液均匀涂布在培养基表面。当表面的琼脂开始干燥（20-40秒）后倒出玻璃珠，准备孵育。
· 相关培养基配置：LB 用于一般的用途，扩增细菌。
· Super Optimal Broth (SOB medium) 强化了营养物质，用于在转染后增加转染效率。
SOB培养基，是在LB培养基的基础上开发的，用来培养E.COLI的富含营养的培养基，在质粒转化细菌时，使用SOB复苏电转化或化学转化的感受态细胞，可以提高转化率。
· Super Optimal broth with Catabolite repression (SOC)。是SOB加入葡萄糖以抑制分解代谢，增加生长速度。
常用培养基配制方法：

LB培养基
配制量：1 L
蛋白胨：       10 g
酵母提取物：5 g
氯化钠：       10 g

1．将左侧所示组分溶解在0.9 L水中：
2．如果需要用1N NaOH（～1 mL）调整pH至7.0，再补足水至1L。
注：琼脂平板需添加琼脂粉12 g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7 g/L。

SOB培养基
配制量：1 L
蛋白胨：20 g
酵母提取物：5 g
氯化钠：0.5 g
1 mol/L 氯化钾：2.5 mL
1．将左侧所示组分溶解在0.9 L水中：
2．培养基冷却到室温后，再在每100 mL的小份中加1 mL灭过菌的1 mol/L氯化镁。
3．分成100 mL的小份，高压灭菌。
4．加水补足体积到1 L。
SOC培养基
配制量：1 L
蛋白胨：20 g
酵母提取物：5 g
氯化钠：0.5 g
1 mol/L 氯化钾：2.5 mL
1．将下列组分溶解在0.9 L水中：
2．用水补足体积到1 L。
3．分成100 mL的小份，高压灭菌。
4．培养基冷却到室温后，再在每100 mL的小份中加1 mL灭过菌的1 mol/L氯化镁和2 mL灭菌的1 mol/L葡萄糖（18 g葡萄糖溶于足够水中，再用水补足到100 mL，用0.22 µm的滤膜过滤除菌）。

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